全 文 ：药物研究

CHINA JOURNAL OF PHARMACEUTICAL ECONOMICS 20
Drug Research 2016 年第 2期
床疗效[8]。
5 小结
综上所述，中药炮制辅料对于中医药理论的临
床应用具有重大意义，加强对中药炮制辅料的研究，
制定统一药用标准的同时提高中药炮制辅料作用机
制的研究，将在一定程度上推进中药炮制学科的迅
猛发展，进而可提高患者的生命质量。
参考文献
[1] 黄建忠.中药炮制中的常用炙法及其临床应用[J].中医临床研
究,2013,5(12):1254-1255.
[2] 全智慧.NIR 分析技术在制川乌配方颗粒制备过程中的应用研
究[D].广东:广州中医药大学,2013.
[3] 张建军.中药炮制中的常用炙法及其临床应用研究[J].中西医
结合心血管病杂志,2014,2(7):2567-2568.
[4] 涂兴明.广州地区中药炮制饮片使用情况的调查及实验研究[D].
广东:广州中医药大学,2010.
[5] 王诒纯,黄勤挽,马逾英.商品白附片、黑顺片的质量分析[J].华
西药学杂志,2011,26(5):1487-1488.
[6] 姚金成,刘颖,饶健,等.引起不良反应的常见中药辅料及监管对
策[J].中国药房,2012,15(23):1424-1425.
[7] 赵宇星.关于进一步做好药用辅料标准工作的设想与建议[J].
中国药品标准,2010,6(11):406-407.
[8] 袁星,杨添钧,黎量,等.中药炮制用辅料的现状及对策[J].中药与
临床,2015,6(1):90-91.


龙牙楤木多糖在大鼠体内的药代动力学研究
徐 倩 1 韩真贤 2 赵 宏 3
【摘要】目的 研究龙牙楤木多糖在大鼠体内的药代动力学。方法 大鼠单次口服龙牙楤木多糖后，采用高效液相色谱
与 1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生方法测定大鼠血浆中的龙牙楤木多糖。色谱柱为 Agilent Zorbax XDB-C18
柱（5 μm，150 mm×4.6 mm），流动相为 0.1mol/L 磷酸盐溶液（pH6.7）:乙腈=83:17。结果 血清样品中，龙牙楤木多
糖的线性范围为 5.0～100.0 μg/ml（r=0.998 8）；高、中、低 3 种不同浓度的日内 RSD 值分别为 4.12%、6.28%、6.93%；
日间 RSD 值分别为 4.07%，6.50%，6.85%；相对回收率分别为 88.0%、93.6%、95.07%。单剂量给药后，大鼠体内的药
代动力学过程符合开放 2 室模型，主要药代动力学参数分别为 Cmax：61.15 μg/ml，tmax：94.57 min，AUC：20421.60 min/
（μg·ml），t1/2ka：34.37，t1/2ke：149.17。结论 高效液相色谱与 PMP 柱前衍生法测定大鼠血浆中的龙牙楤木多糖的方法
专属性强，结果可靠。
【关键词】高效液相色谱；1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮；龙牙楤木多糖；大鼠；血浆
【中图分类号】R774.1 【文献标志码】A 【DOI】10.12010/j.issn.1673-5846.2016.02.006

Pharmacokinetics of Aralia elata Polysaccharide in Rats
Xu Qian Han Zhenxian Zhao Hong
【Abstract】Objective To study the Pharmacokinetics of Aralia elata polysaccharide in Rats.Methods Following
p.o.administration to rats,the use of high-performance liquid chromatography with 1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone
(PMP)were used to determine pre-column derivatization in rat’s plasma polysaccharide Aralia elata.Agilent Zorbax
XDB-C18 column(5 μm,150 mm×4.6 mm I.D.)was used with a mobile phase consisting of 0.1 mol/L Phosphate solution
(pH6.7):Acetonitrile=83:17.Results The linear range of Aralia elata polysaccharide in serum was 5.0～100.0μg/ml
(r=0.9988) and the High,the medium and the low concentrations of three different intraday RSD values were
4.12%,6.28%,6.93%;day RSD values were 4.07%,6.50%,6.85%;The relative recoveries were 88.0%,93.6%, 95.07%.
After single dosage for medicine,the rats in vivos medicine generation of dynamics process tallies opens the two room of
models,the main medicine generation of dynamics parameter respectively is Cmax:61.15μg/ml,tmax: 94.57min, AUC:
20421.60 min(μg·ml),t1/2ka:34.37,t1/2ke:149.17.Conclusion The methods of use high-performance liquid chromatography
with PMP were used to determine pre-column derivatization in rat’s plasma polysaccharide Aralia elata is specific and reliable.

