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生晒参乙醇提取物直接酶法转化及液质分析
喻春皓1,2, 吴 洁1
(1. 淮阴工学院 生命科学与化学工程学院 生物中药与生物催化课题组,江苏 淮安 223002;2. 南京大学淮
安高新技术研究院,江苏 淮安 223005)
收稿日期:2011-10-13
基金项目:江苏省自然科学基金 (BK2008194)
作者简介:喻春皓 (1974—) ,男,副教授,博士,主要从事生物中药、中药生物加工及生物催化。Tel: (0517)83591165,E-mail:yuch@
hyit. edu. cn
摘要:目的 比较糖苷酶制剂直接催化水解生晒参乙醇提取物中人参皂苷部位转化制备高活性次生皂苷的能力。方法
利用 7 种糖苷酶制剂直接水解生晒参乙醇提取物中天然皂苷部位,建立 HPLC法评价其转化能力及采用 LC /MS联用分
析对特征峰加以指认。结果 建立的 HPLC方法可同时测定 8 种皂苷成分。糖苷酶制剂对生晒参乙醇提取物中天然皂
苷部位转化能力分别为蜗牛酶 SE07,62. 1%;果胶酶 PE05,62. 1%;果胶酶 PE06,51. 6%;白酒酶 LE04,31. 5%;纤
维素酶 CE02,22. 6%;纤维素酶 CE01,9. 7%。结论 糖苷酶制剂可以直接转化人参皂苷部位成高活性次生皂苷部
位。蜗牛酶与果胶酶可以规模化制备次生皂苷。
关键词:生晒参;人参皂苷;次生皂苷;糖苷酶制剂;CK;液质联用
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2012)09-1747-06
Directly enzymatic conversion of alcohol extracts from sun-dried Panax ginseng
and LC /MS analysis
YU Chun-hao1,2, WU Jie1
(1. Group of Bio TCM and Biocatalysis,Faculty of Life Science & Chemical Engineering,Huaiyin Institute of Technology,Huai an 223002,China;
2. Huaian High-Tech Research Institute of Nanjing University,Huaian 223005,China)
ABSTRACT:AIM To compare the conversion of saponins in alcohol extracts from sun-dried Panax ginseng by
the catalysis of seven glycosidase preparations to the secondary saponin on industrial scale. METHODS Seven
glycosidase preparations were used to directly hydrolyze ginseng saponins in alcohol extracts from sun-dried Panax
ginseng and to produce secondary saponins. HPLC analysis was developed to evaluate the conversion ability of gly-
cosidase and LC /MS method was established to identify the chromatogram peaks. RESULTS HPLC could be
used to simultaneously determine eight ginseng saponins in the extracts. The conversion ability of glycosidase to sec-
ondary saponins in the alcohol extracts was as follows:snail enzyme SE07 reached 62. 1%,pectinase PE05 reached
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62. 1%,pectinase PE06 reached 51. 6%,liquor enzyme LE04 reached 31. 5%,cellulase CE02 reached 22. 6%
and cellulase CE01 reached 9. 7% . CONCLUSION The glycosidases are able to directly transform the ginseng
saponins into secondary saponins. Snail enzyme and pectinase can prepare secondary saponins in mass production.
