全 文 :现代医药卫生 2014年7月30日 第30卷第14期 J Mod Med Health,July 30,2014,Vol.30,No.14
赶黄草为虎耳草科扯根菜属植物扯根菜(Penthorum Chinense
Pursh.)的干燥地上部分,为苗族民间草药,收载于中华人民共和
国卫生部部颁标准中药成方制剂十三册附录中。学名扯根菜,别
名水泽兰、水杨柳等,主要分布在华北、华东、中南及陕西、四川和
贵州等地 [1-2]。现大量种植于四川省古蔺县境内。民间以其全草入
药,其全草性平、味苦、微辛,无毒,具有清热解毒、退黄化湿、活血
散瘀、利水消肿之功效,临床广泛用于治疗黄疸、水肿、经闭、血
崩、带下、跌打损伤,以及各型肝炎、胆囊炎、脂肪肝等症 [3]。赶黄草
中含有黄酮类、有机酸类等成分,其中稳定存在的为没食子酸、槲
皮素[4]。研究表明,这 2种成分具有抗乙型肝炎病毒和保肝的作用[5]。
常用的提取方法为回流法、超声波法、冷浸法等。本文以槲皮
素提取率为指标,对上述 3 种方法进行了比较研究。槲皮素的测
定方法现有紫外分光光度法、高效液相色谱法等。其中紫外分光
光度法具有样品处理简单、分析速度快、分析结果准确等优点,因
此,本次研究选择紫外分光光度法作为测定槲皮素的方法。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 仪器 UV1700PC 型紫外可见分光光度计(上海凤凰光学
科仪有限公司);KQ3200B 型超声波清洗器(昆山市超声仪器有
限公司);FC 104 电子天平(上海精密仪器公司);B-220 恒温水浴
锅(上海亚荣生化仪器厂)。
1.1.2 试剂 赶黄草(购于四川泸州荷花中药饮片公司);槲皮素
标准品(中国药品生物制品检定所,批号:100081-200406);水为
双蒸水;试剂均为分析纯。
1.2 方法
1.2.1 提取方法
1.2.1.1 超声法 取赶黄草药材粉末 0.3 g,加入 15 mL 95%乙醇,
称质量,超声提取 30 min,超声功率 120 W,用 95%乙醇补足减失
的质量,过滤,弃去初滤液,取续滤液 0.4 mL 于 10 mL 容量瓶中,
加入 95%乙醇至刻度,即得供试品溶液。
1.2.1.2 回流法 取赶黄草药材粉末 0.3 g,加入 15 mL 95%乙醇,
称质量,回流提取 2 h,放冷至室温,用 95%乙醇补足减失的质量,
过滤,弃去初滤液,取续滤液 0.4 mL 于 10 mL 容量瓶中,加入 95%
乙醇至刻度,即得供试品溶液。
1.2.1.3 冷浸法 取赶黄草药材粉末 0.3 g,加入 15 mL 95%乙醇,
称质量,冷浸 24 h,用 95%乙醇补足减失的质量,过滤,弃去初滤
液,取续滤液 0.4 mL 于 10 mL 容量瓶中,加入 95%乙醇至刻度,
即得供试品溶液。
1.2.2 槲皮素含量测定
1.2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的槲皮素对
照品适量,加 95%乙醇配成 0.543 mg/mL 的槲皮素对照品溶液。
1.2.2.2 测定波长的选择 精密吸取槲皮素对照品溶液 0.2 mL,
用 95%乙醇定容至 10 mL,以 95%乙醇为空白,在 200~800 nm 处
对槲皮素标准溶液进行扫描。扫描结果显示槲皮素在 376 nm 处有
最大吸收,因此,本次研究选择 376 nm 波长为测定波长。
1.2.2.3 标准曲线的绘制 取 0.543 mg/mL 的槲皮素标准溶液
0.05、0.08、0.11、0.14、0.17、0.20 mL 于 10 mL 容量瓶中,用 95%乙醇
稀释到刻度,摇匀作为测定溶液。以 95%乙醇为空白,在 376 nm 处
测定其吸光度,以浓度(μg/mL)为横坐标(X),吸光度为纵横坐标
(Y),绘制标准曲线,计算回归方程。
1.2.2.4 精密度试验 取槲皮素对照品溶液,以 95%乙醇为空白,
在 376 nm 处重复测定 6 次 ,记录吸光度 ,并求相对标准偏差
(RSD)值。
1.2.2.5 稳定性试验 取样品溶液(95%乙醇、超声 30 min 制得),
赶黄草中槲皮素提取方法比较研究
柯发敏,侯杰荣,刘 剑,兰 才,李菲菲(泸州医学院药学院,四川泸州 646000)
【摘 要】 目的 从 3 种常用提取方法中选择一种提取赶黄草中槲皮素的最佳方法。 方法 选择紫外分光光度
法,以槲皮素含量为指标,分别对回流法、超声法、浸溃法 3 种常用提取方法对赶黄草药材的提取效果进行比较。 结果
槲皮素在 2.72~10.86μg/mL时浓度与吸光度线性关系良好;回流法、超声法、浸溃法 3种提取方法的提取效率分别为 1.11%、
1.01%、0.8%。 结论 该研究条件下赶黄草中槲皮素的最佳提取工艺为回流法。
【关键词】 虎耳草科; 槲皮素; 提取法; 中草药
doi:10.3969/j.issn.1009-5519.2014.14.016 文献标识码: A 文章编号: 1009-5519(2014)14-2118-02
Comparison study of different extraction methods for quercetin glycoside from Penthorum chinense Pursh Ke Famin,
Hou Jierong,Liu Jian,Lan Cai,Li Feifei(Department of Pharmacy,Luzhou Medical College,Luzhou,Sichuan 646000,China)
