全 文 ：基金项目：国家自然科学基金（８１０６０３６５）；新疆维吾自治区科技支撑计划（２０１２３３１３４）
作者简介：丁文欢（１９８６－），女，硕士，研究实习员，研究方向：中药化学。
通信作者：周晓英，女，教授，硕士生导师，研究方向：分析化学，Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈｏｕｘｉａｏｙｉｎ４＠１６３．ｃｏｍ。
唇香草不同部位总成分的分析比较
丁文欢１，欧亮苗２，张雪佳２，周晓英３
（新疆医科大学１中心实验室；２中医学院；３药学院，乌鲁木齐　８３００１１）
摘要：目的　分析比较唇香草不同部位的化学成分含量。方法　采用可见分光光度法对唇香草不同部位
的总多酚、总黄酮、总三萜酸、总游离氨基酸及总多糖的含量进行测定，并对数据进行分析。结果　唇香草全草以
及不同部位均富含总多酚和总黄酮，总游离氨基酸的含量也较高，而总三萜酸和总多糖的含量较低，在花、叶、茎中
５种总成分的含量有所差异，５种成分在唇香草叶和花中含量较高，茎中的含量最低。结论　根据各总成分含量
在唇香草中的分布可初步将唇香草的采收期定于其叶和花产量较高的时期，即开花初期或盛开期。
关键词：唇香草；不同部位；总成分
中图分类号：Ｒ９１４　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９－５５５１（２０１５）０７－０８５８－０４
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－５５５１．２０１５．０７．０１４
Ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｎｄ　Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　Ｔｏｔａｌ　Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｉｎ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　Ｐａｒｔｓ
ｏｆ　Ｚｉｚｉｐｈｏｒａ　ｃｌｉｎｏｐｏｄｉｏｉｄｅｓ　Ｌａｍ．
ＤＩＮＧ　Ｗｅｎｈｕａｎ１，ＯＵ　Ｌｉａｎｇｍｉａｏ２，ＺＨＡＮＧ　Ｘｕｅｊｉａ２，ＺＨＯＵ　Ｘｉａｏｙｉｎｇ３
（１　Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ；２　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　ＴＣＭ，３　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，
Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ　８３００１１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ａｎａｌｙｚｅ　ａｎｄ　ｃｏｍｐａｒｅ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐａｒｔｓ　ｏｆ　Ｚｉｚｉｐｈｏｒａ
ｃｌｉｎｏｐｏｄｉｏｉｄｅｓ　Ｌａｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｐｈｅｎｏｌｉｃｓ，ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ，ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ，ｆｒｅｅ　ａｍｉｎｏ
ａｃｉｄｓ　ａｎｄ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｂｙ　ｖｉｓｉｂｌｅ　ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ．Ｔｈｅｎ　ａｎａｌｙｚｅ　ｔｈｅ　ｄａｔａ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　
