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黑参和生晒参中人参皂苷的比较研究



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(收稿日期:2012-02-17)
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文章编号:1673-2995(2012)03-0135-03 ·论 著·
黑参和生晒参中人参皂苷的比较研究
李月茹,乔 雪 (吉林农业大学农业质量标准与检测技术研究中心,吉林 长春 130118)
摘 要:目的 采用高效液相法测定黑参和生晒参中人参皂苷 Rf、Rg2、Rh1、Rc、Rb2、Rb3、Rd 的含量,并建立
同时测定人参皂苷含量的方法。方法 采用 Agilent Eclipse XDB-C18(4. 6 mm × 250 mm,5 μm)色谱柱,以乙
腈-水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为 1. 0 mL /min,检测波长 203 nm,以外标法进行定量。结果 黑参中 7 种
人参皂苷 Rf、Rg2、Rh1、Rc、Rb2、Rb3、Rd 含量分别为 0. 06%、0. 05%、0. 03%、0. 02%、0. 40%、0. 08%、0. 23%。
生晒参中人参皂苷 Rg1、Re、Rf、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、Rd 含量分别为 0. 336%、0. 298%、0. 071%、0. 765%、
0. 617%、0. 433%、0. 086%、0. 279%。结论 首次同时对黑参和生晒参中的人参皂苷进行了含量测定,可作为
参类药材同时测定人参皂苷含量的方法。
关 键 词:黑参;生晒参;人参皂苷;高效液相
中图分类号:R284 文献标识码:A
Determination of ginsenosides in black ginseng and dry radix ginsen
LI Yue-ru,QIAO Xue (Agricultural Quality Standard and Testing Technology Research Center,Jilin Agricultural U-
niversity,Changchun,Jilin Province,130118,China)
Abstract:Objective To establish the method for determining simultaneously ginsenosides Rf,Rg2,Rh1,Rc,Rb2,
Rb3,Rd and their contents in black ginseng and dry radix ginseng by HPLC. Methods HPLC was carried out on
agilent eclipse XDB-C18(4. 6 mm × 250 mm,5 μm)with acetonitrile-water,gradient elution,the volume of flow 1. 0
mL /min and detection wavelength 203 nm. Results The contents of many kinds of ginsenosides in black ginseng
were 0. 06%,0. 05%,0. 03%,0. 02%,0. 40%,0. 08%,0. 23% . The contents of many kinds of ginsenosides in dry
radix ginseng were 0. 336%,0. 298%,0. 071%,0. 765%,0. 617%,0. 433%,0. 086%,0. 279% . Conclusion The
contents of ginsenosides ingredients in black ginseng and dry radix ginseng were determined for the first time. The es-
tablished method can be used in determining the contents of multiple ginsenosides in herb ginseng simultaneously.
Key words:black ginseng;dry radix ginseng;ginsenosides;HPLC
2000 多年以前在亚洲的很多地区,人参(五加科
人参属,梅伊尔)传统地被当做一件昂贵的、珍贵的
医药药品[1-2]。人参皂苷,人参中含有的起主要作用
作者简介:李月茹(1964 -) ,女(汉族) ,高级实验师,硕士.
的成分,具有抗糖尿病、抗炎和抗肿瘤的作用[3]。迄
今为止,从人参中已分离出 30 多种不同的人参皂苷,
各具有不同的药理学作用。基于苷元不同,人参皂苷
被分成两类:原人参二醇(Rb1、Rb2、Rc、Rd、Rg3、Rs3)
和原人参三醇(包括 Re、Rg1 和 Rf)
[4-6]。
—531—
第 33 卷 第 3 期
2012 年 06 月
吉 林 医 药 学 院 学 报
Journal of Jilin Medical College
Vol. 33 No. 3
Jun. 2012
生晒参是鲜人参经干燥加工成的干参,属平性,
味甘,微温,无毒。生晒参性温而补,大补元气,益血
生津,具有一定的耐低温能力,对于治疗慢性心力衰
竭有很好的效果。
黑参是用白参在 98 ℃的高温下循环蒸煮 9 次而
得的人参深加工产品,含有多种皂苷类成分,药理作
用与生晒参药理作用相似[7]。国内有关人参皂苷的
报道很多,但黑参与生晒参中人参皂苷类成分的比较
