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老山芹根中亲脂性化学成分的ＧＣ－ＭＳ分析
高　阳，杨敏飞，苏娅萍，霍雅玉，米　洁，王欣芮，尤晓娟，张海龙＊（西安交通大学药学院，西安　７１００６１）
摘要：目的　分析老山芹根的亲脂性化学成分。方法　采用ＧＣ－ＭＳ法对其亲脂性化学成分进行分析，面积归一化法计算其相对
含量。结果　从老山芹根中鉴定出了３３个化合物，并确定了其相对含量，其中石油醚部分鉴定出１９个化合物，氯仿部分鉴定出
１４个化合物。结论　老山芹根中亲脂性化学成分主要为长链醇、甾醇和香豆素类化合物。
关键词：老山芹；亲脂性成分；ＧＣ－ＭＳ；香豆素
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１４．０４．００３
中图分类号：Ｒ２８４　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１４）０４－０３４４－０４
Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｌｉｐｏｐｈｉｌｉｃ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｏｏｔｓ　ｏｆ　Ｈｅｒａｃｌｅｕｍ　ｄｉｓｓｅｃｔｕｍｂｙ　ＧＣ－ＭＳ
ＧＡＯ　Ｙａｎｇ，ＹＡＮＧ　Ｍｉｎｆｅｉ，ＳＵ　Ｙａｐｉｎｇ，ＨＵＯ　Ｙａｙｕ，ＭＩ　Ｊｉｅ，ＷＡＮＧ　Ｘｉｎｒｕｉ，ＹＯＵ　Ｘｉａｏｊｕａｎ，ＺＨＡＮＧ　Ｈａｉｌｏｎｇ＊（Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ
Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｘｉ′ａｎ　Ｊｉａｏｔｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉ′ａｎ　７１００６１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ａｎａｌｙｚｅ　ｔｈｅ　ｌｉｐｏｐｈｉｌｉｃ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｏｏｔｓ　ｏｆ　Ｈｅｒａｃｌｅｕｍ　ｄｉｓｓｅｃｔｕｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｌｉｐｏｐｈｉｌｉｃ　ｃｏｎｓｔｉｔｕ－
ｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｂｙ　ＧＣ－ＭＳ　ｍｅｔｈｏｄ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ａｐｅａｋ　ａｒｅａ　ｎｏｒｍａｌｉｚａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈ－
ｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｉｒｔｙ－ｔｈｒｅｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ＧＣ－ＭＳ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｒｏｏｔｓ　ｏｆ　Ｈｅｒａｃｌｅｕｍ　ｄｉｓｓｅｃｔｕｍ，ｉｎ　ｗｈｉｃｈ　１９ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ
ｗｅｒｅ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ　ｅｔｈｅｒ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　１４ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｅｔｈｙｌ　ａｃｔａｔｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ．
Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ　Ｔｈｅ　ｍａｉｎ　ｌｉｐｏｐｈｉｌｉｃ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒｏｏｔｓ　ｏｆ　Ｈｅｒａｃｌｅｕｍ　ｄｉｓｓｅｃｔｕｍ　ｗｅｒｅ　ｌｏｎｇ　ｃｈａｉｎ　ａｌｃｏｈｏｌｓ，ｓｔｅｒｏｌｓ　ａｎｄ　ｃｏｕｍａ－
ｒｉｎｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｈｅｒａｃｌｅｕｍ　ｄｉｓｓｅｃｔｕｍ；ｌｉｐｏｐｈｉｌｉｃ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ；ＧＣ－ＭＳ；ｃｏｕｍａｒｉｎｓ
基金项目：中央高校基本科研业务费专项资金资助项目
作者简介：高阳，女，讲师
＊通信作者：张海龙，男，副教授
　　老山芹（Ｈｅｒａｃｌｅｕｍ　ｄｉｓｓｅｃｔｕｍ）又名东北牛防
风、山芹菜、土当归，为伞形科（Ｕｍｂｅｌｉｆｅｒａｅ）独活属
多年生草本植物，主要分布在黑龙江、吉林和新疆等
地。它是一种药食两用的植物，其幼嫩茎叶是美味的
蔬菜，具有特殊的香味，深受当地人的喜爱，茎叶中含
有丰富的膳食纤维，可以促进胃肠蠕动，清理肠道垃
圾。它具有显著的降血压作用以及降血脂、降血糖、
祛风、除湿、止痛等作用［１－２］，尤其是对高血压病人具
有显著的降压作用，而对正常人的血压无任何影响。
独活属植物的分类及鉴定一直很混乱，其属间和
属内的划分也一直是伞形科系统学研究的一大难
题［３］，因此本研究通过对老山芹的化学成分的分析不
但对独活属植物的分类具有重要的参考意义，同时鉴
于老山芹的多种药用活性，通过首次对老山芹根中亲
脂性化学成分的ＧＣ－ＭＳ分析，为今后系统分离鉴定
老山芹的化学成分及进一步阐明其活性成分具有一
定的参考价值。
１　仪器与试药
１．１　仪器　日本岛津（Ｓｈｉｍａｄｚｕ）公司 ＧＣ－ＭＳ／
ＱＰ２０１０气相色谱－质谱联用仪。
１．２　试药　老山芹的根于２０１１年９月采自黑龙江
省北安市，经西安交通大学医学部药学院牛晓峰教授
鉴定为伞形科独活属植物 Ｈｅｒａｃｌｅｕｍ　ｄｉｓｓｅｃｔｕｍ
Ｌｅｄｅｂ．的根。甲醇、石油醚、氯仿为分析纯，乙酸乙
酯为色谱纯。
２　方法与结果
２．１　样品的制备　取老山芹的干燥根４．０ｋｇ，剪成
１～２ｃｍ的小段，甲醇回流提取３次，每次２ｈ，合并
提取液并减压回收溶剂得到甲醇总提物，甲醇总提物
分散于水中，先后用石油醚和氯仿分别萃取，得石油
醚层６８．３ｇ，氯仿层８５．１ｇ。
２．２　ＧＣ－ＭＳ分析条件
２．２．１　石油醚部分ＧＣ条件　ＲＴＸ－５ＭＳ柱（３０ｍ×
０．２５ｍｍ，０．２５μｍ）；柱温：始温１５０℃（保持５ｍｉｎ），
以８℃·ｍｉｎ－１升温至２２０℃，再以５℃·ｍｉｎ－１升温
至２８０℃（保持１５ｍｉｎ），气化温度为２８０℃；分流
比５∶１。
石油醚部分 ＭＳ条件　ＥＩ离子源，电离能量
７０ｅＶ；离子源温度２００℃；接口温度２８０℃；质量扫
描范围５０～６００　ｍ／ｚ；溶剂峰切除时间０．５ｓ，起测时
间３．００ｍｉｎ，结束时间４０．７５ｍｉｎ；ＮＩＳＴ１４７质谱图
计算机检索数据库。
２．２．２　氯仿部分ＧＣ条件　色谱柱型号与石油醚部
位相同；柱温：始温１５０ ℃，２０ ℃·ｍｉｎ－１升温至
２３０℃，１℃·ｍｉｎ－１升温至２４０℃，５℃·ｍｉｎ－１升
温至２５０℃，最后８℃·ｍｉｎ－１升温至２８０℃（保持
５ｍｉｎ）；分流比１０∶１。
４４３ 西北药学杂志　２０１４年７月　第２９卷　第４期
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氯仿部分ＭＳ条件　质谱检测起测时间３．００ｍｉｎ，
结束时间２４．７５ｍｉｎ；其余条件均与石油醚部位相同。
２．３　结果　对老山芹的石油醚部分和氯仿部分的总
离子流图中各峰分别经质谱扫描后得到质谱图，通过
ＮＩＳＴ１４７质谱图计算机检索数据库进行检索，鉴定
出石油醚部分１９个化合物，氯仿部分１４个化合物，
按面积归一化法计算各化合物的相对百分含量。结
果分别见图１和图２及表１和表２。
图１　石油醚层的总离子流图
Ｆｉｇ．１Ｔｏｔａｌ　ｉｏｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ　ｏｆ　ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ　ｅｔｈｅｒ　ｆｒａｃｔｉｏｎ
