全 文 ：基金项目:贵州省优秀科技教育省长专项资金项目［黔省专合字(2006)55 号］;贵州省科学技术基金(黔科合 J字［2008］2133)
作者简介:刘文炜，女，硕士研究生，助理研究员 研究方向:植物化学成分及生物活性研究 * 通讯作者:沈祥春，男，教授，硕士生导师
研究方向:中药民族药活性研究 Tel:(0851)6908108 E-mail:shenxiangchun@ 126. com
荨麻属植物大蝎子草化学成分及质量标准研究
刘文炜1，2，沈祥春1* ，陶玲1，高玉琼2(1．贵阳医学院，贵阳 550004;2. 贵州省生物技术研究开发基地，贵阳 550002)
摘要:目的 研究荨麻属植物大蝎子草的化学成分及药材质量控制标准。方法 采用硅胶柱色谱、薄层色谱等手段进行分离
纯化，并通过波谱数据鉴定结构;采用 TLC鉴别大蝎子草中东莨菪内酯，采用 HPLC测定东莨菪内酯含量，以东莨菪内酯为对
照，采用 RP-HPLC，岛津-C18色谱柱(4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，乙腈(A)-0. 2%磷酸(B)梯度洗脱:洗脱程序 0 ～ 5 min，A-B
(25∶ 75)线性变化至 A-B(20∶ 80) ;5 ～ 10 min，线性变化至 A-B(15 ∶ 85) ;10 ～ 18 min，保持 A-B (15∶ 85) ;18 ～ 19 min，A-B(50∶
50) ;19 ～ 25 min，A-B(25∶ 75)。流速 1 mL·min －1，检测波长 298 nm，柱温 30 ℃。结果 分离鉴定了 3 个化合物，东莨菪内
酯 (1) ，山柰素(2) ，β-谷甾醇(3) ;定性鉴别薄层色谱特征明显，东莨菪内酯含量测定的线性范围为 0. 022 ～ 0. 352μg
(r = 0. 999 9) ，平均回收率(n = 6)为 92. 93%(RSD 1. 86%)。结论 化合物东莨菪内酯、山柰素为首次从该植物中分离;建
立的质量标准可准确地定性、定量，有效地控制大蝎子草药材的质量。
关键词:大蝎子草;东莨菪内酯;山柰素;β-谷甾醇;薄层色谱法;高效液相色谱法
中图分类号:R284 文献标志码:A 文章编号:1001 － 2494(2012)23 － 1943 － 04
Chemical Constituents and Quality Standard of Girardinia diversifolia (Link)Friis
LIU Wen-wei1，2，SHEN Xiang-chun1* ，TAO Ling1，GAO Yu-qiong2(1. Guiyang Medical University，Guizhou 550004，
China;2. Guizhou Institute of Biotechnology Research and Development，Guizhou 550002，China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study the chemical constituents and quality standard of Girardinia diversifolia (Link)Friis.
METHODS The compounds were isolated by silica gel column chromatography and thin layer chromatography. Their structures were
identified by physicochemical properties and various spectroscopic methods including NMR，MS，and UV，etc. Scopoletin in this prepa-
ration was identified by TLC. Its content was determined by HPLC. The separation of scopoletin was performed on a Shimadzu C18 col-
umn (4. 6 mm × 250 mm，5 μm). The mobile phase consisted of acetonitrile(A)-0. 2% phosphoric acid(B) :0 － 5 min，A-B(25∶ 75)
→A-B(20∶ 80) ;5 － 10 min，A-B(20∶ 80)→A-B(15∶ 85) ;10 － 18 min，A-B(15∶ 85) ;18 － 19 min，A-B(50∶ 50) ;19 － 25 min，A-B
(25∶ 75) ，with the flow rate of 1. 0 mL·min －1，the UV detection wavelength was 298 nm，and column temperature was 30 ℃. RE-
SULTS Three compounds were isolated and identified as scopoletin (1) ，kaempferol (2) ，and β-sitosterol. They showed obvious
characteristics in TLC identification. Good linearity was obtained over the range of 0. 022 － 0. 352μg (r = 0. 999 9)for scopoletin. The
average recovery (n = 6)was 92. 93% (RSD = 1. 86%). CONCLUSION Compounds 1 － 2 were isolated from the Girardinia diver-
sifolia (Link)Friis for the first time. The qualitative and quantitative analysis methods are accurate and suitable for effective quality
control of Girardinia diversifolia (Link)Friis.
