全 文 ：［收稿日期］ 2010-04-19
［基金项目］ 新疆维吾尔自治区自然科学基金(200821130)
［第一作者］ 施洋，硕士研究生，研究方向为中药活性成分筛选
［通讯作者］ * 田树革，教授，硕士生导师，多年从事新疆中药、
民族药活性成分研究，Tel:15999441880，E-mail:
tianshuge@ hotmail. com
HPLC测定新疆不同产地唇香草中齐墩果酸和熊果酸的含量
施洋1，2，徐暾海3，田树革1，2*
(1. 新疆医科大学中医学院，乌鲁木齐 830011;2. 新疆名医名方与特色
方剂学重点实验室，乌鲁木齐 830011;3.北京中医药大学中药学院，北京 100102)
［摘要］ 目的:建立维药唇香草中齐墩果酸、熊果酸的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法，色谱柱 ODS C18柱
(4. 6 mm × 150 mm，10 μm)，流动相甲醇-0. 03 mol·L － 1磷酸盐缓冲液(90∶ 10，pH 3)，检测波长 214 nm，流速 0. 5 mL·min － 1，进
样量 10 μL。结果:齐墩果酸在 0. 4 ～ 1. 2 g·L － 1线性关系良好，r = 0. 999 6，平均回收率 99. 5%，RSD 1. 19%;熊果酸在 0. 6 ～
1. 8 g·L － 1线性关系良好，r = 0. 999 6，平均回收率 102. 3%，RSD 1. 25%。结论:本方法简单快捷，适用于测定唇香草中齐墩果
酸和熊果酸的含量。
［关键词］ 唇香草;高效液相色谱法;齐墩果酸;熊果酸;含量测定
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ B ［文章编号］ 1005-9903(2010)16-0033-03
Determination of Oleanolic Acid and Ursolic Acid in Ziziphora
Clinopodioides by HPLC from Different Districts in Xinjiang
SHI Yang1，2，XU Tun-hai3，TIAN Shu-ge1，2*
(1 . College of Traditional Chinese Medicine，Xinjiang Medical University，Urumqi 830011，China;
2 . Xin jiang Key Laboratory of Famous Prescription and Science of Formulas，Urumqi 830011，China;
3 . College of Traditional Chinese Medicine，Beijing University of
Traditional Chinese Medicine，Beijing 100102，China)
［Abstract］ Objective:To establish an HPLC method for the simultaneous determination of oleanolic acid
and ursolic acid in Uygur medicine Ziziphora clinopodioides. Method:A ODS C18(4. 6 mm × 150 mm，10 μm)
column was adopted. The mobile phase consisted of methanol and 0. 03 mol·L － 1 phosphate buffer (pH 3，90:10).
Detection wavelength was at 214 nm. The flowrate was 0. 5 mL·min － 1 . The injection volumn was 10 μL. Result:
oleanolic acid was linear in the range was 0. 4-1. 2 g·L － 1(r = 0. 999 6). ursolic acid was linear in the range was
0. 6-1. 8 g·L － 1(r = 0. 999 6)，and the linear relationship is accurate. The average recovery (n = 6)of oleanolic
acid was 99. 5% (RSD 1. 19%) and ursolic acid was 102. 3% (RSD 1. 25%). Conclusion:The method was
simple，feasible and reproducible，and can be used for the simultaneous determination of oleanolic acid and ursolic
acid in Z. clinopodioides.
