全 文 ：2016 年 3 月第 23 卷第 3期 中国中医药信息杂志 ·77·
高效液相色谱法同时测定赶黄草中槲皮素和山柰酚含量
罗兴平 1，杨玲霞 2
1.西北民族大学化工学院，甘肃 兰州 730000；2.甘肃省食品药品检验研究院，甘肃 兰州 730070
摘要：目的 建立高效液相色谱法同时测定赶黄草中槲皮素和山柰酚含量的方法。方法 采用高效液相色
谱法，色谱柱为 Kromasil C18柱（4.0 mm×250 mm，5.0 µm），流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液（50∶50），流速
1.0 mL/min，检测波长 360 nm，检测温度为室温。结果 槲皮素、山柰酚分别在 0.105 6～2.112 0 μg和 0.023 6～
0.472 μg 范围内具有良好线性关系，平均回收率分别为 98.46%（RSD＝2.29%）和 98.17%（RSD＝1.99%）。
结论 该法准确、灵敏，可用于赶黄草中槲皮素和山柰酚的含量测定。
关键词：赶黄草；槲皮素；山柰酚；高效液相色谱法；含量测定
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2016.03.021
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2016)03-0077-03
Simultaneous Content Determination of Quercetin and Kaempferol in Penthorum Chinense
Pursh by HPLC LUO Xing-ping1, YANG Ling-xia2 (1. Institute of Chemical Engineering, Northwest University
for Nationalities, Lanzhou 730000, China; 2. Institute for Food and Drug Control of Gansu Province, Lanzhou
730070, China)
Abstract: Objective To establish an HPLC method for the simultaneous content determination of quercetin and
kaempferol in Penthorum Chinense Pursh. Methods The HPLC analysis was carried out on Kromasil C18 (250 mm×
4.0 mm, 5.0 μm) with a mixture of methanol-0.1% phosphate (50:50) as the mobile phase. The determination
wavelength was set at 360 nm with the flow rate of 1.0 mL/min. The column temperature was set at room temperature.
Results The quercetin and kaempferol showed good linearity in the range of 0.105 6–2.112 0 μg and 0.023 6–0.472 μg
respectively. The average recovery rates of quercetin and kaempferol were 98.46% (RSD=2.29%) and 98.17%
(RSD=1.99%) respectively. Conclusion The method is accurate and sensitive, which can be used for the content
determination of quercetin and kaempferol in Penthorum Chinense Pursh.
Key words: Penthorum Chinense Pursh; quercetin; kaempferol; HPLC; content determination

赶黄草为虎耳草科 Saxifragaceae 扯根菜属
Penthorum 植物扯根菜 Penthorum chinense Pursh.的干
燥地上部分，始载于明代《救荒本草》，苗族民间历
来作为药食两用植物，被誉为“神仙草”。其性温、
味甘、无毒，具有清热解毒、活血散瘀、利水消肿、
退黄、平肝的功效，主要分布于华北、华东、中南及
陕西、甘肃、四川和贵州等地[1-2]，近年来逐渐驯化
为家种，于四川省泸州市古蔺县境内大量种植。
目前关于赶黄草的化学、药理、临床研究已取得
一定进展[3-9]，以其为原料开发的肝苏片、肝苏颗粒、
肝苏胶囊已在临床得到广泛应用[10-11]，有关赶黄草及
其制剂的质量标准评价多为单一的槲皮素、没食子酸
或总黄酮测定 [12-15]。本研究采用高效液相色谱法

基金项目：中央高校基本科研业务费专项资金项目
(zyz2011058)；西北民族大学科研创新团队计划（2014 年）
（HPLC）同时测定赶黄草中槲皮素和山柰酚的含量，
为有效控制赶黄草及其制剂的质量，促进其进一步开
发应用提供技术支持。
1 仪器与试药
Agilent 1200 高效液相色谱仪，美国安捷伦公司；
梅特勒 XS205DU 电子天平，瑞士 Mettler toledo 公司；
B3200S-T 型超声波清洗器，上海必能信超声有限公
司；MILLI Q 超纯水系统，美国 Millipore 公司。
槲皮素对照品（中国食品药品检定研究院，批号
100081-200406）；山柰酚对照品（中国食品药品检定
研究院，批号 110861-2004050）。赶黄草分别采自四
川省古蔺县、四川省成都市新都区、甘肃省康县、甘
肃省天水市，由甘肃省食品药品检验所杨玲霞副主任
药师鉴定为虎耳草科扯根菜属植物扯根菜 Penthorum
chinense Pursh.的干燥全草。甲醇为色谱纯，其他试剂
均为分析纯。
·
2
2.1