KEY WORDS:sun-dried Panax ginseng;ginseng saponins;secondary saponins;glycosidase;CK;LC /MS
人参为五加科人参属植物人参 Panax ginseng
C. A. Meyer的干燥根,是具有 4 000 多年药用历史
的名贵中药材,在中国、韩国、日本、朝鲜及其它
亚洲国家被广泛用于滋补、保健和医疗。生晒参为
一种商品人参,为人参根挖出后洗净晒干的产品。
人参皂苷 (ginseng saponins )是人参的主要活性
成分,已确认的皂苷成分达 30 种之多,按其结构可
分为四环三萜达玛烷型皂苷和五环三萜齐墩果酸型
皂苷两个大类[1-3]。其中达玛烷型皂苷又分为原人
参二醇型皂苷和原人参三醇型皂苷,人参皂苷 Ra1、
Ra2、Ra3、Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、 F2、Rg3、
Rh2、CK、原人参二醇 (protopanaxdiol,PPD)等
为原人参二醇型皂苷,原人参三醇型皂苷主要有
Re、Rg1、Rg2、F1、F3、Rf、20(S)-glc-Rf、Rh1、
原人参三醇 (protopanaxtriol,PPT)等,而人参皂
苷 R0 为齐墩果酸型皂苷。现代药理研究表明,人
参药材中存在的天然皂苷,如 Ra1、Ra2、Ra3、
Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rg1 等,口服时均
为前药,不能直接吸收进入血液,而是在肠道菌群
的生物催化转化作用下转化为次生皂苷 Rg3、Rh2、
CK、Rh1 等,或者进一步转化为苷元 PPD、PPT,
方能进入血液参与药效的发挥[4],抑制癌细胞转
移,诱导肿瘤细胞凋亡,为极具开发前景的抗癌和
抗肿瘤药物。
由于 Rg3、Rh2、CK、Rh1 等次生皂苷在人参
药材中含有量非常低,甚或根本不含有,其制备方
法备受关注,主要有化学降解和生物转化等制备方
法。宋长春等[5]用国产西洋参茎叶总皂苷直接碱
催化水解制备 Rh1 和 Rh2。陈燕萍等
[6]用 20(S)-
原人参二醇组皂苷碱催化、热回流制备 Rh2。但化
学法有污染环境、副产物多等诸多缺点。相比之
下,生物酶法转化具有专一性、产物构象单一、产
率高等优点。因此,本实验结合前期对人参茎叶总
皂苷的酶法修饰的基础[7]之上,选用糖苷酶制剂对
生晒参乙醇提取物进行酶法转化研究,并对转化产
物进行液质分析。
1 材料
高效液相色谱仪 Agilent 1100系列 LC/MS液质联
用系统 (美国安捷伦科技有限公司),包括四元梯度
泵、在线脱气装置、自动进样器、DAD检测器、柱温
箱、电喷雾接口、四极杆质谱、ChemStation色谱工作
站、6300 Series Ion Trap LC/MS分析软件。
生晒参饮片购自安徽亳州药材市场,经淮阴工
学院制药工程系张海江副教授鉴定为五加科人参属
植物人参 Panax ginseng的生晒干燥根。
人参皂苷 R1、Rb1、Re、Rg1、Rg3、Rc、Rd、
Rh2 等皂苷对照品均购自金测分析技术 (天津)有
限公司,其纯度均为 98%。纤维素酶 (CE01)、果
胶酶 (PE05)、白酒酶 (LE04)购自天津佳益酶
制剂公司,纤维素酶 (CE02)、果胶酶 (PE06)、
酸性淀粉酶 (AE03)购自天津利华酶制剂公司,
蜗牛酶 (SE07)购自上海根生生物科技有限公司。
色谱纯乙腈和冰乙酸均购自美国 Tedia 公司,纯水
为娃哈哈纯净水,其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 液相色谱和质谱分析条件 色谱条件参考文献
[7]并适当调整。色谱柱 Agilent Zorbax SB-C18 (250
mm ×4. 6 mm,5 μm) ,保护柱 Agilent Zorbax SB-C18
(12. 5 mm ×4. 6 mm,5 μm) ,以 1. 0 mmol /L乙酸-乙
腈溶液 (A 相)和 1. 0 mmol /L 乙酸-水溶液 (B
相)为流动相,梯度洗脱 (0 ~ 25 min,18% ~ 30%
A;25 ~40 min,30% ~50%A;40 ~ 50 min,50% ~
70%A;50 ~ 60 min,70% ~ 82% A;60 ~ 75 min,
82% ~100%A;75 ~77 min,100% ~18%A;77 ~87
min,18% ~18%A) ,体积流量 1 mL /min,DAD检测
器,检测波长 203 nm,柱温 30 ℃,进样量 10 μL。
采用负离子模式进行质谱分析,干燥氮气体积
流量 10 L /min,干燥温度350 ℃,喷雾气体氮气压力
60 psi (1 psi = 6. 895 kPa) ,毛细管电压3 500 V,扫
描的质荷比范围 100 ~1 400 m/z。
2. 2 溶液制备
2. 2. 1 酶液的制备 分别取 7 种固体酶制剂
