全 文 ：收稿日期: 2007 - 07 - 18
作者简介:陈思妮 ( 1983 - ), 女,辽宁沈阳人, 2005级硕士研究生,
主要从事中药质量分析的研究。
通讯作者:张振秋 ( 1964 - ) ,男, 辽宁本溪人,教授, 博士研究生导
师,博士,主要从事中药质量分析研究。
从表 1可以看出, 1个疗程结束后两组进行比较, 治疗
组显效率和总有效率对比西药对照组的差异均有显著性。
中药补阳还五汤加减治疗颈椎病疗效显著。
4 讨 论
颈椎病是一种常见病、多发病, 属于中国传统医学 /项
强0、/眩晕0、/痹证0等范畴。其中颈部慢性劳损及颈椎退
行性变是主要因素。椎间盘、椎体及椎间小关节的退行性
变使椎间盘变扁,椎间隙狭窄,横突间距缩短, 从而产生骨
或间盘破裂脱出等压迫神经根、脊髓或椎动脉碉引起的各
种症状。近年来研究发现 ,全血黏度增高是造成颈椎退行
性眩晕的重要原因,全血黏度的改善可促使眩晕症状改善,
好转或消失。笔者通过临床观察, 认为气滞血瘀、经络不畅
为本病的主要成因。
补阳还五汤方中重用生黄芪使气旺以促血行, 祛瘀而
不伤正。红花、桃仁、当归、川芎、赤芍起活血祛瘀的功效。
地龙起通经活络的功效。诸药合用, 使气旺血行, 瘀去通
络。根据临床表现加减使用,对神经根型、椎动脉型、交感
神经型颈椎病均有明显治疗效果。
按摩具有活血化瘀、舒筋活络、解除局部肌肉痉挛、松
解粘连等作用。颈椎牵引可以调整椎体及小关节的位置,
增大椎间隙及横突孔间距,伸张被扭曲的椎动脉, 改善椎间
盘、钩椎关节与神经根或椎动脉之间的位置关系, 对颈椎病
的治疗效果是肯定的。需要特别注意的是, 使用按摩手法
切忌粗暴,松解局部肌肉软组织手法要轻柔、舒缓, 术者一
定要熟悉颈椎不同部位的解剖特点。
参考文献
[ 1 ] 陈健,金忠棋,周君富,等. 颈椎退变性眩晕思者的血液流变
学变化及加味补阳还五汤对其治疗作用的研究 [ J ]. 中国中
医骨伤科, 1995, 3( 1 ): 4
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中
药
研
究
扫
描
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紫外分光光度法测定广金钱草中总黄酮的含量
陈思妮,张振秋
(辽宁中医药大学药学院, 辽宁 大连 116600)
摘 要:目的:建立广金钱草中总黄酮的含量测定方法。方法: 采用紫外分光光度法, 以芹菜素为对照品, 测
定波长 272nm。结果: 芹菜素在 2. 144~ 10. 72Lg /mL浓度范围内与吸光度呈良好的线性关系, r = 0. 9997 ( n =
5)回收率为 97. 3% , RSD为 1. 8% ( n = 5)。结论:此方法操作简单, 精密度、稳定性和重复性良好, 有助于广金钱
草药材的质量控制。
关键词:广金钱草;芹菜素; 总黄酮;紫外分光光度法
中图分类号: R284. 1 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2007) 12 -2636 - 02
Quant ita tive Determ inat ion of Tota l F lavonoids in Desmodium S ty racifo lium by UV Spec trophotometry
CHEN S i-n,i ZHANG Zhen-qiu
( Pharm aco logy S choo,l L iaoning Un iversity of Trad itional Ch inese M edicine, Dalian 116600, L iaoning, Ch ina)
Abstrac t: Ob jec tive: To establish the de te rm ina tion me thod for tota l flavono id com pounds in Desmod ium sty racifo li-
um. M ethod : Ap igenin w as used as reference asm ple by UV spectropho tom e try and the m easurem en t w as conducted at
227nm. R esu lts : The abso rbency and concen tra tion o f apig enin had good linear in the range o f 2. 144~ 10. 72Lg /mL, r
= 0. 9997( n = 5). The recovery ra tew as 97. 3% , RSD% was 1. 8% ( n = 5). Conc lus ion : Them e thod is reliab le and
can be he lpfu l to effective ly the qua lity control o f Desm odium sty rac ifo lium.