研究未见报道,目前韩国对黑参的研究比较深
入[8-11]。本研究采用 HPLC 法对生晒参和实验室自
制黑参中的单体人参皂苷 Rf、Rg2、Rh1、Rc、Rb2、Rb3、
Rd等进行了含量测定和比较,建立了同时测定黑参
中 7 种人参皂苷的含量测定方法,为黑参的进一步研
究和质量评价提供科学参考,同时分析研究了两种人
参产品皂苷成分的差异。
1 材料与方法
1. 1 材料与试剂
人参,采于中国吉林省抚松县,为 5 年生人参根,
经吉林农业大学郑毅男教授鉴定为人参(Panax gin-
seng C. A. Meyer.) ;黑参,用前述 5 年生人参加工制
成的人参制品;生晒参为前述 5 年生人参干燥的根;
乙腈(色谱纯)美国 Sigma 公司;超纯水;甲醇(色谱
纯)美国 Sigma 公司;正丁醇、乙醚为分析纯;人参皂
苷 Rf、Rg2、Rh1、Rc、Rb2、Rb3、Rd 由中国药品生物制
品检定所提供。
1. 2 仪器与设备
DHG-9140A型电热恒温鼓风干燥箱,上海精宏
实验设备有限公司;YXQ-LS-50SⅡ立式高压蒸汽灭
菌器,上海博迅医疗设备厂;AL104 电子天平,梅特
勒-托利多仪器有限公司;Agilent 1200Series 高效液
相色谱仪(HPLC) ,安捷伦公司。
1. 3 黑参加工方法
选取 5 年生全须人参若干,要求:大小适中、体长
10 cm以上、单支重量达到 40 g 以上、无痕斑、无霉
斑。清洗除杂,自然通风晾干,40 ℃干燥 12 h,将干
燥好的人参先用 100 ℃蒸汽预热 2 h,平铺放入蒸汽
灭菌锅中 115 ℃加热蒸制 2 h,蒸制完成后取出放入
烘箱中 40 ℃干燥 12 h,如此反复 9 次即得黑参。所
得黑参呈黑色且有人参特有的香气,掰开黑参色泽均
匀呈黑色,无碳糊味。本工作所采用试验材料均采用
本方法制备。
1. 4 色谱条件
采用 Agilent 1200 高效液相色谱仪,配用紫外检
测器,采用梯度洗脱方式进行,检测波长为 203 nm。
色谱 柱 为 Agilent Eclipse XDB-C18 (4. 6 mm ×
250 mm,5 μm) ,进样体积 10 μL,柱温 40 ℃,流动相
流速为 1. 0 mL /min,流动相为乙腈(A)和水(B)按不
同体积比混合溶液,梯度洗脱程序如表 1 所示。
表 1 流动相梯度洗脱程序
时间 /min 乙腈(A)/% 水(B)/%
0 ~ 25 19 ~ 20 81 ~ 80
25 ~ 35 20 ~ 31 80 ~ 69
35 ~ 60 31 ~ 40 69 ~ 60
60 ~ 90 40 ~ 80 60 ~ 20
90 ~ 120 80 ~ 100 20 ~ 0
1. 5 样品含量测定
1. 5. 1 对照品溶液的制备
精密称定人参皂苷 Rg2、Re、Rf、Rg2、Rh1、Rc、
Rb2、Rb3、Rd 各 2. 5 mg、2. 3 mg、2. 4 mg、2. 3 mg、
2. 1 mg、3. 4 mg、2. 6 mg、3. 0 mg、3. 9 mg 分别加色谱
甲醇定容置 10 mL量瓶中,摇匀,待测。
1. 5. 2 供试样溶液制备
精密称定生晒参和黑参样品约 1 g,用中性滤纸
包好,加乙醚索式提取,微沸回流提取 1 h,供试样品
药包挥干乙醚溶剂,加入甲醇浸泡过夜,80 ℃水浴回
流 8 h,以人参皂苷提尽为准(定性鉴别阴性)。合并
甲醇提取液,减压蒸馏,少量甲醇提取液置蒸发皿中,
水浴蒸干。用蒸馏水复溶,加水 30 ~ 40 mL置分液漏
斗中,用水饱和的正丁醇 30 mL 进行萃取,共 4 次。
取上层液蒸干,加甲醇溶解后,转移至 10 mL量瓶中,
用甲醇稀释至刻度,摇匀,备用。
1. 5. 3 样品含量测定
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液 20 μL,
按上述色谱条件测定,以外标法计算含量。
2 结 果
经测定,黑参中 7 种人参皂苷 Rf、Rg2、Rh1、Rc、
Rb2、Rb3、Rd 含量分别为 0. 06%、0. 05%、0. 03%、
0. 02%、0. 40%、0. 08%、0. 23%,高效液相色谱图见
图 1、2。生晒参中人参皂苷 Rg1、Re、Rf、Rg2、Rc、
—631— 吉林医药学院学报 2012 年 06 月 第 33 卷
Rb2、Rb3、Rd 含 量 分 别 为 0. 336%、0. 298%、
0. 071%、0. 765%、0. 617%、0. 433%、0. 086%、
0. 279%,高效液相色谱图见图 3。
1. Rg1;2. Re;3. Rf;4. Rg2
5. Rc;6. Rb2;7. Rb3;8. Rd
图 1 标准品 HPLC谱图 图 2 黑参样品 HPLC谱图 图 3 生晒参样品 HPLC谱图
3 讨 论
本研究首次采用 HPLC 法对黑参所含的 7 种人
参皂苷 Rf、Rg2、Rh1、Rc、Rb2、Rb3、Rd 进行了含量测
定,通过分析发现,黑参中 Rb2、Rd 含量相对较高
(0. 4%、0. 23%) ,但其他人参皂苷 Rf、Rg2、Rh1、Rc、
Rb3 含量较少。黑参 HPLC 谱图中还出现很多未知
峰,其出峰时间较晚,说明这些皂苷可能是人参皂苷
的降解成分,需要借助液质联用及核磁共振等技术对
其成分和结构进行鉴定。生晒参中人参皂苷 Rg2、
Rc、Rb2 含量相对较高分别为 0. 765%、0. 617%、
0. 433%。
在生晒参中的人参皂苷 Rg1、Re 在黑参中可能
完全被转化,根据实验结果可看出生晒参中的人参皂
苷 Rg2、Rc含量要比黑参中人参皂苷 Rg2、Rc 含量要
高 0. 7%、0. 5%。人参皂苷 Rg2 可以改善人体记忆
障碍功能,因此应用生晒参可以制成一类新型的抗痴
呆药物。而黑参中人参皂苷大部分转化为稀有皂苷
原因可能是人参在反复的加热中常规皂苷被转化。
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