KEY WORDS:Girardinia diversifolia (Link)Friis;scopoletin;Kaempferol;β-sitosterol;TLC;HPLC
大蝎子草在贵州作为活麻药用历史悠久，在
《楚彝本草》《滇药录》《藏本草》等均有记载，主要
用于治疗中风不语，咳嗽多痰、风湿疼痛、跌打损伤、
骨折等。
大蝎子草作为治疗药物以红禾麻药名被收录
2003 版《贵州省中药材、民族药材质量标准》，但标
准中既无薄层鉴别，也无含量测定。经过调查，贵州
不少民族地区以荨麻科蝎子草属植物大蝎子草［Gi-
rardinia diversifolia (Link)Friis］的全草或根作为活
麻药材广泛使用。荨麻属植物化学成分研究较
多［1-2］，目前对大蝎子草质量标准的研究较少［3-4］，
主要集中于其植物生态学和药效学及临床等方
面［5］，但对其质量研究内容较少，迄今笔者未见相
关研究报道内容。为提高大蝎子草质量的可控性，
本实验特对大蝎子草中抗炎有效成分东莨菪内
酯［6］含量进行测定，为大蝎子草质量控制标准提供
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依据。
1 仪器和材料
INOVA － 400 型超导核磁共振光谱仪(美国
Varian公司) ;INOVA － 400 MHz 超导核磁共振波
谱仪(美国 Varian 公司) ;LC － 2010 型高效液相色
谱仪(日本岛津公司) ;LIBROR AEL －160 型万分之
一电子分析天平(梅特勒公司) ，TG332A 型十万分
之一分析天平(日本岛津公司) ，KQ5200DB 型数控
超声波清洗器(功率 260 W，频率 40 kHz) (昆山市
超声仪器有限公司)。
东莨菪内酯对照品(110768-200504，供含量测
定用，中国药品生物制品检定所)。大蝎子草药材
采集于贵州花溪，经贵阳医学院生药学与药用植物
学教研室龙庆德副教授鉴定为蝎子草属植物大蝎子
草［Girardinia diversifolia (Link)Friis］的地上部分，
存证标本保存于药学院;实验中乙腈为色谱纯;水为
重蒸水，其他试剂均为分析纯。
2 化学成分研究
2. 1 提取和分离
大蝎子草药材 4 kg 超微粉，分别依次用石油
醚(60 ～ 90 ℃)、乙酸乙酯、乙醇浸泡，浸泡液浓
缩后分别上硅胶柱色谱、薄层色谱、再结晶，得到
化合物 1 (28 mg) ，化合物 2(10 mg) ，化合物 3
(220 mg)。
2. 2 结构鉴定
化合物 1:淡黄色晶体(乙酸乙酯) ，mp 205 ～
207 ℃ ;365 nm 下有强烈蓝色荧光。1 H-NMR
(CDCl3，600 MHz)δ:7. 59(1H，d，J = 9. 5 Hz，H-
4) ，6. 92(1H，s，H-8) ，6. 85(1H，s，H-5) ，6. 28
(1H，d，J = 9. 5 Hz，H-3) ，6. 26(1H，s，7-OH) ，3. 96
(3H，s，6-OCH3) ;
13 C-NMR(CDCl3，150 MHz)δ:
161. 4(C-2) ，150. 3(C-8a) ，149. 7(C-6) ，144. 0
(C-7) ，143. 3(C-4) ，113. 4(C-3) ，111. 5(C-4a) ，
107. 5(C-8) ，103. 2(C-5) ，56. 4(6-OCH3)。由以
上波谱数据和理化性质结合参考文献［7］鉴定该化
合物为东莨菪内酯(scopoletin)。
化合物 2:黄色粉末，mp 273 ～ 275 ℃，HCl-Mg
粉反应阳性。1H-NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ:6. 19
(1H，d，J = 1. 5 Hz，H-6) ，6. 44 (1H，d，J = 1. 5 Hz，
H-8) ，8. 03(2H，d，J = 8. 0 Hz，H-2，6) ，6. 92 (2H，
d，J = 8. 0 Hz，H-3，5) ;13 C-NMR(DMSO-d6，125