Ｂｏｔｈ　ｔｈｅ　ｇｒａｓｓ　ａｎｄ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐａｒｔｓ　ｏｆ　Ｚｉｚｉｐｈｏｒａ　ｃｌｉｎｏｐｏｄｉｏｉｄｅｓ　Ｌａｍ．ａｒｅ　ｒｉｃｈ　ｉｎ　ｔｏｔａｌ　ｐｈｅｎｏｌｉｃｓ　ａｎｄ　ｆｌａ－
ｖｏｎｏｉｄｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｒｅｅ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄｓ　ｉｓ　ａｌｓｏ　ｈｉｇｈ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｔｒｉｔｅｒｐｅ－
ｎｏｉｄｓ　ａｎｄ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｗｅｒｅ　ｌｏｗ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅｓｅ　ｆｉｖｅ　ｔｏｔａｌ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ａｂｏｖｅ　ｗｅｒｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ，
ｂｏｔｈ　ｔｈｅ　ｆｉｖｅ　ｔｏｔａｌ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ａｂｏｖｅ　ａｒｅ　ｒｉｃｈｅｓｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｌｅａｓｔ　ｉｎ　ｓｔｅｍｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｚｉｚｉｐｈｏｒａ
ｃｌｉｎｏｐｏｄｉｏｉｄｅｓ　Ｌａｍ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｈａｒｖｅｓｔ　ｔｉｍｅ　ｆｏｒ　Ｚｉｚｉｐｈｏｒａ　ｃｌｉｎｏｐｏｄｉｏｉｄｅｓ　Ｌａｍ　ｓｈｏｕｌｄ　ｂｅ　ｉｎ　ｔｈｅ
ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ　ｐｅｒｉｏｄ　ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｄａｔａ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｉｔｓ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｚｉｚｉｐｈｏｒａ　ｃｌｉｎｏｐｏｄｉｏｉｄｅｓ　Ｌａｍ．；ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐａｒｔｓ；ｔｏｔａｌ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ
　　唇香草 （Ｚｉｚｉｐｈｏｒａ　ｃｌｉｎｏｐｏｄｉｏｉｄｅｓ　Ｌａｍ．）为唇
形科新塔花属植物唇香草的干燥地上部分，多年生
半灌木草本植物，别名有芳香新塔花、小叶薄荷、山
薄荷等，维吾尔族名字为苏则、续则，是维吾尔医的
常用药材。唇香草全株有强烈的薄荷香气，喜生于
草地、低山坡、砾石及干旱坡地上，是新疆的特有药
材，主要分布于我国新疆的阿勒泰山、天山、准噶尔
西部山地、帕米尔高原的山地草原及砾石质坡地，中
亚的吉尔吉斯斯坦、哈萨克斯坦、蒙古亦有分布［１］。
唇香草性味辛、凉、微苦，具有强心利湿、理气化痰、
消炎散结的功效，常用于治疗心脏病、高血压、哮喘
多汗、心悸失眠、水肿、咳嗽、支气管炎、气短多汗、心
悸失眠、水肿、咳嗽、肺脓肿等疾病［２－３］。
近年来，国内外对唇香草的不同提取部位的生
物活性进行研究结果表明其具有抑菌、抗氧化、舒张
血管、提高免疫力等生物活性［４－６］。目前对其化学
　第３８卷　第７期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Ｖｏｌ．３８　Ｎｏ．７
