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黑参标准制作工艺研究



全 文 :黑参标准制作工艺研究
袁 媛1,2*,徐荣培2
(1.辽宁省中医药研究院,辽宁 沈阳110034;2.韩国大田大学,韩国 大田300716)
摘 要:目的:利用九蒸九曝法建立人参新炮制品———黑参的标准制作工艺。方法:通过对黑参感官评
价,检测不同炮制方法制得的黑参品种的色度、干燥失重、所含皂苷成分、苯并芘含量以及农药残留含量
等。结果:黑参样品具有人参特有的香气,无糊味,外皮无破裂,无汁液流出,断面没有白心也无断裂;随
着蒸制次数增加,所有样品亮度降低,红色度逐渐增加,而黄色度先增加后减少;所有样品的干燥失重为
6.60%~12.93%;人参皂苷Rg1和 人参皂苷Re含量自第一蒸至第九蒸逐渐减少,人参皂苷Rb1和人参
皂苷Rd含量没有变化,而作为稀有成分的人参皂苷Rg3 的含量也只在后3次的蒸制过程中明显增加;
所有样品都没检测出苯并芘和农药残留。结论:本研究有助于建立黑参的标准制作工艺,为进一步建立
黑参的炮制工艺和质量标准,进一步开发黑参奠定基础。
关键词:黑参;九蒸九嚗;炮制;制作工艺
中图分类号:R282   文献标识码:A   文章编号:1673-2197(2016)04-0026-03
DOI:10.11954/ytctyy.201604010
收稿日期:2015-09-10
基金项目:国家人力资源与社会保障部留学人员科技活动择优资助项目(2011LX003)
作者简介:袁媛(1980-),女,博士,辽宁省中医药研究院副研究员,研究方向为生药学。
Study on Standard Manufacture Process of Black Ginseng
Yuan Yuan1,2*,Xu Rongpei 2
(1.Liaoning Institute of Traditional Chinese Medicine,Shenyang China,110034;
2.Daejeon University,Daejeon 300716,Korea)
Abstract:Objective:This experimental study was performed to establish the standard manufacture process of black ginseng.
Methods:We determined chromaticity,loss on drying,ginsenosides content,benzo(a)pyrene and pesticide residues of different
processing methods’black ginseng.Results:In this study,with the number of steaming times increasing,brightness of al samples
declined,and redness of them rised,while the yelowness first increased and then decreased.The results showed that the contents of
loss on drying of black ginseng samples changed from 6.6%to 12.93%,and the content of ginsenosides Rg1and Re decreased grad-
ualy from the first steaming to the ninth steaming,but there was no change between ginsenosides Rb1and Rd.It was obvious that
Rg3 which was considered as special components appeared among the latter three times.The content of benzo(a)pyrene and pesticide
residues have not been detected in al the samples.Conclusion:We believe that this report is helpful for standard manufacture
process of BG.More studies on sensory evaluation and section characteristics,as wel as unique ginsenoside components,etc.should
be carrying on,so as to establish the manufacture and quality standard of black ginseng.
Keywords:Black Ginseng;Standard;Manufacture Process
  人参(Panax ginseng C.A.Meyer)为五加科植物人参
的干燥根,具有很高的药用价值和食用价值,被誉为“草药
之王”,在科学研究领域和国际市场一直占有极其重要的地
位,已经被传统医学乃至全世界广泛认可并应用。其性平,
味甘、微苦,微温,用于大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津
止渴、安神益智。现代临床医学和药理学研究表明,人参具
有提高机体免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、降血糖以及抗炎等多
种活性,因此在医学及养生方面具有可观的价值。近年来,
各种各样的人参炮制品作为功能食品用于饮食文化中,其
中包括白参、红参、黑参等,白参是将鲜参直接在阳光下晾
晒干燥而成,红参是将鲜参在95~100℃蒸制2~3h制得,
黑参是利用九蒸九曝炮制方法将鲜参反复蒸制烘干而得到
的一种人参深加工品,是继红参后的又一新人参商品[1]。
有文献报道,黑参比白参和红参具有更强的抗肿瘤、抗炎、
—62—
提高免疫力等生物活性。因此黑参具有很好的开发前景。
人参皂苷是人参药效活性的主要有效成分。黑参包括
一些独有的人参皂苷成分,比如人参皂苷 Rg3、人参皂苷
Rg5、人参皂苷F4、人参皂苷Rg6、人参皂苷Rk3、人参皂苷
Rs3、人参皂苷Rs4等,这些成分在白参中并不存在,而且人
参皂苷Rg3的含量高于红参。因此,黑参比白参和红参有
更强的抗肿瘤、神经保护、抗炎等生物活性。
黑参具有高生物活性,并且其制作过程中产生了更多
的生物活性物质。但黑参的标准制作工艺仍然没有建立,
不同的研究者有不同的工艺条件,而且质量控制标准也不
一样。在制作过程中,随着蒸制和干燥次数的增加,黑参易
于胀大、破裂、汁液流出,并产生苯并芘,因此建立制作标准
是迫切需要的。为建立黑参标准制作工艺,本实验从色度、
干燥失重、人参皂苷含量、苯并芘含量及农药残留等方面开
展研究,具体研究如下。
1 材料与药物
1.1 试药与仪器
人参皂苷Rg1(批号:110703-201128)、人参皂苷Re(批
号:110754-201324)、人参皂苷Rb1(批号:110704-201223)、
人参皂苷Rd(批号:111715-200802)、人参皂苷Rg3(批号:
110804-200603)标准品购自辽宁省食品药品检验所,纯度均
>98%。4年生韩国鲜人参购自韩国锦山人参市场,并经韩
国大田大学徐荣培教授鉴定为人参(Panax ginseng C.A.
