全 文 ：　实验研究　
3种广枣提取物对哇巴因诱发豚鼠心律失常作用的比较■
内蒙古自治区医院(呼和浩特 010017)　　　　　周丽波　　　　　　　　　　　　　　　　
内蒙古包头医学院心血管研究室(包头 014010)　杨玉梅　应　康　徐继辉　覃建民　张长在
内蒙古自治区中蒙医研究所(呼和浩特 010020)　白音夫　宋一亭　　　　　　　　　　　　
摘　要:目的:观察广枣中 3种提取物对哇巴因所致心律失常的影响 ,为找到一种抗心律失常作用较强的主要化学单体或简
单复合物打下基础。方法:采用 Langendorg 灌流法 ,观察药物对哇巴因所致离体豚鼠心脏心律失常的影响;给豚鼠恒速 iv 哇
巴因致心律失常 ,观察药物的抗心律失常作用 。结果:与空白对照组比 , 样品 1、样品 2 使豚鼠离体心脏出现室颤时所需哇巴
因的量增加 ,并呈明显的剂量依赖性;样品 3使豚鼠离体心脏出现室颤所需哇巴因的量变化不大。样品 1、样品 2 使哇巴因
引起豚鼠早搏 、室颤 、室额 、心脏停搏时的剂量明显增加 , 并呈明显的剂量依赖性:样品 3 使早搏 、室速 、心脏停搏时的剂量变
化不明显 ,但可使室颤出现时的剂量明显降低。结论:样品 1、样品 2能对抗哇巴因所导致的心律失常的发生:而样品 3不仅
没有对抗作用 ,还有可能促进心律失常的发生 。
关键词:广枣提取物;哇巴因;心律失常
中图分类号:R291.2　文献标识码:B　文章编号:1006-6810(2008)01-0034-03
　　广枣 , 又名南酸枣 Choerospondias Axillaries(Roxb.)Burtt
et Hill , 系漆树科南酸枣属植物的干燥成熟果实 , 味甘 、酸 ,
性平 、腻 、重 、柔 , 为蒙藏习用药材;具有行气活血 , 养心安神
的作用 ,临床上用于治疗气滞血瘀 、胸痹作痛 、心悸气短 、心
神不宁等症 ,疗效显著。药理实验也证实 , 广枣具有明显的
抗心律失常作用〔1 , 2〕。为了从广枣中找到一种抗心律失常
作用较强的主要化学单体或简单复合物 , 内蒙古中蒙医研
究所通过不同的提取方法得到 16 种广枣提取物 , 经我室试
验 ,筛选出 3 种对心脏有较强活性的提取物 ,即样品 1:乙醇
提取乙酸乙酪萃取层;样品 2:乙醇提取 , NKA 树脂分离 ,
10%乙醇淋洗浓缩液;样品 3:乙醇提取 , NKA 树脂分离 ,
70%乙醇淋洗浓缩液。前期实验证明 , 样品 1、样品 2 能对
抗乌头碱所导致心律失常 , 而样品 3 可促进乌头碱所导致
心律失常的发生〔3〕。本实验拟观察比较这 3 种提取物对哇
巴因所致心律失常的作用 , 以进一步确定其抗心律失常作
用的有效组分。
1　实验材料
1.1　药物:广枣中 3 种提取物 , 由内蒙古中蒙医研究所提
供 ,批号 030811 ,生药浓度分别为:样品 1:8.25g/ml , 样品 2:
1.72g/ml ,样品 3:2.41g/ml;离体实验时将 3 种被试药分别
稀释成200mg/ L、100mg/L、50mg/ L 3 种浓度;整体实验时将 3
种被试药分别配成 1.15g/ml 、0.58g/ ml、0.29g/ml的溶液。
哇巴因 , 卫生部药品检验所分装的标准品 , 批号 1970.18
(4)。奎宁丁(硫酸哇尼啶),中国医药公司北京采购供应站
进口分装 ,批号 950527。
1.2　动物:豚鼠 ,包头医学院动物室提供 , 体重 350～ 450g ,
　■国家自然科学基金项目:No.30160102
雌雄兼有。
1.3　仪器:BL-410生物机能实验系统(成都泰盟科技有限
公司);超级恒温水浴(上海市试验仪器厂);离体灌流装置;
自动抽注机 ZCZ-50(浙江医科大学医学仪器实验厂)。
2　实验方法
2.1　对离体灌流豚鼠心脏心律失常的影响〔4〕:豚鼠随机分
组 ,每组雌雄各半 , 腹腔注射 3%戊巴比妥钠 1ml/ kg 麻醉 ,
仰位固定。采用 Langendorff法制备离体心脏 , 用 95%O2 与
5%CO2饱和的 K-H 液开始进行灌流 , 灌流压 70cmH2O , 温
度为 37.0±0.5℃, pH7.4±0.5。用容积导电法引导并观察
和记录心电变化。稳定 20 分钟后 , 用含有药物的灌流液灌
流 5分钟 , 然后从侧管注入 30 g/ ml的哇巴因 0.05ml , 每分
钟注入一次 ,观察心电图的变化 ,直至出现心室纤颤停止给
药 ,记录室颤出现时哇巴因的用量 ,进行组间 t检验。
2.2　对哇巴因诱发豚鼠心律失常的影响〔5〕:健康豚鼠 , 雌
雄兼用 ,随机分为 11 组。(1)对照组(生理盐水 20ml/kg),
(2)奎宁丁组(15mg/ kg),(3)～ (5)样品 1 大剂量组(23.0g/
kg)、中剂量组(11.5g/kg)、小剂量组(5.8g/kg),(6)～ (8)样
品 2大剂量组(23.0g/kg)、中剂量组(11.5g/ kg)、小剂量组
(5.8g/kg),(9)～ (11)样品 3 大剂量组(23.0g/kg)、中剂量组
