全 文 ：阿魏侧耳某些生物学特性的初步研究
曹玉清 牟川静 陈忠纯 王秀云
(中国科学院新疆生物土城沙漠研究所 ,乌鲁木齐 )
阿魏侧耳 [p l。 。 , .0 2“ ` e妙 。 9 1 ( D C . e x F r . )
Q u召 . ] 又名阿魏蘑菇 , 是新疆的特产 。 春 、 夏初
自然生长在阿魏 ( F r y l o v i i k o r o v ) 根上 及阿魏
滩上 , 是当地的一种食用菌 , 味道鲜美 , 肉厚 。
19 8 3年 5 月我们在新疆托里地区海拔 7 90 米至
l 斗0 0米山区托里阿魏根上及阿魏滩上采到野生
的阿魏侧耳标本 ,做了组织分离 ,并连同阿魏根
一起进行培养 , 于同年 9 月在罐头瓶里长出了
第一批人工培养的阿魏侧耳的子实体 , 同时对
其生物学特性进行了初步研究 。 阿魏侧耳的人
工培养为开发食用菌资源奠定了基础 。
材 料 和 方 法
(一 ) 菌种
K 0 0 1
、
K 0 0 2 和 K 0 0 5 由野生阿魏侧耳分
离得到。
(二 ) 培养签
1
. 组织分离用培养基 : P D A 培养基 。
2
. 栽培用培养基 : 以棉籽壳 、 锯木屑为主
料 ;以鼓皮 、 阿魏根屑和石膏粉为辅料 (见表 1 ) 。
农 1 舰 晓 婚 井 `
棉籽壳 ! 扶皮 玉米粉
材
豆饼粉
料
柞木屑
及
松木屑
含
石膏粉
t (% )
蔗搪 } 尿素 l 磷肥 l阿魏根属
丁8 6 0 l丰23 0 76 3 23 0 6 3 l 22 8 76 3 23 3 l4 07 3 斗0 l4 0 13 8 110 ll
1
.
2 号培养基中的阿魏根屑直接拌入料中 ; 7 和 8 号培养基中的阿魏根屑放人水中煮沸 2 0分钟后 ,一并伴人料中 。
2
.
10 种培养基中的料 :水 , 1: 1 . 8一 2 . 0
_
3
. 温度实脸是在保温箱内进行的 , 而相对
湿度的保持是在盛有自来水的摘瓷盘上扣大小 本实验承蒙郭志刚同志帮助准备部分栽堵材料 ; 贺文轰同志提供氨基酸分析数据 ,表示感谢 。
DOI : 10. 13344 /j . mi crobi ol . chi na . 1985. 03. 001
不同的铁丝筐 , 再盖上湿纱布以增加自由蒸发
面和喷雾方法进行调节的 , 然后用千湿球湿度
计测定。 光照用 Z D一 1 型照度计测定 , 以室内
散射光为光源 , 用 P H S 一 2 型酸度计测 培 养基
酸度 , 用 R LA 一 , 型氨基酸自动分析仪测氨基酸
含 t 。
结 · 果 与 讨 论
(一 ) 形态特征
阿魏侧耳的子实体形态和色泽等特征 , 除
受子实体内在的种性基因决定外 , 还受外界生
农 2 予实体特征比软
子舒之之 K 001 K 0 0 2 K 0 0 5
翻 形 态 扁半球形 ,后渐平展 , 最后下凹 同 K 0 0 1 同 K 0 0 1
盖 大小(直径 。二 ) 不等 , 4一 7 不等 , 6一 8 不等 , 2一 斗
色 泽 初期浅褐色 ,后渐成白色 同 K 0 0 1 同 K OO I
苗肉厚度 ( c m ) 肉质 0 . 3一 2 . , , 中央厚边缘薄肉质 0 . 3一 3 . 0 , 中央厚边缘薄肉质 0 . 3一 2 . 5, 中央厚边缘薄
菌 形 态 稍密 ,长短不齐 ,平滑 同 K 0 0 1 同 K 0 0 1
摺 色 泽 白 ,后变淡黄色 , , , ,
与菌柄粉生方式 延 生 , , , ,
菌 形 态 回柱伏 ,向下渐细 同 K 0 0 1 同 K 0 0 1
柄 长度 ( e m ) 不等 , 4一 6 不等 6一 9 不等 , 8一 12
直径 ( e m ) 不等 , 1 . 3一 1 . 5 不等 , 2 . 2一 3 . 8 , 不等 , 2 . 0一 3 . 0
粉生位里 偏 生 偏 生 偏 生
质 地 中实 , 较柔嫩 同 K 0 0 1 同 K 0 0 1
担抱子形态 同 K 0 0 2 无色 , 光滑 , 长方枕圆形 同 K 00 2至椭圆形 ,有内含物 , 14 . 63 一
15
.
