全 文 ：［作者简介］ 陆继伟(1977 －) ，女，硕士，主管药师，从事中药质
量控制研究和农药残留分析和检测方法研究。
【化学测定方法】
薄荷素油的气相色谱法指纹图谱研究
陆继伟，苗水，杨新华，王柯，季申*
(上海市食品药品检验所，上海 201203)
［摘要］ 目的:建立薄荷素油的 GC指纹图谱测定法，为薄荷素油质量控制提供参考。方法:采用 HP － FFAP
弹性石英毛细管柱，火焰离子化检测器(FID) ，测定了不同生产厂家的薄荷素油的 GC指纹图谱，通过中药色
谱指纹图谱相似度评价确定了其对照指纹图谱，并对方法进行了一系列的验证试验，通过 GC － MS 确定了
薄荷素油的主要化学成分。结果:建立的薄荷素油 GC 指纹图谱测定方法分离良好、专属性强，可用于薄荷
素油质量的比较和控制。结论:以特征对照品为参照进行薄荷素油指纹图谱相似度评价，结果可靠，重复性
好，可全面有效地控制薄荷素油的质量。
［关键词］ 薄荷素油;气相色谱法;指纹图谱
［中图分类号］ O657． 7 + 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1004 － 8685(2013)08 － 1885 － 03
Study on fingerprint chromatogram of peppermint oil by GC
LU Ji － wei，MIAO Shui，YANG Xin － hua，WANG Ke，JI Shen*
(Shanghai Institute for Food and Drug Control，Shanghai 201203，China)
［Abstract］ Objective:To establish the stable and repeatable GC fingerprint chromatograph standard for quality
analysis and control of peppermint oil． Methods:GC separation was performed on HP － FFAP column with FID as
detector． Ｒeference fingerprint chromatograph was established by the software of chromatographic fingerprint similari-
ty evaluation． The method was verified by a series of tests． The main chemical ingredients were determined by GC －
MS． Ｒesults:The results indicated that the quality assessments of peppermint oil with reference fingerprint chroma-
tograph had good ruggedness，specificity and reproducibility． Conclusion:The GC fingerprint chromatograph as-
sessment method with characteristic standards reference is simple，accurate and reproducible． It can provide a relia-
ble way for evaluating the quality of peppermint oil．
［Key words］ Peppermint oil;Gas chromatography;Fingerprint chromatograph
薄荷素油为唇形科植物薄荷 Mentha haplocalyx Briq
的新鲜茎和叶经水蒸气蒸馏、冷冻、部分脱脑加工提取
的挥发油。薄荷广泛分布于北半球的温带地区，在我国
广布于南北各省。我国分类学者［1］采用 Boriss对薄荷属
的处理意见，结合形态特征和地理分化趋势，将其划分
为两大种群，即欧洲、西亚及北美地区的薄荷种群 M． ar-
vensis L．，东亚及热带亚洲的薄荷种群 M． haplocalyx
Briq．。我国栽培的薄荷品种多属后一种。从薄荷中用
水蒸气蒸馏法直接提炼出的挥发性原油称为薄荷精油
或薄荷原油，为浅黄色或草绿色的油状液体。薄荷原油
精制得到的一种饱和环状醇，称为薄荷醇或薄荷脑。薄
荷原油提取部分薄荷醇后所剩余的薄荷油，称为薄荷素
油［2］。薄荷油是薄荷精油和薄荷素油的泛称，但一般指
薄荷素油。薄荷素油具有消炎镇痛、解痉、抗感染、利
胆、溶石排石等药理作用［3，4］。
薄荷素油为从薄荷的新鲜茎和叶中提取的挥发油，