图２　氯仿层的总离子流图
Ｆｉｇ．２Ｔｏｔａｌ　ｉｏｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ　ｏｆ　ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ　ｆｒａｃｔｉｏｎ
表１　石油醚层亲脂性化学成分分析结果
Ｔａｂ．１Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ　ｅｔｈｅｒ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒｏｏｔｓ　ｏｆ　Ｈｅｒａｃｌｅｕｍ　ｄｉｓｓｅｃｔｕｍ
序号 化合物　　　　　　　　　　　　 相对分子质量 分子式 保留时间／ｍｉｎ 相对含量／％
１
ｄｅｃａｈｙｄｒｏ－１，１，７－ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ－４－ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ－１　Ｈ－ｃｙｃｌｏｐｒｏｐ
［ｅ］ａｚｕｌｅｎ－７－ｏｌ（十氢－１，１，７－三甲基－４－亚甲基－１　Ｈ－环丙
烯并［ｅ］薁－７－醇）
２２０ Ｃ１５Ｈ２４Ｏ　 ８．１３８　 ０．８４
２　 Ｚ－４－ｄｏｄｅｃｅｎｏｌ（Ｚ－４－十二碳烯醇） １８４ Ｃ１２Ｈ２４Ｏ　 ８．５５８　 ０．７３
３　 １－ｄｏｄｅｃａｎｏｌ（１－十二烷醇） １８６ Ｃ１２Ｈ２６Ｏ　 ８．８０７　 ２．２０
４　 １－ｐｅｎｔａｄｅｃａｎｏｌ（１－十五烷醇） ２２８ Ｃ１５Ｈ３２Ｏ　 ９．４２５　 １．７４
５　 ２　Ｈ－ｆｕｒｏ［２，３－Ｈ］－１－ｂｅｎｚｏｐｙｒａｎ－２－ｏｎｅ（异补骨脂素） １８６ Ｃ１１Ｈ６Ｏ３ １１．４０３　 ２．０４
６　 １，１３－ｔｅｔｒａｄｅｃａｄｉｅｎｅ（１，１３－十四碳二烯） １９４ Ｃ１４Ｈ２６ １１．７５２　 ０．８７
７　 １－ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｌ（１－十四烷醇） ２１４ Ｃ１４Ｈ３０Ｏ　 １２．５０３　 １．２６
８ ｍｅｔｈｙｌ　ｈｅｘａｄｅｃａｎａｔｅ（棕榈酸甲酯） ２７０ Ｃ１７Ｈ３４Ｏ２ １３．１１５　 １．２０
９
９－ｍｅｔｈｙｌｔｒｉｃｙｃｌｏ［４．２．１．１（２，５）］ｄｅｃａ－３，７－ｄｉｅｎｅ－９，１０－ｄｉｏｌ
（９－甲基三环［４．２．１．１（２，５）］癸－３，７－二烯－９，１０－二醇）
１７８ Ｃ１１Ｈ１４Ｏ２ １４．６４７　 １．９９
１０ ｂｅｒｇａｐｔｅｎ（佛手柑内酯） ２１６ Ｃ１２Ｈ８Ｏ４ １４．８５９　 ３．７４
１１ ｍｅｔｈｙｌ　ｏｃｔａｄｅｃａ－９，１２－ｄｉｅｎｏａｔｅ（９，１２－十八碳二烯酸甲酯） ２９４ Ｃ１９Ｈ３４Ｏ２ １５．３７６　 １．７５
１２ ｐｉｍｐｉｎｅｌｉｎ（虎耳草素） ２４６ Ｃ１３Ｈ１０Ｏ５ １６．１７５　 ２０．９４
１３
６β，６β－ｄｉｂｒｏｍｏ－６，７－ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ（６β，６β－二溴－
６，７－亚甲基睾丸激素）
４５８ Ｃ２０Ｈ２６Ｂｒ２Ｏ２ １６．８２３　 ３３．７３
１４
［（１Ｅ，３Ｅ）－５－ｍｅｔｈｙｌ－１，３－ｈｅｐｔａｄｉｅｎｙｌ］ｂｅｎｚｅｎｅ（［（１Ｅ，
３Ｅ）－５－甲基－１，３－庚二烯基］苯）
１８６ Ｃ１４Ｈ１８ １７．４６４　 １．７８
１５ ｉｓｏｐｉｍｐｉｎｅｌｉｎ（异虎耳草素） ２４６ Ｃ１３Ｈ１０Ｏ５ １７．６９８　 ３．４２
１６ ｘａｎｔｈｏｔｏｘｏｌ（花椒毒酚） ２０２ Ｃ１１Ｈ６Ｏ４ １９．２２４　 ２．６４
１７ β－ｓｉｔｏｓｔｅｒｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ（β－谷甾醇乙酸酯） ４５６ Ｃ３１Ｈ５２Ｏ２ ２９．８３１　 １．５３
１８ ｓｔｉｇｍａｓｔｅｒｏｌ（豆甾醇） ４１２ Ｃ２９Ｈ４８Ｏ　 ３３．５２７　 ８．３６
１９ （３β，２４Ｓ）－ｓｔｉｇｍａｓｔ－５－ｅｎ－３－ｏｌ（２４Ｓ－豆甾－５－烯－３β－醇） ４１４ Ｃ２９Ｈ５０Ｏ　 ３５．１２１　 ９．２４
