全 文 ：2005年 1月 内蒙古大学学报 (自然科学版 ) Jan. 2005第 36卷第 1期 Acta Scientiarum Naturalium Univ ersi tati s NeiM ongol Vol. 36 No. 1
　　文章编号: 1000- 1638( 2005) 01-0081-03
广枣中黄酮类化合物提取工艺研究
樊海燕1 ,赛　音 1 ,敖登高娃 1 ,宋一亭 2
( 1.内蒙古大学化学化工学院 ,呼和浩特 010021; 2.内蒙古中蒙医研究所 ,呼和浩特 010020)
摘要:用正交试验方法对广枣中黄酮类化合物的提取工艺进行了探讨 .选取乙醇浓度、乙醇倍
量、提取时间、提取次数四个考察因素 ,进行 L16正交试验 .确定了最佳提取工艺条件为:用 12
倍量、 60%乙醇回流提取 4次、每次 1. 5 h.乙醇浓度对总黄酮含量的影响特别显著 .在此条件
下总黄酮的平均得率为 3. 653% .
关键词: 广枣 ;黄酮类化合物 ;正交试验 ;提取工艺
中图分类号: R944. 1; T S201. 2　　文献标识码: A
引　言
　　蒙药广枣是漆树科南酸枣属植物南酸枣 (Choerospondias axil lax i ( Roxb. ) Burt t et Hi ll)的干燥
成熟果实 ,系蒙医习用药材 .广枣性味甘、酸、平、脂、重、柔 ,具有行气活血、养心、安神的功能 ,用于气
滞血瘀、胸痹作痛、心悸气短、心神不安〔1〕 .内蒙古蒙成药标准共收藏含广枣制剂 11种〔 2〕 ,约占总方剂
的 10% .对广枣的成分分析表明 ,广枣中含有糖、氨基酸、有机酸、鞣质、甾醇、黄酮类及酚性成分等 .
国外有文献报道〔3～ 4〕黄酮类化合物用于治疗肿瘤及抗氧化侵蚀等作用 .复方广枣注射液〔 5〕是根据蒙
医经典方剂研制而成 ,其中的总黄酮被认为是有效成分 ,具有对心血管系统、免疫功能的影响及清除
自由基作用等 .
本研究以开发药效优良的新制剂为宗旨 ,采用乙醇—水提取法 ,以广枣为原料 ,以总黄酮为有效
成分的测定指标 ,采用正交试验法 ,对提取工艺进行研究 ,确定最佳提取工艺条件 ,在实际生产中可选
择适用 ,为生产提供理论依据和工艺参数 .
1　实验部分
1. 1　仪器与试剂
回流提取装置 ,恒温水浴箱 , RE-52AA旋转蒸发器 , SHZ-D循环水式真空泵 ,粉碎机 ,分析天平 ,
UV-265紫外可见分光光度计 (日本岛津 ) ;实验用化学药品均为分析纯 .
芦丁对照品 ,批号 0080-9504,中国药品生物制品检定所出品 .
实验用广枣产于广西桂林 ,于本地药材公司购得 ,经中蒙医研究所专家鉴定确认 .
1. 2　提取工艺设计
将自然风干干燥的广枣粉碎 ,过 40目筛 ,准确称取 5. 000 g ,按一定料液比加入乙醇 -水浸提溶
剂 ,在恒温水浴箱中加热回流提取 ,保持微沸 .趁热过滤 ,合并数次提取滤液 ,定容至 250 mL,备测 .
1. 3　正交试验设计
根据生产实际及文献〔6〕报道 ,影响总黄酮成分提取的主要因素有: 乙醇浓度 ( A)、乙醇倍量 ( B)、
收稿日期: 2004-08-18
基金项目: 国家自然科学基金资助项目 ( 30160102)
作者简介: 樊海燕 ( 1972～ ) ,女 ,内蒙古呼和浩特人 ,讲师 .
提取时间 ( C)、提取次数 ( D) .故实验中选择此 4个考察因素 ,每个因素安排 4个水平 ,进行 L16 ( 44 )正
交试验 ,见表 1、表 2.
表 1　正交试验因素水平表
Table 1　 Factors and levels of orthogonal test
水平 因　　素
A乙醇浓度 (% ) B乙醇量 (倍 ) C提取时间 ( h ) D提取次数
1 60 6 1. 0 1
2 70 8 1. 5 2
3 80 10 2. 0 3
4 95 12 2. 5 4
1. 4　总黄酮含量测定方法
1. 4. 1　标准曲线绘制　按文献〔7〕的方法并加以改进 .用移液管分别量取芦丁标准液 ( 0. 232 g /L)
0. 0、 1. 0、 2. 0、 3. 0、 4. 0、 5. 0 m L于 10 mL比色管中 ,用 30%乙醇补充至 5 mL,加入 0. 3 mL 5%亚硝
酸钠 ,摇匀 ,放置 5 min后 ,加入 0. 3 mL 10%硝酸铝 , 6 min后 ,再加入 4. 0 mL 4%氢氧化钠 ,混匀 ,用
30%乙醇定容至 10. 00 mL, 15 min后以试剂空白为参比 ,用 1 cm比色皿于 500 nm处测定吸光度
A.以吸光度 A为纵坐标 ,浓度 C( g /L)为横坐标 ,得回归方程: A= 11. 99C- 0. 070, r= 1. 0001.
