全 文 ：收稿日期:2010-12-09; 修订日期:2011-06-22
基金项目:国家自然科学基金(No． 81060365)
作者简介:于 谦(1986-) ，女(汉族) ，新疆昌吉人，现为新疆医科大学在
读硕士研究生，学士学位，主要从事中药活性成分筛选研究工作．
* 通讯作者简介:田树革(1968-) ，男(汉族) ，山东梁山人，现任新疆医科
大学中医学院教授，硕士研究生导师，硕士学位，主要从事新疆中药、民族
药活性成分研究工作．
新疆不同产地唇香草中胡薄荷酮含量
的高效液相色谱测定
于 谦1，2，裴凌鹏3，葛 亮1，2，王东东1，2，张浩科1，2，田树革1，2*
(1．新疆医科大学中医学院，新疆 乌鲁木齐 830011;
2．新疆名医名方与特色方剂学重点实验室，新疆 乌鲁木齐 830011;
3．中央民族大学中国少数民族传统医学研究院，北京 100081 )
摘要:目的 建立维药唇香草中胡薄荷酮的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法，色谱柱:ODS C18(4． 6 mm × 250
mm，5 μm)柱，流动相:甲醇 －水(80∶ 20) ，检测波长:252 nm，流速:1． 0 ml /min，进样量 10 μl。结果 胡薄荷酮在0． 015 7
～ 0． 219 8 mg /ml范围内线性关系良好，r = 0． 999 9，平均加样回收率 96． 17 %，RSD = 1． 83 %。结论 该方法简单快捷，适
用于测定唇香草中胡薄荷酮的含量。
关键词:唇香草; 高效液相色谱法; 胡薄荷酮
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2011． 10． 016
中图分类号:R284． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2011)10-2354-10
Determination of Pulegone in Ziziphora clinopodioides Lam from Different Districts in Xin-
jiang by HPLC
YU Qian1，2，PEI Ling-peng3，GE Liang1，2，WANG Dong-dong1，2，ZHANG Hao-ke1，2，TIAN Shu-ge1，2*
(1． College of TCM，Xinjiang Medical University，Urumqi 830011，China;2． Xinjiang Key Laboratory of Fa-
mous Prescription and Science of Formulas，Urumqi 830011，China;3． Institute of Minority Traditional Medicine
Research，Central Minzu University，Beijing 100081，China)
Abstract:Objective To establish an HPLC method for determination of Pulegone in Uygur medicine Ziziphora clinopodioides
Lam．Methods An ODS C18(4． 6 mm × 250 mm，5μm)column was adopted． The mobile phase consisted of methanol and H2O
(80∶ 20)． Detection wavelength was 252 nm，the flow rate was 1． 0 ml /min，injection volume was 10 μl． Results The Pulegone＇s
linear relationship was good within the range of 0． 0157 ～ 0． 2198 mg /ml(r = 0． 999 9)． The average recovery (n = 6)of Pulegone
was 96． 17% (RSD = 1． 83%)． Conclusion The method is simple，feasible and reproducible，and can be used for determination