３　讨论
老山芹根的ＧＣ－ＭＳ分析结果表明，石油醚层中
甾体类（谷甾醇，豆甾醇及其衍生物及６β，６β－二溴－６，
７－亚甲基睾丸激素）化合物的含量为主要成分，占
５２．８６％，香豆素类化合物为第二大成分，含量共
３２．７８％，其他的长链烷醇、烯、烯醇及酯含量共
９．７５％，此外还有０．８４％的薁类化合物以及１．９９％
的三环衍生物等。氯仿部分的１４个化合物中绝大多
数为香豆素类化合物，其含量高达５４．１４％。从两部
分的分析结果可以看出，老山芹根中尤其是氯仿层的
亲脂性成分主要是香豆素类化合物。
香豆素类化合物具有多种多样的生物活性，如：
５４３西北药学杂志　２０１４年７月　第２９卷　第４期
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抗病毒及抗 ＨＩＶ 活性［４－７］，抗菌和抗寄生虫活
性［８－１１］，抗癌活性［１２－１５］，抗炎和抗氧化活性［１６－１８］，以及
抗糖尿病和抗高血压活性［１９－２１］等。老山芹发挥降压
作用的物质基础可能就是其中所含有的香豆素类化
合物，为验证这一推测和阐明其中的降压活性成分，
系统的化学成分研究和降压活性研究正在进行。
表２　氯仿部分化学成分分析结果
Ｔａｂ．２Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒｏｏｔｓ　ｏｆ　Ｈｅｒａｃｌｅｕｍ　ｄｉｓｓｅｃｔｕｍ
序号 化合物　　　　　　　　　　　　 相对分子质量 分子式 保留时间／ｍｉｎ 相对含量／％
１ ａｎｇｅｌｉｃｉｎ（异补骨脂素） １８６ Ｃ１１Ｈ６Ｏ３ ４．８６５　 ２．１１
２ ｂｅｒｇａｐｔｅｎ（佛手柑内酯） ２１６ Ｃ１２Ｈ８Ｏ４ ６．６３２　 ８．３４
３ ｓｐｈｏｎｄｉｎ（６－甲氧基当归素） ２１６ Ｃ１２Ｈ８Ｏ４ ６．７２９　 ２．２６
４
８－ｍｅｔｈｏｘｙ－ｂｅｎｚｏｆｕｒｏ［３，２－ｄ］ｐｙｒｉｍｉｄｉｎ－４（３　Ｈ）－ｏｎｅ
（８－甲氧基苯并呋喃并［３，２－ｄ］嘧啶－４（３　Ｈ）－酮）
２１６ Ｃ１１Ｈ８Ｎ２Ｏ３ ６．８７９　 １４．４５
５
ｂｅｎｚｏ［１，２－ｃ：４，５－ｃ＇］ｄｉｐｙｒｒｏｌｅ－１，３，５，７（２　Ｈ，６　Ｈ）－ｔｅｔｒｏｎｅ
（苯并［１，２－ｃ：４，５－ｃ＇］二吡咯－１，３，５，７（２　Ｈ，６　Ｈ）－四酮）
２１６ Ｃ１０Ｈ４Ｎ２Ｏ４ ６．９５０　 １０．９４
６ ｐｉｍｐｉｎｅｌｉｎ（虎耳草素） ２４６ Ｃ１３Ｈ１０Ｏ５ ７．５８２　 １９．１６
７
６β，６β－ｄｉｂｒｏｍｏ－６，７－ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎ
（６β，６β－二溴－６，７－亚甲基睾丸激素）
４５８ Ｃ２０Ｈ２６Ｂｒ２Ｏ２ ７．８９１　 ２１．８８
８　 １－（３－ｉｏｄｏｐｈｅｎｙｌ）ｅｔｈａｎｏｎｅ（１－３－碘苯基）乙酮） ２４６ Ｃ８Ｈ７ＩＯ　 ８．９３６　 １１．９２
９ ｉｍｐｅｒａｔｏｒｉｎ（欧前胡素） ２７０ Ｃ１６Ｈ１４Ｏ４ １０．６０６　 ２．４８
１０
（Ｓ）－４－（（３，３－ｄｉｍｅｔｈｙｌｏｘｉｒａｎｙｌ）ｍｅｔｈｏｘｙ）－７　Ｈ－ｆｕｒｏ［３，２－
ｇ］ｂｅｎｚｏｐｙｒａｎ－７－ｏｎｅ（（Ｓ）－４－［（３，３－二甲基噁丙环基）甲
氧基］－７　Ｈ－呋喃并［３，２－ｇ］苯并吡喃－７－酮）
２８６ Ｃ１６Ｈ１４Ｏ５ １２．４４５　 １．８５
１１ ｉｓｏｏｘｙｐｅｕｃｅｄａｎｉｎ（异氧化前胡素） ２８６ Ｃ１６Ｈ１４Ｏ５ １３．１５４　 ０．５５
１２ ｘａｎｔｈｏｔｏｘｏｌ（花椒毒酚） ２０２ Ｃ１１Ｈ６Ｏ４ １４．３２２　 １．１２
１３ ｏｘｙｐｅｕｃｅｄａｎｉｎ　ｈｙｄｒａｔｅ（水合氧化前胡素） ３０４ Ｃ１６Ｈ１６Ｏ６ １６．９４４　 １．８２
１４　 ２－ｍｅｔｈｙｌ－２－ｎｉｔｒｏｐｒｏｐａｎ－１－ｏｌ（２－甲基－２－硝基－１－丙醇） １１９ Ｃ４Ｈ９ＮＯ３ １７．４７９　 １．１２
　　市面上独活品种很多，主要来自伞形科当归属和
独活属植物，而这２个属的主要化学成分为香豆素
类，目前已经从不同品种的独活中分离得到的香豆素
类化合物达７０多种［２２－２３］。通过 ＧＣ－ＭＳ分析得知，
老山芹根中的化学成分绝大多数为香豆素类化合物，