［Key words］ Ziziphora clinopodioides Lam.;HPLC;oleanolic acid;ursolic acid;determination
维药唇香草 Ziziphora clinopodioides Lam. 为唇形
科植物，维吾尔名称为苏则［1-2］。本品为多年生半灌
木状草本，喜生于低山坡、草地及干旱坡地上，分布于
新疆、前苏联、蒙古及中亚地区亦有分布。性味辛凉、
微苦，具有强心利湿、理气化痰、消炎散结的功效，维
吾尔医将唇香草长期用于临床治疗冠心病、心绞痛、
气管炎、肺脓肿的复方中［3］，具有明显改善冠心病患
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第 16 卷第 16 期
2010 年 11 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 16，No. 16
Nov.，2010
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2010.16.019
者的心肌缺血缺氧症状，动物实验结果证实该药可明
显延长缺氧小鼠模型的生存时间，具有很好的抗心肌
缺血缺氧作用［4］。天香丹颗粒为新疆医科大学附属
中医医院院内制剂，具有益气补虚，和血通络，化痰散
结的功效，临床上长期用于治疗冠心病、胸闷胸痛、气
短、心悸、眩晕等症，具有良好的临床疗效，对天香丹
颗粒的研究主要集中在临床药理学方面。唇香草为
天香丹颗粒组方的主药，经前期查阅相关文献及预实
验已知唇香草中含有齐墩果酸和熊果酸，现通过对新
疆 8 个不同产地唇香草中齐墩果酸和熊果酸的含量
测定，以期为天香丹颗粒建立科学的质量标准提供理
论依据。
1 材料
1. 1 仪器 LC-6AD 高效液相色谱仪，SPD-20A 型
紫外检测器，CBM-20A 色谱工作站(岛津公司)。
XS105 型 1 /10 万电子天平(梅特勒-托利多)，AL204
型 1 /万电子天平(梅特勒-托利多)，KQ-200KDE 型
高功率数控超声清洗器(昆山市超声仪器有限公
司)。
1. 2 试剂 齐墩果酸、熊果酸对照品(中国药品生
物制品检定所，批号 110709-200304，110742-200516
含量测定用)。甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试
剂均为分析纯。
1. 3 样品 唇香草采摘于新疆 8 个不同产地(阿勒
泰、吉木萨、木垒、阜康、乌拉泊、雅玛里克山、水西
沟、后峡鹰沟)，经新疆医科大学中医学院李永和主
任 药 师 鉴 定 为 唇 形 科 植 物 唇 香 草 Ziziphora
clinopodioides Lam.的样品标本存于新疆医科大学中
维药展览馆。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱 ODS C18柱(4. 6 mm × 150
mm，10 μm)，流动相甲醇-0. 03 mol·L － 1磷酸盐缓冲
液(90∶ 10，pH 3)，检测波长 214 nm，流速 0. 5 mL·
min － 1，进样量 10 μL。在上述色谱条件下，齐墩果酸
和熊果酸在混标和样品中分离效果良好，空白无干
扰，见图 1 ～ 2。
2. 2 混合对照品溶液的配制 分别精密称取齐墩
果酸、熊果酸对照品适量，以甲醇配制成 2. 0 g·L － 1
的齐墩果酸和 3. 0 g·L － 1的熊果酸混合对照品溶液，
摇匀。
2. 3 供试品溶液的制备 精密称定不同产地的唇
香草粗粉 10. 0 g，以甲醇 100 mL 为溶剂，超声提取
图 1 齐墩果酸、熊果酸混标分离
1.齐墩果酸;2.熊果酸
图 2 唇香草样品分离
1.齐墩果酸;2.熊果酸
30 min，过滤并转移至 100 mL 量瓶中，用甲醇定容
至刻度，摇匀，过 0. 45 μm 微孔滤膜，即得。
2. 4 线性关系考察 精密吸取混合对照品溶液
1. 0，1. 5，2. 0，2. 5，3. 0 mL，置于 5 mL 量瓶中，加甲
醇定容至刻度，摇匀。分别吸取上述各溶液 10 μL，
进样，以浓度(X)为横坐标，峰面积(Y)为纵坐标，进
行线性回归，齐墩果酸线性回归方程为 Y = 5. 14 ×
106X － 1. 10 × 105，r = 0. 999 6;熊果酸线性回归方程
为 Y = 3. 69 × 106X － 1. 13 × 105，r = 0. 999 6。
2. 5 精密度试验 精密吸取含混合对照品溶液 10
μL，按上述色谱条件测定，连续进样 6 次。测定齐
墩果酸和熊果酸峰面积积分值，RSD 分别为 1. 53%
和 1. 13%。实验结果表明，该方法精密度良好。
2. 6 稳定性试验 精密吸取混合对照品溶液，分别
在 0，2，4，8，24 h 进样，测定齐墩果酸和熊果酸的峰
面积积分值，RSD 分别为 1. 40%和 1. 58%。实验结
果表明，供试品溶液在 24 h 内稳定。
2. 7 重复性试验 精密称定乌拉泊唇香草药材粗粉
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第 16 卷第 16 期
2010 年 11 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 16，No. 16
Nov.，2010
6 份，按 2. 3 项下方法操作，按上述色谱条件测定含
量。齐墩果酸、熊果酸锋面积的 RSD 分别为 1. 86%
和 1. 62%。实验结果表明，该方法测定齐墩果酸和熊
果酸含量准确可靠。
2. 8 回收率试验 分别取已知含量的乌拉泊唇香草
6 份，每份约 5. 0 g，各加 3. 80 mg 齐墩果酸对照品和
5. 92 mg 熊果酸对照品，样品按 2. 3 项下方法处理后
测定，标准曲线法计算含量，计算加样回收率。齐墩
果酸和熊果酸平均回收率结果见表 1，2。实验结果表
明，该方法测定齐墩果酸和熊果酸含量准确可靠。
表 1 齐墩果酸回收率实验
No.
