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20种菝葜近缘种的薯蓣皂苷元含量测定



全 文 :依法测定 ,采用外标法 ,结果见表 1、表 2。
3  讨论
3.1  不同产地平贝母样品均在采收期采收 ,但贝
母乙素的含量有差异 ,可能因伊春市 、五常市 、尚志
市在温度 、光照 、湿度等均存在一定差异。
3.2  不同物候期平贝母中贝母乙素含量差异较
大 ,且呈现有规律的变化。萌芽期含量较高 ,随着地
上部分的迅速生长 ,贝母乙素含量下降 ,到开花期又
迅速回升达到峰值 ,进入枯萎期时含量达最低值 ,可
能这一时期因母鳞茎生出多个子鳞茎 。更新期有新
鳞茎形成 ,贝母乙素含量又开始逐渐增多 ,虽然此时
地上部分已枯萎 ,但地下鳞茎的代谢仍在进行 。萌
芽期 ,开花期 ,更新期都是平贝母地下鳞茎代谢旺盛
时期。
 表 1   不同产地平贝母贝母乙素含量(n=3)
产地 贝母乙素含量(%)
尚志市向阳山林场 0.0163±0.000551
伊春市永绪经营所 0.0223±0.000503
海林市横道河镇 0.0196±0.00121
饶河县岭南村 0.0187±0.00112
大兴安岭河南农场 0.0187±0.000265
伊春市长青农场 0.0184±0.00162
伊春市杨树河经营所 0.0218±0.000651
五常市沙河子镇 0.0172±0.000252
桦南县曙光农场 0.0253±0.000321
尚志市冲河林场 0.0233±0.00172
伊春市新青区 0.0252±0.00213
伊春市红星区 0.0261±0.00165
  表 2  平贝母不同物候期贝母乙素含量(n=3)
物候期 萌芽期 展叶期 开花期 枯萎期 更新期
贝母乙素含量(%) 0.0538±0.00385 0.0462±0.0156 0.0480±0.00358 0.0222±0.00412 0.0294±0.00158
RSD(%) 7.17 5.37 7.42 3.31 5.39
3.3  本研究所测平贝母鳞茎中贝母乙素含量变化
规律与王臣等〔2〕所报道的平贝母地下器官生长发
育规律基本相符 ,也与王栋等 〔3〕所测的栽培平贝母
不同生长期总生物碱含量变化规律基本一致 ,因此 ,
贝母乙素可作为平贝母质量评价指标之一 。
参 考 文 献
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受体的拮抗作用 .中国药科大学学报 , 2003, 34(1):58-
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物碱的含量测定 .中医药学报 , 1996, 2:52.
(2006-03-29收稿
2006-06-28修回)
·资源 ·
20种菝葜近缘种的薯蓣皂苷元含量测定
阎 磊 ,徐淑珍 ,李秋怡 ,何再安 ,刘焱文*
(湖北中医学院 ,湖北武汉 430061)
  摘要 采用 RP-HPLC法检测 20种菝葜近缘植物 ,结果在选定的色谱条件下 , 薯蓣皂苷元在 5 ~ 15 μg范围内
与峰面积呈良好线性关系 , 方法简单易行 , 准确度高;而且检测的 20种菝葜植物中 , 有 4种所含薯蓣皂苷元均超过
1.2%, 可为菝葜类开发利用提供参考。
关键词 菝葜近缘种;薯蓣皂苷元;RP-HPLC
中图分类号:R282.71  文献标识码:A  文章编号:1001-4454(2006)11-1136-03
作者简介:阎磊 ,硕士生 , Tel:027-63294635。*通讯作者:刘焱文 ,教授 ,博士生导师 ,湖北省中药资源与中药化学省级重点实验室主任 , Tel:027-88920834。
  百合科菝葜属为攀缘状灌木 ,广泛分布于热带
和亚热带地区 ,华东 、中南及西南各省均产。菝葜
SmilaxchinaL.(又名金刚藤)及其他一些种 ,现代
药理研究〔1-3〕证实 ,具有抗炎 、抑菌 、抗肿瘤 、类激素
·1136· 中药材第 29卷第 11期 2006年 11月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2006.11.006
和抗诱变作用。临床单用或与其它药物配伍用于各
种炎症性疾病 ,如妇科盆腔炎症 、炎症性包块 、前列
腺炎 、类风湿性关节炎及各种肿瘤疾患 ,均取得满意
疗效〔4〕。菝葜的根茎中主要活性成分为薯蓣皂苷
