全 文 ：罗汉果叶黄酮的中试生产及产品指标的制定
谭洪盛1，陈全斌2 (1．桂林中族中药股份有限公司，桂林永福 581000;2．广西师范大学资源与环境学院，桂林 541004)
摘要 ［目的］研究罗汉果叶黄酮的生产方法并制定产品指标。［方法］试验采用水浸提、大孔吸附树脂吸附、浓度 75%乙醇洗脱等方法
对罗汉果叶黄酮进行中试生产试验。［结果］粗品黄酮总量为 25． 52%、精品黄酮总量达 45． 8%。［结论］初步确认了罗汉果叶黄酮的生
产工艺并制订了产品指标。
关键词 产品指标;黄酮类化合物;罗汉果(FRUCTUS MOMORDICAE);
中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2011)26 －15954 －02
Pilot Production and Product Index of Flavonoids from the Leaves of Momordica grosvenori Swingle
TAN Hong-sheng et al (Guilin Otigh Natural Medicine Co．，Ltd．，Guilin，Guangxi 581000)
Abstract ［Objective］The aim was to study on the production and product index of flavonoids from the leaves of Siraitia grosvenori (Swingle)
C． Jeffery． ［Method］Pilot production test on the leaf flavonoids from S． grosvenori was carried out by the methods of water extraction，macro-
porous resin adsorption，75% ethanol elution，and so on． ［Result］ Total flavonoids in crude sample and refined sample were 25． 52% and
45． 8%，respectively． ［Conclusion］Production process for the flavonoids from the leaves of S． grosvenori was preliminarily set up and its product
index was formulated．
Key words Product index;Flavonoids;Siraitia grosvenori (Swingle)C． Jeffery
基金项目 广西科学研究与开发项目，合同编号:桂科转 0896002 － 20。
作者简介 谭洪盛(1960 － ) ，男，广西桂林人，工程师，从事中药成分
的提取与分离和药物制剂制造研究。
收稿日期 2011-05-30
罗汉果(FRUCTUS MOMORDICAE)是葫芦科(Cucurbita-
ceae)植物罗汉果(Momordica grosvenori Swingle)的成熟果实，
为广西桂北地区的传统特产，广泛用于医药、饮料和调味品。
前人已经对罗汉果果实中甜苷［1］、多糖［2］、黄酮［3 －4］、块根中
淀粉［5］、种仁油［6］等成分进行了较多的研究。近几年来也有
关于罗汉果叶黄酮的研究报道［7 －9］，认为罗汉果叶中黄酮可
以明显提高小鼠断头后张口呼吸的时间，延长 ADP 诱发小
鼠急性肺栓塞呼吸喘促的时间，减轻大鼠静脉血栓重量，降
低急性血瘀大鼠全血粘度、血浆粘度及红细胞压积。说明罗
汉果黄酮具有明显的活血化瘀药理作用。但目前关于罗汉
果叶黄酮提取生产和产品指标的文献鲜有报道，试验对罗汉
果叶中黄酮的生产和指标的制定进行了研究和探讨。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 研究对象。罗汉果叶，2009年秋季采于广西临桂永福。
1． 1． 2 主要仪器。P200Ⅱ型高效液相色谱仪，由连依利特分
析仪器有限公司生产;DTQ多功能提取罐(3 m3) ，由温州泰
康蒸发器有限公司生产;SJN 三效浓缩器 (500 L3) ，由温州
泰康蒸发器有限公司生产;溶剂回收器(500 L3)、吸附分离
柱 (3组) ，自制。储液罐、槽 (40 m3) ，自制。喷雾干燥装置
(40 L /h) ，自制。
1． 1． 3 主要试剂。LSA-10 大孔吸附树脂，由西安蓝深交换
吸附材料有限公司生产;槲皮素及山奈酚对照品，购自于中
国药品生物制品检定所;95%乙醇、甲醇、磷酸，均为 AR。
1． 2 方法
1． 2． 1 工艺流程。称取罗汉果叶 250 kg，置入提取罐中，再
加入 2． 5 m3 的水，回流提取 1． 5 h，冷却过滤，重复 3次，合并
滤液。将滤液以适宜速度过大孔吸附树脂柱。吸附完毕后，
首先用蒸馏水洗，至流出液无色，然后用浓度 75%的乙醇洗
脱。洗脱液经浓缩回收乙醇至含固量 25%左右，再进行喷雾
干燥得罗汉果黄酮粗品 10． 5 kg;将粗品加入 84． 0 ～ 105． 0 L
的浓度 95%的乙醇进行回流萃取，重复 3次，过滤，合并乙醇
溶液，浓缩，回收乙醇至含固量 25%左右，进行喷雾干燥工
序，得罗汉果叶黄酮精品 5． 5 kg。
1． 2． 2 产品含量检测。
