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China Pharmaceuticals
2015年 2月 5日 第 24卷第 3期
Vol． 24，No． 3，February 5，2015
＊广西壮族自治区卫生厅基金资助项目，项目编号:GZYZ － 10 － 40。
复方黄根颗粒(无糖型)是由广西平乐县中医医院根据传统
壮医药新研制开发的院内制剂，主要由黄根、叶下珠、黄芪、绞股
蓝等中药制成。其君药黄根为茜草科植物三角瓣花 Prismatomeric
connate Y． Z． Ｒuan的干燥根，具有祛瘀生新、利湿退黄的功效 [1 ] 254，
临床用于治疗慢性乙型肝炎、脂肪肝、酒精性肝病所致食欲不振。
叶下珠为大戟科植物叶下珠 Phyllanthus urinaria Linn． 的干燥全草，
具有平肝清热、利水解毒的功效 [ 1 ] 89。动物试验证明，叶下珠对乙
型肝炎病毒有抑制作用，具有保护肝细胞及提高细胞免疫力作
用，其中没食子酸为主要活性成分，具有抗病毒作用。黄芪为豆科
植物蒙古黄芪 Astragalus membra － naceus Bge． var． mongholicus
(Bge． ) Hsiao 或膜荚黄芪 Astragalus membra － naceus ( Fisch． ) Bge．
的干燥根，能增强淋巴细胞免疫功能，对细菌和病毒均有明显抑
制作用 [ 2 ]。本试验中用薄层色谱(TLC)法对方中叶下珠、黄芪进行
鉴别，用高效液相色谱(HPLC)法测定制剂中没食子酸含量，建立
了可靠、准确、专属性强的质量控制标准。
1 仪器与试药
Agilent 1200 型高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);AE240
型电子天平(瑞士梅特勒公司);KQ － 300 型超声波清洗器 (江苏
昆山市超声仪器有限公司 )。没食子酸对照品(批号为 110831 －
200803)，黄芪甲苷对照品(批号为 110781 － 200613)，叶下珠对
照药材(批号为 121374 － 200401)均由中国药品生物制品检定所
提供; 复方黄根颗粒(无糖型，广西平乐县中医院自制 ，批号为
20120112，20120202，20120303，20120315，20120327，20120510，
规格为每袋装 3 g);硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂);甲醇为色
谱纯，磷酸为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2． 1 定性鉴别
叶下珠 [ 3 ]:取本品3 g，研细，加水 15 mL 使溶解，滤过，滤液
用乙酸乙酯 30 mL振摇提取，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇
1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取叶下珠对照药材 2 g，加 75%
乙醇 20 mL，加热品流 30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水 100 mL，
煮沸 30 min，滤过，滤液用乙酸乙酯 30 mL振摇提取，分取乙酸乙
酯液，蒸干，残渣加甲醇 1 mL使溶解，作为对照药材溶液。再取没
食子酸对照品，加甲醇制成每 1 mL 含 0． 5 mg 的溶液，作为对照
品溶液。再取阴性样品 (缺叶下珠的样品 )，按照供试品溶液的制
备方法制备，即得阴性对照品溶液。吸取上述 4 种溶液各 5 μL，
分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以甲苯 －氯仿 －丙酮 －甲酸
( 8 ∶ 5 ∶ 7 ∶ 2 )为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 1%三氯化铁乙醇
溶液。供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱和对照品溶液
色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照品溶液无干扰。
见图 1 A。
黄芪 [ 4 ]: 取本品内容物3 g，研细，加甲醇 50 mL，超声处理
30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水 15 mL 使溶解，用水饱和的正
A B
1 － 3． 供试品溶液 4． 对照药材溶液
5． 对照品溶液 6． 阴性对照品溶液
A． 叶下珠 B． 黄芪
图 1 薄层色谱图
复方黄根颗粒(无糖型)质量标准研究＊
唐德智 1，劳广耀 2，杨 辉 1
(1． 广西壮族自治区南宁食品药品检验所，广西 南宁 530001; 2． 广西壮族自治区平乐县中医医院，广西 桂林 542400)
摘要:目的 建立复方黄根颗粒(无糖型)的质量标准。方法 采用薄层色谱(TLC)法对方中叶下珠、黄芪进行定性鉴别;采用高效液相色谱法
测定叶下珠中有效成分没食子酸的含量。结果 TLC特征明显，阴性无干扰，专属性强;没食子酸进样量在0． 252 ～ 2． 264 μg范围内与峰面