元(diosgenin)和多种皂苷。本文以水解后薯蓣皂苷
元为指标测定了 20种菝葜近缘种的薯蓣皂苷元含
量 ,以期为扩大菝葜类药物资源提供依据 。
1  仪器与试药
日本 SHIMADZULC-10ATVP高效液相色谱系
统(LC-10ATVP泵 , SPD-10AVP紫外检测器 , C10-
10ASVP柱温箱);N2000色谱工作站(浙江大学智
能信息研究所);BP211D电子分析天平(西德 SAR-
TORIOUS)。甲醇为色谱纯 ,其它试剂均为分析纯 。
菝葜近缘种由本实验室人员采集 ,并经湖北中医学
院中药鉴定教研室鉴定 。薯蓣皂苷元对照品(批号
1539-2000)购自中国药品生物制品检定所。
2  方法和结果
2.1  色谱条件的选择 色谱柱:KromasilC18(7 μ,
200×4.6mmID);流动相:甲醇-水(94∶6);检测波
长:210 nm;柱温:25℃;流速:1.0 ml/min;理论塔板
数按薯蓣皂苷元峰计算 ,不应低于 2000,在此条件
下 ,供试品中薯蓣皂苷元峰能与其它组分达到完全
基线分离 ,且峰形较好 。
2.2  对照品溶液的制备 取薯蓣皂苷元对照品适
量 ,精密称定 ,加甲醇制成每 1 ml含有 1 mg的溶
液 。
2.3  供试品溶液的制备 分别称取各近缘种粉末
2.5g,精密称定 ,装入索氏提取品 ,加 50 ml95%乙
醇提取至无色 ,放冷 ,用 95%乙醇补足至 50 ml,加
入 5 ml浓盐酸 ,置水浴中水解 3 h,放冷 ,置分液漏
斗中 ,用石油醚萃取 3次(60ml, 60ml, 60ml),合并
石油醚萃取液 ,回收石油醚 ,残渣用甲醇定溶至 2.0
ml,摇匀 ,用微孔滤膜(0.45 μm)滤过 ,即得 。
2.4 线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液 5、
7、10、12、15 μl进样 ,以色谱峰面积(A)对浓度(C)
得薯蓣皂苷元的回归方程 A=19843.93454 +
26409.02X, r=0.9995。
2.5  精密度试验 取同一供试品溶液 10μl,重复
进样 6次 , 测得薯蓣皂苷元的峰面积的 RSD为
0.65%,表明进样精密度良好 。
2.6  稳定性试验 取同一供试品溶液 10μl,分别
在 0、2、4、6、8、10、20、22、24 h进样 ,测得薯蓣皂苷
元的峰面积的 RSD为 1.06%,表明样品在 24 h内
稳定性良好 。
2.7  重复性试验 配制同一批号供试品溶液 5
份 ,测定薯蓣皂苷元的 RSD为 1.54%,表明重复性
良好 。
2.8 回收率试验 取供试品 3份 ,每份约 1.3 g,
精密称定 ,加入对照品溶液 1ml,照供试品溶液制备
项下操作 , 进样 , 计算薯蓣皂苷元的回收率为
98.47%, RSD为 1.01%,表明本方法可靠性强 。
2.9 样品测定结果 20种菝葜近缘植物的薯蓣
皂苷元测定结果见表 1。
 表 1    20种菝葜类薯蓣皂苷元测定结果
产地 来源 菝葜皂苷元含量mg/g
陕西 SmilaxripariaA.DC.牛尾菜 0.7313
江西樟树 S.discotisWarb.托叶菝葜 0.6975
浙江 HeterosmilaxpolyandrGangep. 0.4717
广东徐闻 H.yunnanensisGagnep.短柱肖菝葜 0.4509
安徽 S.menispermoideaA.DC.防己叶菝葜 0.3986
湖北五峰 S.glauco-chinaWarb.黑果菝葜 0.5764
浙江温州 S.glabraRoxb.土茯苓 0.5921
湖南长沙 S.feroxWal.exKunth长托菝葜 0.7103
江西樟树 S.vanchingshanensisWangetTang梵净山菝葜 1.0207
江西弋阳 S.davidianaA.DC.小时菝葜 1.0929
湖北宜都 S.arisanensisHayuata尖叶菝葜 0.1541
广西宾阳 H.chinensisWang华肖菝葜 0.9714
湖北巴东 S.scobinincaulisC.H.Wright短梗菝葜 0.9103
广东湛江 H.septomnerviaWangetTang 0.7312
湖南靖州 S.chingiiWangetTang柔毛菝葜 1.2324
陕西眉县 S.chapaensisGagnep密庞菝葜 1.5961
云南昆明 S.sieboldiMiq.华东菝葜 1.8085