9 6 x 5
.
3 2一 7 . 7 8朴m
活条件的影响而有差异 。 比较瓶栽阿魏侧耳在
相同管理条件下子实体的异同形态见表 o2
也高于野生的阿魏侧耳。 无论是野生的还是栽
培的阿魏侧耳 , 谷氨酸含量都比决高。
(二 ) 分类地位
阿魏侧耳属于真菌门 ( E u m yco at ) 担子菌
纲 ( asB i di o m y c e et s ) 伞菌目 ( A g a r i e a le s )白蘑科
( T
r i eh ol o诚 t ac e ae ) 侧耳属 ( P l e u or , u , ) 。
学名 : lP o olr “ , e明沙 ( D C . ex rF . ) Qu61 .
异名 : 尸介“ or 御 , 加“ ale eL nz i 是有性生殖
方式为异宗结合四级性的菌类 。
(四 ) 生活余件
(三 ) 子实体质 ,
根据出菇情 况 , K 0 01 和 K 0 02 的菇形较
整齐 , 畸形菇少 ,菌柄短。 而 K 0 5 菇形差异较
大 ,畸形菇较多。 经氨基酸分析 , 3 株菌均含有
1 7种氨基酸。 从表 3 中看出各种氮基酸含最 ,
栽培的 K 0 1精氨酸明显地高于 K 0 2和 K 0 0 5 ,
1
. 营养 : 表 1 中的 10 种培养基均适合 3
株菌的生长 , 其中以 1、 2 、 5、 6 和 10 号培养基
上的菌丝生长尤其旺盛 。 在每瓶装干料约 1 0
一 12 09 条件下 , K 0 2 可在 10 种培养基上分化
子实体 , 除在 3 、 4 号培养基上 出菇很小外 , 其
余生长正常 , 在 1 号培养基上可长出鲜重 1 1 29
的大菇 , 甚至有的一次可以同 时 长 出 2一 3 个
菇 , 其中最重的有 5 2 9 , 最轻的有 1 3 9。 x o o l 可
以在 1 、 6 、 7 和 1 0 号培养基上出菇。 K 0 0 5 可
在 l 、 7 和 10 号培养基上出菇 。
综上所述 , 1、 7 和 10 号培养基对 3 株菌出
菇均适合 , 说明阿魏侧耳在有无阿魏根屑的培
养基中均能生长。 3 株菌在 10 号培养基 上的
农 3 阿魏侧耳扭备吐t t (创1 0 0 9 千菇 )
K 0 0 1 K 0 0 2 K 0 0 5…一一一.4一农成分与~ ~ 、 ~ ~ 菌 号含t ~ ~ 、 ~ ~ ~ 一~ 叭270491[6a81牡科3n“6权眨杨n甘ù日ùx1nUn,j八UnCn.1nó1日峪.0291758阳铭们43八2nlóx` .1nU1.,ónù00nCU。,人C、J`Ud .R,乙孟ln…. .孟n甘、`J;::: 1 . 4 30 . 月9l 。 4 62 。 6 81 。 2 21。 2 84 . 0 40。 5 31 . 2 6I 。 5 40 . 0 51 . 2 90 . 5 1
0
.