of Pulegone in Ziziphora clinopodioides Lam．
Key words:Ziziphora clinopodioides Lam; HPLC; Pulegone
维药唇香草 Ziziphora clinopodioides Lam．为唇形科新塔花属
植物唇香草的干燥地上部分，维吾尔名称为苏则［1］。维吾尔医
将唇香草长期用于临床治疗冠心病、心绞痛、气管炎、肺脓肿的复
方中［2］。现代动物实验结果证实，唇香草对急性缺血的心肌和
氧化损伤的心肌细胞均有明显的保护作用［3］。唇香草中所含化
学成分较多，目前国内外对唇香草的成分研究主要集中在对其挥
发油的成分分析，国外对不同产地唇香草中挥发油类成分及抑
菌、抗氧化作用亦有研究报道［ 4 ～ 7］。本课题组在之前的研究中
对唇香草挥发油的稳定性进行考察［2］。唇香草挥发油中以胡薄
荷酮为主要成分，含量远高于其他成分。现代药理研究表明，胡
薄荷酮具有抗炎作用［8］。本实验采用高效液相色谱法建立唇香
草中胡薄荷酮的测定方法并比较 10 个不同产地唇香草中胡薄荷
酮的含量，以期为其质量标准的制定提供理论依据。
1 仪器、试剂和样品
1． 1 仪器 岛津半制备高效液相色谱仪(LC － 6AD 高压泵，SPD
－20A型紫外检测器，CBM －20A 色谱 工作站，日本岛津公司) ;
XS105 型十万分之一电子天平(梅特勒 －托利多上海有限公司) ;
Direct － Q3 纯水系统(美国，Millipore 公司) ;AL204 型万分之一
电子天平(梅特勒 －托利多上海有限公司) ;大龙移液器，KQ －
200KDE型高功率数控超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
1． 2 试剂 胡薄荷酮标准品(中国药品生物制品检定所，批号:
111706 － 200903) ;甲醇为色谱纯;水为超纯水;其它试剂均为分
析纯。
1． 3 样品 唇香草采摘于新疆 10 个不同产地(其中乌鲁木齐市
板房沟、阿勒泰、塔城托里县、伊犁特克斯、伊犁夏塔古道、伊犁伊
昭公路、伊犁果子沟这 7 个产地的唇香草采于 2010 年 7 月;昌吉
州阜康、昌吉州吉木萨尔产地的唇香草采于 2009 年 8 月;乌鲁木
齐市乌拉泊产地的唇香草采于 2008 年 7 月)。经新疆医科大学
中医学院中药系李永和主任药师鉴定为唇形科植物唇香草 Ziz-
iphora clinopodioides Lam．，样品标本存于新疆医科大学中药民族
药标本馆。
2 方法与结果
2． 1 色谱条件 色谱柱:ODS C18(4． 6 mm × 250 mm，5 μm)柱，流
动相为甲醇 － 水(80 ∶ 20) ，检测波长为 252 nm，流速 1． 0 ml /
min［9］，进样量 10 μl。在上述色谱条件下，胡薄荷酮标准品和样
品分离效果良好，空白无干扰。见图 1 ～ 2。
2． 2 对照品溶液的配制 精密称取胡薄荷酮标准品 0． 015 7 g，
以甲醇定容于 50 ml容量瓶中，配制成浓度为 0． 314 mg /ml 的对
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时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 10 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL． 22 NO． 10
照品溶液，摇匀。过 0． 45 μm微孔滤膜，即得。
图 1 胡薄荷酮对照品色谱图 图 2 板房沟唇香草色谱图
2． 3 样品溶液的制备 精密称定不同产地的唇香草粗粉 1． 000 g
装入 25 ml具塞锥形瓶中，以 20 ml 甲醇为溶剂，浸泡 1 h，超声
提取 40 min，过滤，用甲醇洗涤定容至 25 ml 容量瓶中，摇匀，过
0． 45 μm微孔滤膜，即得。
2． 4 线性关系考察 精密吸取对照品溶液 0． 25，0． 5，1． 5，2． 5，
3． 5 ml，置于 5 ml 容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，过 0． 45