(11.5g/kg)、小剂量组(5.8g/kg)。各组豚鼠均以 2ml/100g
的容量灌胃给药 , 连续 3天。于末次给药后 1 小时 , 腹腔注
射 3%戊巴比妥钠 1ml/kg 麻醉后 , 仰位固定 , 用 BL-410 生
物机能实验系统观察并记录Ⅱ导 ECG 。用自动抽注机通过
左侧颈外静脉恒速注射 30μg/ kg 的哇巴因 0.3ml/min , 观察
并记录室性早搏(室早)、室性心动过速(室速)、心室纤颤(室
颤)、心脏停搏(停搏)出现时哇巴因的剂量 ,进行组间 t检验。
3　实验结果
34　　　　　　　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志　　　　　　　　　　　　　2008 年 1月第 1 期
DOI :10.16041/j.cnki.cn15-1175.2008.01.023
3.1　广枣提取物对离体灌流豚鼠心脏心律失常的影响:与
空白组比 , 样品 1、样品 2 使豚鼠离体心脏出现室颤时所需
哇巴因的量明显增加 ,并呈剂量依赖性;样品 3 各剂量组使
豚鼠离体心脏出现室颤所需哇巴因的量明显变化。见表 1。
表 1　广枣提取物对哇巴因所致豚鼠
离体心脏心律失常的影响( x±S , n=10)
组别 浓度(mg/ L) 例数 哇巴因用量(μg)
空白对照 10 3.45±1.74
奎尼丁 8 10 11.85±2.50＊＊＊
样品 1 200 10 7.30±2.02＊＊＊
100 10 6.00±2.00＊＊
50 10 5.20±1.75＊
样品 2 200 10 8.10±1.83＊＊＊
100 10 6.92±2.29＊＊
50 10 5.59±1.32＊
样品 3 200 10 3.90±1.89
100 10 3.15±1.31
50 10 4.20±1.70
　　与空白对照组比较＊P <0.05 , ＊＊P <0.01 , ＊＊＊P
<0.001
3.2　广枣提取物对哇巴因诱发豚鼠心律失常的影响;与对
照组比 , 样品 1、样品 2 使豚鼠早搏 、室速 、室颤 、心脏停搏出
现时间延长 , 所需哇巴因的量增加 , 并呈剂量依赖性。样品
3却可使豚鼠室颤出现时间缩短 ,所需哇巴因的量减少。见
表 2。
4　讨　论
哇巴因通过抑制 Na-KATP 酶 ,导致细胞内 Na+高 K+
低 、自律性升高 、传导阻滞 , 并由于 Ca++内流紊乱而导致振
荡性后电位 ,从而诱发多种类型的心律失常 ,是筛选和评价
抗心律失常药常用的方法之一〔6〕。本实验结果显示 , 在离
体实验中 ,样品 1 、样品 2 可使豚鼠离体心脏出现室颤时所
需哇巴因的量明显增加;在整体实验中 ,样品 1 、样品 2 也可
使豚鼠出现早搏 、室速 、室颤 、心脏停搏时的哇巴因的量明
显增加。而样品 3 却可使豚鼠出现室颤时的哇巴因用量明
显减少。离体和整体实验结果均表明 , 样品 1 和样品 2 可
对抗哇巴因所导致的心律失常的发生 , 样品 3 却没有对抗
哇巴因所致心律失常的发生的作用 , 这与前期实验药物对
乌头碱所致心律失常影响的结果是一致的〔3〕。提示样品 1
和样品 2有抗心律失常作用 , 而样品 3 不仅没有抗心律失
常作用 , 反而可能促进心律失常的发生。表 2　广枣提取物对哇巴因诱发豚鼠心律失常的影响( x±S ,n=10)
组别 剂量(g/kg)
哇巴因用量(μg/ kg)
早搏　　　 室速　　　 室颤　　　 心脏停搏　
生理盐水 134.1±16.2 167.8±19.2 213.7±26.5 259.1±28.0
奎尼丁　 0.015 207.9±23.1＊＊＊ 248.1±21.3＊＊＊ 277.6±26.8＊＊＊ 321.1±19.7＊＊＊
样品 1 　 2300 187.3±16.4＊＊＊ 213.9±20.7＊＊＊ 263.4±32.2＊＊＊ 308.4±18.0＊＊
11.5 168.7±12.5＊＊＊ 192.6±20.1＊＊ 244.3±19.05＊＊ 289.6±21.0＊＊
5.8 149.1±18.9＊ 183.1±17.3＊ 234.0±20.8＊ 283.5±30.9＊
样品 2 　 23.0 178.2±17.4＊＊＊ 221.6±25.4＊＊＊ 273.7±17.9＊＊＊ 293.1±26.8＊＊
11.5 161.2±23.1＊＊ 211.7±22.5＊＊＊ 258.4±25.7＊＊＊ 286.1±23.9＊
5.8 151.9±13.7＊＊ 187.7±24.7＊ 238.6±18.0＊ 266.6±19.8
样品 3 　 23.0 131.3±17.2 142.2±15.0 168.1±23.7＊＊＊ 237.9±32.4
11.5 141.1±18.1 150.3±21.9 174.2±29.6＊＊ 255.8±28.8
5.8 132.2±15.4 162.9±29.9 185.4±29.4＊ 260.4±22.4
　　与空白对照线比较＊P <0.05 , ＊＊P <0.01 , ＊＊＊P<0.001