取样量
/ g
样品含量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD
/%
1
2
3
4
5
6
5. 00
5. 00
5. 00
5. 00
5. 00
5. 00
3. 80
3. 80
3. 80
3. 80
3. 80
3. 80
3. 80
3. 80
3. 80
3. 80
3. 80
3. 80
7. 64
7. 59
7. 51
7. 58
7. 56
7. 61
101. 1
99. 7
97. 6
99. 5
98. 9
100. 2
99. 5 1. 19
表 2 熊果酸回收率实验
No.
取样量
/ g
样品含量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD
/%
1
2
3
4
5
6
5. 00
5. 00
5. 00
5. 00
5. 00
5. 00
5. 88
5. 88
5. 88
5. 88
5. 88
5. 88
5. 92
5. 92
5. 92
5. 92
5. 92
5. 92
12. 01
11. 93
11. 83
11. 95
12. 03
11. 87
103. 5
102. 1
100. 5
102. 5
103. 8
101. 2
102. 3 1. 25
2. 9 不同产地唇香草中齐墩果酸和熊果酸含量测
定的结果 不同产地的唇香草按 2. 3 项下方法处理
后测定 5 次，求均值，按标准曲线法计算含量。齐墩
果酸和熊果酸含量测定结果见表 3，4。
表 3 不同产地唇香草中齐墩果酸的含量
产地 齐墩果酸平均峰面积 齐墩果酸含量 /mg·g － 1
雅玛里克山 939 875 2. 044
木垒 1 269 928 2. 686
后峡鹰沟 671 643 1. 522
阜康 1 527 370 3. 187
阿勒泰 1 805 110 3. 728
水西沟 826 427 1. 823
吉木萨 817 236 1. 805
乌拉泊 584 660 1. 352
表 4 不同产地唇香草中熊果酸的含量
产地 熊果酸平均峰面积 熊果酸含量 /mg·g － 1
雅玛里克山 442 386 1. 505
木垒 567 703 1. 845
后峡鹰沟 797 717 2. 468
阜康 1 038 346 3. 119
阿勒泰 874 975 2. 677
水西沟 982 832 2. 969
吉木萨 876 970 2. 682
乌拉泊 699 089 2. 201
3 讨论
本实验以 HPLC 同时测定唇香草中齐墩果酸和
熊果酸的含量，分离效果理想，重复性好，简便快捷。
对新疆 8 个不同产地的唇香草中齐墩果酸和熊果酸
进行含量测定后发现，不同产地的唇香草中齐墩果
酸和熊果酸的含量存在着明显差异。这可能是由于
唇香草在新疆不同的生长地区，受到温度、湿度、土
质、光照、海拔、纬度、昼夜温差等生长环境因素的影
响所造成的。同时说明欲通过测定唇香草中某些特
质组分的含量，为唇香草建立科学的质量标准仍存
在一定的困难，因此对唇香草质量标准的建立依然
需要深入系统的研究，探寻更为科学、客观的参考标
准。
［参考文献］
［1］ 刘勇民，沙吾提·伊克木 . 维吾尔药志［M］. 上册 . 乌鲁
木齐:科技卫生出版社，1999:446.
［2］ 米吉提·胡达拜尔地，潘晓玲 . 新疆植物志［M］. 第四
卷 .乌鲁木齐:新疆科学技术出版社，2004，7(4):326.
［3］ 陈希元，于晖 .唇香草抗心肌缺血药理作用得研究［J］.
新疆药讯，1982，(2):66.
［4］ 安冬青，胡金霞，赵明芬，等 .天香丹对冠心病病人血管
内皮生长因子及相关因子的影响［J］. 中西医结合心
脑血管病杂志，2007，5(8):662.
［责任编辑 顾雪竹］
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第 16 卷第 16 期
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Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
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