为多种挥发性成分的混合物。根据文献报道［5］，薄荷挥
发油中主要成分为左旋薄荷醇、异薄荷酮、胡薄荷酮、胡
椒酮、胡椒烯酮、桉油精等。薄荷素油中包含的成分虽
然很多，但成分和含量较为固定，因此可采用指纹图谱
法对其质量进行控制［6］。经研究摸索，采用气相色谱法
对薄荷素油中的挥发油成分进行色谱分离，并建立其指
纹图谱。
1 仪器与试剂
HP 5890 气相色谱仪(FID 检测器) ，Agilent 6890 /
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5973 型气相色谱 －质谱联用仪，SPGH － 300 高纯氢气发
生器，WYB － 1A静音无油空气泵。桉油精对照品(中国
药品生物制品检定所提供，批号 1110788 － 9202) ，
(－)－薄荷酮对照品(中国药品生物制品检定所提供，
批号 111705 － 200501) ，薄荷脑对照品(中国药品生物制
品检定所提供，批号 111728 － 200005)。薄荷素油 12 批
样品分别由安徽丰乐香料有限责任公司、南通薄荷厂有
限公司、黄山天目薄荷药业有限公司、上海新嘉香料有
限公司提供。
2 薄荷素油指纹图谱
2． 1 气相色谱条件
柱温:初始温度 60 ℃，保持 4 min，以每 1． 5 ℃的速
率升温至 130 ℃，再以每 20 ℃的速率升至 200 ℃。进样
口温度:250 ℃，分流比∶ 100∶ 1。检测器温度∶
250 ℃。
2． 2 参照物的选择
参照物溶液的制备:精密称取桉油精对照品、(－)
－薄荷酮对照品、薄荷脑对照品，精密适量，分别加无水
乙醇制成每 1 ml含 5 mg的溶液。
供试品溶液的制备:取本品，即得。
2． 3 样品的测定
取 12 批样品，按前述供试品溶液的制备方法与色
谱条件测定，记录色谱图，用计算机模拟相似度软件计
算相似度，12 批样品的指纹图谱相似度均在 0． 99 以上。
各厂家样品的 GC指纹图谱见图 1。
图 1 不同厂家生产的薄荷素油 GC指纹图谱
2． 4 对照指纹图谱的生成
根据薄荷素油指纹图谱的相关参数，12 批样品的指
纹图谱相似度均在 0． 99 以上，且共有峰基本一致，因
此，采用计算机模拟相似度计算软件(国家药典委员会
提供，2004 年版) ，以该 12 批样品模拟生成了薄荷素油
的对照指纹图谱(见图 2)。其中峰 S1为参照物桉油精，
峰 S2为参照物(－)－薄荷酮，峰 S3为参照物薄荷脑。
图 2 薄荷素油对照指纹图谱
2． 5 重现性考察
直接取样品(批号:0A080115) ，连续进样分析 6 次，
记录色谱图，用计算机模拟相似度计算软件计算，相似
度均为 1，表明本方法重现性良好。
2． 6 稳定性考察
直接取样品(批号:0A080115) ，于当天，第 1 d、第
5 d，按前述色谱条件测定(室温保存) ，记录色谱图，经
计算机模拟相似度计算软件(国家药典委员会提供，
2004 年版)计算，指纹图谱的相似度均为 1，表明供试品
溶液在 5 d内基本保持稳定。
2． 7 中间精密度考察
为考察随机变动因素对精密度的影响，按照拟订的
方法，由不同的分析人员在不同日期、不同仪器设备、不
同色谱柱对 12 批样品进行了指纹图谱测定。结果表
明:由不同的分析人员在不同日期、不同仪器设备和不
同色谱柱上测得的相似度均大于 0． 95，均符合“相似度
不得低于 0． 90”的规定。因此，本法的中间精密度良好。
3 GC －MS法分析薄荷素油化学成分
按照拟订的薄荷素油指纹图谱的气相色谱条件，在
气相色谱 －质谱联用仪(GC － MS)上对薄荷素油进行检
测，对其中大的色谱峰进行归属。根据 GC － MS 检测结
果，薄荷素油峰归属见表 1。
根据 GC － MS的归属结果，对薄荷素油的指纹色谱
图(气相色谱图)进行归属，见图 3。
注:色谱图中的峰编号同表 1 中的编号，其中 6 号色谱峰由于在
GC － MS中为 1 个峰，而在 GC中该保留时间处有 2 个峰，无法准确定
位，因此在气相色谱图未标明。
图 3 薄荷素油指纹色谱图峰归属
6881 中国卫生检验杂志 2013 年 7 月 第 23 卷 第 8 期 Chinese Journal of Health Laboratory Technology，Jul 2013;Vol 23 No 8
表 1 薄荷素油特征峰的鉴别
编号
色谱峰保留
时间(min)
英文名 中文名 CAS号 分子式 分子量 匹配度
1 2． 94 alpha － pinene α －蒎烯 000080 － 56 － 8 C10H16 136． 13 95
2 4． 13 beta － pinene β －蒎烯 000127 － 91 － 3 C10H16 136． 13 94
3 6． 35 D － Limonene (+)－柠檬烯 005989 － 27 － 5 C10H16 136． 13 94