置
即得
山柰
液
2.2

醇-
流
（4
用
2.3

5.0
测波
样量
2.4

按
果表
中其
计算

2.5

10
78·
方法与结果
对照品溶
分别精密称
50 mL 容量瓶
对照品储备
酚浓度为
5 mL，加甲
供试品溶
取赶黄草细
25%盐酸溶
1 h，放冷，
∶1）补足减
0.46 μm 微孔
色谱条件
色谱柱为
µm），流动
长为 360 n
10 μL。
系统适用
分别精密吸
“2.3”项下
明，在此色
他组分色谱
为 8491，
注：A.
图 1
线性关系
精密量取对
.0 mL，分别

5
5


液的制备
取槲皮素
中，加甲醇
溶液（槲皮
47.2 μg/mL
醇定容至 10
液的制备
粉约 0.25
液（4∶1）2
再称定质量
失的质量，
滤膜过滤，

Kromasil C
相为甲醇-0.
m，流速 1.0
性试验
取对照品溶
色谱条件进样
谱条件下，
峰基线分离
按山柰酚峰计
A
B
对照品；B.供试品
赶黄草中槲皮
考察
照品贮备液
置 10 mL 容
1
1
10 15
10 15
Chinese Jo

10.56 mg、山
溶解并定容
素浓度为 2
）。精密吸取
mL，即得对

g，精密称定
5 mL，称定
，用甲醇
摇匀，过滤
即得。
18 柱（4.0 m
1%磷酸溶液
mL/min，温
液和供试品
测定，色谱
槲皮素和山
，理论塔板
算为 5862




；1.槲皮素；2.
素和山柰酚 HPLC
0.5、1.0、
量瓶中，加
2
2
20 25
20 25
urnal of
柰酚 2.36 m
至刻度，摇匀
11.2 μg/mL
对照品储备
照品溶液。
，精密加入
质量，加热
-25%盐酸溶
，取续滤液
m×250 mm
（50∶50），
度为室温，
溶液各 10 μ
图见图 1。
柰酚均与样
数按槲皮素
。
山柰酚
图
2.0、5.0、8
甲醇稀释并
30
30 t/min
Informati
g，
，
，
溶

甲
回
液
，
，
检
进
L，
结
品
峰
.0、
定
容至刻
样 10
量为横
A＝4
围为
113 1
0.472
酚线性
2.6
精
复进样
RSD＝
度良好
2.7
精
5 份，
项下色
RSD＝
法重复
2.8
取
在 0、
素和山
2.12%
溶液在
2.9
取
槲皮素
精密称
项下方
测定，
均回收
（RS
准确性
取样量
/g
0.256
0.257
0.252
0.248
0.250
0.251

on on TCM
度，摇匀，
μL。以槲皮
坐标，进行
200 023C＋
0.105 6～2.1
59，r＝0.99
μg。结果表
关系良好。
精密度试验
密吸取对照
5 次，每次
1.02%，山柰
。
重复性试验
密称取同一
按“2.2”项
谱条件依次
1.82%，山柰
性良好。
稳定性试验
同一供试品
2、4、8、1
柰酚的峰面
，山柰酚峰
24 h 内稳定
加样回收率
已知含量的
和山柰酚含
定，分别精
法制备供试
计算回收率
率分别为
D＝1.99%），
。
表
样品中
含量/mg
加
2 1.316 9 0
4 1.323 0 0
3 1.296 8 1
6 1.277 8 1
7 1.288 6 1
9 1.294 8 1
Ma
用 0.46 μm
素、山柰酚
回归计算，
34 097，r＝
12 0 μg；山
9 9，山柰酚
明，在给定