积积分值线性关系良好 ( r = 0． 999 9，n = 6)，平均加样回收率为 100． 88%，ＲSD = 1． 78%(n = 6)。结论 该标准可用于复方黄根颗粒(无糖
型)的质量控制。
关键词:复方黄根颗粒(无糖型);薄层色谱法;高效液相色谱法;质量标准
中图分类号:Ｒ284． 1;Ｒ286． 0 文献标识码:A 文章编号:1006 － 4931 (2015 )03 － 0025 － 03
Study on Quality Standard of Compound Huanggen Granules (Sugar Free)
Tang Dezhi1， Lao Guangyao2， Yang Hui1
( 1． Nanning Municipal Institute for Food and Drug Control， Nanning， Guangxi， China 530001;
2． Pingle County Hospital of Traditional Chinese Medicine， Guilin， Guangxi， China 542400 )
Abstract: Objective To establish the quality standard of Compound Huanggen Granules ( sugar free ) ． Methods Phyllanthus urinaria
and Astragali radix in this preparation were identified by TLC and the content of gallic acid as the effective component in Phyllanthus
urinaria was determined by HPLC． Ｒesults The TLC characteristics were distinctive without interference by the negative control and
with strong specificity; the linear concentration range of gallic acid was 0． 252 － 2． 264 μg ( r = 0． 999 9， n = 6 ) and the average sample
recovery rate was 100． 88%，ＲSD = 1． 78% ( n = 6)． Conclusion The established standard can be used for the quality control of Compound
Huanggen Granules ( sugar free ) ．
Key words: Compound Huanggen Granule ( sugar free ) ; TLC; HPLC; quality standard
1 2 3 4 5 6 1 2 3 5 6
·药物鉴定·
Drug Identification
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2015年 2月 5日 第 24卷第 3期
Vol． 24，No． 3，February 5，2015
1． 没食子酸
A. 对照品溶液 B． 供试品溶液 C． 阴性对照品溶液
图 2 高效液相色谱图
表 1 没食子酸加样回收试验结果(n = 6)
取样量
(g)
0． 400 3
0． 401 9
0． 400 7
0． 404 5
0． 403 5
0． 405 3
样品含量
(μg)
0． 584
0． 587
0． 585
0． 591
0． 589
0． 592
加入量
(μg)
0． 458
0． 458
0． 583
0． 583
0． 708
0． 708
测得量
(μg)
1． 034
1． 042
1． 184
1． 178
1． 315
1． 312
回收率
(%)
98． 25
99． 35
102． 74
100． 69
102． 54
101． 69
X
(%)
100． 88
ＲSD
(%)
1． 78
丁醇振摇提取 3 次，每次 20 mL，合并正丁醇液，用 l%氧氧化钠
溶液洗涤 2 次，每次 20 mL，弃去碱液，再加正丁醇饱和的水洗至
中性，弃去水液，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇 1 mL使溶解，作为
供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每 1 mL 含 1 mg
的溶液，作为对照品溶液。再取阴性样品 (缺黄芪的样品 )，按照供
试品溶液的制备方法制备，即得阴性对照品溶液。吸取上述溶
液各 5 μL，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以正丁醇 －醋酸 －
水 ( 4 ∶ 1 ∶ 5 )的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10%硫
酸乙醇溶液，在 105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品溶液色谱中，
在与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对
照无干扰。见图 1 B。
2． 2 含量测定 [ 5 － 8 ]
2． 2． 1 色谱条件