　２０１５年７月 Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｊｕｌｙ．２０１５
成分的研究，主要采用可见分光光度法测定唇香草
中的总成分。利用高效液相色谱法测定唇香草中黄
酮类以及有机酸类成分，并建立了唇香草的指纹图
谱以及唇香草的质量标准［７－１１］。在维吾尔族民间，
唇香草多为药食两用的材料。药用时取唇香草全草
入药，民间食用时多只用唇香草的叶。本实验对唇
香草中花、叶、茎以及全草的总成分进行测定与比
较，以期为唇香草的物质基础研究提供实验数据。
１　仪器、试药与方法
１．１　仪器与试药　ＸＳ－１０５型万分之一电子天平及
ＭＥＴＴＬＥＲ－ＭＳ１０５ＤＵ型十万分之一电子天平（瑞
士梅特勒－托利多公司），ＫＱ５２００ＤＥ型数控超声清
洗器（昆山市超声仪器有限公司），ＴＧＬ－１６Ｂ离心机
（上海安亭科学仪器厂），ＧＢＣ　Ｃｉｎｔｒａ－４０型紫外可
见分光光度计（澳大利亚ＧＢＣ科学仪器公司）。药
材于２０１２年８月１日在新疆乌鲁木齐市托里乡采
收，经新疆维吾尔自治区中医医院主任药师李永和
鉴定为唇形科 植物唇香草；没食子 酸 （批 号：
Ａ０１１０）、芦丁（批号：１０００８０－２００７０７）、熊果酸（批
号：１１０７０９－２００５０５）、精氨酸（批号：１０００８０－２００９０８）
均购自中国药品生物制品鉴定所，葡萄糖（批号：
２０１０１０２４，天津市天新精细化工开发中心），乙醇、浓
硫酸、蒽酮、福林试剂、碳酸钠、亚硝酸钠、硝酸铝、香
草醛、氢氧化钠、茚三酮等均为分析纯。
１．２　方法
１．２．１　供试品溶液的制备　唇香草的乙醇提取液：
将阴干的唇香草粉碎，过４０目筛。精密称取唇香草
粉末１ｇ，用２５ｍＬ　７０％乙醇超声提取３０ｍｉｎ，过
滤即得。唇香草的水提取液：将阴干的唇香草粉碎，
过４０目筛。精密称量唇香草粉末１ｇ，用２５ｍＬ蒸
馏水超声提取３０ｍｉｎ，过滤即得。总多糖提取液制
备：称取唇香草粉末０．５ｇ，加入２０ｍＬ蒸馏水超声
３０ｍｉｎ，过滤，滤液中加入２０ｍＬ　Ｓｅｖａｇｅ试剂（氯仿
∶正丁醇４∶１），以１２０ｒ／ｍｉｎ的速度振荡３０ｍｉｎ
除蛋白，将Ｓｅｖａｇｅ试剂层弃去，滤液层加入１００ｍＬ
９５％乙醇放置过夜使多糖沉淀，弃上清液，离心，得
粗多糖，用１００ｍＬ蒸馏水溶解即得。
１．２．２　唇香草中总多酚的含量测定
１．２．２．１　标准曲线的建立　精密称取５ｍｇ没食
子酸对照品，用７０％乙醇溶解，定容至５０ｍＬ容量
瓶中，得浓度为０．１ｍｇ／ｍＬ的没食子酸对照品溶
液。准确吸取没食子酸对照品溶液１、２、３、４、５ｍＬ
置于１０ｍＬ容量瓶中，加入福林试剂１ｍＬ，摇匀，
静置１ｍｉｎ，再加入２ｍＬ　２０％碳酸钠溶液，用７０％
乙醇定容，混匀，７５℃水浴１０ｍｉｎ，在４００～８００ｎｍ
波长范围内扫描没食子酸及样品的最大吸收波长，
没食子酸对照品的扫描结果显示其最大吸收波长为
７６０ｎｍ，结合文献报道的最大吸收波长，确定在
７６０ｎｍ处测定唇香草中的总多酚含量。以没食子
酸浓度Ｃ（ｍｇ／ｍＬ）为横坐标，吸光度值 Ａ为纵坐
标，绘制标准曲线，得回归方程：Ａ＝１５．８２０　０　Ｃ＋
０．０４８　２（ｒ＝０．９９９　４），结果表明，没食子酸浓度在
０．０１～０．０５ｍｇ／ｍＬ范围内线性关系良好。
１．２．２．２　样品含量测定　分别精密吸取按“１．２．１”
项下方法制得的唇香草乙醇提取液１ｍＬ，用７０％
乙醇稀释至１０ｍＬ，再精密吸取０．５ｍＬ的稀释液，
并按照“１．２．２．１”项下方法测定吸光样品溶液的吸
光度，根据线性方程计算唇香草样品中总多酚的
含量。
１．２．３　唇香草总黄酮含量测定
１．２．３．１　标准曲线的建立　精密称取芦丁对照品
１０ｍｇ，用７０％乙醇溶解，定容至５０ｍＬ的容量瓶
中，得浓度为０．２ｍｇ／ｍＬ的芦丁对照品溶液。精密
吸取芦丁对照品溶液０、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、
０．７ｍＬ于１０ｍＬ容量瓶中，加入５％亚硝酸钠溶液
０．３ｍＬ，摇匀；放置６ｍｉｎ后，再加入０．３ｍＬ　１０％
的硝酸铝溶液，摇匀；放置６ｍｉｎ后，加入４ｍＬ　４％氢
