全 文 ：药学学报 ^e t aP h r am ae eu t ie as in ie a1 9 9 3 ; 2 8 (3 ) :9 2 2 ~3 3 2
大青叶和板蓝根药材及其制剂质量控制的研究
李 玲 乔传卓 李修禄 董同义
(第二军医大学药学院 , 上海讼0 4 3 3)
提要 首次提出以 2 , 4 ( IH , 3H )座哇二酮〔2 , 4 ( I H , 3H ) qu ~ 川加曲。 ne 〕作为马蓝
、萝蓝药材及其
制剂的质量控制指标 。此成分系最近发现的 ,含量稳定且有代表性 , 尤其适用于评价此类中药制剂的
真伪优劣 ,为当前难以解决的感冒退热冲剂和板蓝根冲剂的质量监控提供了可靠的方法 。特别要指
出的是本文是在高效液相色谱法中采用变换检测波长和梯度洗脱的方法 ,一次进样即可完成三种化
学性质不同组分的含量分析 ,缩短了分析时间 ,提高了分析效率 。
关扭词 2 , 4 (1 H , 3 H )喳哇二酮 ;大青叶 ;板蓝根 ;靛蓝 ,靛玉红 ;高效液相色谱法
感冒退热冲剂和板蓝根冲剂主要成分为大青叶 、 板蓝根 。大青叶来源于爵床科马蓝侣卜的踌
翻场郎
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、 萝科寥蓝 (凡帆阿娜 艺玩礴毋~ )和十字花科落蓝物时七 忿如比 , 它 )的叶 ,板蓝根来源于马
蓝和落蓝的根 。 其中马蓝分布在华南 、西南和福建地区 ,萝蓝分布在东北和华北地区“ , ,几乎退
布大半个中国 ,是大青叶和板蓝根的主要来源 。 但几十年来大青叶和板蓝根药材及其制剂的质
量监控一直未能解决 。在中国药典中仅规定用靛玉红作为感冒退热冲剂的鉴定标准 (2) ,原因可
能是靛玉红的脂溶性较强 ,在现有的制剂生产工艺中很难将其提出 。 曾有人对各地生产的感冒
退热冲剂做了含量分析 ( 3一 5 , ,很难测到其中靛玉红的含量 , 我们在测定咬哇酮含量的同时验证
了靛玉红的含量 , 结果与之一致 ,这说明继续采用靛玉红作为质量控制标准是行不通的 。 而哇
哇酮的化学性质符合制剂的生产工艺 (6) , 将哇哇酮作为药材和制剂的质量控制指示成分则客
观地反映了马蓝和萝蓝药材及制剂的质量优劣 ,使多年来徘徊在测定靛玉红含量基础上的分
析方法有了突破 ,为大青叶和板蓝根药材及其制剂的质量监控提供了可靠的方法 。
实 验 部 分
仪器 、试荆及药品
高效液相色谱仪包括 M 5 1 O和 M 5 90 型泵 , 49 0型 U v / v 份检测器 、 74 0型色谱数据站 、 U 6 K
进样阀均为 W a t e r s 公司产品 , L IhC rosr b 砂一 1 8 ( 1 0卿 )色谱柱 ( 4
·
6 m m X 2 5 0 m m )
。
溶剂及试剂均为色谱纯和分析纯 ,四蒸水 。药材由各产地药材公司购置 , 经本院生药教研
室乔传卓副教授鉴定 。 唆哇酮标准品由上海医药工业研究院提供 ,经元素分析 、核磁共振 、 质
谱 、 红外光谱分析确认为喳哇酮 ;靛蓝 (访 d i g o) 、靛玉红 i( dn i r u b i r )标准品由四川中药研究所提
供 ;内标 A (乙酞苯胺 ) 由意大利 car l。 E: ba 公司提供 ;内标狱蔡 )为上海试剂一厂产品 。 以上标
准品经面积归一化测定含量均在9 · 5%以上 。
本文于 1 99 2年 3月 1 6日收到 。
, 军内科研基金课题
药学学报 八 、 t aP h r am e ao uti e a Si ni e a1 9 9 3 ;2 8 (3) : 29 2 ~ 23 3
分析亲件
色谱程序
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5 5 3 0 65 6
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, 梯度洗脱为 O ; a 梯度洗脱呈直线变化 ; b 梯度洗脱呈凹型曲线变化 .
