全 文 ：法半夏中甘草酸的检测研究
甘肃省药品检验所 ( 73 0 0 0) 0杨 锡 张伯崇 常克俭 刘涵芳
提要 :采用薄层扫描法对法半夏中甘草酸进行了定性定量检查。 方法快速简便 , 专属性
强 , 为法半夏质量控制提供了检验依据 。
法半夏是以甘草和石灰水为主要辅料炮
制而成的临床常用中药 , 具有燥湿化痰 , 止
呕之功效 。 其炮制方法《中国药典 》 1 9 8 5年版
已作 了规定 , 但尚无检测辅料含量的方法报
道 。生产中辅料用量凭经验掌握 , 这不 利炮制
品质量的提高和统一 。 作者曾采用薄层扫描
法检查了远志等炮制品中辅料甘草的存在 ,
在此基础上 , 采用薄层扫描法 , 以甘草 酸 G 卜
y c y r r h i z i e a e i d为指标 , 对 法半 夏 中 甘 草
进行了检测 , 建立满意的定 性 定 量方法 。
一 、 实验材料
1
. 供试药材 : 半夏 、 法半夏 1 , 2号 , 兰
州药材站提供 , 经鉴定为夭南星科植物半夏
P i n e l l i a t e r n a t a ( T h 往 n b
.
) B r e i v 的干 燥 块
茎及炮制品 ;法半夏 3 , 4号为本所 留样检品 ,
经鉴定均为天南星科植物鞭檐犁头尖 T y p h -
o n i u m f l a g e l l i f o r m e ( L o d d
.
) B l u m e 的 块
茎加工炮制品。 甘草 , 兰州药材站提供 , 符
合 《中国药典 》 规定 。 石灰水 , 市售碳酸钙 。
2
. 法半夏制备 : 取净选的半夏加 水 浸
泡至无干心 , 按每 1 0 0 9半夏加甘草1 59 (水煎
2 次合并 )及石灰水 ( 1鲍” 20 m l) 浸 泡 。 到
一定时间捞出甩清水冲洗千净 , 60 ℃烘干 。
按浸泡时间不同分为法半夏5( 浸 泡 3 d ) , 法
半夏 6 (浸泡 s d ) , 法 半 夏 7 (浸 泡 7 d ) 。
3
. 仪器及试剂 : C S一 920 型快速薄层扫
描仪 , 日本岛津 ; 硅胶G F 254 薄层板 ,青岛海
洋化工厂 ; 定量毛吸管 (M ic r oc a p ) , 美国
D r u m m o n dj 厂。 甘草酸 , 兰州大学 化学系
提供 , 经 80 % 乙醇反复重结晶 , T L C 检查为
单一斑点 。 试剂均为分析纯 。
二 、 实验方法及结果
1
. 薄层层折
(1 ) 样品液制备 : 取法半夏药粉 5 “ , 加
l m ol / L 氢氧化钱 乙醇液 20 m l , 振摇浸泡 12
h
。 滤过滤液浓缩至干 , 用 50 写乙醇 l m l 溶
解 , 供点样用 。
( 2) 对照液制备 : 称取甘草细粉 O . 3 g’
同上方法制成甘草对照液 , 另取 60 ℃干燥至
恒重的甘草酸 , 配成 1 . l m g / m l的 50 % 乙醇
液备用 。
(3 ) 薄层检查 : 精密吸取样品液及对照
液 , 点于 10 5℃ 活化 o . s h 的硅胶 G F s4Z 薄层
板上 , 分别以展开系统 : 1 . 正丁醇一冰 乙酸
一水 ( 4 : 1 : 2 ) ; 2 . 正丁醇一浓氨一水一 乙醇 ( 25 : :3
:8 6) 上行展开 。 展距 1 c5 m , 取出凉干 ,于 U V
2 5 4 n m 紫外灯下观察 。 结果见图1 , 图 2。
ǐ |..1、l…|00泊0000!d 6 0 0 00 0 0 0 0 0
忿 0 0 0
。 息黑 艺 : ` :
0 0 0 0
图 1
a 甘草酸 , b . 甘草
1
. 法半夏 1 , 2 .法半
夏2 , 3 .法半夏 3 , 4 .