　　参考文献
〔1〕李增唏 ,田凤居 , 石山 ,等.蒙药广枣总黄酮抗实验性心
律失常作用〔J〕.中国药理学报 , 1984 , 5(4):251-254.
〔2〕宋一亭.广枣总黄酮对心脏舒缩功能 、缺血型心电图改
变和心律失常的即时效应〔J〕.内蒙古中医药 , 1986 ,(1):
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〔3〕王凤华 ,杨玉梅 , 徐继辉 , 等.蒙药广枣 3 种黄酮类成分
对乌头碱所致心律失常的作用比较〔J〕.中国中药杂志 ,
2005 , 30(14):1096-1098.
〔4〕徐叔云.药理实验方法学〔M〕.第三版.北京:人民卫生出
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〔5〕杨健 , 罗顺德 ,陈怡.莲心碱醚类衍生物抗心律失常作用
〔J〕.武汉大学学报(医学版), 2002 , 23(4):339-341.
〔6〕陈维州 , 董月丽 , 张月芳 , 等.关服甲素的抗心律失常作
用〔J〕.中国药理学报 , 1983 , 4(4):247-249.
2007 年 2月 9 日收稿
352008年 1 月第 1 期　　　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　
Comparing the action of the three extracts in Choerospondias Axillaries
(Roxb.)Burtt et Hill on arrhythmias induced by ouabain
Yang Yumei Ying Kang xu Jihui Qin Jianmin Zhang Changzai Song Yiting
Departement of Cardiovascular Research , Baotou Medical college ,Baotou 014010
Bai Yinfu Song Yiting
Instiut of Inner Mengol Chinese-Mengol Medicine , Huhhot 010020
Abstracts:Objective:To compare the actions of the three extracts in Choerospondias Axillaries(Roxb.)Burtt et Hill on
arrhythmias induced by ouabain.Method:Langendorff perfuse was applied in the experiment , the antiarrhythmic action
was to study by using ouabain on the guinea pig isolated heart;The antiarrhythmic action of the three extracts in Cho-
erospondias Axillaries(Roxb.)Burtt et Hill was to study by using iv ouabain in guinea pig to induce arrhythmias.Re-
sult:compared with the NS group ,Sample 1 and sample 2 both significantly prolonged the beginning time of VF of isolat-
ed heart and increased the dosage of ouabain ,Sample 3 didn t change on the beginning time of VF of isolated heart;
Sample 1 and sample 2 both greatly prolonged the beginning time of VE ,VT ,VF ,HA;Sample 3 reduced the beginning
time of VF.The actions of the three samples were in a concentration-dependent way.Conclusion:Sample 1 and Sam-
ple 2 both resisted the occurrence of arrhythmias induced by ouabain ,Sample 3 and Sample 2 both resisted the occur-
rence of arrhythmias induced by ouabain , Sample 3 markedly promoted the occurrence of arrhythmias induced by
ouabain.