1. 0 g,溶于 10 mL 1. 0 mmol /L pH 4. 5 磷酸缓冲液
(其中含 10%乙醇) ,充分混匀,1 000 r /min 低温
离心,取上清液备用。
2. 2. 2 生晒参乙醇提取物的制备 称取 1. 0 kg 生
晒参饮片,用 6 倍量 70%乙醇提取 3 次,合并药
液,趁热过滤处理,减压回流除去乙醇,浓缩至
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1. 2 L,再次过滤处理得滤液,并蒸气灭菌处理备
用,用 8 倍量 1. 0 mmol /L pH 4. 5 磷酸缓冲液稀释,
记为生晒参提取物 SGE。
2. 2. 3 参比样品的制备 准确取 10 mL 生晒参提
取物 SGE,加入 1. 0 mL磷酸缓冲液 B,在180 r /min
37 ℃恒温水浴摇床中培养 48 h,用 11 mL水饱和的
正丁醇萃取,取 5 mL 超纯水洗正丁醇相 3 次,
80 ℃减压回收正丁醇至干得残渣,用 10 mL 甲醇
充分溶解残渣,并经 0. 45 μm有机系滤膜过滤处理
为 HPLC分析备用,作为参比样品 E00。
2. 2. 4 酶法转化样品的制备 准确取 10 mL 生晒
参提取物 SGE,分别加入 2. 2. 1 项中的酶液 1 mL,
其余处理同 2. 2. 3 项,得系列酶法转化样品。
2. 2. 5 对照品皂苷溶液制备 分别准确称取 8 种
皂苷对照品,用甲醇配制成单标皂苷溶液,用作定
性分析。准确称取 8 种皂苷对照品一同置于 5 mL
量瓶中,用甲醇溶解定容至 5 mL,经 0. 45 μm有机
系滤膜过滤处理,其最终质量浓度为:NR1,
0. 543 5 mg /mL;Rb1,0. 652 2 mg /mL;Rc,0. 179 3
mg /mL;Rd,0. 451 1 mg /mL;Re,0. 157 6 mg /mL;
Rg1,0. 402 2 mg /mL;Rg3,0. 141 3 mg /mL;Rh2,
0. 592 4 mg /mL。即得 8 种皂苷的混合对照品溶液,
记为 GMS混标溶液。
2. 3 线性关系考察 取 2. 2. 5 项中配制的 GMS 混
标溶液,取 0. 5、1. 0、2. 0、4. 0、5. 0、10、15 μL
等不同的进样体积,按照 2. 2. 1 项中的色谱条件进
行测定。以进样量对峰面积积分值进行回归处理,
得 8 种皂苷的对照品曲线,见表 1。
表 1 8 种皂苷活性成分的对照品曲线
Tab. 1 Standard curves of eight ginsenosides
皂苷 对照品曲线方程 R2 线性范围 /μg
R1 y = 356. 84x + 17. 73 0. 998 8 0. 271 7 ~ 8. 695 7
Re /Rg1 y = 379. 93x + 8. 24 0. 999 6 0. 279 9 ~ 8. 956 3
Rb1 y = 309. 21x + 3. 22 0. 999 1 0. 326 1 ~ 10. 434 8
Rc y = 249. 1x + 13. 42 0. 997 5 0. 089 7 ~ 2. 869 6
Rd y = 369. 42x + 9. 88 0. 999 9 0. 225 5 ~ 7. 217 4
Rg3 y = 426. 83x + 3. 37 0. 999 7 0. 070 7 ~ 2. 260 9
Rh2 y = 602. 53x + 0. 37 1. 000 0 0. 296 2 ~ 9. 478 3
2. 4 方法学考察 参考文献[7],对所建立测定方
法进行精密度、稳定性、重复性、加样回收率等考
察分析,结果表明所测试项均符合要求。
2. 5 数据处理 单体皂苷含有量 =样品溶液中各
单体皂苷的质量 /10 mL 生晒参提取物相当的生晒
参质量 × 100%。总含有量为样品中检出的 Rg1、
Re、Rb1、Rc、Rd等 5 种皂苷含有量之和。总转
化能力 = (未加酶样品中皂苷总含量 -转化样品
中 5 种皂苷总含有量) /未加酶样品中皂苷总含有
量 × 100%。
2. 6 结果
2. 6. 1 不同糖苷酶制剂转化生晒参乙醇提取物的
液相色谱分析 按 2. 2. 4 项制备样品,考察不同糖
苷酶制剂对生晒参乙醇提取物的转化影响,结果见
图 1,其主要特征色谱峰面积变化见表 2。7 种酶制
剂对 8 种皂苷的含有量变化影响见表 3,其中 6 种
糖苷酶制剂的总转化能力顺序为 SE07 = PE05 >
PE06 > LE04 > CE02 > CE01,而 AE03 转化时因提
取物中的其它皂苷被转化成 Rc和 Rd使得计算的 5
种皂苷总含有量高于未加酶样。其中蜗牛酶 SE07
对生晒参乙醇提取物中天然皂苷的转化作用较强,
转化生成了系列新化合物。
a. E00 b. CE01 c. CE02 d. AE03 e. LE04
f. PE05 g. PE06 h. SE07 i. GMS
