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黄瓜子和生菜子提取物促进骨折愈合的试验研究



全 文 :黄瓜子和生菜子提取物促进骨折愈合的试验研究
禇洪光 ,邓孝廷 ,田淑琴 ,谢秋菊
(西南民族大学生命科学与技术学院 , 成都 610041)
摘要:本试验主要研究黄瓜子和生菜子合用促进骨折愈合的作用及其初步机理。将蛋鸡 60 只 , 体重1.75~ 2.25 kg , 造成
右侧小腿中段横行闭合骨折模型 ,随机分为数目相等的高剂量组 、中剂量组 、低剂量组 , 阳性对照组和阴性对照组。试验组以
不同比例的黄瓜子和生菜子提取物灌胃给药 , 阳性对照组以麝香接骨胶囊灌胃给药 , 阴性对照组以生理盐水灌胃 , 随后对各
组进行动态观察 、组织学观察 、血清学观察和放射学观察。结果显示 , 黄瓜子和生菜子提取物中剂量组可促进全身代谢反应 ,
提高血清碱性磷酸酶含量 ,加快血肿吸收机化 ,提高血钙 、磷离子浓度 ,提高骨痂生成量和强度。结果表明黄瓜子和生菜子提
取物可以通过提高钙 、磷离子浓度 , 促进钙 、磷向骨折断端转移而对骨折的愈合起到促进作用。
关键词:黄瓜子;生菜子;骨折愈合;鸡
中图分类号:S853.75     文献标识码:A     文章编号:1671-7236(2010)02-0125-04
  骨折愈合是一个复杂的生理病理过程 ,它需要
全身和局部多种因素的参与来完成 。中医药治疗骨
折已有悠久的历史 ,积累了丰富的经验 ,随着许多经
方与验方应用于临床 ,已取得了一定的疗效。虽然
目前已对中药促进骨折愈合进行了大量的研究 ,尤
其是在补肾中药和活血化瘀中药方面的研究 ,然而
对黄瓜子和生菜子合用对促进骨折愈合的研究较
少。本试验拟对以黄瓜子 、生菜子提取物合用的接
骨作用予以初步探讨 。
1 材料与方法
1.1 材料 试验动物为健康蛋鸡 60只 ,体重 1.75
~ 2.25 kg ,平均(2.0±0.25)kg ,均为雌性 ,购于双
流县养鸡场。动物适应性饲养 1周后开始试验。试
验药品:①试验组药品:由黄瓜子 、生菜子提取物组
成 ,于西南民族大学生命科学与技术学院药理实验
室制备。 ②麝香接骨胶囊:由赤芍 、麻黄(蜜制)、牛
膝 、当归 、没药(炒)、黄瓜子 、血竭 、朱砂 、土鳖虫 、续
断 、红花 、儿茶等药物组成(吉林某药业集团有限公
司 ,批号:20080601 ,国药准字 z22025768)。
1.2 方法
1.2.1 鸡急性骨折模型的建立及分组 试验鸡随
机分为 5组 ,对其造成人工骨折模型。按照文献方
法 ,术前以速眠新Ⅱ号 0.2 mL/kg 体重行肌肉注射
麻醉 ,麻醉生效后将鸡置于手术台上 ,对其造成右侧
修回日期:2009-10-26
作者简介:褚洪光(1983-),男 ,黑龙江人 ,硕士生 ,研究方向:新
药药理与临床药理。
通信作者:邓孝廷(1950-),男 ,四川人 ,副研究员 ,研究方向:基
础兽医学。
小腿中段闭合性骨折。造模后 3 d 注射青霉素(20
U/只)以预防感染 。
1.2.2 给药途径及方法 于术后第 2天开始给药。
阴性对照组灌等容量的生理盐水;试验组按低剂量
组(5 g/(kg ·d))、中剂量组(10 g/(kg ·d))、高剂
量组(20 g/(kg ·d))灌胃给药 。阳性对照组以麝香
接骨胶囊 0.6 g/(kg ·d)(相当于成人每天总量 4.5
g 的 3倍)灌胃给药 。
1.2.3 样品的采集 每组试验动物分别于造模后
第 1 、7 、14 、21 、28 天 5个时间点 ,采取鸡血液样品 ,
采取方法为心脏采血 2 mL ,采集后立即离心 ,取血
清 0.5 mL 置于 2 mL 中 ,保存在 4 ~ 8 ℃冰箱中 ,用
于 AKP 、Ca 、P 的检测 。用自动生化分析仪分别测
出骨折后第 1 、7 、14 、21 、28天各时段的 AKP 、Ca 、P
含量。
2 结果
2.1 对骨折愈合过程中 AKP 的影响 骨折后第 1
天各组的 AKP 含量无显著差异(P >0.05)。至骨
折后第 7天 ,高剂量组 AKP 含量高于低剂量组(P
<0.01)、阴性对照组(P<0.05);中剂量组的 AKP
含量高于低剂量组(P<0.05);阳性对照组的 AKP
含量高于低剂量组 、阴性对照组(P <0.01);而其余
各组之间无显著差异(P >0.05)。至骨折后第 14
天时 ,高剂量组 、中剂量组 、阳性对照组的 AKP 含
量分别高于低剂量组 、阴性对照组(P<0.01);其余
各组之间无显著差异。至骨折后第 21天时 ,高剂量
组的 AKP 含量分别高于低剂量组(P <0.05)、阴性
对照组(P <0.01);中剂量组 、阳性对照组的 AKP
含量高于低剂量组 、阴性对照组(P <0.01);其余各
·125·中国畜牧兽医  2010 年第 37 卷第 2 期 疾病防治
