全 文 ：高效液相色谱法测定七味广枣丸中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量
谭生建 1 ,邱冬 2 ,刘刚 1 ,谢雅君 1 ,王海涛1 ,赵淼1
(1.中国人民解放军第 306医院药学部 ,北京 100101;2.北京经济管理职业学院 ,北京 102602)
摘要　目的:建立高效液相色谱法测定七味广枣丸中木香烃内酯和去氢木香内酯含量。方法:采用 AgilentZORBAXEclipse
SB-C18(4.6mm×150mm, 5 μm)色谱柱 ,流动相为 5%乙腈 -乙腈(58∶42), 流速 1 mL· min-1 ,检测波长为 225 nm。结果:
木香烃内酯和去氢木香内酯的保留时间分别约为 21 min和 24 min, 与相邻峰的分离度大于 1.5;线性范围分别为 7.400 ～
185.0 μg· mL-1(r=0.9999)和 5.950 ～ 148.8 μg· mL-1(r=0.9998);平均回收率(n=6)分别为 101.3%和 97.0%, RSD
均为 1.6%。结论:该法操作简便 , 测定结果准确 , 重复性好 , 可用于七味广枣丸中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量
测定。
关键词:高效液相色谱;七味广枣丸;木香烃内酯;去氢木香内酯
中图分类号:R917　　　文献标识码:A　　　文章编号:0254-1793(2011)01-0145-03
HPLCdeterminationofcostunolideanddehydrocostus
lactoneinQiweiGuangzaopils
TANSheng-jian1 , QIUDong2 , LIUGang1 , XIEYa-jun1 ,
WANGHai-tao1 , ZHAOMiao1
(1.DepartmentofPharmacy, Hospital306 ofPLA, Beijing100101, China;
2.BeijingInstituteofEconomicManagement, Beijing102602, China)
Abstract　Objective:ToestablishanHPLCmethodforthedeterminationofcostunolideanddehydrocostuslactone
inQiweiGuangzaopils.Methods:AgilentZORBAXEclipseSB-C18(4.6 mm×150 mm, 5 μm)columnwasa-
dopted, themobilephaseconsistedof5% acetonitrile-acetonitrile(58∶42)attheflowrateof1 mL·min-1 , and
thedetectionwavelengthwassetat225 nm.Results:Theretentiontimeofcostunolideanddehydrocostuslactone
wasabout21minand24min, andtheresolutionwasmorethan1.5;Thelinearrangesofcostunolideanddehydro-
costuslactonewere7.400-185.0 μg· mL-1(r=0.9999)and5.950-148.8 μg· mL-1(r=0.9998), respec-
tively;Theaveragerecoveriesofcostunolideanddehydrocostuslactonewere101.3% and97.0%, andRSDsof
bothwere1.6%.Conclusion:Thismethodissimple, time-savingandaccurate.Itcanbeusedforroutineanalysis
ofcostunolideanddehydrocostuslactoneinQiweiGuangzaopils.