检侧波长设定
唆哇酮紫外最 .人吸收在 2 2 6 n m , 靛蓝在 2 5 8 n m , 靛玉红在 2 9 2 n m ,故选定 2 2 6 n m 和 2 8 8 n m
作为含量测定的紫外检测波长 。 内标 A 用于唆哇酮的测定 , 内标 B 用于靛蓝 、靛玉红的测定 。
从进样至 n m i n ,检测波长为 2 26 n m , 检测唆哇酮和内标 A 两个组分 , 保留时间分别为
5
.
53 m in 和 8 . 20 m in ;从 l m山 至色谱程序结束 ,检测波长为 2 8 lun ,检侧艘蓝 、 靛玉红和内标
B 三个组分 ,保留时间分别为 24 . 62 m in , 30 . 18 m in 和 26 . 18 m in . 检测灵敏度为 0 . 05 A U F s .
标准液和样品制备 `
标准液配制 精密称取咬哇酮 2 . O mg 。 内标 A 4 . O mg , 内标 B 5 . O lgn 分别置于 1 0 而 量
瓶中 , 用甲醉溶解 , 并稀释至刻度 ;靛蓝 、靛玉红各 3 . o gm , 分别置于 1 0 ml 量瓶中 , 用氛仿溶
解 ,并稀释至刻度 。
药材中咬哇翻的报取 精密称取粉碎过的药材 1 0 mg ,置 2 5而 量瓶中 ,加适量四氢咬喃 ,
在超声波提取器中提取 90 ~ ,过涟后置水浴上燕干 ,用 甲醉溶解于 25 而 量瓶中
,加入内标 A
溶液 2 . 5 m l ,用甲醉稀释至刻度备用 (提取液 1 ) 。
药材中徽蓝 、艘玉红的提取 另取同样重的一份样品 ,置 25 而 量瓶中 , 加入适量抓仿 ,在
超声波提取器中提取 90 m in ,冷却后滤于 25 而 量瓶 ,加人内标 B 溶液 2 . s ml ,用抓仿稀释至刻
度备用 (提取液 2) 。
制剂中咬哇翻的提取 将各地产的板蓝根冲剂各五袋在乳钵中研细 ,精密称取巧 g 置
so hx let 提取器中 ,用 1 0 ml 四氢咬喃提取 s h ,提取液浓缩后置水浴上蒸干 ,用 甲醉溶解后 , 移
置 25 ml 量瓶中 ,加人内标 A 溶液 2 . s ml ,用甲醉稀释至刻度备用 (提取液 3) 。
制剂中桩蓝 、 艘玉红的提取 另取同样重量的样品 ,置 &找灿 e t 提取器中用 10 0 lu 氛仿提
取 5 ” , 提取液浓缩后 , 移置 25 回 量瓶中 , 加人内标 B 爷液 .2 5 而 , 用抓仿稀释至刻度备用 (提
取液 4 ) 。
实验与结果
标准曲线制备 分勺取咬哇酮 、靛蓝 、 靛玉红标准液各0 . 05 , 0 . 1 , 0 . 2 , 0 . 4 , 0 . 8 m l 置 s ml
量瓶中 ,配成各自含量为每 ml 含 0 . 2 , 0 . 4 , 0 . 8 , 1 . 6 , 3 . 2 昭 ;加入内标 A 溶液 0 . s lm , 加入内标
B 溶液 0 . s ml ,进样量 20 川 。 经色谱方法测定 , 以峰面积 比 y( sA / iA )对含量 x( 昭 )进行回归处
理 。
唆哇酮线性方程为 : y 一 0 . 0 1 4 2 + 0 . 7 3 5 x ( r 一 0 . 9 9 9 9 5 , n = 4 )
靛蓝的线性方程为 : y = 0 . 0 3 8 3 + 0 . 13 4 6 x ( r 一 0 . 9 9 9 7 , n 一 4 )
药学学报 ^ et aP h ar m a e e ut i e a s in i e a 1 9 9 3 ;2 8( 3 ): 2 2 9~ 2 3 3
靛玉红的线性方程为 : y~ 0 .02 02 0 + .1 6o 7x ( r~ 0 .9 9 9 9, n = 4 )
色谱图见图 1 。
药材中咬哇酮 、艘蓝 、饭玉红含 t 侧定 精
密吸取提取液 1和 2各 l ml 混匀后进样 20 口 , 用
内标法计算出各样品的含量 ,结果见表 1 ,色谱
图见图2 。
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T加田如 1 . 3 7 8 1 . 13 0 0 1 . 9 4 1 . 7 4 0
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加样目收试验 分别于 1 5 9冲剂中加入不同量的哇哇酮 、靛蓝和靛玉红标准品 ,同时作样
品对照 ,提取方法和测定方法等同 , 结果见表 3 。
药学学报 A et a phan r l a e e ut i e a S in i e al 9 9 3 ;2 8 ( 3 ): 2 2 9一 2 3 3
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稳定性试验 取标准液和样品液在室温 ( 20 一 25 `C )下保存 ,分别在不同时间测定 (表 4 ) 。
结果表明几种样品在二 日内稳定性较好 , 由于靛蓝和靛玉红对光不稳定 ,因而要避光保存 。