组之间无显著差异(P>0.05)。至骨折第 28天 ,中
剂量组 、阳性对照组的 AKP 含量极显著高于阴性
对照组(P <0.01);其余各组之间无显著差异
(表 1)。
表 1 血清碱性磷酸酶活性测定结果(金氏单位/100 mL)
项目 第 1天(n=12) 第 7天(n=12) 第 14天(n=9) 第 21天(n=6) 第 28天(n=3)
高剂量组 
中剂量组 
低剂量组 
阳性对照组
阴性对照组
46.02±1.5aA
45.15±1.35aA
46.12±1.05aA
46.24±0.82aA
45.82±1.40aA
63.60±2.40cB
62.39±3.70bA
56.14±1.25aA
63.25±1.41cC
55.12±2.36aA
67.18±1.85cC
68.20±3.20cC
62.34±2.56aA
69.10±3.40cC
56.20±1.80aA
72.65±2.30bC
73.46±2.90cC
67.15±1.90aA
73.26±2.91cC
64.38±2.45aA
65.35±3.40aA
66.24±2.30aC
63.46±0.85aA
66.56±1.75aC
62.24±2.06aA
  注:与低剂量组相比 ,相邻小写字母表示差异显著(P<0.05),相间小写字母表示差异极显著(P<0.01);与阴性对照组比 ,相邻大写字母
表示差异显著(P<0.05),相间大写字母表示差异极显著(P<0.01)。下同。
2.2 对骨折愈合过程中血钙的影响 骨折后第 1
天 ,阳性对照组 、高剂量组血钙含量高于低剂量组
(P <0.01);中剂量组的血钙含量高于阴性对照组
(P<0.01);其余各组的血钙含量无显著差异(P >
0.05)。至骨折后第 7天时 ,中剂量组的血钙含量高
于阴性对照组(P <0.01);阳性对照组的血钙含量
高于低剂量组(P<0.05)、阴性对照组(P <0.01);
其余各组之间的比较无显著差异 。至骨折后第 14
天时 ,高剂量组 、中剂量组 、阳性对照组的血钙含量
高于低剂量组(P<0.05)、阴性对照组(P<0.01);
其余各组之间无显著差异。至骨折后第 21天 ,高剂
量组 、中剂量组 、阳性对照组血钙含量高于低剂量组
(P<0.05);其余各组之间无显著差异(P>0.05)。
至骨折后第 28天 ,高剂量组 、阳性对照组的血钙含
量高于低剂量组 、阴性对照组(P <0.05);中剂量组
血钙含量高于阴性对照组(P <0.05);其余各组之
间无显著差异(表 2)。
表 2 各组动物血钙含量测定结果(mmol/ L)
项目 第 1天(n=12) 第 7天(n=12) 第 14天(n=9) 第 21天(n=6) 第 28天(n=3)
高剂量组 
中剂量组 
低剂量组 
阳性对照组
阴性对照组
3.42±0.37cA
3.24±0.30aC
3.32±0.35aA
3.41±0.33cA
3.45±0.31aA
3.35±0.20aA
3.50±0.12aC
3.37±0.19aA
3.57±0.15bC
3.41±0.12aA
3.61±0.11bC
3.65±0.14bC
3.42±0.17aA
3.60±0.09bC
3.47±0.13aA
3.69±0.08bA
3.64±0.15bA
3.55±0.18aA
3.68±0.11bA
3.53±0.20aA
3.62±0.25bB
3.59±0.19aB
3.60±0.23aA
3.61±0.20bB
3.52±0.24aA
2.3 对骨折愈合过程中血磷的影响 骨折后第 1
天各组的血磷含量无显著差异(P>0.05)。至骨折
后第 7天时 ,高剂量组 、阳性对照组的血磷含量分别
高于低剂量组 、阴性对照组(P <0.05);中剂量组的
血磷含量高于低剂量组 、阴性对照组(P <0.01);其
余各组之间的比较无显著差异。至骨折后第 14 天
时 ,高剂量组的血磷含量高于低剂量组和阴性对照
组(P <0.05);阳性对照组的血磷含量高于阴性对
照组(P <0.05),中剂量组的血磷含量高于低剂量
组 、阴性对照组(P<0.01);其余各组之间无显著差
异 。至骨折后第 21 天时 ,高剂量组 、中剂量组的
血磷含量显著高于低剂量组 、阳性对照组(P <
0.01);阳性对照组的血磷含量显著高于低剂量
组 、阴性对照组(P <0.05);其余各组之间无显著
差异 。至骨折后第 28 天 , 各组之间无显著差异
(表 3)。
表 3 各组动物血磷含量测定结果(mmol/ L)
项目 第 1天(n=12) 第 7天(n=12) 第 14天(n=9) 第 21天(n=6) 第 28天(n=3)
高剂量组 
中剂量组 
低剂量组 
阳性对照组
阴性对照组
1.54±0.22aA
1.48±0.30aA
1.42±0.17aA
1.55±0.23aA
1.46±0.33aA
1.68±0.25bB