品溶液，按
10 µL，分
酚峰面积

批赶黄草药
下方法制备
进样测定
酚平均含量

溶液（四川
2、16、24 h
积，结果槲
面积的 RSD
。
试验
赶黄草样品
量分别为 5
密加入对照
品溶液，并
，结果表明
98.46%（RS
见表 1、表
1 槲皮素加样回
入量
/mg
测得量
/mg
.422 4 1.735 1
.422 4 1.738 2
.056 0 2.339 8
.056 0 2.342 1
.689 6 2.972 7
.689 6 2.886 5

r.2016 Vo
微孔滤膜过
峰面积为纵
得回归方程
1.000 0，槲
柰酚：A＝4
的线性范围
的范围内槲
“2.3”项下
别计算得槲
RSD＝1.43%
材（四川省古
供试品溶液
，结果槲皮
RSD＝2.3
省古蔺县 1
进样 10 µL
皮素峰面积
＝1.69%，
（四川省古
.14、0.92 m
品溶液适量
按“2.3”项
，槲皮素和
D＝2.29%）
2。本方法
收率试验
回收率
/%
平
收
99.01
98.29
98.77
98
100.79
99.67
94.21
l.23 No.3
滤，依次进
坐标，进样
。槲皮素：
皮素线性范
044 914C＋
为 0.023 6～
皮素和山柰
色谱条件重
皮素峰面积
，表明精密
蔺县 1号）
，按“2.3”
素平均含量
1%，表明本
号），分别
，测定槲皮
的 RSD＝
表明供试品
蔺县 1 号，
g/g）6 份，
，按“2.2”
下色谱条件
山柰酚的平
和 98.17%
具有良好的
均回
率/%
RSD
/%


.46 2.29


2016 年 3 月第 23 卷第 3期 中国中医药信息杂志 ·79·
表 2 山柰酚加样回收率试验
取样量
/g
样品中
含量/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回
收率/%
RSD
/%
0.256 2 0.235 7 0.094 4 0.327 2 96.92
0.257 4 0.236 8 0.094 4 0.329 8 98.51
0.252 3 0.232 1 0.236 0 0.458 9 96.09
98.17 1.99
0.248 6 0.228 7 0.236 0 0.468 2 101.48
0.250 7 0.230 6 0.377 6 0.596 8 96.97
0.251 9 0.231 7 0.377 6 0.605 8 99.06
2.10 样品测定结果
采用本试验所建立的方法对 5批赶黄草样品中槲
皮素和山柰酚含量进行测定，计算含量，结果见表 3。
表 3 样品测定结果（mg/g，n＝3）
编号 样品来源 槲皮素含量 山柰酚含量 总量
1 四川省古蔺县 1 号 5.14 0.92 6.06
2 四川省古蔺县 2 号 5.32 1.01 6.33
3 四川省成都新都区 5.12 0.70 5.82
4 甘肃省天水市 5.27 0.98 6.25
5 甘肃省康县 4.89 0.78 5.67
3 讨论
赶黄草作为药食两用的药材资源，自明代《救荒
本草》至《全国中草药汇编》均有收载，以其为原料
研究开发的保健食品也因其解酒醒酒、保肝护肝作用
日益受到重视。赶黄草野生资源遍及全国 24 个省市，
但目前仅有四川省泸州市古蔺县境内有大量种植，这
一宝贵的自然资源尚未被《中华人民共和国药典》收
载。因此，应用现代科技手段，进一步阐明赶黄草的
药效物质基础，提高赶黄草的质量标准，促进该药材
的进一步推广应用具有重要的意义。
赶黄草主要含有槲皮素、山柰酚及其苷等黄酮类
化合物。本试验中曾以甲醇超声提取后直接进样测
定，结果槲皮素及山柰酚含量低，杂质峰多，分离度
差。采用本文方法，以甲醇-25%盐酸溶液（4∶1）为
溶剂加热回流水解提取，槲皮素和山柰酚含量明显提
高，杂质峰显著减少，各成分分离度良好。
水解条件的选择系参考 2010 年版《中华人民共
和国药典》（一部）垂盆草项下的含量测定方法，以
甲醇-25%盐酸溶液（4∶1）为溶剂加热回流水解 1 h。
曾对提取时间进行考察，采用四川省古蔺县 1 号样品
分别水解提取 30、60、90、120 min，测定槲皮素含
量分别为 5.09、5.14、5.13、5.15 mg/g，山柰酚含量
分别为 0.87、0.92、0.93、0.90 mg/g，结果表明水解
提取 1 h 即可提取完全。
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（收稿日期：2015-04-09）
（修回日期：2015-05-06；编辑：陈静）