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第 1 1 卷 第 1 期
2009 年 1 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 11 No. 1
Jan . ，2009
东北铁线莲（Clematis mandshurica Rupr），别名
辣寥铁线莲，多年生草质藤本，主产于东北、华北及
蒙古，俄罗斯、朝鲜也有分布，具有祛风除湿，通络
止痛的功效。是中药威灵仙的主要来源之一。其
主要有效成分为三萜皂苷类，其皂苷元为齐墩果酸
oleanonin acid和常春藤皂苷元hederagenin等。测定
东北铁线莲中齐墩果酸含量在一定程度上能代表药
材中皂苷的含量，从而反映药材的质量。
1 仪器与试药
Agilent1100系列高效液相色谱仪(包括四元泵,
自动进样器,脱气机,紫外可见检测器,柱温箱,配备
Agilent1100工作站),CG16—W高速微量离心机(北
京医用离心机厂)。东北铁线莲（产地黑龙江）购自
河北省安国市康立东北中药材有限公司，药材阴干，
打粉过筛备用。对照品齐墩果酸来自中国药品生物
制品检定所。甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱为 kromasil C18柱（150mm×
4.6mm，5μm）；柱温为室温（25℃）；流动相为甲醇-
水（95：5）；检测波长220nm；流速：0.5mL/min 。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取齐墩果酸对照
品5mg，置5mL容量瓶中，甲醇溶解，定容，得含量为
1mg/mL的对照品溶液。
2.3 线性范围考察 精密称取齐墩果酸对照品
10mg加入10mL容量瓶，甲醇定容，摇匀即得1mg/
mL对照品溶液。分别精密吸取4、6、8、10、15μL
进样，按上述色谱条件测定峰面积。以进样量为横
坐标，平均峰面积为纵坐标绘制标准曲线。得到
标准曲线方程：y=144598.26 + 437954092.72x，r =
0.9991。结果表明，齐墩果酸在0.004~0.015mg范围
内线性关系良好。
2.4 精密度考察 精密吸取标准品溶液10μL，重
复进样5次，测定峰面积，计算得峰面积的RSD值为
1.43%。
2.5 稳定性试验 取东北铁线莲药材粗粉按样品
制备项下方法制备样品，在室温下保存，分别在0、
2、4、6、8、10h测定其峰面积，得RSD值为0.58％。
2.6 重现性试验 平行制备样品5份（n=3），按样
品测定项下方法分别测定平均峰面积平均值，计算
其RSD值为1.50％。
2.7 加样回收试验 取已知准确含量的东北铁
线莲样品3份各2.5g，各份分别按照样品中含量的
80％，100％，120％加入2mg/mL齐墩果酸对照品溶
液2.28、2.86、3.42mL，按照对照品制备方法制样，同
时按照对照品测定方法测定，计算得到其平均回收
率为98.01％。
2.8 样品的测定 精密称取东北铁线莲药材粉末
2.5g（n=3）于250mL圆底烧瓶内，加入50mL蒸馏水，
沸水浴回流提取1h，趁热抽滤，滤液定容在50mL，
加入盐酸，使得盐酸浓度为10％，用沸水浴回流水
解1h。水解液用醋酸乙酯萃取（20mL×3次），挥干
醋酸乙酯，残渣用甲醇溶解，定容至5mL，得样品溶
液。然后分别精密吸取样品溶液10μL，测定峰面
积后，根据回归方程计算出东北铁线莲中齐墩果酸
HPLC法测定东北铁线莲中齐墩果酸含量
张 萌，郑 杨，李 盈
（沈阳药科大学高职学院，辽宁 沈阳 110031）
摘 要：目的：建立测定东北铁线莲中齐墩果酸含量的方法。方法：HPLC法，色谱柱为 kromasil C18柱（150mm×
4.6 mm，5μm）；柱温为室温（25℃）；流动相为甲醇－水（95：5）； 检测波长220nm ；流速：0.5mL/min 。结果：以进样
量为横坐标，平均峰面积为纵坐标绘制标准曲线。得到标准曲线方程： y=144598.26+437954092.72x，r = 0.9991，计算
得到其平均回收率为98.01％。东北铁线莲中齐墩果酸含量为0.2279％。结论：方法操作简单，灵敏，重现性好，可以用
来测定东北铁线莲中齐墩果酸的含量。
关键词：东北铁线莲；高效液相色谱法
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1673-842X (2009) 01- 0163- 02
收稿日期：2008-08-25
作者简介：张萌（1982-），女，辽宁沈阳人，助教，硕士，研究方向：药物制剂。
HPLC Determines in the Clematis Hybridas the Uneven Pillar Tartaric Acid Content
ZHANG Meng,ZHENG Yang，LI Ying
（Shenyang Pharmaceutical University Technical Vocational College,Shenyang 110031,Liaoning,China）
Abstract：Objective：The establishment determines in the Northeast Clematis hybridas the uneven pillar
tartaric acid content method. Methods: The HPLC law, the chromatographic column is kromasil the C18 column
(150mm×4.6 mm,5μm); The column warm is the room temperature (25℃); Flowing for methyl alcohol-water (95:5);
Examination wave length 220nm; Speed of flow: 0.5mL/min. Results: Take the specimen handling quantity as the
abscissa, average peak area for y-coordinate plan specification curve. Obtains the specification curve equation:
y=144598.26+437954092.72x, r = 0.9991, the computation obtains its average returns-ratio is 98.01%. In the
Northeast Clematis hybridas the uneven pillar tartaric acid content is 0.2279%. Conclusion: This method simplicity
of operator, keen, the reproduction quality is good, may use for to determine in the Northeast Clematis hybridas the
uneven pillar tartaric acid content.