1.75±0.17cC
1.52±0.23aA
1.51±0.15bB
1.57±0.19aA
1.56±0.22 aB
1.63±0.21 cC
1.50±0.31aA
1.62±0.19bB
1.43±0.27aA
1.64±0.17cC
1.69±0.18cC
1.58±0.26aA
1.59±0.24bB
1.47±0.19aA
1.42±0.21aA
1.35±0.15aA
1.38±0.23aA
1.50±0.14aA
1.21±0.16aA
2.4 对血钙磷乘积的影响 骨折后第 1天 ,各组的 血钙磷乘积无显著差异显著(P >0.05)。至骨折后
·126· 疾病防治 中国畜牧兽医  2010 年第 37 卷第 2 期
第 7天 ,高剂量组的血钙磷乘积高于低剂量组(P <
0.05);中剂量组的血钙磷乘积高于低剂量组(P <
0.05)、阴性对照组(P <0.01);阳性对照组高于低
剂量组(P<0.05)、阴性对照组(P<0.01);其余各
组之间无显著差异。至骨折后第 14 天时 ,高剂量
组 、阴性对照组的血钙磷乘积高于低剂量组 、阴性对
照组(P<0.05);中剂量组的血钙磷乘积高于低剂
量组 、阴性对照组(P<0.01);其余各组之间无显著
差异。至骨折后第 21 天 ,高剂量组 、中剂量组的
血钙磷乘积高于低剂量组(P<0.05);阳性对照组
的血钙磷乘积高于低剂量组 、阴性对照组(P <
0.05);其余各组之间无显著差异 。至骨折后第 28
天 ,高剂量组的血钙磷乘积高于低剂量组(P <
0.05);中剂量组 、阳性对照组的血钙磷乘积显著
高于阴性对照组(P<0.05);其余各组之间无显著
差异(表 4)。
表 4 各组动物血钙磷乘积测定结果(mmo l/ L)
项目 第 1天(n=12) 第 7天(n=12) 第 14天(n=9) 第 21天(n=6) 第 28天(n=3)
高剂量组 
中剂量组 
低剂量组 
阳性对照组
阴性对照组
5.15±0.16aA
4.86±0.79aA
4.63±0.87aA
5.41±0.69aA
4.87±0.82aA
4.76±0.85bA
4.87±0.43bC
4.45±0.77aA
5.11±0.38bC
4.34±0.37aA
5.53±0.78bB
5.69±0.61 cC
4.93±0.67aA
5.68±0.31 cC
4.73±0.54aA
5.67±0.34bA
5.71±0.45bA
5.17±0.54aA
5.87±0.31bB
5.01±0.68aA
4.76±0.85bA
4.87±0.43aB
4.45±0.77aA
5.11±0.38aB
4.34±0.35aA
2.5 骨折愈合过程的 X 光观察 用药第 14 天即
骨折愈合初期 ,中药中剂量组血肿已大部分消失 ,并
代之以肉芽组织 ,骨折间隙较明显 ,低剂量组血肿较
高 、低剂量组重 ,而较阴性对照组轻;阳性组血肿最
小 ,骨折缝隙较明显(图 1 、2)。
用药第 21 天即骨折愈合中期 ,中药高 、中剂量
组及阳性组与阴性组相比有明显区别。中药各剂量
组肉芽组织中出现骨样组织和骨小梁 ,骨折断端边
缘趋于模糊 ,但骨密度淡浅。阴性组血中完全消失 ,
代之为肉芽组织 ,有轻微骨膜反应(图 3 、4)。
用药第 36天即骨折愈合末期 ,中药中剂量组折
断端几乎消失 ,骨膜反应密度较深 ,骨痂量增多 、增
深 ,其密度与骨密度相似;阴性组骨折断端模糊 ,骨
膜反应密度淡浅 ,骨痂量少没有覆盖骨折缝隙 ,少数
可见骨痂覆盖骨折缝隙 , 但较浅且边缘模糊(图
5 、6)。
3 讨论
选药依据:黄瓜子别名哈力苏 ,为葫芦科黄瓜的
种子 ,据《中华本草》中介绍其具有续筋接骨 、祛风 、
消痰等功效 ,且在民间骨伤科中是具有悠久历史的
续筋接骨良药 。黄瓜子含脂肪油 ,其中油酸(o leic
acid)58.49%,亚油酸(linoleic acid)22.29%,棕榈
酸(palmitic acid)6 .7 9 %, 硬脂酸(stearic acid)
·127·中国畜牧兽医  2010 年第 37 卷第 2 期 疾病防治
3.72%;生菜子为菊科莴苣属生菜的种子 ,据《中华
本草》中介绍 ,生菜子具有通乳汁 、利小便 、活血行瘀
等功效。主乳汁不通 、小便不利 、跌打损伤 、瘀肿疼
痛 、阴囊肿痛等 。
碱性磷酸酶(alkalinepho sphatase , ALP或AKP)
由成骨细胞产生 ,富含于胞浆中 ,其分泌出的 AKP
进入血液中 ,因而使血液中的 AKP 含量明显增加 ,
表示骨重建活跃性增强和成骨细胞活性增加。它既
可作为成骨细胞的功能标记物 ,又可反映其分化成
熟程度 ,即可以作为一项骨折愈合的指标(Lian等 ,
1987)。成骨细胞有调节钙 、磷和其它离子钙化的作
用 。成骨细胞分泌的胶原能催化这些离子的成核
现象-晶核的形成 ,即在钙化初期沉积于胶原分子