μm微孔滤膜备用。分别吸取上述各浓度对照品溶液 10 μl，进
样，以浓度(X)为横坐标，峰面积(Y)为纵坐标，进行线性回归，胡
薄荷酮线性回归方程为 Y = 59 533 249． 16X － 10 824． 88，r =
0． 999 9。胡薄荷酮在 0． 015 7 ～ 0． 219 8 mg /ml 范围内线性关系
良好。
2． 5 精密度实验 取浓度为 0． 031 4 mg /ml 对照品溶液按上述
色谱条件测定，连续进样 6 次。测定胡薄荷酮峰面积积分值，计
算 RSD为 0． 56%。实验结果表明，该方法精密度良好。
2． 6 稳定性实验 取板房沟唇香草样品溶液为供试液，按以上色
谱条件分别在 0，2，4，8，24 h进样，测定胡薄荷酮峰面积积分值，
计算 RSD为 2． 27%。实验结果表明，供试品溶液在 24 h内稳定。
2． 7 重复性实验 采用板房沟唇香草药材，按“2． 3”项下方法处
理 6 份，按相同色谱条件测定胡薄荷酮峰面积积分值，计算 RSD
值为 2． 22%。实验结果表明，该方法测定胡薄荷酮含量准确可
靠。
2． 8 加样回收率实验 分别精密称取已知含量的板房沟唇香草
粗粉 6 份，每份 0． 5 g，各加 1． 69 4 mg 胡薄荷酮对照品，样品按
“2． 3”项下方法处理后测定，标准曲线法计算含量，计算胡薄荷
酮平均加样回收率为 96． 17%，RSD值为 1． 83%。结果见表 1。
表 1 加样回收实验结果
编号
取样量
m /g
样品含量 A
m /mg
加入量 B
m /mg
测得量 C
m /mg
回收率
(%)
平均值
(%)
RSD
(%)
1 0． 5 1． 707 5 1． 694 3． 332 5 95． 92
2 0． 5 1． 707 5 1． 694 3． 345 96． 66
3 0． 5 1． 707 5 1． 694 3． 355 97． 26 96． 17 1． 83
4 0． 5 1． 707 5 1． 694 3． 335 96． 07
5 0． 5 1． 707 5 1． 694 3． 2825 92． 98
6 0． 5 1． 707 5 1． 694 3． 37 98． 14
回收率(%)=［(C － A)/B］× 100 %
2． 9 不同产地唇香草中胡薄荷酮的含量测定 不同产地的唇香
草按“2． 3”项下方法处理后测定 3 次，求均值，按标准曲线法计
算含量。胡薄荷酮含量测定结果见表 2。
3 讨论
通常挥发油类成分的测定采用气相色谱法。本实验以
HPLC法测定唇香草中胡薄荷酮的含量，分离效果理想，重复性
好，简便快捷。唇香草挥发油，其主要成分是含氧单萜类化合物，
如胡薄荷酮、异胡薄荷酮等，而以胡薄荷酮含量最高，其紫外最大
吸收峰在 252 nm处，在此波长处其他成分干扰小，分析时间短，
故本实验选择高效液相色谱法测定唇香草药材中胡薄荷酮的含
量。
表 2 不同产地唇香草中胡薄荷酮的含量
产地 胡薄荷酮平均峰面积 胡薄荷酮含量 C /mg·g － 1
乌鲁木齐市板房沟 8 118 342 3． 42
阿勒泰 5 359 378 2． 26
塔城托里县 3 534 260 1． 49
伊犁特克斯 4 183 806 1． 76
伊犁夏塔古道 3 499 893 1． 48
伊犁昭苏公路 13 112 847 5． 51
伊犁果子沟 8 860 875 3． 73
乌鲁木齐市乌拉泊 1 236 319 0． 56
昌吉州阜康 2 963 996 1． 25
昌吉州吉木萨尔 1 855 092 0． 78
n = 3
本实验对新疆 10 个不同产地的唇香草中胡薄荷酮进行含量
测定后发现，不同产地的唇香草中胡薄荷酮的含量存在着明显差
异。这可能是由于新疆地形复杂，山脉、盆地、沙漠交错，气候相
差大，受到温度、湿度、土质、光照、海拔、纬度、昼夜温差等生长环
境因素的影响所造成的。
唇香草在新疆分布广泛，是维吾尔医常用药，在之前的研究
中发现不同产地的唇香草中齐墩果酸和熊果酸的含量存在着明
显差异［10］。对新疆 10 个不同产地唇香草挥发油类成分胡薄荷
酮的含量测定，也将为唇香草确定最佳产地，建立质量标准和保
证成药的稳定性与疗效提供研究依据。
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