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赶黄草不同溶剂提取物抑菌活性的初步探讨



全 文 :赶黄草不同溶剂提取物抑菌活性的初步探讨
雷 娇1,肖 茂2,朱 锐1,夏静若1,杨宗琪3
(1.川北医学院 医学检验学系,四川 南充637000;2.川北医学院 临床医学系,四川 南充637000;
3.川北医学院 病原中心,四川 南充637000)
摘 要:目的:研究赶黄草水提物及不同浓度醇提物的体外抑菌作用。方法:以抑菌圈直径为参考指标,
采用滤纸片法,测定赶黄草水提物及30%、50%、70%、90%醇提物对几种常见病菌的体外抑菌活性。
结果:各提取物对绿脓杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌均有不同程度的抑制作用,
而对白色念珠菌、新生隐球菌、大肠杆菌的抑制作用不明显。结论:赶黄草不同溶剂提取物对4种供试
菌均具有不同程度的抑制作用,是一种具有开发价值的天然抑菌资源。
关键词:赶黄草;水提物;醇提物;体外抑菌
中图分类号:R285.5   文献标识码:A   文章编号:1673-2197(2012)08-0029-02
收稿日期:2012-04-12
作者简介:雷娇(1990—),女,川北医学院学生,研究方向为医学检验。
通讯作者:杨宗琪(1953-),男,川北医学院教授,研究方向为病源微生物。
PreLiminary AntimicrobiaL Activity of Different SoLvent Extracts form Phethorum Chinense Pursh
Lei Jiao1,Xiao Mao2,Zhu Rui 1,Yang Zongqi 3
(1.Department of Laboratory Medicine,North Sichuan MedicaL CoLLege;Sichuan,China
2.Department of CLinicaL Medicine,North Sichuan MedicaL CoLLege,Pathogen Center,
North Sichuan MedicaL CoLLege,Nanchong,Sichuan 637000,China)
Abstract:Objective:To study the antibacteriaL effect of aqueous extract and ethanoL extract of Phethorum chinense Pursh in
vitro.Methods:According to the size of the antibacteriaL annuLus,the antibacteriaL effect of aqueous extract and 30%,50%,
70%,90%ethanoL extract of severaL common bacteria in vitro were determined by using fiLter paper method.ResuLts:Different
extracts from Phethorum chinense Pursh aLL showed different degrees of antibacteriaL effects on Pseudomonas aeruginosa,BaciL-
Lus stubtiLis,StaphyLococcus.Results:aureus and StaphyLococcus epidermidis,but they had no obvious inhibition effects on Mo-
niLia aLbican,Cryptococcus neoformans and Pseudomonas aeruginosa.Conclusion:The different soLvent extracts of Phethorum
chinense Pursh have different degrees of antibacteriaL effects on four kinds of tested strains,is a naturaL inhibition of the deveLop-
ment vaLue of resources.
Key Words:Phethorum Chinense Pursh;EthanoL Extract;Aqueous Extract;In Vitro Bacteriostasis
  赶黄草,学名扯根菜,别名水泽兰、水杨柳等,主要分布
在华北、华东、中南及陕西、四川和贵州等地[1,2]。
赶黄草含有没食子(GaLie acid)、槲皮素(Guercatin)、
2,6-二 羟 基 苯 乙 酮-4-0-β-D-吡 喃 葡 萄 糖 苷 (2,6-di-
hydroxyacetophenone-4-0-β-D-gLucside)、两个结构有待进
一步确证的化合物及丰富的黄酮类物质[3,4]。中医学认为,
赶黄草性温味甘,具有祛黄疸、利尿、活血、保肝、清热等功
效,以其为原料提取而成的肝素颗粒广泛应用于临床。近
几年来,国内外对赶黄草的化学成分及其对肝病的治疗作
用研究较多,但对该植物抑菌方面的作用,少有报道。本文
分别采用赶黄草的水提取物及乙醇提取物对多种菌进行体