Keywords: Desm od ium styracifo lium ( O sbeck) M err; apigen in; to ta l flavonoids; UV spectrophotom a try
广 金 钱 草 为 豆 科 植 物 广 金 钱 草 Desmod ium
styracifo lium ( O sb. ) M err. 的干燥地上部分。始载于5岭南
草药志6, 为常用中药, 主产于我国广东、广西、四川、云南、
江西、福建、海南等地。具有清热除湿、利尿通淋之功效。
用于治疗各种淋证、水肿等疾病历史悠久。含黄酮类,生物
碱类,皂苷类, 酚类等成分。药理研究证明 :广金钱草有预
防草酸钙结石形成和复发的作用。广金钱草中的三萜皂苷
类和黄酮苷类化合物有预防乙二醇和维生素 D3造成的大
鼠草酸钙尿路结石形成的效果。广金钱草在体内能保护肾
组织细胞,对草酸钙晶体形成有明显抑制作用。广金钱草
总黄酮对心脑血管病理模型具有很好的改善作用。另外广
金钱草还有抗炎镇痛作用,改善记忆和脑保护作用, 利胆作
用等。5中华人民共和国药典6只收载了广金钱草中黄酮,
生物碱的检查方法,为其制定质量可控的标准带来了困难。
目前广金钱草中含有的黄酮类化合物已知的有 5种: 异牡
荆苷、v icenin -1、v icenin - 2、夏佛塔苷和异荭草苷, 均属于
黄酮类衍生物。本实验首次采用异牡荆苷、v icenin - 1、v i-
cenin -2和夏佛塔苷共有的母核芹菜素为对照品, 采用紫
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DOI：10.13193/j.archtcm.2007.12.205.chensn.086
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外分光光度法,测定了广金钱草中总黄酮的含量,为广金钱
草原药材的质量控制提供了依据。
1 仪器与试药
UV -3050型紫外可见分光光度计 (日立仪器有限公
司 ), AR2140电子分析天平, AS3120A超声波清洗器。芹菜
素对照品 (北京显通时代科技有限公司 ), 含量 98% 以上。
所用试剂均为分析纯。广金钱草药材购于广东、广西等地
不同的药房,经辽宁中医药大学李峰教授鉴定为豆科山蚂
蝗属植物广金钱草 Desmod ium styracifo lium ( O sb. )M e rr.的
干燥地上部分。
2 方法与结果
2. 1 对照品溶液的制备 精密称取芹菜素对照品
5. 36m g,置于 25mL的量瓶中,加 60%甲醇使之溶解后稀释
至 25mL, 摇匀,备用。
2. 2 供试品溶液的制备 取本品粉末 (过二号筛 ) 1g, 精
密称定,置 50mL具塞锥形瓶中, 精密加 60%甲醇 20mL,密
塞,称定重量, 超声处理 30m in, 取出,放冷,再称定重量,用
60%甲醇补足减失的重量, 摇匀, 滤过, 精密吸取续滤液
0. 1mL置 10mL量瓶中用 60%的甲醇稀释至刻度, 摇匀,作
为供试品溶液。
2. 3 测定波长的选择 对照品溶液和供试品溶液在 200
~ 400nm进行扫描, 发现均在 272nm和 339nm附近有最大
吸收峰,但波长 272nm处的灵敏度比波长 339nm波长出的
灵敏度大,故选择测定波长 272nm。
2. 4 线性关系考察 精密吸取上述对照品溶液 1、2、3、4、
5mL,分别置于 10m L量瓶中, 加 60% 的甲醇稀释至刻度,
摇匀,以 60%甲醇为空白对照,于 272nm 测定吸光度,以芹
菜素溶液浓度为横坐标,吸光度为纵坐标, 绘制标准曲线,
计算得回归方程 Y = 68. 986X - 0. 0193, r = 0. 9997 ( n =
5)。结果表明芹菜素在 2. 144 ~ 10. 72Lg /mL范围内与吸
光度呈良好的线性关系。
2. 5 精密度试验 分别精密吸取同一供试品溶液, 测定
吸收度, RSD%为 0. 3% , 表明仪器精密度良好。
2. 6 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液, 于室温放
置 0、30、60、90、120m in测定吸光度, 其吸光度的 RSD%为
1. 5% , 说明样品在 2h内稳定。
2. 7 重复性试验 取本品同一批样品 5份,按 / 2. 30项平
行制备供试品溶液, 测定吸收度, 并计算含量, 其含量的
RSD%为 1. 5% ,结果表明本方法重复性好。