图 1 糖苷酶制剂转化生晒参乙醇提取物后的
色谱图谱比较
Fig. 1 HPLC chromatograph of alcohol ex-
tracts from sun-dried Panax ginseng
converted with glycosidase
2. 6. 2 液质联用法色谱峰指认 采用负离子模
式[8-10]按 2. 1 项对蜗牛酶 SE07 转化样品进行液质
联用分析,并与未加酶样品 (E00)及混标溶液
(GMS)的液质分析图谱比较,对各保留时间下物
质峰进行指认,结果见表 4。
3 讨论
本实验通过 HPLC分析比较了 7 种糖苷酶制剂
对生晒参乙醇提取物中天然皂苷成分的转化能力,
与未加酶样品比较 7 种糖苷酶制剂对生晒参乙醇提
取物中的天然皂苷成分均有一定的转化作用,但各
有侧重。与对照品比对分析,生晒参乙醇提取物
经纤维素酶CE01、CE02及酸性淀粉酶AE03催化反
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表 2 糖苷酶制剂对生晒参乙醇提取物转化液的液相色谱特征峰面积的影响
Tab. 2 Effects of glycosidase on peak area of active components in converted solutions
人参
皂苷
保留时间 /
min
积分面积 /mAU* S
E00 CE01 CE02 AE03 LE04 PE05 PE06 SE07
NR1 15. 7 # # # # # # # #
Rg1 + Re 18. 0 2247. 1 2396. 3 2038. 6 2423. 2 2170. 3 1648. 6 2163. 8 1746. 3
20. 8 # # # # # 257. 0 # #
29. 1 # # # # # 204. 5 # #
30. 8 370. 2 339. 7 213. 7 364. 6 242. 3 214. 5 259. 4 #
31. 2 # # # # # 402. 3 # #
32. 2 226. 1 193. 2 # 202. 7 170. 5 136. 9 # #
Rb1 32. 5 1029. 7 259. 8 138. 2 460. 8 307. 3 # 120. 3 #
Rc 33. 4 900. 2 567. 0 286. 2 765. 3 337. 7 106. 5 118. 7 71. 0
33. 8 # # 193. 4 # 154. 0 165. 5 116. 5 366. 2
34. 2 526. 9 444. 5 467. 4 547. 3 280. 3 # # #
Rd 35. 9 405. 4 1163. 0 1285. 6 1228. 5 529. 2 # 233. 5 #
36. 1 # # # # # 222. 1 146. 0 131. 2
37. 1 # # # # 431. 8 # # #
38. 2 # 133. 7 # # 301. 2 80. 9 87. 1 #
38. 9 # 114. 2 175. 2 # 317. 4 194. 4 267. 6 #
41. 6 # 229. 7 436. 4 # 496. 7 785. 1 1165. 8 81. 9
43. 2 # # # # # # # 93. 5
43. 5 # # # # # # # 119. 2
44. 8 # # # # # 147. 9 # #
Rg3 44. 2 # # # # # # # #
45. 5 253. 4 253. 6 292. 7 244. 4 230. 3 246. 4 339. 3 258. 4
46. 0 # # # # # 231. 1 326. 3 448. 2
46. 5 # # # # # 540. 2 671. 3 649. 3
49. 7 # # # # # 1069. 4 826. 9 973. 7
50. 9 # # # # 196. 6 1160. 4 1218. 8 1655. 6
Rh2 51. 7 # # # # # # # #
注:#,在相同积分事件下未检测到。
表 3 糖苷酶制剂对生晒参乙醇提取物转化液中 8 种皂苷的影响
Tab. 3 Effects of glycosidase on concentration of eight ginsenosides in converted solutions
人参皂苷
质量浓度 / (μg·mL -1)
E00 CE01 CE02 AE03 LE04 PE05 PE06 SE07
NR1 # # # # # # # #
Re + Rg1 0. 52 0. 52 0. 48 0. 52 0. 51 0. 42 0. 51 0. 45
Rb1 0. 32 0. 08 0. 04 0. 15 0. 09 # # #
Rc 0. 32 0. 22 0. 1 0. 3 0. 12 0. 03 0. 04 0. 02