氧化钠溶液，摇匀；最后用７％乙醇定容至１０ｍＬ，
１５ｍｉｎ后在４００～８００ｎｍ波长范围内扫描，结果显
示其最大吸收在 ５１０ｎｍ 处，故本实验选择在
５１０ｎｍ处测定唇香草中总黄酮的含量。以芦丁对
照品溶液的浓度Ｃ（ｍｇ／ｍＬ）为横坐标，吸光度值Ａ
为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Ａ＝１０．７００　０
Ｃ＋０．０１３　６（ｒ＝０．９９９　９），对芦丁溶液的浓度在
０．０２～０．０７ｍｇ／ｍＬ间线性关系良好。
１．２．３．２　样品含量测定　分别精密吸取按“１．２．１”
项下方法制成的唇香草乙醇提取液０．３ｍＬ，于
１０ｍＬ容量瓶中，按“１．２．３．１”项下方法测定吸光度
值，并根据标准曲线计算唇香草样品中总黄酮的
含量。
１．２．４　唇香草三萜酸类含量测定
１．２．４．１　标准曲线的建立　精密称取熊果酸对照
品６ｍｇ，置于１０ｍＬ容量瓶中，用７０％乙醇溶解并
定容，得浓度为０．６ｍｇ／ｍＬ的熊果酸对照品溶液。
准确吸取对照品溶液０．２、０．３、０．４、０．５、０．６ｍＬ分
别置于蒸发皿中，水浴蒸干，冷却后加入５％香草
醛－冰醋酸溶液０．５ｍＬ和浓硫酸溶液１ｍＬ，移入带
有刻度的比色管，用冰乙酸润洗蒸发皿并入比色管，
用冰乙酸定容至１０ｍＬ，摇匀，６０℃水浴中加热１０
ｍｉｎ，冷却至室温后在４００～８００ｎｍ波长范围内进
行最大吸收波长的扫描，根据最大吸收波长最后确
定在５５１ｎｍ波长处测定吸光度值。以熊果酸对照
品浓度Ｃ（ｍｇ／ｍＬ）为横坐标，吸光度值 Ａ为纵坐
标，绘制标准曲线，标准曲线为Ａ＝２３．０６６　７Ｃ－０．
９５８　第７期 丁文欢，等：唇香草不同部位总成分的分析比较
０１９　２（ｒ＝０．９９９　９），表明熊果酸对照品溶液的浓度
在０．０１２～０．３６ｍｇ／ｍＬ范围内线性关系良好。
１．２．４．２　样品含量测定　分别精密吸取按“１．２．１”
项下方法制成的唇香草乙醇提取液１ｍＬ，按“１．２．４．
１”项下方测定样品溶液的吸光度值，并带入线性方
程计算其三萜酸的含量。
１．２．５　唇香草总游离氨基酸含量测定
１．２．５．１　标准曲线的建立　精密称取１０ｍｇ精氨
酸对照品，置于２５ｍＬ容量瓶中，用蒸馏水溶解定容，
得浓度为０．４ｍｇ／ｍＬ精氨酸对照品溶液，精密量取精
氨酸对照品溶液０．８、１．１、１．４、１．７、２．０ｍＬ分别置于２５
ｍＬ棕色比色管中，各加２ｍＬ　２％茚三酮溶液和ｌ　ｍＬ
磷酸缓冲液（ｐＨ＝６．８０），置沸水中水浴加热１５ｍｉｎ，室
温冷却１５ｍｉｎ，蒸馏水定容至２５ｍＬ，在５６６ｎｍ波长处
测定吸光度值。以精氨酸对照品溶液的浓度Ｃ为横坐
标，吸光度值Ａ为纵坐标，绘制标准曲线，标准曲线
为Ａ＝２６．２０８　３Ｃ－０．０７６　１（ｒ＝０．９９９　７），结果表
明精氨酸对照品溶液的浓度在０．０１２８～０．０３２ｍｇ／
ｍＬ范围内线性关系良好。
１．２．５．２　样品含量测定　分别精密吸取按“１．２．１”
项下方法制成的水提取液５ｍＬ，按“１．２．５．１”项下
方法测定吸光度值，计算样品含量。
１．２．６　唇香草总多糖含量测定
１．２．６．１　标准曲线的建立　对照品溶液的制备：精
密称取葡糖糖０．２００　０ｇ置１００ｍＬ容量瓶中，用蒸
馏水定容至刻度，得浓度为２ｍｇ／ｍＬ的对照品溶
液。硫酸－蒽酮溶液的配制：称取蒽酮０．２ｇ，加入
１００ｍＬ浓硫酸超声溶解即得。精密吸取对照品溶
液０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６ｍＬ分别置于１０ｍＬ
容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，再分别取１ｍＬ置
于试管中，各加硫酸－蒽酮溶液４ｍＬ，摇匀后放置
１３ｍｉｎ，置沸水中水浴加热１０ｍｉｎ，取出冷却至室
温（１５ｍｉｎ）。于５８２ｎｍ处测定吸光度，绘制标准曲
线，得葡萄糖溶液浓度Ｃ与吸光度 Ａ的曲线，回归
方程为Ａ＝６．７８７Ｃ＋０．０４５　７（ｒ＝０．９９９　６），线性
范围为０．０２～０．１２ｍｇ／ｍＬ。
１．２．６．２　样品含量测定　分别精密吸取按“１．２．１”