9 8
l
。
7 5
0
.
56
1
.
8 8
2 2
.
9 5
109九朽%27权洲562103-2120
产卜U只n.18了O月’ t/`,`JZJ护匕尹O, .d`lǎ10ù-魂`ùQ了1n.U臼,门ZJ.,人了O.….`1,rl` .L1,jnUn。八flC,ōnU二n
,`
酸
氨氮基
氮氨
冬耽硫亮丙氨
赖组精天丝苏谷脯甘半丙绷甲异亮酩苯总
生长特征见表 4 。
2
.
p H 值 : 测定托里阿魏根系土的 p H值为
7
.
8 ,
,属微碱性土 。 对配制斜面培养基的各种浸
出汁 p H 值和加人各种营养成分后的 p H 值 , 以
及灭菌前后的 p H 值做了测定 , 结果见表 5 。 用
稀盐酸调麦芽汁 p H 为 5 . 0 , 用石灰水调拌料用
水 p H 为 1 和 9 , 在此条件下菌丝依然生长 ,说
明阿魏侧耳的菌丝可在 p H S一 1 的基 物上生
长 , 但菌丝生长的最 适 p H 为 5 . 5一 6 . 5。 子实
在 10 号培井舀上 . 胜生长的特征 ( 25 ℃ )一卜卜\ 产 ” . K 0 0 1 K 0 02 K 0 0 S观察项目 ~ \ \ ~ 一
菌丝长满瓶夭数 2 0 2斗 2 3
菌丝生长速度 (m m / 日 ) 4 3 . 3 3。 5
菌丝长满瓶至子实休 斗0 4 l 40分化所需天数
菌丝生长特征 旺盛 ,菌 旺盛 ,菌 旺盛 ,菌索较细 索粗壮 , 索细多
农 5 各种料面培并 . p H 位比较
5% 1 0% 2 0% 2 0% 5%
玉米粉 肤 皮 棉籽壳 马铃 , 阿魏根屑
第 及 出 汁 7 . 0 8 6。 8 7 6 . 5 8 7 . 6 0 7。 0 1 5 . 9 0
组 灭 菌 后 7 . 02 6 . 5 1 6 . 1 4 7。 5 9 6 . 5 9 5 . 7 0
第 浸出汁十 2肠翻萄艳 6 . 斗2 6 . 1 7 6 . 1 0 6 . 6 2 6 . 3 7殖 0 . 3呱蛋 白陈
灭菌后 6。 3 3 6 . 1 4 5 . 9 5 6 . 3 3 6 . 0 0
第 浸出汁 十 6 . 2 2 6 . 0 5 6。 0 0 6。 3 5 6。 25组 2%葡萄糖
0
.
3%蛋白陈
0
.
07 %磷酸二氢钾
0
.
06 %硫酸钱
0
.
2%酵母浸膏
灭 菌 后 6 . 18 6 . 0 2 5 . 9 0 6 . 1 8 6 . 0 8
1
.玉米粉水溶液于 70 ℃水浴保温一小时 ,取毖液 。
抽彼 . 3 . 灭菌 I k` /e m 盆 , 2 0分钟 。
2
. 肤皮 、 棉仔壳 、 马铃签和阿魏根屑的水溶液均煮沸 20 分钟后 ,取
二 子鑫体分化时绮井谷 pH 位
培养荃 pH 值
l
` 养基 pH 值
1 5
.
7 3
{
` , 。 6 2
2 月 . 3 9
!!
7 5
.
3 4
3 5
.
3 1
{}
8 5
.
0 5
4 4
.
3 8
}
9 5
.
3 3
5 5
.