4 19． 42
Cyclohexanone，5 － methyl － 2 － (1 －
methylethyl)－，cis
(－)－薄荷酮，异薄荷酮 000491 － 07 － 6 C10H8O 154． 14 97
5 20． 95
Cyclohexanone，5 － methyl － 2 － (1 －
methylethyl)－，trans
胡薄荷酮 000089 － 80 － 5 C10H8O 154． 14 98
6 26． 02
Bicyclo［4． 1． 0］heptane，3，7，7 － trim-
ethyl －，(1． alpha，3． alpha，6．
alpha)－
——— 018968 － 23 － 5 C10H18 138． 14 90
7 28． 48
Cycolhexal，5 － methyl － 2 －(1 － meth-
ylethyl) ，［1Ｒ －(1． alpha，2． alpha，5．
alpha) ］－
L －薄荷醇 002216 － 51 － 5 C10H20O 156． 15 91
8 30． 68 pulegone 长叶薄荷酮，胡薄荷酮 000089 － 82 － 7 C10H16O 152． 12 96
9 32． 49 menthol 薄荷脑 001490 － 04 － 6 C10H20O 156． 15 91
10 36． 26
3 － Cyclohexen － 1 － one，2 － isopropyl
－ 5 － methyl －
——— 1000155 － 47 － 0 C10H16O 152． 12 96
4 讨论
4． 1 气相色谱条件的考察
参考有关文献［6，7］，对不同的程序升温条件，不同进
样口温度等 5 种气相色谱条件进行了考察，结果显示:
在前 4 种气相条件下，均有色谱峰未完全分离，采用 2． 1
中气相条件，则分离效果较好。
4． 2 气相色谱柱考察
采用正文所述的气相条件，对 3 种不同规格的弹性
石英毛细管柱进行了考察，结果显示，采用①号柱 HP －
INNOWAX(30 m × 0． 25 mm × 0． 25 μm) ，②号柱 HP －
INNOWAX(30 m × 0． 53 mm × 1 μm)色谱柱分离度效果
差，而采用③号柱 FFAP(30 m × 0． 25 mm × 0． 25 μm)色
谱柱可以达到良好的分离效果，故最终采用 FFAP 色谱
柱(30 m × 0． 25 mm × 0． 25 μm)。
4． 3 参照物的选择
薄荷脑、(－)－薄荷酮和桉油精为薄荷素油中的主
要成分，其色谱峰分别处于整个气相色谱图的前、中、后
位置，且面积较稳定，因此选其作为参照物，测定结果显
示该方法可行。理论板数按薄荷脑峰计暂定为不得低
于 20 000。
4． 4 供试品溶液的制备
由于采用溶剂进行稀释，较大的溶剂色谱峰会掩盖
薄荷素油的一些指纹特征，因此直接采用薄荷素油样品
作为供试品溶液。
4． 5 薄荷素油含量测定指标的建议
中国药典 2010 年版一部中收录的薄荷素油的含量
测定项下仅对薄荷脑进行了测定，通过本文对薄荷素油
指纹图谱的研究可知，除薄荷脑外，薄荷素油中 α － 蒎
烯、β －蒎烯、(+)－柠檬烯、(－)－薄荷酮、胡薄荷酮、
L －薄荷醇等成分的含量均较高。陈在敏［7］报道了采用
气相色谱法对薄荷素油中的 α －蒎烯、柠檬烯、薄荷酮、
薄荷醇、胡薄荷酮、薄荷醋酸酯等 6 种成分采用气相色
谱法进行测定。因此，建议在薄荷素油指纹图谱的基础
上，增加对薄荷素油中多成分的含量测定，进一步有效
控制薄荷素油质量。
［参考文献］
［1］桂新，周荣汉． 国产野生薄荷挥发油化学组分变异及其化学型
［J］．植物资源与环境，1998，7(3) :13．
［2］刘红杰，金若敏． 薄荷油研究进展［J］． 山东中医药大学学报，
2006，30(6) :502．
［3］花盈 狄留庆． 薄荷油的基础研究及其应用开发［J］． 世界临床药
物，2006，26(8) :505．
［4］景玉霞，兰卫． 薄荷的化学成分和药理作用［J］． 新疆中医药，
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［5］李娟娟，王羽梅． 薄荷精油成分和含量的影响因素综述［J］． 安徽
农业科学，2011，39(36) :22313．
［6］谷俊峰，高艳梅，李历伟． 薄荷素油的 GC 指纹图谱［J］． 中国药
师，2010，13(5) :685．
［7］陈在敏． 薄荷素油特征图谱的研究及多组分含量测［J］．药物分析
杂志，2011，34(4) :1957．
(收稿日期:2013 － 05 － 15)
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