Key words：Clematis mandshurica Rupr; High performence liquid chromatography
DOI：10.13194/j.jlunivtcm.2009.01.165.zhangm.089
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Jan .，2009
良好的麻醉效果是实施动物实验的一个重要
前提，在对实验动物实行预定的手术操作前，必须要
对动物进行较理想的麻醉。正确的选择和使用麻醉
剂以及剂量，不仅能使其获得正确的实验结果，同时
也可减轻或消除动物痛苦，符合国际上对实验动物
福利的要求。
与此同时，麻醉药对实验动物的副作用也是必
须引起人们密切关注的，了解掌握麻醉药的副作用，
不仅可以减少其对实验结果的干扰，同时还可以减
少麻醉过程中动物的死亡率，以利于实验的顺利进
行。为了更好的利于大家的工作，笔者对目前常用
的麻醉药，从它们的理化性质、适用范围、作用机制、
药物的副作用以及使用注意事项进行了整理和总
结。
1 全身麻醉药
1.1 吸入性麻醉药
吸入性麻醉药是经肺泡动脉入血，到达脑组
织，阻断大脑的突触传递功能，引起全身麻醉。它们
的特点是易挥发，给药量不易控制。常用的吸入性
麻醉药有乙醚、异氟烷、氟烷。
1.1.1 乙醚 乙醚是具有特殊气味的无色透明易挥
发的液体，不溶于水。在麻醉初期常出现强烈兴奋
现象，对呼吸道有较强刺激作用，使黏液分泌增加，
易阻塞呼吸道而发生窒息；同时乙醚的肌肉松弛作
用较强，但诱导期和苏醒期较长，适于时间短的手术
或实验。
1.1.2 异氟烷 异氟烷是目前较为常用的吸入性麻
醉药。该药为无色、透明的液体，略具刺激性醚样臭，
性质稳定。其麻醉诱导平稳、迅速、苏醒也快。适于
各种动物大手术的全麻和诱导麻醉。
该药可能是通过抑制中枢系统兴奋性氨基酸
突触传递，增强抑制性氨基酸突触传导而产生麻醉
作用[1]。在加深麻醉时易引起呼吸抑制，需适当给
予辅助呼吸，诱导时可能出现咳嗽、屏气或不呼吸，
苏醒期偶尔有体动或寒战。异氟烷对鼠脑缺血再灌
注损伤有保护作用，故不适于脑缺血动物模型的麻
醉。
1.1.3 氟烷 氟烷是无色澄明、易挥发香味的重质
液体，化学性质不稳定。其特点是麻醉作用强，诱导
期短，苏醒快，对呼吸道黏膜无刺激性。主要用于各
种动物大手术的全麻和诱导麻醉，作用机制同乙醚；
极易引起麻醉过深，出现呼吸抑制、心搏缓慢等。其
肌肉松弛和镇痛作用较弱；可使脑血管扩张，升高
颅内压；增加心肌对儿茶酚胺的敏感性，可诱发心
律失常；特别适于哮喘动物模型的麻醉。
1.2 注射型麻醉药
注射型麻醉药常用的有硫喷妥钠、戊巴比妥
钠、苯巴比妥钠、乌拉坦等。其中硫喷妥钠、戊巴比
妥钠、苯巴比妥钠都属于巴比妥类药物 ；该类药的
特点是方法简便易行，但是麻醉深度不易掌握。
1.2.1 硫喷妥钠 硫喷妥钠（戊硫巴比妥钠），为微
黄色粉末，味苦，有潮解性，易溶于水，水溶液不稳
定。该药起效快，但作用时效短，属超短效麻醉药。
单独应用仅适于小手术的全身麻醉，也用于各种动
物的诱导麻醉和基础麻醉以及复合麻醉。
硫喷妥钠脂溶性高，易透过血脑屏障。其作用
动物实验中常用麻醉药的选择与应用
张 彦，朱艳菊，张 芳，贾 冬
（辽宁中医药大学，辽宁 沈阳 110032）
摘 要：动物实验中常用麻醉药分为全身麻醉药和局部麻醉药；全身麻醉药又分为吸入麻醉药和注射麻醉药，
吸入麻醉药有乙醚等；注射麻醉药有戊巴比妥钠等；局部麻醉药有利多卡因等。
关键词：麻醉药；实验动物；作用机制；适用范围
中图分类号：R971.2 文献标识码：A 文章编号：1673-842X (2009) 01- 0164- 02
收稿日期：2008-08-11
作用简介：张彦（1958-），女，辽宁庄河人，助理研究员，主要从事中药新药开发研究。
通讯作者：贾冬，Tel：（024）31207383，Email:jiadg@yahoo.com.cn
含量。结果显示：东北铁线莲中齐墩果酸含量为
0.2279％。
3 讨 论
东北铁线莲是中药威灵仙的主要来源之一，测
定东北铁线莲中齐墩果酸含量在一定程度上能反映
药材的质量。实验测得东北铁线莲中齐墩果酸含量
较高，从色谱图上可以看出，东北铁线莲中皂苷元较
为单一。
《中华人民共和国药典》（2005年版）把TLC薄
层层析法作为威灵仙（东北铁线莲）中水解三萜皂
苷元齐墩果酸的检测方法，当前齐墩果酸含量测定
的方法还有薄层色谱扫描法、比色法等。本次实验
将HPLC法用于测定东北铁线莲中三萜皂苷元齐墩
果酸含量，将东北铁线莲的质量控制方法从形态鉴
别和薄层层析的定性方法推向定量检测的科学、规
范的方法。众所周知高效液相色谱法属于定量测定
方法，具有操作简便，测定直观、准确、直接等优点，
因而较之薄层层析法、薄层扫描法等更具有准确性。
实验表明，本方法操作简单，灵敏，重现性好，
可以用来测定东北铁线莲中齐墩果酸的含量。◆