MHz)δ:146. 9(C-2 ) ，135. 8(C-3 ) ，176. 0(C-4 ) ，
156. 3(C-5) ，98. 4(C-6) ，164. 0(C-7) ，93. 7(C-8) ，
160. 8(C- 9) ，103. 2(C-10 ) ，121. 8(C-1) ，129. 7
(C-2，6) ，115. 6(C-3，5) ，159. 3(C-4)。由以上
波谱数据和理化性质结合参考文献［8］鉴定该化合
物为山柰素(kaempferol)。
化合物 3:白色针晶，mp 137. 5 ～ 139. 5 ℃。EI-
MS m/z:414，396，381，367，351，329，303，273，255，
213，199，159，145，95，81，43。与 β-谷甾醇对照品
TLC的 Rf 值一致，且混合熔点不下降，确定为 β-谷
甾醇(β-sitosterol)。
3 质量标准研究
3. 1 东莨菪内酯 TLC鉴别
取大蝎子草药材细粉 5 g，加甲醇加热回流 2
h，滤过，滤液挥干，残渣加 1%的盐酸溶液 30 mL
超声(功率 260 W，频率 40 kHz)使溶解，水浴水
解 3 h，放冷，加乙酸乙酯萃取 3 次，每次 15 mL，
合并乙酸乙酯液，加水洗涤至中性，乙酸乙酯液
经放有无水硫酸钠 2 g 的滤纸滤过，滤液蒸干，残
渣加乙酸乙酯 1 mL 溶解，作为供试品溶液。另
取东莨菪内酯对照品适量，加乙酸乙酯制定每 1
mL 含 0. 2 mg 的溶液，作为对照品溶液。分别取
上述溶液各 5 μL ，照薄层色谱法(《中国药典》
2010 年版一部附录Ⅵ B)实验，分别点于同一硅
胶 G 薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲酸(7. 5 ∶
5 ∶ 0. 8)为展开剂，展开，取出，晾干，于紫外 365
mn 下观察，供试品色谱中，在与对照品色谱相应
的斑点位置上，显相同颜色斑点。见图 1。
图 1 大蝎子草中东莨菪内酯鉴别 TLC 图
1 －贵州遵义大蝎子草;2 －贵州花溪大蝎子草;3 －东莨菪内酯对照品;4 －贵
州黔南大蝎子草
Fig. 1 TLC chromatograms of scopoletin in Herba Girardinia
1 － sample solution of Herba Girardinia produced at Zunyi;2 － sample solution of
Herba Girardinia produced at Huaxi;3 － standard solution of scopoletin;4 － sample
solution of Herba Girardinia produced at Qiannan
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3. 2 东莨菪内酯 HPLC含量测定
3. 2. 1 色谱条件 岛津-C18色谱柱(4. 6 mm × 250
mm，5 μm) ;流动相组成:乙腈(A)-0. 2%磷酸溶
液(B) ;流速:流速 1 mL·min －1;检测波长:298
nm;柱温 30 ℃;进样量 10 μL。洗脱时间程序:洗
脱程序 0 ～ 5 min，A-B(25∶ 75)线性变化至 A-B(20∶
80) ;5 ～ 10 min，线性变化至 A-B(15 ∶ 85) ;10 ～ 18
min，保持 A-B (15∶ 85) ;18 ～ 19 min，A-B(50∶ 50) ;
19 ～ 25 min，A-B(25∶ 75)。在此色谱条件下东莨菪
内酯的分离大于 1. 5，拖尾因子在 0. 95 ～ 1. 05，分
离度良好，色谱图见图 2。
3. 2. 2 对照品溶液的制备 精密称取东莨菪内酯
对照品适量，加甲醇制成每 1 mL含 8. 8 μg 的溶液，
即得。
3. 2. 3 供试品溶液的制备 取大蝎子草药材细粉
2 g，精密称定，精密加入甲醇-25%盐酸(40∶ 1)溶液