这不仅为老山芹的归属提供了依据，同时也为老山芹
的开发利用奠定了实验基础。
参考文献：
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ｔｕｒｅ－ｂａｓｅｄ　ｄｅｓｉｇｎ　ｏｆ　ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｉｃ　ＨＩＶ　ｐｒｏｔｅａｓｅ　ｉｎｈｉｂｉ－
ｔｏｒｓ：ｔｈｅ　ｓｕｌｆｏｎａｍｉｄｅ－ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ　ｃｙｃｌｏｏｃｔｙｌｐｙｒａｍｏｎｅｓ
［Ｊ］．Ｊ　Ｍｅｄ　Ｃｈｅｍ，１９９７，４０（７）：１１４９－１１６４．
［８］　Ｋｏｋｕｂｕｎ　Ｔ，Ｖｅｉｔｃｈ　Ｎ　Ｃ，Ｂｒｉｄｇｅ　Ｐ　Ｄ，ｅｔ　ａｌ．Ｄｉｈｙｄｒｏｉｓｏ－
ｃｏｕｍａｒｉｎｓ　ａｎｄ　ａ　ｔｅｔｒａｌｏｎｅ　ｆｒｏｍＣｙｔｏｓｐｏｒａ　ｅｕｃａｌｙｐｔｉｃｏｌａ
［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００３，６２（５）：７７９－７８２．
［９］　Ｋｗｏｎ　Ｙ　Ｓ，Ｋｏｂａｙａｓｈｉ　Ａ，Ｋａｊｉｙａｍａ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ，Ａｎｔｉｍｉ－
ｃｒｏｂｉａｌ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　Ａｎｇｅｌｉｃａ　ｄａｈｕｒｉｃａ　ｒｏｏｔｓ［Ｊ］．
Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９７，４４（５）：８８７－８８９．
［１０］Ｕｒｄａｎｇａｒｉｎ　Ｃ，Ｒｅｇｅｎｔｅ　Ｍ　Ｃ，Ｊｏｒｒｉｎ　Ｊ，ｅｔ　ａｌ．Ｓｕｎｆｌｏｗ－
ｅｒ　ｃｏｕｍａｒｉｎ　ｐｈｙｔｏａｌｅｘｉｎｓ　ｉｎｈｉｂｉｔ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｖｉｒ－
ｕｌｅｎｔ　ｐａｔｈｏｇｅｎ　Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ　ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ［Ｊ］．Ｊ　Ｐｈｙｔｏ－
ｐｈａｔｈｏｌ，１９９９，１４７（７）：４４１－４４３．
［１１］Ｔａｄａ　Ｙ，Ｓｈｉｋｉｓｈｉｍａ　Ｙ，Ｔａｋａｉｓｈｉ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｏｕｍａｒｉｎｓ
ａｎｄ　ｇａｍｍａ－ｐｙｒｏｎｅ　ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ　ｆｒｏｍＰｒａｎｇｏｓ　ｐａｂｕｌａｒ－
ｉａ：ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｙｔｏｋｉｎｅ　ｒｅ－
ｌｅａｓｅ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００２，５９（６）：６４９－６５４．
［１２］Ｍｉｚｕｎｏ　Ａ，Ｔａｋａｔａ　Ｍ，Ｏｋａｄａ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｏｆ
ｎｅｗ　ｃｏｕｍａｒｉｎｓ　ａｎｄ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ－ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ
６４３ 西北药学杂志　２０１４年７月　第２９卷　第４期
ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
ｃｏｕｍａｒｉｎｓ　ｆｒｏｍ　Ａｎｇｅｌｉｃａ　ｅｄｕｌｉｓ［Ｊ］．Ｐｌａｔａ　Ｍｅｄｉｃａ，
１９９４，６０（４）：３３３－３３６．
［１３］Ｏｉｋａｗａ　Ｔ，Ｓａｓａｋｉ　Ｍ，Ｉｎｏｓｅ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｙｔｏ－
