全 文 ：广金钱草黄酮和生物碱成分薄层色谱鉴别的研究
罗勇慧(广州东康药业有限公司　广东广州 510440)
摘　要　目的 探讨鉴别广金钱草黄酮和生物碱成分的方法。方法 应用薄层色谱法鉴别广金钱草黄酮和生物碱成分 ,黄酮采
用ρ=3%AlCl3(乙醇)溶液显色 , 生物碱采用稀碘化铋钾试液显色。结果与结论 以薄层色谱鉴别广金钱草黄酮和生物碱成
分 ,不同于一般化学鉴别(试管法), 其分离效果较好 ,专属性强 , 具有实际参考价值。
关键词　广金钱草;薄层色谱鉴别;黄酮;生物碱
中图号　R 284.1　文章编号:1006-8783(2004)06-0596-01　文献标识码:A
作者简介:罗勇慧 , 28 岁 , 女 ,制药助理工程师。
研究方向:中草药有效成分精制及其在眼科外用药中的应用。
　　广金钱草是豆科植物广金钱草 Desmodium
styracifolium (Osb.)Merr.的干燥地上部分 ,为较常用
中药[ 1 ,2] 。中国药典2000年版收载有“清热除湿 ,利
尿通淋”的作用[ 1] 。对广金钱草的鉴别 ,文献主要介
绍性状鉴别 、显微鉴别及一般的化学鉴别(试管
法)[ 1 ,3] 。本文以薄层色谱法鉴别广金钱草中的黄
酮和生物碱成分 ,报道如下。
1　仪器及试剂
1.1　仪器
20 cm×10 cm双槽展开缸。
1.2　试剂
薄层层析硅胶G(化学纯),GF254(化学纯),青岛
海洋化工厂产品 。层析氧化铝(碱性),100 ～ 200目 ,
上海社园精细有限公司产品。羧甲基纤维素钠 ,上
海化学试剂分装 ,黏度 2%水溶液为 300 ～ 800 mPa/
s。其余试剂均为分析纯。
2　供试品及对照药材
2.1　广金钱草药材购自采芝林药店北京路分店 ,经
广东药学院药用植物与生药学教研室鉴定为豆科广
金钱草 Desmodium styracifolium (Osb.)Merr.(中国药
典2000年版一部)的全草。
2.2　广金钱草对照药材由广东省药品检验所中药
室提供。
3　广金钱草黄酮薄层色谱鉴别[ 2]
取广金钱草粉末 1 g ,置圆底瓶中 ,加甲醇 20
mL ,加热回流 1 h ,滤过 ,滤液蒸干 ,残渣加水 10 mL
使溶解 , 滤过 , 滤液用醋酸乙酯提取 2次 ,每次 10
mL ,合并醋酸乙酯液 ,蒸干 ,残渣加甲醇 1 mL 使溶
解 ,作为供试品溶液。另取广金钱草对照药材 1 g ,
同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典
2000版一部附录Ⅵ B)试验 ,吸取上述两种溶液各 10
μL ,分别点于同一以 ρ=0.3%羧甲基纤维素钠为黏
合剂的硅胶 G薄层板上 ,以 ψ(醋酸乙酯∶甲酸∶水)
=(8∶1∶1)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷以 ρ=3%
AlCl3(乙醇)溶液[ 4 ,5] , 105 ℃加热约 5min ,置紫外光
灯(365 nm)下检视[ 6] ,供试品色谱中 ,在与对照药材
色谱相应的位置上 ,显相同颜色的荧光斑点 。见图
1。
1、2 、3 为供试品;4为对照品
　　图 1　广金钱草黄酮薄层色谱
　　Fig.1 　TLC chromatogram of flavonoids in Desmodium
styracifolium(Osb.)Merr.