Rd 0. 08 0. 3 0. 34 0. 3 0. 13 0. 02 0. 05 #
Rg3 # # # # # # # #
Rh2 # # # # # # # #
合计 1. 24 1. 12 0. 96 1. 27 0. 85 0. 47 0. 6 0. 47
总转化能力 /% - 9. 7 22. 6 - 2. 4 31. 5 62. 1 51. 6 62. 1
#,在相同积分事件下未检测到。
应 48 h后,Rb1 和 Rc分子上 1,6-糖苷键均可被催
化水解转化为 Rd。经白酒酶 LE04、果胶酶 PE05
和 PE06、蜗牛酶 SE07 催化反应 48 h后,可催化水
解 Rb1 和 Rc分子中的 1,6-糖苷键转化成 Rd,也可
催化水解 Rd中的糖苷键,均在 Rh2 峰紧邻处产生
了一个强峰,其中酶 PE05 和 SE07 对 Rb1 转化较为
彻底。由表 3 和 4 可知,生晒参乙醇提取物经蜗牛
酶处理后,与未经酶处理相比,Rb1 消失殆尽,Rc
和 Rd均降低,而在保留时间 41. 6 min 和 50. 9 min
分别产生了与 Rg3 (783 [M - H]
- 1)和 Rh2 (621
[M - H]- 1)的同分异构体。文献[11]数据比对分
析表明,HPLC及 LC /MS分析保留时间为 41. 6 min
和 50. 9 min分别为人参皂苷 F2 (783 [M - H]
- 1)
和 CK (621 [M - H]- 1)。可推测生晒参中天然皂
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苷 Rb1 和 Rc的酶法转化途径为,Rb1 或 Rc→Rd→ F2→CK。
表 4 混标溶液 (GMS)、未加酶 (E00)及蜗牛酶 (SE07)转化样品的液质分析及峰指认
Tab. 4 HPLC-UV-ESI-MS identification results of GMS,sample E00 and SE07
人参皂苷 保留时间 /min GMS E00 SE07
NR1 15. 7 931 ( [M-H]-,24%)
967 ( [M + Cl]-,100%)
Rg1 17. 9 799 ( [M - H]-,7%) 799 ( [M - H]-,10%) 799 ( [M - H]-,12%)
835 ( [M + Cl]-,100%) 835 ( [M + Cl]-,97%) 835 ( [M + Cl]-,100%)
859 ( [M + HAc - H]-,26%) 859 ( [M + HAc - H]-,100%) 859 ( [M + HAc - H]-,88%)
1599 ( [2M - H]-,22%) 1599 ( [2M - H]-,13%) 1599 (2 [M - H]-,20%)
Re 18. 0 945 ( [M - H]-,50%) 945 ( [M - H]-,100%) 945 ( [M - H]-,100%)
981 ( [M + Cl]-,100%) 981 ( [M + Cl]-,50%) 981 ( [M + Cl]-,40%)
30. 8 799 ( [M - H]-,100%)
835 ( [M + Cl]-,82%)
32. 2 769 ( [M - H]-,100%)
805 ( [M + Cl]-,73%)
Rb1 32. 5 1107 ( [M - H]-,11%) 1107 ( [M - H]-,100%)
1143 ( [M + Cl]-,100%) 1143 ( [M + Cl]-,75%)
Rc 33. 4 1077 ( [M - H]-,33%) 1077 ( [M - H]-,100%) 1077 ( [M - H]-,100%)
1113 ( [M + Cl]-,100%) 1113 ( [M + Cl]-,43%) 1113 ( [M + Cl]-,50%)
33. 8 637 ( [M - H]-,10%)
673 ( [M + Cl]-,100%)
697 ( [M + HAc - H]-,80%)
34. 2 1077 ( [M - H]-,77%)
1113 ( [M + Cl]-,100%)
Rd 35. 9 945 ( [M - H]-,30%) 945 ( [M - H]-,100%) 945 ( [M - H]-,100%)
981 ( [M + Cl]-,100%) 981 ( [M + Cl]-,97%) 981 ( [M + Cl]-,50%)
36. 1 637 ( [M - H]-,19%)
673 ( [M + Cl]-,100%)
697 ( [M + HAc - H]-,98%)
41. 6 783 ( [M - H]-,29%)
819 ( [M + Cl]-,50%)
843 ( [M + HAc - H]-,100%)
43. 2 885 ( [M - H]-,100%)
921 ( [M + Cl]-,47%)
43. 5 885 ( [M - H]-,100%)