项下方法制成的唇香草多糖提取液 １ ｍＬ，按
“１．２．６．１”项下方法测定吸光度值，代入线性方程计
算样品含量。
２　结果
采用可见分光光法对唇香草不同部位的总
成分含量进行测定，结果唇香草全草及各部位均
富含总多酚和总黄酮，总游离氨基酸的含量也较
高，而总三萜酸以及总多糖的含量较低。唇香草
花、叶、茎中的各总成分含量存在差异，唇香草花
和叶中５种总成分的含量均较高，而茎中的含量
较低，结果见表１。
表１　唇香草不同部位总成分含量／（ｍｇ／ｇ）
部位 总成分含量
花 ９７．８１　 ５１．５８　 ４．７３　 ２３．１８　 ２．６５
叶 １０６．２７　 ５３．０８　 ５．６８　 ２１．６０　 ３．０７
茎 ７８．４１　 ４０．４９　 ２．６８　 ８．６２　 １．９４
全草 １０５．４４　 ５０．２８　 ４．６６　 １４．８６　 ２．９０
３　讨论
近年来的研究证明植物中总多酚、总黄酮、总三
萜酸、总游离氨基酸以及总多糖均有较强的生物活
性，如多酚类物质多具有抗氧化、抗菌以及抗凝血等
活性［１２－１３］；黄酮类物质多具有抗菌、抗氧化、抗抑郁
以及光保护作用等活性［１４－１６］；三萜酸类成分具有抗
炎、镇咳抗抑郁等活性［１７－１８］；氨基酸是构成人体营
养所需蛋白质的基本物质；游离氨基酸具有抗氧化、
提高人体过氧化物酶的水平等作用［１９－２０］；多糖类化
合物多具有抗疲劳、抗癌、抗氧化等生物活性［２１－２２］。
本研究采用可见分光光度法对不同采收期的唇香草
中总多酚、总黄酮、总三萜酸、总游离氨基酸以及总
多糖的含量进行测定。根据各总成分的溶解性质的
不同，总多酚、总黄酮以及总三萜酸采用７０％的乙
醇溶液进行超声提取；总游离氨基酸与总多糖采用
蒸馏水超声提取，由于蛋白质类成分对总多糖的测
定结果有干扰，故在唇香草多糖提取过程中采用
ｓｅｖａｇｅ试剂（氯仿∶正丁醇＝４∶１）除蛋白；测定多
糖含量时，水浴加热后放至室温，放置时间的长短对
吸光度值影响较大，故测定时要统一放置时长。实
验结果证明在唇香草花和叶中５种总成分含量均较
高，而茎中含量较低，从而验证了唇香草以开花前期
和花期作为采收期以及维吾尔族民间食用唇香草叶
的行为是有科学依据的。
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ｃｌｉｎｏｐｏｄｉｏｉｄｅｓ　Ｌａｍ　ｆｒｏｍ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｌｏｃａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｎａｔ　Ｐｒｏｄ
Ｃｏｍｍｕｎ，２０１２，７（９）：１１８１－１１８４．
［１１］　于谦，施洋，袁苏宁，等．唇香草质量标准的初步研究［Ｊ］．
新疆医科大学学报，２０１２，３５（３）：３０１－３０５．
［１２］　Ｚｈａｎｇ　ＧＷ，Ｈｕ　ＭＭ，Ｈｅ　Ｌ，ｅｔ　ａｌ．Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉｃｒｏｗａｖｅ－ａｓ－
ｓｉｓｔｅｄ　ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ　ｆｒｏｍ　ｗａｓｔｅ　ｐｅａｎｕｔ　ｓｈｅｌｓ
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［收稿日期：２０１４－１１－１９］
（本文编辑　施洋
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）
（上接８５７页）
　　总之，不同基因型的 ＨＣＶ可能存在民族、临床
类型、病毒载量等方面的差异，因此 ＨＣＶ基因分型
对临床诊断与治疗有重要意义。随着 ＨＣＶ基因型
研究的不断深入，基因型在 ＨＣＶ患者的临床类型、
病程、转归及治疗方案的选择及预后等方面将发挥
重要作用。
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［收稿日期：２０１５－０２－０９］
（本文编辑　张巧莲）
１６８　第７期 丁文欢，等：唇香草不同部位总成分的分析比较