Meyer)。
乙腈为色谱纯(德国默克公司),水为纯净水(杭州娃哈
哈集团有限公司),其他试剂均为分析纯(天津科密欧化学
试剂有限公司)。
CM-5台式分光测色仪(日本柯尼卡美能达投资有限公
司);NY-1D农药残留快速检测仪(北京诺亚威仪器仪表有限
公司);苯并芘检测仪(山西太星蓝天环保科技有限公司)。
1.2 黑参样品制作[1-4]
黑参样品通常考察的因素有不同的蒸制温度及次数、
不同的干燥温度及次数。通过权衡炮制过程中的利弊,我
们首先选取4年生鲜人参,大小适中,体长10cm以上,单支
重量达到40g以上,无斑痕、无霉斑,清洗除杂,自然通风晾
干,40℃干燥24h,完全干燥之后,再采用无压力蒸制,并且
固定蒸制温度为95℃ ,干燥温度为室温 ,其他因素见表1,
共制备11种黑参样品。
表1 黑参样品的制备因素
样品
蒸制时间(95℃)(min)
1  2  3  4  5  6  7  8  9
1  10  20  20  40  60  80  90  100  110
2  15  20  20  40  60  80  90  100  110
3  20  20  20  40  60  80  90  100  110
4  10  20  40  40  80  80  90  110  110
5  15  20  40  40  80  80  90  110  110
6  20  20  40  40  60  80  90  100  110
7  10  40  50  60  70  80  80  80  80
8  20  40  50  60  70  80  80  80  80
9  30  50  60  70  70  70  70  100  130
10  40  50  70  70  70  100  130  130  130
11  60  70  100  100  130  130  130  130  130
1.3 感官评价
从外观外皮色度、有无破裂、有无汁液流出、是否具有
香气而无糊味、断面有无白心及断裂制定感官评价标准。
1.4 色度
取黑参样品,粉碎,置于石英皿中,根据国际照明委员
会标准测定亮度、红色度和黄色度。
1.5 干燥失重
将样品置于已在相同条件下干燥至恒重的扁形称量瓶
内,精密称定,于烘箱内在规定温度下干燥至恒重,恒重是
指样品连续2次干燥或炽灼后的重量差异在0.3mg以下的
重量。干燥至恒重的第2次以及以后每次称重均应在规定
条件下继续干燥1h后进行。样品应平铺于扁形称量瓶中,
其厚度不超过5mm,放入烘箱进行干燥时,应将瓶盖取下,
置称量瓶旁,或将瓶盖半开进行干燥,取出时,需先将瓶盖
盖好,置干燥器中放冷至室温,然后称重。
1.6 人参皂苷含量测定
11种干燥的黑参粉末,各取3g,分别用70%的甲醇
50mL提取,每次提取1h,提取2次,滤过,将2次滤液合并,
置蒸发皿中蒸干,残渣用30mL蒸馏水溶解,再用正丁醇
30mL提取3次,合并3次正丁醇部分置蒸发皿中蒸干,残
渣用甲醇溶解,转移至5mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,
用0.45μm微孔滤膜滤过,即得。
色谱柱:Agilent TC-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动
相:A为乙腈,B为水,梯度洗脱条件:0~35min(19%A,
81%B),33~35min(19%~29%A,81%~71%B),55~
70min(29%A,71%B),70~100min(29%~40%A,71%~
60%B);流速:1.5mL·min-1;检测波长:203nm;柱温:
25℃;进样量:10μL。
1.7 苯并芘检测
称取约0.3g样品,用5mL正己烷溶解,涡旋混合器上
充分混匀,通过活化、上样、洗脱等过程后注入苯并芘检测
仪进样分析。
色谱柱:Venusil ASB-C18(250mm×4.6mm,5.0μm);
流动相:乙腈-水=88︰12;流速:1.0mL·min-1;进样量:
20μL;荧光检测器:发射波长406nm,激发波长:412nm。
1.8 农药残留检测
取样品的表皮4g,放入三角瓶中,加入10mL缓冲液,
振荡1~2min,倒出提取液,静置2min,待测,在分光光度计
—72—
412nm用农药残留快速检测仪检测。
2 结果
2.1 感官评价
黑参样品均具有人参特有的香气,无糊味;外观色泽随
着蒸制次数的增加颜色逐渐加深,外皮无破裂,无汁液流
出,断面没有白心也无断裂的为首选。
2.2 色度检测
随着蒸制次数的增加,所有样品的亮度降低,红色度增