法半夏 4 , 5 .法半夏
5 , 6
.法半夏 6 , 7 . 法
半夏7 , 展开剂 ( l)
图 2
a
. 甘草酸 b .甘葺
1
.法半夏 1 , 2 . 法半
夏 2 , 3 法半夏 3 4 ,
法半夏 4 , 5 . 法半夏
乐, 6 . 法半夏 6 , 7 , 法
半夏 7 , 展开剂 ( 2 )
1 99 1 年第 1 3 卷第 8 期
2
. 薄层扫描
(1 ) 扫描条件 : 扫描波长坑 = 2 5 6 n m ,
反射法锯齿扫描 , 灵敏度 x Z , 记录纸速 度
1 7
, 、
5 2m m /mi
n ,狭缝 1 . 2 x 1 . 2 m m ,线性参数 S X
= 1
, 背景校正 A Z S 二 N O 。
(2 ) 场的选择: 对图 2 中甘草酸斑点 ,
在波长 2 0 一 4 o o n m 范围内进行光谱扫描。
结果在 2 5 6 n m有最大的吸收 , 故 入d = 2 5 6 n m 。
(3 ) 精密度实验: 在伺一薄层板上 , 点
l
.
l m g / m l标准液 1川 7个点 , 依图 2 方法展
开 , 扫描测定 , 变异系数 C V = 1 . 69 % 。
(4 ) 稳定性 : 自薄层板挥干溶剂开始 ,
每 o . s h 测定 1 次 。 结果甘草酸 斑 点在 h5 内
稳定 。
(5 ) 标准 曲线绘制 : 用定量毛细管分别
点标准液 0 . 5 , r , 2 , 3 , 4 , 5 , 6拼1于 同一
薄层板上 , 依法展层扫描测定 。 以峰面积积分
值为纵座标 , 点样浓度为横座标做图 , 得一
不过原点的直线 。 见图3。 回归方 程为 : A =
3 3 1
.
4 7 C 一 6 5 . 3 1 , 相关系数 r = 0 . 9 9 9 4。
( 6) 回收率实验 : 在 已知甘草酸含量的
法半夏中加入定量的标准品 , 依法提取 , 展
层并扫描测定 , 计算回收率 。 结果见 表 l 。
衰 1 甘草酸加样品回收率实验
_
4
. 法半夏中甘草酸的定量检查 :
( 1) 提取方法选择 : 为了便于定量分析 ,
本文选用 l m ol / L 氢氧化馁乙醇液提取 , 并
以甘草为例与文献方法做了比较 。 结果见表
2 , 表明两种方法有同样的效果 。
表 2 提取方法选择
方 法 本 法 文献方法
提取时间 2五 2 . 5 h 3 h i . s h
甘草酸含量 2 . 0 7 5 . 2 0 5 , 2 1 3 . 15
(2 ) 样品液提取 : 精密称取法半夏 5 9置
索氏提取器中以 l m ol / L氢氧化按 乙 醇浸泡
0
.
hs
, 加热回流提取2 . h5 。 提取液浓缩至干 ,
精密加入 50 % 乙醇 l m l 溶解供测定用 。
(3 ) 测定 : 将样品液和标准品液高低浓
度各精密点于同一薄层板上 , 依法展开测定 ,
以外标两点法计算 , 结果见表 .3
表 3
编号 测定女数 _ 平均值 标准差 变异系数又 (多 ) X 1 0一 2 5刀 X 1 0一 2 C V (另 )
0
.
6 3 0
.
0 3 4
.
7 6
0
.
5 9 0
.
01 1
.
7 0
0
.
8 6 0
.
01 1
。
1 6
5
工b尸J25a4342156件`
口曰` . . . . . . .偏 . . . . .
N o 1 2 3 孟 ` R
加入钓准品量 几丁
1
.
3 1
1
.
7 4
1
,
7 9
0
.
0 3 2
.
2 9
0
.
0 4 2
.
9 0
0
.
0 2 1
.
12
工坦 g )侧得总虽 3 . 0 7 3 1 9 3 0 8 3 . 18 3 . 12 3 15
( m g )
回收率
(形 )
C V多
= 2
.
2 3
5
. 甘草利用率计算 :
以本文炮制工艺为例 , 计算公式为 :
9 9 09 1 0 4
.
4 5 99
,
5 4 1 0 4
.
0 9 1 0 1
.
36 1 02
.
7 3
利用率 (拓) -
3
. 薄层 扫描法检查 :
将图 2 薄层板 , 在薄层板上进行色谱扫
描 , 结果见图 4 。 此法可更直观 , 准确 地反
映法半夏中甘草酸的存在 。
迎一 C l W Z _ 一二 , - 1 0 0沁W 1
W Z
: 半夏用量 。 W l : 甘草用量 。
C Z: 法半夏中甘草酸含量 .
cl
:
一甘草山甘草酸含量 。
经过计算甘草利用率仅为 3 . 65 % 。
三 、 小结与讨论
法半夏与半夏相比 , 具有毒性小 , 副作
用少的优点 , 文献认为甘草酸可降低半夏的
毒副作用 , 因此本文以甘草酸为指标 , 考察
法半夏质量 , 并提出了较满意的分析方法 。
目前部分地区以水半夏 即天 南 星 科 植
物鞭 檐 梨 头 尖 T y p h o n i u m f l a g e l l i f o r m e
( L o dd
.
) B ih m e 的炮制品充当法半夏药用 ,
但它们的功效有一定差异 , 应予以纠正 。
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圈 3
1 8
标准曲魏. 田 4 薄层扫描圈讲
中 成 药