1 大庆市第三医院，黑龙江大庆 163712
2 大庆油田总医院，黑龙江大庆 163001
3 佳木斯大学药学院，黑龙江大庆 154007
作者简介：徐倩（1982.11-），硕士学位，主管药师。研究方向：黄铜衍生物的提取及应用
药物研究

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2016年第2期 Drug Research
【Key words】High Performance Liquid Chromatography;PMP;Rats;Plasma;Aralia elata polysaccharide

龙牙楤木[Aralia elata(Miq.)Seem.]为五加科楤
木属植物，别名辽东楤木、刺老鸦，味辛、平，有
小毒，据《本草纲目》记载其具有除风疾、治水瘤、
补肾腰、壮筋骨等作用[1]，主治神经衰弱、风湿性关
节炎、糖尿病、胃痉挛、便秘、外伤出血、阳痿、
肝炎。目前，国内外对龙牙楤木的皂苷类化合物、
黄酮类化合物、挥发油类化合物及氨基酸等研究较
多[2-4]，而对于龙牙楤木多糖（aralia elata polysacch-
arides,AEPS）的报道相对较少。药理研究表明，AEPS
对小鼠艾氏腹水癌、小鼠肉瘤、小鼠网状组织细胞
白血病均有抑制作用，可明显延长患病小鼠的生存
期并抑制肿瘤细胞增生[5]，具有抗辐射损伤作用[6]。
但有关 AEPS 药代动力学方面的报道[7-11]几乎没有。
本研究采用高效液相色谱与 PMP 柱前衍生方法[11-15]
测定口服给药后 AEPS 在大鼠血浆中的浓度，就
AEPS 在大鼠体内的药代动力学特点进行探讨，现报
道如下。
1 仪器与试剂
1.1 仪器 美国 Agilent 1100 LC（美国安捷伦公
司）；TGL-16M 台式高速冷冻离心机（长沙平凡仪器
仪表有限公司）；DZG-6050 型真空干燥箱（上海森
信实验仪器有限公司）。
1.2 药品与试剂 AEPS 由佳木斯大学药学院提供
（含量＞99%），批号：20140716；色谱纯乙腈（山
东禹王实业有限化工分公司）；色谱纯甲醇（天津市
北方天医化学试剂厂）；1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮
（PMP，天津市科密欧化学试剂开发中心）；其他试
剂均为分析纯。
1.3 动物 Wista 大鼠，体重（180±10）g，由佳木
斯动物实验中心提供。
2 方法
2.1 色谱条件 色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18
（5 μm，150 mm×4.6 mm）；流动相：0.1 mol/L 磷
酸盐溶液（pH6.7）:乙腈=83:17；流速：1.0 ml/min；
λmax：245 nm；柱温：30 ℃；进样量：50 μl。
2.2 血清样品处理 取血清1 ml，加入5%高氯酸1 ml，
混匀后，10 000 r/min，离心 15 min（离心半径为 0.1 m），
取上清液于 55 ℃真空干燥箱内干燥，残渣用 1 ml
蒸馏水溶解，加入1 ml三氟乙酸（2mol/L）水解110 ℃，
2 h；水解后真空干燥，残渣溶于 1 ml 氨水中。取
100 μl 氨水溶液与 100 μl PMP 甲醇溶液（0.5 mol/L）
混合，70 ℃下反应 30 min，取出后冷却至室温，加入
0.5 ml 蒸馏水，真空干燥，残渣用 1 ml 蒸馏水与 1 ml
氯仿溶解，充分震荡后除去有机相，重复 3 次，水
相过 0.22 μm 微孔滤膜，取 50 μl 进样。
2.3 标准曲线制备 取大鼠血清 100 μl，精密加入不
同量的葡萄糖贮备液，使其浓度分别为 5.0、10.0、25.0、
50.0、75.0、100.0 μg/ml，按 2.2 项下方法处理过程分
析，以样品峰面积（A）对浓度（C）做线性回归。
2.4 回收率与精密度试验 取大鼠血清 0.5 ml，精密
加入不同量的 AEPS 贮备液，浓度分别为 10.0、50.0、
75.0 μg/ml。按 2.2 项下方法处理后，于同日内连续
测定 5 次，5 d 内重复测定，评价本方法回收率及日
内、日间 RSD。
2.5 稳定性试验 取大鼠血清 0.5 ml，精密加入不
同量的 AEPS 贮备液，浓度分别为 10.0、50.0、75.0
μg/ml，一份置 4 ℃冷藏保存，另一份置－20 ℃冷
冻保存，连续 5 d 取样，按 2.2 项下方法处理后，考
察样品在 4 ℃及－20 ℃的稳定性。
2.6 试验方案 Wista 大鼠 15 只，体重 180～240 g，
禁食 12 h，随机分为 5 组，按 200 mg/kg 口服 AEPS
溶液，于给药前及给药后 20、40、60、90、120、150、
180、210、240、300、360、720、1080、1440 min
取大鼠眼底静脉血，将血样以 10 000 r/min离心 5 min
（离心半径为 0.1 m），转移上层血清，按 2.2 项下方
法处理后进样。
3 结果与讨论
3.1 标准曲线 按 2.3 项下方法，结果表明血清中
AEPS在5.0～100.0 μg/ml浓度范围内线性关系良好，
标准曲线回归方程为 y=51.097x+521.25（r=0.9988），
见图 1