外抑菌实验,拟观察赶黄草的体外抑菌活性,为临床提供理
论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
赶黄草,采于四川古蔺桂花乡。供试菌种:金黄色葡萄
球菌(StaphyLococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia co-
Li)、枯草芽孢杆菌(BaciLLus stubtiLis)、绿脓杆菌(Pseudo-
monas aeruginosa)、表皮葡萄球菌(StaphyLococcus epider-
midis)、新生隐球菌(Cryptococcus neoformans)、白色念珠
菌(MoniLia aLbican),皆由我校微生物实验室提供。
1.2 方法
1.2.1 赶黄草水提取法[5]
取赶黄草10g,加适量蒸馏水浸泡30min后加热煮沸,
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再用文火加热30min,过滤得第1次水提取物,将滤渣用同
样方法得到第2次、第3次水提取物,合并3次滤液,再浓缩
至10mL,得到赶黄草水提取物(即每毫升药液含1g干药)。
1.2.2 赶黄草乙醇提取法[6]
取赶黄草10g,共4份,分别置于500mL圆底烧瓶中,
然后加适量30%、50%、70%和90%乙醇浸泡30min后,
100℃加热30min后过滤。药渣再加适量同浓度乙醇溶液,
100℃加热30min后过滤。将两次滤液合并,用文火浓缩至
10mL,得到赶黄草相应浓度乙醇提取物(即每毫升药液含
1g干药)。
1.2.3 比浊管的配制[7]
取0.5mL浓度为0.048moL/L的BacL2加到99.5mL
浓度为0.18moL/L的 H2SO4 中配制成0.5个麦氏浊度的
比浊管(相当于细菌数为1.5×108个/mL),密封备用。
1.2.4 菌悬液的制备[7]
将供试菌接种至固体培养基上,细菌37℃培养24h,真
菌28℃培养48h后,用适量生理盐水将菌落洗下。用比浊
调管对比稀释至0.5麦氏浊度(1.5×108 个/mL),4℃保存
备用。
1.2.5 药敏纸片制备
取优质滤纸,用打孔器制备成直径6mm的滤纸片,置
于洁净干燥的培养皿中,121℃高压蒸汽灭菌20min。无菌
操作下将其分别浸在赶黄草的各种提取液及相应提取剂
中,备用。
1.2.6 药敏试验[9]
无菌操作下吸取0.2mL菌悬液于琼脂平板上(细菌用
MH琼脂平板,真菌用沙氏琼脂平板),均匀涂布,取含药滤纸
片紧贴于平板上,每个平板贴4片,每个菌种做三组平行,另
外每个菌种用含提取剂滤纸片做一份阴性对照,10min后倒
置于恒温培养箱中37℃培养,细菌培养24h,真菌培养48h。
使用十字交叉法测量抑菌圈直径,并记录数据。
2 结果
赶黄草水提取物及不同浓度乙醇提取物的体外抑菌效
果见表1。
表1 赶黄草提取液的抑菌效果比较
(抑菌圈直径mm)
   菌株
水提取物
醇提取物
30% 50% 70% 90%
白色念珠菌 — — — — —
新生隐球菌 — — — — —
大肠杆菌 — — — — —
绿脓杆菌 9.81  10.54  9.75  9.07  8.51
枯草芽孢杆菌 8.64  8.94  9.44  9.68  9.94
金黄色葡萄球菌 7.66  8.06  9.24  10.28  9.67
表皮葡萄球菌 — — 7.21  8.36  9.10
注:表中各抑菌圈直径为三组平行试验测得表皮葡萄球菌的抑菌圈直径
的平均值;“—”表示无抑菌圈产生;所用阴性对照组均无抑菌圈产生。
3 讨论
现代药理研究表明赶黄草有治疗黄疸、水肿、经闭、血
甭、带下、跌打损伤以及各型肝炎、胆囊炎、脂肪肝等作
用[10],对细菌与真菌的抑菌作用研究甚少。本实验用赶黄
草的30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、90%乙醇提取物与水
提取物,分别对白色念珠菌、新生隐球菌、大肠杆菌、绿脓杆
菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌在体外
进行抑菌效果观察。结果如表1所示,赶黄草水提物及醇
提物对绿脓杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡
萄球菌均有不同程度的抑制作用,对供试真菌无抑菌效果。
表1提示水与乙醇不同溶剂赶黄草提取物的抑菌活性
无明显差别;乙醇浓度与抑菌效果之间呈不均一的线性关
系,随着乙醇浓度的增高,赶黄草乙醇提取物对绿脓杆菌的
抑菌活性降低,对枯草芽孢杆菌和表皮葡萄球菌的抑菌活
性增强:30%乙醇提取物对绿脓杆菌抑菌效果最好,90%乙
醇提取物对枯草芽孢杆菌和表皮葡萄球菌体外抑菌效果较
好。
随着抗生素的广泛应用,致使多重耐药菌株的出现,细
菌耐药性的问题已日益突出。中草药以其价格低廉,毒副
作用小,且很少产生耐药性等独特优势越来越受到外界重
视,中草药的抑菌作用已受到重视。目前,对赶黄草的抑菌
作用研究较少,进一步对其抑菌机制、抑菌成分及其对更多
其他菌种的抑菌活性进行研究将具有更大的价值。
参考文献:
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(责任编辑:余 婷)
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