色谱柱:Agilent Zorbax SB C18 柱 ( 250 mm × 4． 6 mm，5 μm );
流动相: 甲醇－ 0． 1%磷酸(10 ∶ 90); 检测波长:270 nm; 流速:
1． 0 mL /min;柱温:30 ℃;进样量:10 μL。
2． 2． 2 溶液制备
精密称取干燥至恒重的没食子酸对照品 12． 58 mg，置 50 mL棕
色容量瓶中，加 50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得 0． 251 6 g /L
对照品贮备液，精密吸取 5 mL，置 10 mL 棕色容量瓶中，加 50%
甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取本品内容物，混匀，研
细，取约 0． 8 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加 50%甲醇 25 mL，
称定质量，超声处理 30 min (功率 300 W，频率 40 kHz )，放冷，再
称定质量，用 50%甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，用微孔滤膜
(0． 45 μm)滤过，取续滤液，即得供试品溶液。按质量标准中的处
方，按制备工艺制成缺叶下珠的阴性供试品，再按供试品溶液的
制备方法制成阴性对照品溶液。
2． 2． 3 方法学考察
专属性考察:分别取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照品
溶液各 10 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，记录色谱
图，结果见图 2。结果阴性对照品溶液的色谱图中，在没食子酸保
留时间的相应位置上无没食子酸峰出现，表明此方法专属性强，
阴性对照无干扰。
线性关系考察: 精密吸取2． 2． 2 项下对照品贮备溶液 1，3，
5，7，9 mL，分别置 10 mL 棕色容量瓶中，加 50%甲醇至刻度，摇
匀。分取上述不同质量浓度对照品溶液 10 μL，注入液相色谱仪，
记录峰面积，以进样量为横坐标、以峰面积为纵坐标进行线性回
归，回归方程为 Y = 3 069． 2 X － 4． 669 5，r = 0． 999 9(n = 5)。结果
表明，没食子酸进样量在 0． 252 ～ 2． 264 μg 范围内与峰面积呈良
好的线性关系。
精密度试验:精密吸取对照品溶液10 μL，重复进样 6 次，测
定没食子酸峰面积。结果的 ＲSD为 0． 19%，表明仪器精密度良好。
稳定性试验:取供试品溶液(批号为 20120315 )，分别在 0，2，
4，6，8，10，12，24 h进样测定，记录峰面积。结果的 ＲSD为 0． 96%
(n = 8)，表明供试品溶液在 24 h内稳定。
重复性试验: 取同一批号样品(无糖型，批号为 20120315)，
按 2． 2． 2 项下方法制备供试品溶液，分别测定，计算没食子酸含
量。结果平均含量为每袋 10． 95 mg，ＲSD 为 0． 89%(n = 5)，表明
方法重复性良好。
加样回收试验: 取已知没食子酸含量的样品(批号为
20120315，每袋 10． 95 mg)粉末约 0． 4 g，共 6 份，精密称定，分别
精密加入一定量的没食子酸对照品，按 2． 2． 2 项下制备供试品溶
液，测定没食子酸的含量，计算回收率。结果见表 1。
2． 2． 4 样品含量测定
取不同批号的样品，依法制备供试品溶液。精密吸取对照品
溶液和供试品溶液各 10 μL，注入液相色谱仪，测定，按外标法以
峰面积计算样品中没食子酸的含量。结果见表 2。
3 讨论
制剂中的君药为黄根，但因制剂过程中提取工艺的原因，黄
根的薄层色谱未检出，因此本试验选择了方中另 2 味主药叶下
珠、黄芪进行定性鉴别。现代药理试验证明，叶下珠具有抗乙型肝
炎病毒、保肝等作用 [ 9 ]。没食子酸为其有效成分之一，是可水解鞣
质的单体，具有抗病毒作用。本试验中用 HPLC 法测定没食子酸
的含量，方法简便、快速。
在提取溶剂考察时分别用稀乙醇、乙醇、甲醇、50%甲醇为提
取溶剂，结果 50%甲醇对没食子酸提取效率高，故以 50%甲醇作
为提取溶剂。对提取方法冷浸法、热回流提取法、超声处理法进行
考察，结果表明超声处理法效果较理想。
在试验中，取没食子酸对照品溶液，在 200 ～ 400 nm 波长范
围内进行光谱扫描，结果其在 270 nm波长处吸收值最大，灵敏度
表 2 复方黄根颗粒(无糖型)含量测定结果(n = 3)
批号
20120112
20120202
20120303
含量(mg /袋)
11． 43
11． 70
11． 88
ＲSD (% )
0． 96
0． 54
1． 15
批号
20120315
20120327
20120510
含量(mg /袋)
10． 92
11． 46
11． 82
ＲSD (% )
0． 91
1． 16
0． 78
0 5 10 15 20 25
t / min
1
A
1
B
0 5 10 15 20 25
t / min
C
t / min
0 5 10 15 20 25
·药物鉴定·
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2015年 2月 5日 第 24卷第 3期
Vol． 24，No． 3，February 5，2015