Keywords:HPLC;QiweiGuangzaopils;costunolide;dehydrocostuslactone
　第一作者　Tel:(010)66356172;E-mail:tansj163@163.com
七味广枣丸由广枣 、肉豆蔻 、木香 、丁香 、枫香
脂 、沉香 、牛心粉加工制成 ,收载于中国药典 (2005
年版一部),具有养心益气 、安神功能 ,用于胸闷疼
痛 、心悸气短 、心神不安 、失眠健忘 。七味广枣丸质
量标准中有性状 、鉴别 、检查等项目 ,没有含量测定 。
木香中含有木香烃内酯和去氢木香内酯 ,其含量测
定方法有高效液相色谱法 [ 1, 2] ,含木香的其他制剂
中的木香烃内酯和去氢木香内酯的含量测定也有报
道[ 3, 4] 。七味广枣丸中木香烃内酯和去氢木香内酯
的含量测定方法未见报道 ,本文研究建立了高效液
相色谱法同时测定七味广枣丸中木香烃内酯和去氢
木香内酯含量的方法。
1　仪器与试药
高效液相色谱仪 (Agilent1200系列)包括:
G1311A四元色谱泵 , G1329A自动进样器 , G1315B
二极管阵列检测器 , G2170BA色谱工作站 , G1316A
—145—药物分析杂志 ChinJPharmAnal2011, 31(1)DOI :10.16155/j.0254-1793.2011.01.028
柱温箱和 G1379B在线脱气机。
对照品木香烃内酯 (批号 111524 -200503)和
去氢木香内酯(批号 110525 -200505)购自中国药
品生物制品检定所。七味广枣丸由中国人民解放军
第 306医院制剂室制备 (批号 090331, 090401,
090402)。乙腈(FISHER, LOTNO:063507)为色谱
纯 ,水为纯化水 ,其他试剂为分析纯。
2　方法与结果
2.1　溶液制备
2.1.1　混合对照品溶液　分别取对照品木香烃内
酯和去氢木香内酯适量 ,精密称定 ,用流动相溶解并
稀释制成每 1 mL分别含木香烃内酯 37.00μg和去
氢木香内酯 29.75 μg的混合对照品溶液 ,摇匀 ,即
得 。
2.1.2　供试品溶液 　取重量差异项下的本品 ,剪
碎 ,取约 2g,精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加入
流动相 50mL,密塞 ,称定重量 ,超声处理(功率 250
W,频率 50kHz)40 min,放冷 ,再称定重量 ,用流动
相补足减失的溶剂 ,摇匀 ,用微孔滤膜(0.45 μm)滤
过 ,取续滤液 ,即得 。
2.1.3　阴性供试品溶液 　按照七味广枣丸的处
方和制法 ,制备不含木香的七味广枣丸 ,作为木香阴
性样品。取阴性样品适量(相当七味广枣丸约2 g),
精密称定 ,按 “ 2.1.2”项下方法制备操作 ,即得 。
2.2　 色谱条件 　采用 AgilentZORBAXEclipse
SB-C18(4.6 mm×150 mm, 5 μm)色谱柱 ,流动相
为 5%乙腈 -乙腈(58∶42),流速 1 mL· min-1 ,检
测波长 225 nm。在此色谱条件下 ,分别取混合对照
品溶液 、木香阴性供试品溶液和七味广枣丸供试品
溶液各 10 μL,注入液相色谱仪 ,记录色谱图 ,结果
见图 1。图 1显示 ,七味广枣丸中其他成分对木香
烃内酯和去氢木香内酯的测定没有干扰 。木香烃内
酯和去氢木香内酯的保留时间分别约为 21 min和
24 min,它们与相邻的色谱峰的分离度均大于 1.5,
理论板数分别约为 4000和 7000。
图 1　对照品(A)、木香阴性样品(B)和样品(C)色谱图
Fig1　HPLCchromatogramsofchemicalreferencesubstances(A), negativesamplewithoutRadixAucklandiae(B)andsample(C)
1.木香烃内酯(costunolide)　 2.去氢木香内酯(dehydrocostuslactone)
2.3　线性关系考察 　分别取对照品木香烃内酯
和去氢木香内酯适量 ,精密称定 ,用流动相溶解并稀
释制成每 1mL含木香烃内酯分别为 7.400, 11.10,
18.50, 37.00, 74.00 , 185.0 μg,含去氢木香内酯分
别为 5.950, 8.925, 14.88, 29.75, 59.50, 148.8 μg
的对照品混合溶液 ,分别精密量取 10 μL进样测定 。
结果木香烃内酯色谱峰面积分别为 90.30, 122.3,
192.6, 382.8, 776.8, 1944.7;去氢木香内酯色谱峰
面积分别为 71.80, 99.90 , 194.8, 387.9, 778.2,
1887。以进样浓度对峰面积线性回归 ,木香烃内酯 、