25 mL，称定重量，加热回流 3 h，放冷，再称定重量，
用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。
3. 2. 4 线性关系考察 分别配置含东莨菪内酯
2. 2、4. 4、8. 8、17. 6、35. 2 μg·mL －1的对照品溶液，
按“3. 2. 1”色谱条件进样，测得峰面积积分值，以东
莨菪内酯质量浓度(μg·mL －1)为横坐标(ρ) ，色
谱峰面积为纵坐标(Y) ，绘制标准曲线，得回归方
程为:Y = 35 572ρ － 4 780，r = 0. 999 9。结果表明，
东莨菪内酯在 0. 022 ～ 0. 352 μg线性关系良好。
3. 2. 5 精密度实验 精密吸取东莨菪内酯对照品
图 2 东莨菪内酯对照品溶液和蝎子草药材样品溶液的高
效液相色谱图
A －东莨菪内酯对照品 HPLC色谱图;B －蝎子草药材样品 HPLC色谱图
Fig. 2 HPLC chromatograms of standard solution and sample
A － standard solution;B － sample solution
溶液(8. 8 μg·mL －1)10 μL，连续重复进样 5 次，记
录峰面积，测得 RSD 为 0. 40%，表明仪器精密度
良好。
3. 2. 6 重复性实验 精密称取同一大蝎子草药材
细粉 6 份(贵州花溪) ，按上述供试品溶液制备项
下方法操作，在上述色谱条件下进行测定，计算东莨
菪内酯含量，结果药材中东莨菪内酯的含量平均值
(n = 5)为 94. 35 μg·g －1;RSD为 1. 42%，表明该方
法重复性良好。
3. 2. 7 稳定性实验 取同一供试品溶液，室温下放
置，分别于 0，2，4，6，8，10 h 进样测定 1 次，求得东
莨菪内酯峰面积的 RSD为 0. 56%。结果表明，供试
品溶液在 10 h 内稳定。
3. 2. 8 回收率实验 精密称取已知含量的大蝎子
草药材细粉 1 g，6 份，分别精密加入含东莨菪内酯
对照品 3. 2 μg·mL －1的甲醇-25%盐酸(40 ∶ 1)25
mL，按“3. 2. 3”供试品制备方法制备所需溶液，测定
含量，计算回收率，结果东莨菪内酯平均回收率
(n = 6)为 92. 93%，RSD为 1. 86%。
3. 2. 9 样品的测定 精密称取贵州花溪、贵州遵
义、贵州黔南 3 个不同产地大蝎子草药材细粉各 2 g
(3 份) ，按“3. 2. 2”项下操作，在“3. 2. 1”色谱条件
下进行分析。东莨菪内酯的含量分别为 94. 35
μg·g －1 (RSD 1. 24%)、45. 97 μg · g －1 (RSD
1. 46%)、40. 32 μg·g －1(RSD 1. 33%)。
4 讨 论
4. 1 流动相的选择
曾采用甲醇-0. 2%磷酸溶液、乙腈-0. 2%磷酸
溶液等流动相等度洗脱，但东莨菪内酯峰分离较差，
经过大量实验研究，乙腈-0. 2%磷酸溶液进行梯度
洗脱程序，药材东莨菪内酯峰分离较好，分离度均
大于 1. 5。
4. 2 供试品溶液制备方法的选择
4. 2. 1 提取溶剂的选择 分别采用甲醇、乙醇、
50%甲醇、50%乙醇、不同浓度盐酸-甲醇等溶剂对
样品进行加热回流提取，结果甲醇-25%盐酸(40∶ 1)
提取含量高。
4. 2. 2 提取时间的选择 取样品 6 份，加入甲醇-
25%盐酸(40 ∶ 1)分别回流提取 1、1. 5、2、2. 5、3、
3. 5、4 h，结果提取 3 h样品含量最高，故选用提取 3
小时为提取时间。
4. 3 小结
东莨菪内酯有抗关节炎的作用，是大蝎子草治
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疗关节炎的有效成分，故对药材中东莨菪内酯进行
含量测定，能有效地反应药材的质量;本方法可为药
材的质量控制提供依据。
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(收稿日期:2012-02-09)