4　广金钱草生物碱薄层色谱鉴别
取广金钱草粉末 1 g ,置圆底瓶中 ,加浓氨溶液
5 mL[ 6] ,密塞 ,摇匀 ,放置30 min ,加氯仿 50mL ,加热
回流2 h ,取出放冷 ,分取氯仿液 ,药渣再用氯仿适量
洗涤 ,合并氯仿液 ,用无水硫酸钠脱水 ,置水浴上蒸
至约1 mL ,加于碱性氧化铝柱(5 g ,直径 15 mm)上 ,
用 ψ(氯仿∶无水乙醇)=(1∶1)混合溶液 50 mL 洗
脱[ 6] ,收集洗脱液 ,置水浴上蒸至约 1 mL ,作为供试
品溶液 。另取广金钱草对照药材 1 g ,同法制成对照
药材溶液。照薄层色谱法(中国药典 2000版一部附
录Ⅵ B)试验 ,吸取上述两种溶液各 4 μL ,分别点于
同一以 ρ=3%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶
GF254薄层板上 ,以 ψ(苯∶丙酮∶甲醇)=(8∶3∶0.5)为
展开剂 , (下转第 598页)
596
第 20卷第 6期 广　东　药　学　院　学　报 Vol.20 No.6
2004年 12月 ACADEMIC JOURNAL OF GUANGDONG COLLEGE OF PHARMACY Dec.2004
作 ,分别在 0 、1 、3 、5 、7 h 进样测定供试品含量 , RSD
为1.59%,表明样品 7 h内稳定。
2.5　精密度试验　精密吸取供试品溶液 10μL ,重
复进样5次 ,测定其峰面积 ,结果得 RSD 为 2.00%,
可知仪器的精密度符合要求。
2.6　重现性试验　取同一批供试品 ,按“1.2”项下
操作 , 重复测定 5 次 , 其平均含量为 0.622 mg/g ,
RSD 为1.50%,由此说明方法重现性较好。
2.7　回收率试验　精密称取已知含量样品(0.622
mg/g)0.5 g ,精密加入浓度 0.150 mg/mL的盐酸小
檗碱对照品溶液 1 mL ,按“1.2”项下方法进行测定 ,
计算回收率 , 结果平均回收率 =98.18%, RSD =
2.08%,见表 2。
表 2　加样回收率试验结果
Tab.2　Result of recovery test(n=5)
称样量
m/g
样品含量
m/mg
对照品加入
量 m/mg
测得量
m/mg 回收率/ %
0.2564 1.0538 1.032 2.095 100.9
0.2487 1.0222 1.032 2.020 96.69
0.2506 1.0300 1.032 2.021 96.03
0.2514 1.0333 1.032 2.041 97.65
0.2498 1.0267 1.032 2.055 99.64
2.8　样品含量测定　取不同批号的五味香连丸 3
份 ,按“1.2”项下进行样品制备 ,按“1.2”项下色谱条
件进行 HPLC 分析 ,进样体积 10 μL ,按外标法计算
含量 ,测定结果见表 3。
表 3　五味香连丸的含量测定结果
Tab.3　Assay result of Wuweixianglian Pills(n=3)
批 号 ω(盐酸小檗碱)/(mg/ g) RSD/ %
030601 0.592 2.01
031206 0.628 1.85
040503 0.611 1.96
3　讨论
采用不同比例的流动相作比较:甲醇 -0.05
mol/L 磷酸二氢钾中甲醇的体积分数范围为 25%～
32%时 ,盐酸小檗碱的保留时间由 30 min缩短到 8
min ,其中甲醇比例为 28%时 ,保留时间为 5 min ,此
时即可将其与其他杂质峰分开 ,又缩短了分析时间 ,
故选用甲醇-0.05 mol/L 磷酸二氢钾(82∶18)为流
动相 ,分离效果最佳。
参考文献
[ 1] 中国药典(2000年版一部)[ S] .250-251.
[ 2] 吕琳 , 张谨.HPLC法测定荡涤灵(冲剂)中盐酸小檗碱含
量[ J] .中草药 , 2000 , 31(1):28.
[ 3] 郑凤庚 , 顾孝宏.RP-HPLC 法测定西圆喉药散中盐酸小檗
碱含量[ J] .中国药业 , 2002 , 11(8):41.
[ 4] 王进.复方薤白胶囊中盐酸小檗碱含量测定[ J] .时珍国
医国药 , 2001 , 12(1):37.
(2004-06-24 收稿;2004-11-02修回)
(上接第 596页)
另槽用等量的浓氨溶液预平衡 15 min ,展开 ,取出 ,
晾干 。置 254 nm 下检视 ,供试品色谱中 ,在与对照
药材色谱相应的位置上 ,显相同的暗斑点;喷以稀碘
化铋钾试液[ 6 , 8] ,供试品色谱中 ,在与对照药材色谱
相应的位置上 ,显相同颜色的斑点 。见图2。
1、2 、3 供试品　4 对照品　左:紫外灯　右:日光灯
　　图 2　广金钱草生物碱薄层色谱
　　Fig.2 　TLC chromatogram of alkaloids in
Desmodium styracifolium(Osb.)Merr.
5　讨 论
上述试验结果表明 ,以薄层色谱方法鉴别广金
钱草黄酮和生物碱成分的分离效果较好 ,且专属性
较强 ,对具体成分的提取分离有一定的参考意义。
但由于本研究受到实验条件的限制 ,没有使用对照
品进行对照 ,有待进一步深入探讨。
参考文献
[ 1] 中国药典(2000版一部)[ S] .2000:32-33.
[ 2] 中药大辞典[ M] .上海:上海人民出版社 , 1998.321.
[ 3] 丁平 , 朱品业 ,现代实用本草(中册)[ M] .人民卫生出版
社 , 1998.431.
[ 4] 胡昌奇 , 施蛟 , 陈博 , 等.中间锦鸡儿黄酮类成分的研究
[ J] .药学学报 , 2003 , 38(8):599.
[ 5] 中国科学院上海药物研究所植物化学研究室编译.黄
酮化合物鉴别手册[ M] .北京:科学出版社 , 1981.253.
[ 6] 宵崇厚.中药化学[M] .上海:上海科技出版社 , 1997.78
[ 7] 周文华 , 杨辉荣 ,岳庆磊.生物碱提取和分离方法的研究
新进展[ J] .当代化工 , 2003 , 32(2):111.
(2004-05-29 收稿;2004-12-02修回)
598
广东药学院学报(ACAD J GCP)　2004 , 20(6)