【Abstract】 Objective To select optimum extraction process of quercetin glycoside from Penthorum chinense Pursh from
3 common extractions methods. Methods Ultraviolet(UV) spectrophotometry was used to compare the extraction effects of Pentho-
rum chinense Pursh by 3 common extraction methods of reflux method,ultrasonic method and cold-maceration with the content of
quercetin glycoside as index. Results The concentration and absorbance were in good linear relationship when the quercetin
glycoside was within 2.72-10.86 μg/mL. Extraction ratios were obtained as follows:1.11%,1.01% and 0.8% respectively for re-
flux method,ultrasonic method and cold-maceration. Conclusion The study demonstrates that the best extraction process for
quercetin glycoside from Penthorum chinense Pursh is reflux method.
【Key words】 Saxifragaceae; Quercetin; Extraction; Drugs,Chinese herbal
·短篇论著·
作者简介:柯发敏(1983-),女,四川雅安人,硕士研究生,主要从事药物分析的教学与科研;E-mail:120597946@qq.com。
·2118·
现代医药卫生 2014年7月30日 第30卷第14期 J Mod Med Health,July 30,2014,Vol.30,No.14
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(收稿日期:2014-03-28)
以 95%乙醇为空白,在 376 nm 处每隔 10 min测定 1 次吸光度,求
RSD 值。
1.2.2.6 样品含量测定 取样品溶液,以 95%乙醇为空白,在 376 nm
处测定其吸光度,根据标准曲线计算样品溶液中槲皮素的含量。
2 结 果
2.1 线性关系考察 回归方程 Y=0.068 1X-0.000 8,r=0.999 6。测
定结果见表 1。结果表明,槲皮素在 2.72~10.86 μg/mL 时浓度与吸
光度线性关系良好(图 1)。
2.2 精密度试验 槲皮素对照品溶液 RSD为 0.02%,表明仪器精
密度良好,可以满足测定的需要。
2.3 稳定性试验 槲皮素样品溶液 RSD为 0.78%。表明槲皮素在
60 min 内稳定,可以满足测定需求。
2.4 样品溶液含量测定 3 种提取方法得到的槲皮素含量顺序
由高到低为:回流法(1.11%)、超声法(1.01%)、冷浸法(0.80%)。
说明回流法是槲皮素的最佳提取方法。
3 讨 论
槲皮素是一种天然的黄酮类化合物,其具有降低氧化应激,抗
肿瘤 [6]及清除自由基的作用,还具有抗炎、抗菌、抗病毒、降糖降
压、免疫调节及心血管保护作用等 [7]。体外研究还发现槲皮素具有
一定的抗人类免疫缺陷病毒(HIV)作用,其机制主要是通过抑制
HIV 逆转录酶、蛋白酶和整合酶等途径而产生抑制 HIV 复制的
作用[8]。研究还发现槲皮素能治疗关节炎,止痛消炎等方面有潜在
的疗效[9-10]。
3 种方法中槲皮素的收率回流法最高,其次为超声法,冷浸
法最低。超声波法、回流法和冷浸法虽然所用溶剂相同,但超声波
可以破坏赶黄草细胞壁结构,使内容物容易溶出 [11],回流法加热,
温度高也易于槲皮素溶出,冷浸法温度为室温,需要的时间长。综
合以上因素,可以看出超声波和温度对槲皮素溶出影响较大,今
后应就这些因素对槲皮素提取率的影响进行进一步研究。经查阅
部分文献 [12],发现有报道超声法的提取效率较好,但本次研究发
现,3 种提取方法中,以回流法的提取效率最高。回流法具有生产
周期短、操作简便等优势,故本次研究中最终选择回流法为提取
方法。
参考文献
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(收稿日期:2014-03-13)
表 1 槲皮素线性范围考察结果
浓度(μg/mL)
吸光度 0.182 0.283 0.391 0.517 0.619
4.34 5.972.72
0.731
7.60 9.23 10.86
浓度(μg/mL)
图 1 槲皮素标准曲线
0 2 4 6 8 10 12
0.0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
Y=0.068 1X-0.000 8
r=0.999 6
吸
光
度
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·2119·