加,而黄色度先增加后降低。本检测以9#样品为例,结果
见表2。
表2 黑参的色度变化
蒸制次数 L* a* b*
0  74.73  0.74  19.40
1  65.64  6.98  29.82
2  58.17  8.46  31.76
3  54.02  9.70  31.37
4  54.03  9.84  30.79
5  47.95  10.19  30.85
6  41.86  11.43  30.52
7  40.69  10.52  29.69
8  35.41  10.52  27.38
9  30.88  10.34  23.28
L*:亮度(白 +100~0黑);a*:红色度(红 +60~ -60绿);b*:黄
色度(黄 +60~ -60蓝)
2.3 干燥失重
结果表明干燥失重的平均值为11.11%。尽管黑参9
次蒸制的方法不同,但不同黑参样品的水分变化均在
6.60%~12.93%之间。韩国药典规定应低于15.50%。同
样以9#样品为例,结果见表3。
表3 黑参样品的干燥失重 (珚x±s)
蒸制次数 干燥失重(%)
1  10.40±0.060
2  11.48±0.055
3  11.97±0.083
4  9.27±0.028
5  9.56±0.071
6  10.46±0.047
7  10.27±0.072
8  10.98±0.025
9  10.93±0.052
2.4 人参皂苷含量测定
以9#样品为例,人参皂苷Rg1 和Re的含量随着蒸制
次数的增加反而减少。基于此次研究结果,发现由于前几
次蒸制过程中没有出现人参皂苷Rg3,而在后3次中才出
现,并且含量逐渐增加,因此人参皂苷Rg3 可以作为黑参制
作过程中的标志性成分。所有黑参样品中都没有检测出苯
并芘和农药残留。结果见表4。
表4 黑参样品中人参皂苷含量 (珚x±s)
9#样品 G-Rg1 G-Re  G-Rb1 G-Rd  G-Rg3
1  0.141±0.001  0.159±0.002  0.162±0.002  0.013±0.001 -
2  0.186±0.005  0.152±0.005  0.252±0.003  0.027±0.001 -
3  0.164±0.003  0.119±0.001  0.198±0.004  0.017±0.001 -
4  0.215±0.006  0.151±0.001  0.248±0.004  0.026±0.001 -
5  0.259±0.004  0.147±0.014  0.324±0.002  0.034±0.001 -
6  0.215±0.013  0.079±0.007  0.234±0.005  0.030±0.002 -
7  0.190±0.036  0.109±0.033  0.289±0.025  0.029±0.002  0.018±0.001
8  0.137±0.009  0.062±0.002  0.187±0.006  0.026±0.004  0.019±0.001
9  0.071±0.005  0.048±0.003  0.187±0.006  0.023±0.001  0.037±0.002
3 讨论
到目前为止对黑参的制作工艺还没有统一标准,不同
的实验者采用不同的方法,他们蒸制和干燥的温度、时间、
方法都不尽相同。虽然制作黑参的方法很多,但哪种方法
更好,目前尚无定论。因此在该研究中,我们对不同制作方
法得到的黑参,进行了感官评价,对色度、干燥失重、人参皂
苷含量、苯并芘及农药残留进行了检测。结果以具有人参
特有的香气,无糊味,外观色泽随着蒸制次数的增加逐渐加
深,外皮无破裂,无汁液流出,断面没有白心也无断裂的黑
参样品为首选。随着蒸制次数的增加,所有样品的亮度降
低,红色度增加,而黄色度先增加后降低。人参皂苷Rg1 和
Re的含量随着蒸制次数的增加反而减少。基于此次研究结
果,发现由于前几次蒸制过程中没有出现人参皂苷Rg3,而
在后3次中才出现,并且含量逐渐增加,因此人参皂苷Rg3
可以作为黑参制作过程中的标志性成分。在前期研究中发
现苯并芘是在蒸制和干燥的过程中产生的,实验中发现温
度越高,苯并芘含量越高,由此我们可以推断温度是控制苯
并芘含量的首要因素。因此本实验控制了蒸制和干燥的温
度,所有黑参样品中都没有检测出苯并芘和农药残留。总
之,希望本实验研究有助于推进黑参标准化进程,为开发黑
参保健品或功能性食品奠定基础。
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Korea,2008:35-36. (责任编辑:余 婷)
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