1. 4. 2　样品测定　准确移取 1. 00 m L提取液 ,按 1. 4. 1的方法测定样品的吸光度 A,从标准曲线方
程得出浓度 ,并计算得率 .
2　结果与讨论
2. 1　总黄酮最佳提取工艺条件的确定
正交试验结果分析见表 2.对正交试验结果进行因素方差分析见表 3.
表 2　正交试验结果分析表
Table 2　Results and analysis of orthogonal test
A B C D 得率 (% )
1 4 3 3 2 2. 425
2 4 2 1 4 2. 483
3 4 4 4 3 2. 532
4 4 1 2 1 1. 554
5 3 4 1 1 2. 207
6 3 2 4 2 2. 634
7 3 3 2 3 2. 798
8 3 1 3 4 2. 791
9 2 1 1 2 2. 768
10 2 3 4 1 2. 568
11 2 2 2 4 3. 426
12 2 4 3 3 3. 442
13 1 2 3 1 2. 489
14 1 4 2 2 3. 479
15 1 1 4 3 3. 173
16 1 3 1 4 3. 538
K1 12. 68 10. 29 11. 00 8. 82
K2 12. 20 11. 03 11. 26 11. 31
K3 10. 43 11. 33 11. 15 11. 94
K4 8. 99 11. 66 10. 91 12. 24
k1 3. 17 2. 57 2. 75 2. 20
k2 3. 05 2. 76 2. 81 2. 83
k3 2. 61 2. 83 2. 79 2. 99
k4 2. 25 2. 92 2. 73 3. 06
R 0. 92 0. 35 0. 08 0. 86
82 内蒙古大学学报 (自然科学版 ) 2005年
表 3　方差分析表
Table 3　 Analysis of variance
方差来源 偏差平方和 自由度 均方 F值 显著性
A 2. 10 3 0. 700 30. 43 影响特别显著
B 0. 26 3 0. 087 3. 78 看不出有较大影响
C 0. 07 3 0. 023 1. 00 看不出有较大影响
D 1. 81 3 0. 603 26. 22 影响显著
误差效应 0. 07 3 0. 023
　　 F0. 10 ( 3, 3)= 5. 39, F0. 05 ( 3, 3)= 9. 28, F0. 01 ( 3, 3)= 29. 46
　　从以上两个表可以看出 , A、 B、 C、 D四因素对总黄酮提取率影响的主次顺序为 A> D> B> C,最
佳提取工艺条件为 A1 B4 C2D4 ,即 60%乙醇、 12倍量、微沸回流提取 4次、每次 1. 5 h.
2. 2　最佳提取工艺条件下总黄酮含量的测定
准确称取广枣粉末 1. 000 g,以最佳工艺条件 A1 B4 C2D4进行提取 ,按 1. 4. 2的方法测定总黄酮含
量 ,计算出以芦丁为标准的总黄酮得率为 3. 653% , 5次测定结果的相对标准偏差 RSD= 1. 0% .
3　结　论
　　通过正交试验及方差分析 ,确定了从广枣中提取黄酮类化合物的最佳工艺条件为:用 12倍量、
60%乙醇回流提取 4次、每次 1. 5 h.乙醇浓度对总黄酮含量的影响特别显著 , 60%乙醇提取效果最
佳 .提取次数具有显著影响 ,次数越多效果越好 ,大于 4次总黄酮得率的增加变缓 ,因此选择提取 4次
即可满足生产需要 .乙醇倍量和提取时间的显著性影响看不出有较大影响 ,属次要工艺控制参数 .
参考文献:
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25.
(责任编委　边占喜 )
Research on Ex tracting Process of Flav onoids
f rom Choerospondias axillax i
FAN Hai-yan1 , SAI Yin1 , Aodeng Gaowa1 , SONG Yi-ting2
( 1. College of Chemistry and Chemical Engineering , NeiMongol University , Hohhot 010021, PRC;
2. NeiMongol Institute of Chinese Medicince and Meng Medicine , Hohhot 010020, PRC )
　　 Abstract: Concentra tion of alcohol , ref luxing time, amount of alcohol and ref lux ing number of
times w ere tested in o rthogonal ar ray design for ex t racting process. Experimental results show ed
that concentration of a lcohol w as the significant facto r. The best ex t racting pro cess can be described
as: the drug powder is ref lux ed 4 times ( 1. 5 h each time) , 60% alcoho l wi th 12 times o f the amount
to drug w eight. The average yield is 3. 653% .
Key words: Choerospondias ax illax i ( Roxb. ) Burt t et Hill; f lav onoids; or thogonal test;
ex t racting process
83第 1期 樊海燕等　广枣中黄酮类化合物提取工艺研究