2. 8 加样回收率试验 精密称取已知含量的广金钱草药
材 (总黄酮含量为 12. 79m g /g ) 5份, 各 0. 5g, 精密称定。置
25m L量瓶中, 分别精密加入浓度为 2. 5831m g /mL芹菜素
对照品溶液 3. 0mL于量瓶中按 / 2. 30下测定, 计算回收率,
结果见表 1。平均回收率 97. 3% , RSD= 1. 8% ( n = 5)。
表 1 加样回收率考察结果
编号 称样量
( g)
已知样品量
( mg)
加入对照品量
( mg)
测得量
( mg)
回收率
(% )
平均回收率
(% )
RSD
(% )
1 0. 4982 6. 3726 7. 7494 13. 9825 98. 2
2 0. 4909 6. 2796 7. 7494 13. 9246 99. 4
3 0. 5000 6. 3958 7. 7494 14. 0695 97. 9 97. 3 1. 8
4 0. 5109 6. 5353 7. 7494 14. 2725 96. 1
5 0. 5170 6. 6128 7. 7494 14. 2435 95. 1
2. 9 样品测定 按 / 2. 30项下制备供试品溶液, 对 11批
来源不同的广金钱草进行了总黄酮的含量测定,结果见表
2。
表 2 不同产地广金钱草的总黄酮含量
序号 来源 收集时间 总黄酮含量 (m g /g)
1 北京 2006. 01 11. 37
2 哈尔滨 2006. 01 6. 846
3 天津 2006. 01 8. 307
4 安国 2006. 01 9. 116
5 杭州 2006. 03 10. 63
6 广州 2006. 03 10. 76
7 沈阳 2006. 03 12. 01
8 温州 2006. 03 9. 901
9 大连 2007. 03 17. 56
10 南宁 2007. 03 14. 58
11 深圳 2007. 03 9. 517
3 讨 论
3. 1 测定方法的选择 黄酮类化合物含量测定方法有比
色法,紫外分光光度法等。郭亚健等 [2]选择了多种黄酮类
及非黄酮类化合物, 与 NaNO 2、A l( NO 3 ) 3、NaOH 试剂反应
后测定 400~ 700nm吸收曲线。结果表明, 有些黄酮类物
质在 500nm处无最大吸收或吸收很弱, 而有些非黄酮类物
质在 500nm处有最大吸收或有较强吸收。实验结果说明
以芦丁为对照, N aN02 - A l( NO2) 3 -NaOH 比色法测定总
黄酮专属性不强,准确性较差。石淋通片是由广金钱草一
味药制成的制剂, 席先蓉等 [3 ]曾参照 5中华人民共和国药
典6测定槐花中芦丁含量方法, 对石淋通片中黄酮类化合
物的含量进行了测定。结果未见供试品溶液在 500 nm处
与对照品有相似吸收峰, 显然用该法测定石淋通片中总黄
酮的含量是不妥的。笔者也曾采用上述方法,以芦丁为对
照品, 对广金钱草药材进行总黄酮的含量测定, 实验结果与
席先蓉等一致。笔者又曾以 A lC l3, HAC -NaAC缓冲液为
显色剂,芦丁的最大吸收为 270nm, 芹菜素为 268nm, 广金
钱草为 274nm,最大吸收均相差较大。从实验结果可知, 以
异牡荆苷、v icenin - 1、v icen in -2和夏佛塔苷共有的母核芹
菜素为对照品,采用紫外分光光度法测定其总黄酮的含量,
操作简便,重复性好, 结果准确。
3. 2 提取溶剂的选择 实验中比较了乙醇和甲醇超声提
取样品结果以甲醇提取的总黄酮含量高, 又比较了 30%、
60%、100%甲醇超声提取样品, 结果以 60% 甲醇超声提取
的样品杂质少含量高。
3. 3 提取方法的选择 实验中分别以 60%甲醇为溶剂考
察了加热回流提取 2h, 索式提取 2h和超声提取 30m in, 结
果以超声提取 30m in的样品总黄酮含量最高。
3. 4 超声时间次数选择 采用 3因素 3水平的正交实验
对加甲醇量,超声时间, 超声次数进行考察,结果以加 20m L
60%的甲醇超声提取 1次, 30m in为最佳条件。
参考文献
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出版社, 2005
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( 2) : 97 -98
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