图 1 大鼠血清中的龙牙楤木多糖血药浓度标准曲线
3.2 回收率与精密度 按 2.4 项下方法，大鼠血清
中 AEPS 的高、中、低的相对回收率分别为 88.0%、
93.6%、95.07%。大鼠血清中，高、中、低 3 种不同
浓度的日内 RSD 值分别为 4.12%、6.28%、6.93%；
日间 RSD 值分别为 4.07%、6.50%、6.85%，见表 1。
3.3 稳定性 按 2.5 项下方法，大鼠血清中 AEPS
的稳定性见表 2。
3.4 血药浓度-时间曲线 大鼠单剂口服 AEPS 溶液
后，其平均血药浓度见图 2。
3.5 药代动力学参数 大鼠单剂口服龙牙楤木多糖
溶液后，血药浓度经 3P97 生物等效性软件处理，按
药物研究

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Drug Research 2016 年第 2期
二室开放模型计算药代动力学参数，见表 3。
表 1 大鼠体内 AEPS日内、日间 RSD
日内 日间 浓度
(μg/ml) Mean±S.D.
(μg/ml, ±s)
精密度
(CV%)
Mean±S.D.
(μg/ml, ±s)
精密度
(CV%)
10.0 8.8±0.6 6.9 8.9±0.6 6.9
50.0 46.8±2.9 6.3 47.0±3.0 6.5
75.0 71.3±2.7 3.8 72.1±2.9 4.1
表 2 大鼠血清中 AEPS在不同温度下的稳定性
温度(℃) 浓度(μg/ml) Mean±S.D.(μg/ml, ±s) RSD(CV%)
10 8.7±0.6 6.8
50 46.8±3.1 6.6
4
75 71.2±2.6 3.6
10 8.7±0.6 7.2 -20
50 46.7±3.0 6.4
75 70.1±2.8 4.0