去氢木香内酯回归方程分别为:
Y=0.09539X-0.2972　　　r=0.9999
Y=0.07851X-0.07949　　r=0.9998
表明木香烃内酯进样浓度在 7.400 ～ 185.0μg·mL-1 ,
去氢木香内酯进样浓度在 5.950 ～ 148.8μg·mL-1范
围内与峰面积呈良好的线性关系。
2.4　定量限测定　取对照品溶液稀释至峰高约为
基线噪音的 10倍 ,测得木香烃内酯和去氢木香内酯
的定量限均为 0.001 μg。
2.5 　精 密度试 验 　精密量 取木 香烃内 酯
(37.00μg·mL-1)和去氢木香内酯(29.75μg·mL-1)
的对照品混合溶液 10 μL连续进样 5次。结果木香
烃内酯色谱峰面积平均为 388.3, RSD为 0.42%;去
氢木香内酯色谱峰面积平均为 380.1, RSD为
0.74%。
2.6　重复性试验 　取同一批样品(批号 090331)
6份 ,分别按 “2.1.2”项下方法制备供试品溶液 ,精
密量取 10 μL进样测定 。结果木香烃内酯含量平均
为 1.121mg· g-1 , RSD为 1.8%;去氢木香内酯含
量平均为 0.5655 mg·g-1 , RSD为 1.4%。
—146— 药物分析杂志 ChinJPharmAnal2011, 31(1)
2.7　加样回收率　取测得含量的七味广枣丸(批
号 090401,每 1 g含木香烃内酯和去氢木香内酯分
别为 1.094 mg和 0.7052mg)0.2 g共 6份 ,精密称
定 , 分 别 置 10 mL 量 瓶 中 , 精 密 加 入
74.00 μg· mL-1的木香烃内酯对照品溶液 3 mL及
119.0 μg· mL-1的去氢木香内酯对照品溶液 1mL,
用流动相稀释至刻度 ,超声处理(功率 250 W,频率
50 kHz)40min,放冷至室温 ,用流动相补足减失的
溶剂 ,摇匀 ,用微孔滤膜(0.45μm)滤过 ,取续滤液 ,
作为加样回收供试溶液。进样测定木香烃内酯和去
氢木香内酯的量 ,计算回收率 ,结果木香烃内酯和去
氢木香内酯平均回收率(n=6)分别为 101.3%和
97.0%, RSD均为 1.6%。
2.8　供试品溶液稳定性　配制供试品溶液 ,置自动
进样器中 ,分别于 0 , 1, 2, 3, 4, 26, 27 , 28, 29 h测定 ,
木香烃内酯 、去氢木香内酯峰面积的 RSD分别为
1.4%和 1.1%,显示供试品溶液在 29 h内稳定。
2.9　样品测定 　分别精密吸取按 “2.1”项下方法
制备的混合对照品溶液和供试品溶液各 10 μL注入
液相色谱仪 ,测定 ,按外标法以峰面积计算 ,测定了
3批样品 ,结果见表 1。
表 1　含量测定结果(mg· g-1)
Tab1　Resultsofsampledetermination
批号(LotNo.) 木香烃内酯(costunolide)
去氢木香内酯
(dehydrocostuslactone)
090331 1.1 0.57
090401 1.1 0.71
090402 1.1 0.71
3　讨论
3.1　检测波长的确定　木香烃内酯和去氢木香内
酯的吸收峰均在 202 nm波长附近 ,逐步至 260 nm
波长处降低到 0,本文参考中国药典[ 2] ,选择在 225
nm波长处测定木香烃内酯和去氢木香内酯。
3.2　流动相的选择 　试验过程中分别试用了甲
醇 -水和乙腈 -水作为流动相 , 结果显示使用乙
腈 -水作为流动相木香烃内酯和去氢木香内酯峰形
较好 ,故使用乙腈 -水作为流动相 。
3.3　提取条件的选择　出于保持溶质(七味广枣
丸的提取物)在进样前后溶剂环境一致的考虑 ,选
择流动相为提取溶剂。试验了不同溶剂用量对提取
效果的影响 ,结果显示 2 g样品加 50 mL流动相的
比例可以保证提取完全;试验了超声(功率 250 W,
频率 50kHz)不同时间的提取效果 ,结果显示超声
40 min可以提取完全 , 因此 ,确定超声时间为 40
min。
3.4　小结　本法操作简便 ,测定结果准确 ,重复性
好 ,可用于七味广枣丸中木香烃内酯和去氢木香内
酯含量的同时测定 。
参考文献
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强).DeterminationofcostunolideanddehydrocostuslactoneinRadix
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Pharm(中南药学), 2007, 5(6):524
(本文于 2010年 1月 7日收到)
—147—药物分析杂志 ChinJPharmAnal2011, 31(1)