2012 年中国药学大会暨第十二届中国药师周在江苏省南京市隆重召开
2012 年中国药学大会暨第十二届中国药师周 2012 年 11 月 19 日至 21 日在江苏省南京市隆重举行，大会主题是:“创新型
生物医药产业发展与临床合理用药”。
出席本次大会的有中国科协、国家食品药品监督管理局、卫生部、民政部、国家发改委、工业和信息化部、科技部、总后卫
生部、江苏省政府、南京市政府及有关部门、国家食品药品监督管理局有关司局及直属单位、各省市区食品药品监督管理局、
各省市药学会等部门领导，两院院士、中国药学会理事、新闻媒体记者，以及来自医药科研院所、大专院校、医院、生产企业、流
通企业等药学专家学者，共计 2 500 余人。
全国人大常委会副委员长、中国药学会理事长桑国卫院士致开幕词。江苏省委副书记、江苏省人民政府省长李学勇，卫
生部部长、中国科学院院士陈竺，卫生部副部长、国家食品药品监督管理局局长尹力，中国科协副主席、书记处书记程东红，卫
生部副部长、国家中医药管理局局长王国强，解放军总后勤部卫生部副部长方国恩，工业和信息化部总工程师朱宏任，中共南
京市委副书记、南京市人民政府市长季建业分别在开幕式上致辞。中国药学会副理事长兼秘书长丁丽霞主持大会开幕式。
大会开幕式上，颁发了 2012 年中国药学会优秀药师奖(72 名) ;2012 年中国药学会 －赛诺菲安万特青年生物药物奖(8
名，详见第 1898 页) ;2012 年中国药学会-石药集团青年药剂学奖(6 名，详见第 1919 页) ;2012 年中国药学会科学技术奖(20
项，详见第 1904 页) ，其中一等奖 1 项，二等奖 3 项，三等奖 16 项，南京绿叶思科药业有限公司、江苏省药物研究所有限公司联
合申报的抗肿瘤药物新剂型“注射用紫杉醇脂质体”关键技术研究及产业化项目获得一等奖。
本次大会共邀请 6 位两院院士、2 位著名药学专家作大会学术报告，他们是:中国药学会理事长、中国工程院院士桑国卫
(我国生物医药产业和创新药物发展战略) ，中国科学院院士、中国药学会副理事长陈凯先(转化医学和新药研究) ，中国工程
院院士、第四军医大学教授陈志南(当代抗体药物的发展与趋向) ，中国工程院院士、中国科学院上海药物研究所所长丁健(靶
向抗肿瘤药物—分子生物标志物) ，中国工程院院士、河北省中西医结合医药研究院院长吴以岭(中医理论创新提高中药原创
水平) ，中国科学院院士、武汉大学教授张俐娜(菌类多糖的二级结构及生物活性) ，中国食品药品检定研究院副院长王军志研
究员(生物制品质量及标准化研究进展) ，兰州大学基础医学院院长王锐教授(多肽新药创制中的关键科学问题研究进展)。
在本次大会上，中国药学会所属的生化与生物技术药物、中药和天然药物、抗生素、医院药学等 20 个专业委员会分别设立
分会场作特邀主题报告及论文交流，经过专家组评审，共评出优秀论文 44 篇(详见第 1898 页)。
本次会议作为我国全面进入建成小康社会决定性阶段的重要会议，深入贯彻落实党的十八大精神，建好药学工作者之
家，完成学会“十二五”规划中的阶段性工作是当前工作之重。党的十八大报告明确提出坚持科学发展观的指导思想，与时俱
进发展中国特色社会主义，加快完善社会主义市场经济体制和加快转变经济发展方式，推进社会主义文化强国建设等重要思
想，及时引导广大药学工作者，把智慧和力量凝聚到实现党的十八大确定的各项目标任务上来，不辱使命，不负各级领导和社
会各界重托，竭诚努力，锐意进取，广泛团结和动员广大药学科技工作者，在加快我国药学科技事业改革与发展、建设创新型
国家、构建和谐社会等方面，扎扎实实履行好学会承担的桥梁和纽带的重要职责。
本次大会由中国药学会、江苏省人民政府主办，南京市人民政府、江苏省食品药品监督管理局、中国药科大学承办，南京
市食品药品监督管理局、江苏省药学会、南京圣和药业有限公司、广西梧州制药(集团)股份有限公司协办。
［本刊讯］
·6491· Chin Pharm J，2012 December，Vol. 47 No. 23 中国药学杂志 2012 年 12 月第 47 卷第 23 期