ｇｅｎｉｎ，ａ　ｎｏｖｅｌ　ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｐｒｏｄｕｃｔ，ｏｎ　ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ　ａｎｄ
ｔｕｍｏｒ　ｃｅｌ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ｉｎ　ｖｉｖｏ［Ｊ］．
Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，１９９７，１７（３Ｃ）：１８８１－１８８６．
［１４］张庆林，赵精华，毕建进，等．蛇床子中３种逆转肿瘤细
胞多药耐药活性香豆素［Ｊ］．中草药，２００３，３４（２）：
１０４－１０６．
［１５］Ｍｏｒｉｔａ　Ｈ，Ｄｏｔａ　Ｔ，Ｋｏｂａｙａｓｈｉ　Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｔｏｔｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ
ｏｆ　ｇｌａｕｐａｌｏｌ－ｒｅｌａｔｅｄ　ｃｏｕｍａｒｉｎｓ　ｆｒｏｍ　Ｇｌａｕｃｉｄｉｕｍ　ｐａｌ－
ｍａｔｕｍ［Ｊ］．Ｂｉｏｏｒｇ　Ｍｅｄ　Ｃｈｅｍ　Ｌｅｔｔ，２００４，１４（１４）：
３６６５－３６６８．
［１６］Ｋｕｍｍａｌａ　Ｔ，Ｖｕｏｒｅｌａ　Ｐ，Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎｈｉｂｉｔｏ－
ｒｙ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ａ　ｓｅｒｉｅｓ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎｓ　ｏｎ　ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｅｌｅａｓ－
ｔａｓｅ　ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｐｌａｔｅｌｅｔ　ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ
（ＰＡＦ）ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｈｅｍｏｔａｃｔｉｃ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｆＭＬＰ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍ
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［１７］Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ－Ｐｕｎｔｅｒｏ　Ｂ，Ｂａｒｒｏｓｏ　Ｉ，Ｉｇｌｅｓｉａｓ　Ｉ，ｅｔ　ａｌ．Ａｎ－
ｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｆｒａｘｅｔｉｎ：ｉｎ　ｖｉｖｏ　ａｎｄ　ｅｘ　ｖｉｖｏ　ｐａ－
ｒａｍｅｔｅｒｓ　ｉｎ　ｎｏｒｍａｌ　ｓｉｔｕａｔｉｏｎ　ｖｅｒｓｕｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｓｔｒｅｓｓ［Ｊ］．
Ｂｉｏｌ　Ｐｈａｒｍ　Ｂｕｌ，２００１，２４（７）：７７７－７８４．
［１８］Ｙｕｎ　Ｂ　Ｓ，Ｌｅｅ　Ｉ　Ｋ，Ｒｙｏｏ　Ｉ　Ｊ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｏｕｍａｒｉｎｓ　ｗｉｔｈ
ｍｏｎｏａｍｉｎｅ　ｏｘｉｄａｓｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅ
ｃｏｕｍａｒｉｎｏ－ｌｉｇｎａｎｓ　ｆｒｏｍ　Ｈｉｂｉｓｃｕｓ　ｓｙｒｉａｃｕｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｎａｔ
Ｐｒｏｄ，２００１，６４（９）：１２３８－１２４０．
［１９］Ｎｇｕｅｌｅｆａｃｋ－Ｍｂｕｙｏ　Ｐ　Ｅ，Ｎｇｕｅｌｅｆａｃｋ　Ｔ　Ｂ，Ｄｏｎｇｍｏ　Ａ