6 3
}
,。 5 . 83
体分化时 , 10 种培养基的 州 值见表 6 所示 。
3
. 温度 : 比较阿魏侧耳菌丝在不同温度下
的生长速度和健壮程度 (见表 7 、 8、 9 ) , 看出菌
丝生长的最适温度为 25 一 28 ℃ 。 当菌 丝 生长
到一定的成熟阶段 , 要给予适当的低温条件 ,使
其形成原基开始分化子实体 , 一般控制在 O一
1 3℃ 。 子实体 发育温度以 15 一 18 ℃适宜 , 在 35
一 36 ℃时菌丝停止生长。
农 7 不网沮魔 , 盆长绮比较
谈奈矛 2 2℃ 2 4℃ 2 5℃ 2 8℃ 3 0℃K 0 0 1 K 0 0 2 K刀 0 5 K 0 0 1 K 0 0 2 K 0 0 5 K 0 0 1 K 00 2 K 0 0 5 K 00! K 0 0 2 K 00 5 K 0 0 1 K 0 0? K O朽
l + + 十 十 + + 十 + + 斗 + + + 月斗 + + + + + + + + + 十+ 十
+ 十 十 子十 辛十 + + + + + + + + + + + + ++2 十+ + 寸十 + + + + + + + + + + + 十++ +十十 十+ + + + + + + 十 + + + + + + +
. . .户 . . .目 .. . . .
+ + 令 + + +
3 + + 干十 + +
培养荃组成 : l 号培养基 : 10 % 肤皮浸出汁十 2%葡萄塘 + 0 . 3%蛋白陈 十 2 . 2% 琼脂
2 号培养蚤 : 2 0% 沛籽壳浸出汁十同上
3 号培养基 : ,%阿魏根屑浸出汁+ 同上
每号培养基取 3管 , 培养 7天 , 以生长近似的二管为准 ,记录 。 菌丝长势 : “ 十 ”
开始生长 , “ + + ” 少级生长 , “ + ” 大 t 生长 ,茂密粗壮
。
农 8 不阅沮度培并的 . 盆生长盆度 ( m m /日 )
.赢卜一生几 K 0 0 1 K 0() 2 K 0 0 5 备 注
6℃ 0 . 7 5 0 . 7 5 1 . 2 5 先在 P D A 培养基上于
2 , ℃培养 , 天 , 后置于不同
8℃ 1。 4 1 l 。 5 6 2 . 8 8 温度下培养 , 每天测一次 , 取
4 次平均值 。2 5 、 1 2 . 5 0 2 。 2 0 5 . 5 0
3 2 U l
`
6 0 1
.
7 5 3
.
9 0
表 9 在 p D A 培井` 上 . 盆生长 . 健 ( 2 5℃ )
`
~氯窟一一遭一几 K 0 0 1 K 0 0 2 K 0 0 5
日丝长度 ( e m ) 5 天 0 . 9 3 0 . 9 7 3 . 4 0
7 天 1 . 25 1 . 18 5 ` 0 0
14 天 3 . 00 2 . 7 4 8 . 8苏
菌丝生长方式、 特征 菌落呈面包状隆起 5一 8 同 K 0 0 1 射线状贴生生长
m m 高 ,菌丝呈绒毛状 。
菌丝停止生长沮度 3 5一 3 6℃ 3 5一 3 6℃ 3 5一 3 6℃
每菌取三管平均值 ,
一
1 0 y(
·
氧量剧增 , 所以必须注意经常给于新鲜空气。培
养在地道里的子实体 , 由于缺少适当光照和足
够氧气 , 常出现一种细而长的菌柄和薄而小的
菌盖的畸形菇 。
今 考 文 狱
{; {
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杨庆尧 : 《食用菌生物学基础 》 第一版 , 上海科技出版