湖北宜昌 S.stansMaxim.鞘柄菝葜 1.7348
江西樟树 S.lancaefoliavar.opacaA.DC.暗色菝葜 1.0288
湖南韶山 S.trachypodaNorton粗柄菝葜 0.7673
3 讨论
菝葜及近缘种均含有薯蓣皂苷元 ,在供试样品
中 ,华东菝葜 、鞘柄菝葜 、密疣菝葜 、柔毛菝葜的含量
均在 1.2%以上 ,具有较大的药用价值 ,可望为扩大
菝葜类植物资源的应用提供依据 。
参 考 文 献
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·1137·中药材第 29卷第 11期 2006年 11月
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(2006-04-10收稿)
忍冬不同部位马钱苷含量比较
许 丹 ,孙文基*
(西北大学陕西省生物医药重点实验室 ,陕西西安 710069)
  摘要 目的:比较忍冬不同部位马钱苷含量。方法:采用 HPLC法测定。结果:忍冬不同部位马钱苷含量相差
很大 , 根 >藤 >叶 >花 ,因此根可作为忍冬药用资源开发的一个新部位。
关键词 忍冬;不同部位;马钱苷
中图分类号:R282.71  文献标识码:A  文章编号:1001-4454(2006)11-1138-02
作者简介:许丹 ,硕士研究生 ,研究方向天然产物分离分析与制备 , Tel:13891990678。*通讯作者:孙文基 ,教授 ,博士生导师 , Tel:(029)88304569。
  忍冬的藤 、叶 、花均可入药 ,三者性味基本相同 ,
味甘苦 、性微寒 ,有清热解毒 、散结消肿 、通经活络之
功效。忍冬各部位所含马钱苷 〔1〕 ,有抗炎〔2〕和扩张
外周血管〔3〕的作用 ,与忍冬清热解毒 、疏风通络的
功效相符合 ,为忍冬中的活性成分之一 。陈军 〔4〕等
人测定过忍冬藤中马钱苷含量 ,但其他部位未见报
道 。为进一步了解马钱苷在忍冬植物中的分布状况
及开发利用 ,特应用 HPLC法比较忍冬植物不同部
位的马钱苷含量 。
1  仪器与材料
HITACHI高效液相色谱仪:PumpL-7110;UV-
VISDetectorL-7420;TECHOMPN-200色谱工作站;
YCQ-300超声波清洗器(上海凯波超声设备有限公
司)。马钱苷(自制 ,经各种理化常数和波谱数据鉴
定 ,面积归一法测定其纯度为 99%)。样品采集于
西北大学生命科学学院果园 ,由王亚洲副教授鉴定
为 Lonicerajaponica。
2  试验方法
色谱柱:KromasilC18柱(250 mm×4.6 mm, 5
μm);流动相:乙腈-水(16∶84);体积流量:1.0 ml/
min;柱温:室温;检测波长:240 nm〔5〕;精密称取干
燥至恒重的样品粉末 0.5g置于 25ml量瓶中 ,加入
30%甲醇约 20 ml,超声提取 40 min,定容至 25 ml,
取混悬液经 12000 r/min离心 10 min,取上清液 ,滤
过进样 。在此色谱条件下 ,样品中马钱苷和其他组
分分离效果良好 。
3  样品测定
忍冬不同部位按上述方法制备测定 ,经外标法
计算马钱苷含量 ,结果见表 1。
 表 1  忍冬各部位马钱苷含量
部位 含量% RSD%




1.02 1.23
0.35 0.89
0.23 0.73
痕量 1.35
4 讨论
4.1 测定结果 ,忍冬各部位马钱苷含量 ,根 >藤 >
叶 >花 ,印证了文献记载 “忍冬各部位药性有所不
同 ,花不如藤 、叶之味厚;散结消肿 、通经活络之力 ,
花远不及藤 、叶 。”结合马钱苷抗炎和扩张外周血管
的特性 ,说明马钱苷可能为忍冬的有效成分之一 。
4.2 忍冬传统药用部位一般为藤和花 ,但实验结
果显示 , 根的马钱苷含量比其他部位更高 , 达到
1%,应加以利用。而有关忍冬根的应用未见文献报
道 ,可能与忍冬其他部位相比 ,根不易采集。从资源
综合利用考虑 ,根可作为忍冬药用资源开发的一个
新部位。
4.3 中国药典 2005年版将马钱苷作为山茱萸药
材及含山茱萸成药含量测定的对照品 ,但山茱萸药
材价格较高 ,所含成分复杂 ,分离马钱苷的成本相对
较高 。本实验结果 ,忍冬的根 、茎 、叶中马钱苷含量
较高 ,药材价格相对低廉 ,可将忍冬作为提取分离马
钱苷的原料来源之一。
4.4 为保证马钱苷提取完全 ,比较了 10%、30%、
·1138· 中药材第 29卷第 11期 2006年 11月