Key words:extracts of Choerospondias Axillaries(Roxb.)Burtt et Hill;ouabain;arrhythmias
沙棘黄酮固体脂质纳米粒 Beagle犬体内药动学的研究■
内蒙古医学院药学院 2005 级研究生(010050)　郭　瑛　　　　
内蒙古药品检验所(010020)　　　　　　　　王瑞生　盛　惟
关键词:沙棘黄酮;药动学;实验研究
中图分类号:R291.2　文献标识码:B　文章编号:1006-6810(2008)01-0036-02
　　沙棘(醋柳 ,Hippophae rhamnoides L)系蒙古族 、藏族常用
药材 ,为胡颓子科植物沙棘的干燥成熟果实 , 是我区特产药
材之一。从沙棘中提取的总黄酮(醋柳黄酮)[ Total Flavones
of Hippophae rhamnoides , TFH] 作为有效成分已被研制成心达
康胶囊在临床应用多年 ,临床疗效显著。
TFH 属平面型分子结构 , 分子间堆砌较紧密 , 分子间引
力大 , 造成 TFH在水中极难溶解。水难溶性药物因溶出速
率低 ,胃肠道吸收差而影响口服给药的生物利用度。 本课
题采用纳米技术将 TFH 包裹在类脂核中 , 制成粒径小于
1000nm 的固体纳米粒;本文考察了 TFH-SLN 在比格犬体
内的药物动力学参数 , 为 TFH -SLN 临床用药提供科学依
据。
1　实验材料
比格犬 , 体重 8 ～ 12kg , 动物合格证为辽实动质字
[ 1999] 062号 , 学院实验动物中心提供。高效液相色谱仪:
岛津 LC-2010c , SUTEK 色谱柱(C18μm200×4.6mm), XW-
80A 旋涡混合器:日本岛津公司。
　■内蒙古自治区科学基金资助 ,项目编号:200508010907
2　方法学考察
2.1　色谱条件:流动相:C18柱 ,柱温为室温;流动相:(甲醇:
0.4%磷酸:乙睛=55:45:5);流速为 1.0ml/min;检测波长:
370nm , 进样量 20μl。
2.2　血浆样品处理:取 0.15ml 血浆 , 加甲醇 0.2ml , 25%的
盐酸0.1ml , 50℃水浴30min ,离心后取 20μl进行 HPLC分析。
2.3　方法专属性考察:在本实验的色谱条件下 , 槲皮素保
留时间约为 7min , 分离度大于 3 ,峰形良好 , 分离完全 , 无杂
质干扰。
2.4　标准曲线的制备:称取槲皮素对照品置 50ml 容量瓶
中 ,加甲醇 ,超声 5min ,冷却后用甲醇稀释至刻度 ,分别取 0.
25、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 、5.0ml于 10ml容量瓶中 , 加甲醇至
刻度备用。取血浆 8 份 , 加甲醇 0.2ml 、25%盐酸 0.1ml , 于
50℃水浴 15min ,离心 , 依次加入 0.5ml槲皮素对照液(由稀
到浓), 离心 ,进样 , 同时作空白。 测定峰面积 , 对色谱图中
槲皮素的峰面积 A和浓度 C 进行线性回归 , 得标准曲线方
程。标准曲线方程为:Y=298624X-60021　r=0.9952。 结
果表明槲皮素浓度在 1.26～ 50.12μg/ml范围内 ,浓度与峰面
积有良好的线性关系 ,最低限量浓度为 1.26μg/ ml。
36　　　　　　　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志　　　　　　　　　　　　　2008 年 1月第 1 期