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从制剂的含量分析结果可以看出 , 靛蓝和
靛玉红 已基本测不出 。如果继续采用靛玉红作
为质量控制指标 ,缺乏足够的科学依据 。 我们认
为应根据制剂的生产工艺确定质量控制指标 。
咬哇酮可溶于四氢吠喃 、 甲醇 、 乙醇 ,微溶于水 ,
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它的化学性质符合制剂的提取制备工艺 ,而且在不同产地的同种植物中分布稳定 。 咬哇酮的药
理试验显示了抗炎和抗高血压的活性 `卜“ ) 。既然唆哇酮能反映药材的真伪优劣 ,将它作为药材
和制剂的质量控制标准是切实可行的 。本文在 H P L c 中采用变换检测波长和梯度洗脱的方法 ,
使本来需要两次色谱程序的分析方法一次完成 。 这样做既节约了分析时间 , 又节省了溶剂消
耗 ,提高了仪器使用效率 。 对提取方法进行了筛选 , 采用了甲醇 、 乙醇 、 乙醚和四氢吠喃为提取
溶剂 ,结果以四氢吠喃最好 。 由于制剂中组分较复杂 ,超声波提取的效果不如 so x hl et 提取效果
好 ,故选定 oS hx lct 提取 。
致谢 本工作得到本院张紫洞教授 、 魏水易讲师 、 陈卫平博士研究生及上海医药工业研究院易大年教授
的帮助 。
参 考 文 献
1 乔传卓 ,等 . 大青叶类药材的研究概况 . 中药材 ! 9 8 6 ; 5 , 41 ·
2 中华人民共和国卫生部药典委员会编 . 中国药典一部 . 1 9 9 0版 . 北京 : 人民卫生出版社 , 1 9 9 0 : 5 2 .
3 张建军 , 等 . 板蓝根提取工艺探讨 . 中国中药杂志 19 91 ; 1 5 , 31 .
4 李影 ,等 . 板蓝根冲剂生产过程中靛玉红的含量变化及工艺改进设想 . 中成药 1 990 ; 12 : .8
5 陈发奎 ,等 . 感冒退热冲剂中叫噪贰损失问题的探讨 . 中成药研究 1 9 8 8 ; 1 : 1 .
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a d m i n i s t r a t i o n i n r a t s a n d d o g s
.
Z万泛勺 J介之砧 玩毕沼 1 9 8 4 ; 1 2 : 7 7 2 .
药学学报 ^c ta P ha rm a e e uti e a si ni e a 199 3; 5 2 (3) : 2 29一 5 3 23 3 2
9 M on t饱娜 n o uC l, et a l . A n a lg eS l c , an it e o n v u l sa nt an d an it in f 1a m m at o r y a c t1v 1t ieS of 1H , 3 H 一 q u in a -
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an d aB n俪 g e n ( R a d议 tS r o b il a n this ) as w le as ist erP 四 at i o n s . Qz L w as fo un d fo r ht e 份st it m e
fr om het
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n t io n de t w o Ch l n e se he rha l dr u gs w hi e h ha s a r e Pr e se n at it v e Por pe r t y
.
Ist e o n et n t is
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.
T hi s m ade i
t p韶 s i lbe ot sol ve t h e d if f ic u lt y of q u a il yt eon t r of for th e erP 琳 r a t ion s “ a n ti讨 r e ti e
an d e om m
o n e o ld g r a n u lse
” a n d “ aB n l a n助 n gr anu 油 an d 讲 o v id e a r e il a b ic a sa y 角 e ht de to e va l u a t e
ht e q u碰 t y of the he ralb P r e琳 r a it on s . By c h a n ig n g th e w a v e le n g th a n d su i n g g r ad i e n t e l u t fo n i n
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