特定排列“孔”的特殊部位 ,有利于骨钙化的顺利
进行 ,因而在骨形成钙化中成骨细胞的数量和域
功能增加的同时 ,也表现为 AKP 的升高(朱宪彝 ,
1989)。
血清磷 、钙受诸多因素影响。钙离子在小肠上
段吸收 ,经肾小球滤过作用 ,不停歇地进出骨的液体
间隙。骨内矿物质的不断吸收和沉积 ,起到了稳定
钙内环境的作用 ,一些内在因素 , 如激素 、肾脏和
VD的代谢 ,对维持血钙浓度也起到了重要作用。
磷以可溶性无机盐的形式由小肠吸收 ,其吸收过程
受 VD的控制 。当血磷 、钙乘积增高时 ,钙 、磷便会
向骨内沉积(胥少汀等 ,2004)。
本试验证实了黄瓜子和生菜子合用可以提高骨
折后血清磷钙的浓度 ,促进血清磷 、钙向骨折断端的
转移 ,促进骨痂的钙化 。其中以中剂量组的作用稳
定 ,且总体疗效与阳性对照组相似 ,至于其详细机制
尚有待于进一步研究。
The Study of Cucumber and Lettuce Seed Powder
Extract Promoting Fracture Healing
CHU Hong-guang , DENG Xiao-Ting , TIAN Shu-qin , ZHAO Qiu-ju , XIE Qiu-ju
(Colleg e of L ife Science and Technology , Southw est Univer sity fo r Nationalitie s , Chengdu 610041 , China)
  Abstract:To research the cucumbe r and le ttuce s combination to pr omo te the r ole of fracture healing and the initial mecha-
nism , 60 w hite broile r , w eighing 1.75-2.25 kg , were random ly divided into an equal number o f high-do se g roup , middle dose
gr oup , low-dose gr oup , po sitive contro l g roup and negative contro l g roup , then , to fracture the bro ile r s middle o f right leg to
cause transver se clo sed fracture model.Different propo rtions o f cucumber and lettuce seed pow de r ex tract we re gavage feeding
to experimental g roup.Musk bone capsule was gavage feeding to po sitiv e control gr oup.Negative contr ol g roup we re fed with
saline.Subsequently each g roup we re adopt dynamic observa tion , histolog ical observ ation , sero lo gical and radio lo gical obse rva-
tion.Expe rimental g roup that w ere fed middle do se of cucumber and lettuce seed pow der ex tr ac t could promo te sy stemic meta-
bolic re sponse , increase se rum alkaline phosphateslevels , speed up the abso rption o f hematoma , increased serum calcium and
pho sphorus concentr ation and improve the quantity and intensity of callus g ene ration.The results show ed tha t cucumber and
lettuce can increase calcium and pho spho rus concentr ation , promote calcium and pho spho rus tr ansfer to the f racture line to pro-
mo te fracture healing.
Key words:Cucumber;Le ttuce;f racture;bro iler
·128· 疾病防治 中国畜牧兽医  2010 年第 37 卷第 2 期