921 ( [M + Cl]-,48)
Rg3 44. 2 783 ( [M - H]-,10%)
819 ( [M + Cl]-,100%)
45. 5 839 ( [M - H]-,100%)
875 ( [M + Cl]-,26%)
46. 0 753 ( [M - H]-,6%)
789 ( [M + Cl]-,40%)
813 ( [M + HAc - H]-,100%)
46. 5 753 ( [M - H]-,18%)
789 ( [M + Cl]-,67%)
813 ( [M + HAc - H]-,100%)
49. 7 617 ( [M - H]-,5%)
653 ( [M + Cl]-,71%)
677 ( [M + HAc - H]-,100%)
50. 9 621 ( [M - H]-,12%)
657 ( [M + Cl]-,100%)
681 ( [M + HAc - H]-,85%)
1243 ( [2M - H]-,42%)
Rh2 51. 7 621 ( [M - H]-,10%)
657 ( [M + Cl]-,100%)
681 ( [M + HAc - H]-,50%)
1571
2012 年 9 月
第 34 卷 第 9 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
September 2012
Vol. 34 No. 9
天然人参皂苷的转化方法主要有化学转化、微
生物转化、酶法转化等方法[12]。酸水解转化有完
全水解和部分水解,但皂苷的 C-20 位的构型极易
受酸的影响转位,发生互变异构现象,结果造成次
生皂苷活性降低。和酸水解比较,碱水解中间产物
较少,水解比较完全,C-20 位异构化程度低,但规
模化生产的环境污染严重。微生物转化的反应条件
相对要求较高,其规模化扩大上可控性要求会更
高。酶法转化为选择性水解反应,不同种类的酶可
作用于不同构型和不同的糖苷键,可达到定向水解
的目的。某些高活性特殊次生皂苷 (如 CK)分子
很难通过化学转化法获得,而通过酶法转化较为容
易,体现了酶法转化的专一性、高选择性的优点。
本实验采用的糖苷酶制剂是多种酶的混合物,因此
对生晒参乙醇提取中天然皂苷就够会有不同的选择
性。该研究结果为利用酶制剂直接转化生晒参乙醇
提取物制备高活性次生皂苷提供可靠的依据,具有
较高的利用前景。
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板蓝根中 3 种核苷成分的多波长 HPLC测定及主成分分析
尚晓娜1, 宋平顺2, 李士博2, 何禄仁2, 赵建邦2* , 丁永辉3
(1. 兰州大学药学院,甘肃 兰州 730000;2. 甘肃省食品药品检验所,甘肃省中药品质与安全评价工程技
术研究中心,甘肃 兰州 730000;3. 甘肃省食品药品监督管理局,甘肃 兰州 730000)
收稿日期:2011-10-31
基金项目:甘肃省科技重大计划项目 (当归等八种道地药材的质量标准制订 1002KFDA048)
作者简介:尚晓娜 (1987—) ,女,硕士生,研究方向:中药化学及质量标准。E-mail:pingshunsong@ 163. com
* 通信作者:赵建邦 (1955—) ,男,主任药师,硕士生导师,研究方向:中药化学及质量标准。Tel: (0931)4968901
摘要:目的 建立 HPLC同时测定板蓝根药材中 3 种核苷的方法,比较各地板蓝根的质量。方法 以乙腈、水为流动
相梯度洗脱,在不同波长下检测,柱温为室温,体积流量 0. 6 mL /min。结果 鸟苷线性方程 y = 7 × 10 -6 x - 0. 003 3,
r = 0. 999 5,线性范围为 4. 556 ~ 56. 95 μg /mL;尿苷线性方程 y = 1 × 10 -6x + 0. 032 6,r = 0. 999 9,线性范围为 5. 58 ~
73. 51 μg /mL;腺苷线性方程 y = 5 × 10 -7 x + 0. 022 1,r = 1,线性范围为 5. 75 ~ 71. 34 μg /mL;含鸟苷量在 0. 005% ~
0. 194%,含尿苷量在 0. 035% ~0. 082%,含腺苷量在 0. 009% ~0. 086%。结论 本方法准确、简便、快速,可作为板
蓝根药材及饮片质量控制的方法之一。
关键词:板蓝根;核苷;HPLC;多波长;主成分分析
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2012)09-1752-04
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2012 年 9 月
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中 成 药
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