全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2010，25(2)∶135 ～ 137
基金项目:国家自然科学基金项目(批准号:30960503);贵州省科学技术基金(黔科合丁字［2008］2143 号)
作者简介:曲国玉，正攻读中药学专业的硕士学位。Email:quguoyu685@ 163. com
* 通信作者(Correspondent author)，Email:dlsha1216@ yahoo. cn
贵州产菝葜类 8 种药用植物中薯蓣皂苷元的分析
曲国玉，任广聪，董凯旋，王先奎，朱 莉，董立莎*
(贵阳中医学院，贵州 贵阳 550002)
摘要:目的 采用 TLC、RP － HPLC法分析贵州产菝葜属及肖菝葜属 8 种常用药用植物中的指标性成分薯蓣皂苷元。方法
TLC法采用硅胶 G板，以环己烷 －乙酸乙酯(4∶1)为展开剂。RP － HPLC 的色谱条件为依利特 Hypersil ODS2 色谱柱(250
mm ×4. 6 mm，5 μm)，流动相为甲醇 － 0. 2%磷酸(76∶24)，流速 1. 0 mL·min －1，检测波长 203 nm，柱温 30 ℃，薯蓣皂苷元理
论板数不低于 4 × 103。结果 薄层鉴别中仅有短梗菝葜、黑叶菝葜及小叶菝葜含有薯蓣皂苷元。薯蓣皂苷元 0. 0105 ～ 2. 105
μg与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率为 100. 4%(RSD = 1. 85%，n = 9)。黑叶菝葜的薯蓣皂苷元含量最高，为
0. 15%，土茯苓、柔毛菝葜、托柄菝葜、短柱肖菝葜中均未检测到薯蓣皂苷元。结论 所用 TLC 法及 RP － HPLC 法简单易行、
专属性强、准确度高、重复性好，可作为菝葜类药材内在质量的控制方法。
关键词:薯蓣皂苷元;菝葜类;薄层色谱法;反相高效液相色谱法
中图分类号:R28 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2010)02 － 0135 － 03
Analysis of diosgenin of 8 species of medicinal plants from smilax group in Guizhou province
QU Guo － yu，REN Guang － cong，DONG Kai － xuan，WANG Xian － kui，ZHU Li，DONG Li － sha*
(Guiyang College of Chinese Traditional Medicine，Guiyang，Guizhou，550002 P. R. China)
Abstract:OBJECTIVE To establish a TLC method and RP － HPLC analysis of diosgenin as the indicator composition in 8 kinds of
Guizhou Smilax (Smilax L.)and Xiao Smilax(Heterosmilax K.)，the commonly used medicinal plants. METHODS TLC method，
using silica gel G plate with cyclohexane － ethyl acetate(4∶1)as the agent，was carried out for qualitative analysis. Using RP － HPLC
determination of eight varieties of diosgenin content，chromatographic conditions were as follows:Bartlett Hypersil ODS2 column(250
mm ×4. 6 mm，5 μm);mobile phase methanol － 0. 2% phosphoric acid (76∶24);flow rate:1. 0 mL·min －1;detection wavelength at
203 nm. column temperature 30 ℃ . The theoretical plate number of diosgenin was not less than 4 × 103 pedal. RESULTS TLC，only
three species contained diosgenin(short － stemmed Smilax，black leaves and lobular Smilax Smilax);The diosgenin showed good linear
in the range 0. 01052 － 2. 105 μg under this chromatographic conditions:Average recoveries to 100. 4% (RSD = 1. 85%，n = 9). The
content of diosgenin in the black leaves of Smilax was up to 0. 15%，while the diosgenin in the soil Fuling，soft hair Smilax，Smilax
care，short column Heterosmilax were not detected. CONCLUSION TLC method and RP － HPLC method are simple，specific，high
accuracy and repeatable.
Key words:Dosgenin;Smilax china Linn.;TLC;RP － HPLC
CLC number:R28 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2010)02 － 0135 － 03
百合科菝葜属 Smilax L.及肖菝葜属 Heterosmi-
lax K.植物的根及根茎均为苗族民间用药，蕴藏量
较大［1 － 2］。菝葜又名金刚藤，具有抗炎、祛风湿、利
小便、消肿毒等功效［3］，广泛用于治疗妇科炎症、关
节疼痛、淋病、肿毒等症。菝葜的主要指标性成分是