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,J .1口ój
月
,户.`r.L
4
. 湿度: 根据培养料千湿程度 , 掌握不同
的拌水量 , 使其适宜于阿魏侧耳的生长 。 拌水
t 为料重的 10 一 25 0务时 , 菌丝生长 良好 。 一
般攀握在 1 80 一 2 0 沁 时 , 更有助于菌丝和子实
体的生长 。 子实体分化时要求空气中的相对湿
库在 7 0并以上 。 在 85 一 90 拓时 ,子实体的个体
大、 菌盖厚 、 菌柄粗壮。
;
,
. 光照和通气 : 根据阿魏侧耳菌丝生长阶
段不僻要光照 , 子实体发育阶段只需有一定照
度的教射光的情况 , 本实验置培养斜面于近窗
的实脸台上 , 子实体接受的光照强度为 2 0 一
, 0 0l x
。 由于子实体发育阶段 , 呼吸旺盛 , 所需
十五株球形芽抱杆菌质粒的检测和质粒电泳图谱的比较
高才昌张燕娜* 蔡宝立 任 改 新
(南开大学分子生物学研究所 ,天津 ) (南开大学生物系 )
蚊虫是使人类感染多种 疾 病 的 昆 虫 媒介
者 , 消灭蚊虫对预防多种传染病有重要意义 。长
期以来 ,主要使用化学药物灭蚊 , 由于蚊虫对多
种化学药物产生了抗药性 , 导致药效降低 ,而且
污染环境 , 贻害人畜 。 近年来 , 国内外都在寻找
灭蚊的新方法 , 新途径 。 其中之一是使用蚊虫
病原菌进行生物防治 ,灭蚊效果好 , 并且对人畜
无害 ,是一种很有前途的灭蚊方法 〔1] 。
最有希望的蚊虫病原菌是从野外分离的一
类产芽抱的细菌。 K le en 等 1 9 6 5 年首次报道
了能使蚊子幼虫 口服致病的球形芽抱杆菌 ( B a -
c i l佃 , ,户h。 。 ` r 。 , ) 。 此后 ,对蚊虫有致病性的细
菌株系累有发现比” 。 在这类好氧芽抱菌中 , 特
别是苏芸金杆菌 (力a c i z彻 , t汤“ inr 砂e , , 15 ) 与球
形芽抱杆菌在对大量致病蚊虫的控制中可互相
补充 。
球形芽抱杆菌对蚊虫致病性 、 种型鉴定及
有效成分等已有不少研究 【` ,3J 。
关于芽抱杆菌中质粒的研究亦已有不少报
道 , 如短小芽抱杆菌 (召“ ` 121“ s P: m i lu , ) 、 枯草
芽抱杆菌 ( aB ic lu , s “ bt ilt ` ) 、 巨大芽抱杆菌
归。 “ l zu , 二 ,洲 e万: m ) 、 苏芸金杆菌和 球形芽
抱杆菌等 4t, ” 都已发现有质粒存在 。 苏芸金杆
菌中的卜内毒素的形成与质粒有关 `,1 , 并已通
过 D N A 重组技术使质粒上晶体蛋白基因在大
肠杆菌中克隆和表达 7tJ 。 但 在 球形芽 抱杆菌
中 , 系统地进行有关质粒与毒性的研究到 目前
为止尚未见报道 。 本试验供试菌十五株仅有五
株有病原性。 因为病原性球形芽 抱杆菌中的
细胞壁和芽抱壁毒素可能是一 种 蛋 白质或 多
肤 8I, ,] 。 从苏芸金杆菌的毒素形成与质 粒之间
的关系得到启示 , 球形芽抱杆菌的毒素是否亦
与质粒有关 , 因此我们采用修改的 K a do 方法 ,
对球形芽抱杆菌的质粒 D N A 进行检测 ; 对致
病性和非致病性球形芽抱杆菌的凝胶 电泳图谱
作了比较 。
本工作得到焦瑞身教授的指导 ,特此致谢。
张燕娜同志是南开大学生物学系 19 8 3届毕业生 ,现在
天津医学院工作。