Ｂ，ｅｔ　ａｌ．Ａｎｔｉ－ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈａｎｏｌ／
ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｃｈｌｏｒｉｄｅ　ｓｔｅｍ　ｂａｒｋ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　Ｍａｍｍｅａ　ａｆ－
ｒｉｃａｎａ　ｉｎ　ｌ－ＮＡＭＥ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ　ｒａｔｓ ［Ｊ］．Ｊ
Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００８，１１７（３）：４４６－４５０．
［２０］Ｔｃｈａｍａｄｅｕ　Ｍ　Ｃ，Ｄｚｅｕｆｉｅｔ　Ｐ　Ｄ　Ｄ，Ｎｏｕｇａ　Ｃ　Ｃ　Ｋ，ｅｔ
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ｔｉｆｅｒａｅ）ｉｎ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２０１０，
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ｍｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｔｅｒａｍｎｕｓ　ｌａｂｉａｌｉｓ（Ｆａｂａｃｅａｅ）［Ｊ］．Ｐｈｙ－
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［２３］柳江华，徐绥绪，姚新生．独活的化学成分与药理研究
进展［Ｊ］．沈阳药学院学报，１９９４，５９（２）：１４３－１５０．
（收稿日期：２０１４－０２－２１）
酶法提取苦豆草生物碱研究
李　军，郝彩琴，陈海燕，郭鸿雁，冷晓红（宁夏职业技术学院，宁夏中药材开发与利用工程技术研究中心，银川　７５００２１）
摘要：目的　在实验室酶法提取的基础上，优化苦豆草生物碱酶法提取小试工艺条件。方法　以苦豆草生物碱的提取率为指标，
在小试条件下优化提取次数、料液比、提取时间，并与传统提取法比较。结果　酶法提取最佳的小试工艺条件为：酶解时间４ｈ，
溶剂ｐＨ＝６，温度为５０℃，加酶量为１∶１　０００，酶解后，加入盐酸至浓度为４ｍＬ·Ｌ－１，料液比１∶１６，提取２次，第１次２ｈ，第２
次１ｈ。苦豆草生物碱的提取率达到２．１７％　结论　实验室提取工艺与小试生产存在差异，经条件优化基本达到实验室提取生
物碱的提取率。
关键词：苦豆草；生物碱；酶法提取
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１４．０４．００４
中图分类号：Ｒ２８４　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１４）０４－０３４７－０４
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ　ｆｒｏｍＳｏｐｈｏｒａ　ａｌｏｐｅｃｕｒｏｉｄｅｓ　Ｌ．
ＬＩ　Ｊｕｎ，ＨＡＯ　Ｃａｉｑｉｎ，ＣＨＥＮ　Ｈａｉｙａｎ，ＧＵＯ　Ｈｏｎｇｙａｎ，ＬＥＮＧ　Ｘｉａｏｈｏｎｇ（Ｎｉｎｇｘｉａ　Ｐｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃ　Ｖｏｃａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ，Ｎｉｎｇｘｉａ　Ｅｎｇｉ－
ｎｅｅｒｉｎｇ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｈｅｒｂｓ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ，Ｙｉｎｃｈｕａｎ　７５００２１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ，ｔｏ　ｏｐｔｉｍｉｚｅ　ｓｍａｌ－ｓｃａｌｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ
ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｆｒｏｍＳｏｐｈｏｒａ　ａｌｏｐｅｃｕｒｏｉｄｅｓ　Ｌ．．Ｍｅｔｈｏｄ　Ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｔｈｅ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ａｓ　ｉｎｄｅｘ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ，
ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ　ｒａｔｉｏ　ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅｓ　ｗｅｒｅ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｉｎ　ｓｍａｌ－ｓｃａｌｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｗｅｒｅ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　ｅｘ－
ｔｒａｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｓｍａｌ－ｓｃａｌｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ａｓ　ｆｏｌｏｗｓ：ｓｏｌｖｅｎｔ　ｐＨ　６，ａ－
ｍｏｕｎｔｓ　ｏｆ　ｅｎｚｙｍｅ（１∶１　０００），ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ａｔ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　５０℃ｆｏｒ　４ｈ．Ｔｈｅｎ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｗａｓ　ａｄｄｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｃｏｎ－
ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　４ｍＬ·Ｌ－１，ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ　ｒａｔｉｏ　１∶１６，ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｆｏｒ　２ｔｉｍｅｓ．Ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ｔｉｍｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　２ｈ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｓｅｃｏｎｄ　ｔｉｍｅ　ｅｘ－
ｔｒａｃｔｅｄ　１ｈ．Ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ　ｆｒｏｍＳｏｐｈｏｒａ　ａｌｏｐｅｃｕｒｏｉｄｅｓ　Ｌ．ｗａｓ　２．１７％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ａｌｔｈｏｕｇｈ　ｔｈｅ　ｓｍａｌ－ｓｃａｌｅ
ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｗａｓ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　ａｌｍｏｓｔ　ｓａｍｅ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｓｏｐｈｏｒａ　ａｌｏｐｅｃｕｒｏｉｄｅｓ　Ｌ．；ａｌｋａｌｏｉｄｓ；ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
基金项目：２０１２年宁夏高等学校科学技术项目（编号：ＮＧＹ２０１２１２５）
７４３西北药学杂志　２０１４年７月　第２９卷　第４期