1． 2． 2． 1 色谱条件。流动相为 V甲醇 ∶ V水 ∶ V磷酸 = 60∶ 40∶ 0． 3;
流速为 1． 0 ml /min;检测波长为 360 nm;灵敏度为 0． 04;柱温
为 40 ℃。
1． 2． 2． 2 标准溶液及样品制备。分别配制浓度为 0． 2
mg /ml的槲皮素、山奈酚标准溶液，精确吸取 0． 2 ml 槲皮素
标准溶液和 1 ml山奈酚标准溶液，置入 10 ml 容量瓶中，用
甲醇定容、摇匀，得槲皮素、山奈酚混合标样。
1． 2． 2． 3 样品溶液的制备。精确称取 60． 5 mg上述粗黄酮、
60． 03 mg精制黄酮，分别置于圆底烧瓶中，加入30 ml甲醇和
10 ml盐酸(V /V，1∶ 1) ，水浴加热回流 1 h，然后用甲醇定容至
50 ml，得样品待测溶液。根据黄酮苷与苷元相对相对分子质
量比值［9］可知，罗汉果叶总黄酮苷与苷元的换算公式应为:
总黄酮苷(%)= 槲皮素(%)× 620 /302 + 山奈酚(%)×
578 /286;即:总黄酮苷含量(%)=槲皮素(%)× 2． 05 +山奈
酚(%)×2． 02
2 结果与分析
2． 1 样品溶液的含量测定 分别取混合标样和待测样品溶
液进样，色谱图见图 1、图 2、图 3。
由图 1 ～3表明，在试验色谱条件下，标准溶液和样品待测
溶液中各目标峰得到充分的洗脱和分离，样品的色谱峰与标准
样品槲皮素、山奈酚的保留时间一致，标样中槲皮素和山奈酚
的保留时间分别在 8． 57、15． 80 min左右。样品中两峰的保留
时间分别与标样中槲皮素和山奈酚的保留时间一致。
说明两样品均含有槲皮素、山奈酚苷元;采用外标法定
量，分析结果得出:粗品中总黄酮的含量为 25． 52%，精品中
总黄酮的含量为 45． 8%。
2． 2 产品指标 参考银杏叶提取物标准［10］及 GB /T对罗汉
果叶黄酮产品进行菌落总数、大肠菌群、食品中水分及铅的
测定。根据测定结果制定产品指标如下:
责任编辑 石金友 责任校对 况玲玲安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2011，39(26):15954 － 15955
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.26.187
图 1 标样色谱图(t槲皮素 =8． 57 min，t山奈酚 =15． 8 min)
Fig． 1 Chromatogram of standard sample
图 2 粗品色谱图 (tR1 =8． 59 min，tR2 =16． 0 min)
Fig． 2 Chromatogram of crude sample
图 3 精制样品色谱图(tR1 =8． 56 min，tR2 =15． 7 min)
Fig． 3 Chromatogram of refined sample
表 1 生产指标值
Table 1 Production index value
项目 Item 产品指标 Product index
色泽 Color 淡棕黄色
溶解性 Solubility 0． 1%(W/V)水溶液时，加热
冷却后，不得有不溶物存在。
形态 State 粉 末
性味 Taste 微 苦
气味 Smell 罗汉果特殊香味
水份Water ≤5%
黄酮苷总量 Total flavonoids ≥45%
重金属 Heavy metals ≤20 mg /kg
大肠杆菌 E coli ≤50个 / g
细菌总数 Total bacterial count ≤300个 / g
3 结论
中试生产罗汉果叶粗品黄酮含量为 25． 5%，得率为
4． 2%;采用无水乙醇精制后，黄酮含量提高到 45． 8%，得率
为 2． 2%，试验结果表明，生产工艺可行。根据试验结果制定
了罗汉果叶的产品指标，这为进一步生产和应用提供了
依据。
参考文献
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2010．
(上接第 15953 页)
表 2 L9(3
3)正交试验结果
Table 2 Results of L9(3
3)orthogonal test
序号
No． A B C
总黄酮提取率∥%
Extraction rate
of total flavonoids
1 1 1 1 3． 00
2 1 2 2 3． 53
3 1 3 3 3． 79
4 2 1 2 3． 95
5 2 2 3 4． 56
6 2 3 1 4． 99
7 3 1 3 3． 15
8 3 2 1 3． 81
9 3 3 2 4． 40
K1 10． 32 10． 10 11． 80
K2 13． 50 11． 90 11． 88
K3 11． 36 13． 18 11． 50
R 3． 18 3． 08 0． 38
3 结论
微波辅助提取沙棘总黄酮的最佳工艺条件为在微波功
率为 400 W，料液比为 1∶ 25，乙醇浓度为 80%，提取时间 90 s，
在此条件下沙棘总黄酮提取率可达 4． 99%。采用微波辅助
技术提取天然产物中的活性物质，具有提取效率高、选择性
强、重现性好、缩短时间、节约溶剂、降低能耗、绿色环保等优
点，故采用微波辅助方法提取沙棘总黄酮有明显优势，应用
于该药物的工业提取工艺。
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5595139 卷 26 期 谭洪盛等 罗汉果叶黄酮的中试生产及产品指标的制定