图 2 大鼠灌胃龙牙楤木多糖后血药浓度-时间曲线(n=5)
表 3 大鼠灌胃给药 AEPS后的药代动力学参数
参数 结果
Cmax(μg·ml) 61.2±0.8
tmax(min) 94.6±3.4
AUC[min/(μg·ml)] 20 421.6±36.9
t1/2ka(min) 34.4±2.3
t1/2ke(min) 149.2±3.6
由表 3 可知，大鼠灌胃给药后的吸收相和消除
相半衰期表明，AEPS 在大鼠体内吸收较快，消除较
慢，有效血药浓度维持时间较长。本研究所获得的
体内药代动力学参数，可为临床药学深入研究提供
理论依据。
3.6 小结 本研究首次建立高效液相色谱与 PMP
柱前衍生方法测定 AEPS 在大鼠体内药代动力学，该
方法反应条件较温和[16-20]，样品用量少，RSD 和重
现性均较好，操作简单，能够满足龙牙楤木的药代
动力学研究。
参考文献
[1] 李时珍.本草纲目[M].2 册.北京:人民卫生出版社,1997:785-785.
[2] Yoshikama M,Matsuda H,Harada E,et al.Elatoside E,a new
hypoglycemic principle from the root cortex of Aralias elata Seem
Structure-related hypoglycemic activity of oleanolic acid glycosides[J].
Chem Pharm Bull(Tokyo),1994,42(6):1354-1356.
[3] Song SJ,Nakamura N,Ma CM,et al.Four new saponins from the
root bark of Aralia elata[J].Chem Pharm Bull(Tokyo),2000,48(6):
838-842.
[4] Yoshikama M,Murakami T,Harada E,et al.Bioactive saponins and
glycosides Ⅵ.Elatosides A and B,potent inhibitors of ethanol absorp-
tion,from the bark of Aralias elata Seem.(Araliaceae):The structure-
requirement in oleanolic acid glucuronide-saponins for the inhibitory
activity [J]. Chem Pharm Bull(Tokyo),1996,44(10):1915-1922.
[5] 季字彬,李文举,谷春山,等.复方海藻多糖合剂抗癌作用的试验
研究[J].中国海洋药物,1994,13(3):20-24.
[6] 王丽君,石莉.龙牙楤木多糖的抗辐射损伤作用[J].中药材,2006,
29(10):1085-1087.
[7] 刘昌孝.我国药代动力学研究发展的回顾[J].中国药学杂志,
2010,45(2):81-89.
[8] 李晓宇,郝海平,王广基,等.三七总皂苷多效应成分整合药代动
力学研究[J].中国天然药物,2008,6(5):377-381.
[9] 郝海平,郑超湳,王广基.多组分、多靶点中药整体药代动力学研
究的思考与探索[J].药学学报,2009,44(3):270-275.
[10] Han M,Sha X,Wu Y,et al.Oral absorption of ginsenoside Rb1
using in vitro and in vivo models[J].Planta Med,2006,72(5):398-404.
[11] 王雪峰,刘芳,王永梅,等.小柴胡汤中黄芩苷在大鼠体内的代
谢动力学研究[J].中药新药与临床药理,2001,12(2):84-129.
[12] Frank MP,Powers RW.SimpLe and rapid quantitative high-
performance liquid chromatographic analysis of plasma amino acids[J].
J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci,2007,852(1-2):
646-649.
[13] 孔彬,巴吐尔·买买提明,马晓丽,等.柱前衍生 RP-HPLC 荧光检
测法测定人血浆中 17种氨基酸[J].西北药学杂志,2013,28(2):141-
142.
[14] Meyer A,Raba C,Fischer K.Ion-pair RP-HPLC determination of
sugars,amino sugars,and uronic acids after derivatization with
paminobenzoic acid[J].Anal Chem,2001,73(11):2377-2382.
[15] 颜军,郭晓强,邬晓勇,等.非衍生化HPLC法分析银耳多糖中单
糖组成的初步研究[J].食品科学,2007,28(7):446-446.
[16] 刘刚,王辉,周建,等.柱前衍生化毛细管气相色谱法分析松茸
多糖的单糖组成[J].中国实验方剂学杂志,2012,18(3):87-87.
[17] Daniel J.Strydom.Chromatographic separation of 1-phenyl-3-
methyl-5-pyrazolone-derivatized neutral,acidic and basic aldo-Ses[J].
J Chromatogr A,1994,678(1):17-23.
[18] FU D,O NEILL RA.Monosaccharide composition analysis of
oligosaccharides and glycoprotein by high-performance liquid
chromatography[J].Anal Biochem,1995,227(2):377-384.
[19] 马定远,陈君,李萍,等.柱前衍生化高效液相色谱法分析多糖
中的单糖组成[J].分析化学,2002,30(6):702-705.
[20] 刘宇,娄燕,张耀文,等.柱前衍生HPLC分析酸枣仁汤中多糖的
单糖组成[J].中国实验方剂学杂志,2013,19(17):125-126.