患者，男，47 岁，因“咳嗽、咳痰伴发热 3 +月，再发 5 天”于
2014 年 5 月 9 日入住我院呼吸内科。急诊(5 月 7 日)辅助检查，
血常规示血红蛋白 100 g / L，白细胞计数 8． 05 × 109 / L，中性分叶
核粒细胞百分率 85． 1%;血生化示丙氨酸氨基转移酶155 U / L，
白蛋白 26． 2 g / L;凝血常规示凝血酶原时间14． 4 s; 结核抗体检
测阳性; 真菌1，3 － B － D 葡聚糖 70． 11 pg /mL;C －反应蛋白
62． 50 mg / L，降钙素原 0． 90 ng / mL;胸部CT 示“慢支炎，肺气肿
征。双肺散在结节、实变、斑片及条索影，多系感染性病变”。入院
后先后给予盐酸莫西沙星抗感染、氟康唑抗真菌、哌拉西林他唑
巴坦钠抗感染治疗。5 月 24 日晨，患者出现神志不清、呼叫无反
应，即转入我院 ＲICU继续治疗，转科诊断为重症肺炎;Ⅱ型呼吸
衰竭;肺性脑病;双向情感障碍;中度贫血;低蛋白血症;重度营养
不良;甲减;梅毒;肝功能异常。转入后予持续有创呼吸机辅助呼
吸，哌拉西林钠他唑巴坦钠抗感染，同时予以盐酸氨溴索祛痰、还
原型谷胱甘肽和多烯磷脂酰胆碱保肝治疗。5 月 26 日，患者呈阵
发性烦躁不安、意识模糊，医嘱予奥氮平片(江苏豪森药业股份有
限公司，批号为 140313)5 mg、每晚 1 次口服控制精神症状。5 月
29 日，复查血常规示血红蛋白 64 g / L，白细胞计数 5． 93 × 109 /L，
中性分叶核粒细胞百分率 89． 0 %，血小板计数 202 × 109 / L;
降钙素原 0． 16 ng / mL。6 月 5 日，复查血常规示红细胞计数
2． 42 × 1012 / L，血红蛋白 82 g / L，血小板计数 607 × 109 / L，白细
胞计数 7． 49 × 109 /L，中性分叶核粒细胞百分率 88． 4%。6月 10日，
复查血常规示血红蛋白 88 g / L，血小板计数 505 × 109 / L，白细胞
计数 11． 46 × 109 / L，中性分叶核粒细胞百分率 90． 4%。医嘱于
6 月 11 日停用奥氮平，并于当日转出 ＲICU、转入呼吸内科。6 月
16日血小板计数 162 × 109 / L，6月 19日 134 × 109 / L。
讨论:双向情感障碍主要采用抗精神病药物快速控制患者的
兴奋状态，故给予该患者奥氮平治疗 [1 ]。治疗前曾查血常规，患者
的血小板计数并未出现异常变化;在加用奥氮平的第10 天血小
板计数值达 607 × 109 / L ，在用药期间的几次血常规复查均保持
异常高值;停用该药后，血小板计数降低并恢复至正常值;在血小
板计数异常期间，也并未加用其他任何药物。另外，与奥氮平共同
使用的几种药物，哌拉西林他唑巴坦、盐酸氨溴索、还原型谷胱甘
肽与多烯磷脂酰胆碱均无使血小板计数增多的报道。从用药时间
分析，高度怀疑是奥氮平所致的血小板计数增加。奥氮平很常见
的不良反应包括嗜睡、体重增加及血浆泌乳素升高，而血液和淋
巴系统障碍中少见的为白细胞减少症，很少见的有血小板减少症
及中性粒细胞减少症 [ 2 ]。国内外尚无其致血小板增多的报道。已
知可能诱发奥氮平不良反应的作用机制主要包括以下几种，如阻
断 5 －羟色胺(5 － HT2)、多巴胺 2(D2)、α1 和 α2 肾上腺素能受体、
H1 受体以及拟 γ －氨基丁酸受体反应 [ 3 ]。其引起血小板增多的机
制可能为其中之一，也可能是其他的作用机制，需要进一步研究
考证 [4 ]。该例患者提示，要重视临床使用奥氮平可能导致血小板
计数增多的不良反应。
作者简介:郑冬妮，女，大学本科，主要从事临床药学工作，(电
子信箱)361197378@ qq． com;徐，男，副教授，主要从事临床药学
工作，(电话)028 － 85422664(电子信箱)tingx2009@ 163． com。
参考文献:
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志，2010，23 (3 ) : 235 － 237
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前沿杂志 (电子版 )，2013，50 (3 ) : 53 － 57．
(收稿日期:2014 － 07 － 28 )
最高，故选择 270 nm为测定波长。
作者简介:唐德智，男，副主任药师，主要从事中药制剂的分
析研究，(电话)0771 － 3132340(电子信箱)tangdz7497@ 163． com;
杨辉 ( 1963 － )，男，副主任药师，主要从事药品检验、质量标准研
究与提高方面工作，本文通讯作者，(电话)0771 － 3100835(电子
信箱)yh07719001@ 21cn． com。
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(收稿日期:2014 － 01 － 28;修回日期:2014 － 06 － 04 )
疑似口服奥氮平致血小板增多 1例
郑冬妮，吴逢波，徐
(四川大学华西医院药剂科，四川 成都 610041)
中图分类号:Ｒ969． 3;Ｒ971 + ． 41 文献标识码:D 文章编号:1006 － 4931 (2015 )03 － 0027 － 01
檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨
·药物鉴定·
Drug Identification