甾体皂苷元及苷，如薯蓣皂苷元类［4］。药理研究表
明:薯蓣皂苷元具有抗血小板聚集、降血脂、抗肿瘤、
祛痰及溶血等作用［5］。贵州产菝葜及类同品的研
究迄今未见文献报道，现以现行版药典收载菝葜中
的薯蓣皂苷元为指标性成分，分析研究了贵州产菝
葜类 8 个品种中薯蓣皂苷元的含量，为开发利用新
的药用资源提供科学依据。
1 实验部分
1. 1 仪器与试药
1100 型高效液相色谱仪(美国 Agilent 公司);
SK8310LH 型恒温超声波提取器(500 W，50 /60
kHz，上海科导超声仪器有限公司);紫外分析仪
(WD －9403C型，北京市六一仪器厂);薄层照相系
统(Camag Reprostar 3)。薯蓣皂苷元对照品(中国
药品生物制品检定所，批号:1539 － 200001);乙腈、
甲醇为色谱纯;水为乐百氏纯净水;其他试剂为分析
纯;菝葜类 8 个品种的全株采自贵州各地，并经鉴定
为小叶菝葜 S. microphylla、黑叶菝葜 S. nigrescens、短
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2010.02.028
梗菝葜 S. scobinincaulis、菝葜 S. china、托柄菝葜
S. discotis、土茯苓 S. glabra、柔毛菝葜 S. chingii 及短
柱肖菝葜 H. yunnanensis，除去地上部分后，根茎及
根洗净，切片，阴干备用。
1. 2 薄层鉴别
1. 2. 1 溶液的制备 精密称取薯蓣皂苷元对照品
5 mg于 10 mL 量瓶中，用甲醇定容，得 0. 5004 mg·
mL －1对照品溶液。8 个品种的药材粉碎，分别称取
过 24 目筛的粗粉各 5 g，加乙醇 50 mL，超声处理 30
min(59 kHz、500 W)，过滤，滤液加 5 mL盐酸，加热
回流 2 h，放冷，用 40%氢氧化钠溶液调至中性，挥
干至无醇味，残渣加 40 mL热水使溶解，用二氯甲烷
振摇提取 2 次(40、30 mL)，合并提取液，挥干，残渣
加 1 mL甲醇使溶解，作为供试品溶液(生药浓度为
5 g·mL －1)。
1. 2. 2 薄层色谱条件 对照品溶液的点样量为 7
μL，样品溶液为 20 μL，分别点于同一硅胶 G薄层板
上，以环己烷 －乙酸乙酯(4∶1)为展开剂，上行展
开 15 cm，取出，晾干，喷 10%硫酸乙醇溶液，105 ℃
加热至斑点显色清晰或在 365 nm 下观察。供试品
色谱中，在与对照品色谱相应位置处，显淡紫色斑
点。在薄层鉴别中，仅有 3 个品种含有薯蓣皂苷元，
即短梗菝葜、黑叶菝葜及小叶菝葜，其他 5 个品种未
检测出。
1. 3 含量测定
1. 3. 1 色谱条件与系统适应性试验 采用依利特
Hypersil ODS2 色谱柱(250 mm ×4. 6 mm，5 μm)，流
动相为甲醇 － 0. 2% 磷酸(76∶24)，流速 1 mL·
min －1，检测波长 203 nm，柱温 30 ℃，进样量 10 μL，
采集时间 35 min，理论板数以薯蓣皂苷元峰面积计
不得低于 4 × 103。在此条件下，供试品(生药 0. 8 g
·mL －1)中薯蓣皂苷元峰能与其他组分达到完全基
线分离，分离度均大于 1. 5，且峰形较好(图 1)。
薯
蓣
皂
苷
元
对照品
黑叶菝葜
土茯苓
0 10 20 30
t/min
图 1 菝葜类根茎及根的 HPLC图谱
Fig 1 HPLC chromatograms of Smilax class roots and root
1. 3. 2 溶液的制备 精密称取薯蓣皂苷元对照品
16. 84 mg，置 10 mL 量瓶中，加甲醇溶解并定容，配
制成 1. 684 mg·mL －1的对照品溶液。分别精密称取
各品种药材粗粉 8 g，置三角瓶中，加 150 mL 乙醇，
超声处理 30 min，过滤，滤液置于平底烧瓶中，加盐
酸 16 mL，加热回流水解 2 h，放冷，用 40%氢氧化钠
溶液调至中性，蒸至无醇味，残渣加热水 40 mL使溶
解，用石油醚(60 ～ 90 ℃)振摇提取(40 mL × 4)，合
并提取液，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至
10 mL量瓶中，加甲醇定容，过滤，取续滤液，即得供
试品溶液(生药 0. 8 g·mL －1)。
1. 3. 3 线性范围考察 精密移取 1. 684 mg·mL －1
薯蓣皂苷元对照品贮备液分别置于 10 mL 量瓶中，
加甲醇定容，得到一系列浓度的对照品溶液。分别
吸取 10 μL，进样，记录色谱图，以对照品量对峰面
积 A 进行线性回归，得线性回归方程:Y = 2 ×
10 －7X +5 × 10 －4(r = 0. 9999)。结果表明:薯蓣皂苷
元进样量 0. 0105 ～ 2. 105 μg 与峰面积有良好的线
性关系。
1. 3. 4 精密度试验 精密吸取“1. 3. 2”项下的短
梗菝葜供试品溶液 10 μL，重复进样 6 次，薯蓣皂苷
元峰面积值的 RSD = 0. 95%(n = 6)，结果表明方法
精密度良好。
1. 3. 5 重复性试验 精密称取过 24 目筛的短梗菝
葜粗粉各 6 份，按“1. 3. 2”项下方法制备供试品溶
液。分别吸取 10 μL 此溶液进样，RSD = 2. 15%
(n = 6)，显示重复性良好。
1. 3. 6 稳定性试验 取同一供试品溶液 10 μL，分
别在 0、1、2、3、4、5、6、7、8 h 时进样，测得薯蓣皂苷
元含量的 RSD = 1. 27%(n = 9)，表明供试品溶液在
8 h内稳定。
1. 3. 7 加样回收率试验 精密称取“1. 3. 6”项的
样品(短梗菝葜药材中薯蓣皂苷元含量为 0. 008%)
9 份于三角瓶中，加 95%乙醇 75 mL，分 3 种，各加
入 80%、100%、120%的对照品。按“1. 3. 2”项下方
法法制备并测定，结果见表 1。
表 1 加样回收率试验结果(mg，n =2)
Table 1 The results of recovery test(mg，n =2)
Oringnal Added Detected Recovery /% 珔X /% RSD /%
0. 3253 0. 2652 0. 5936 101. 17 99. 80 1. 85
0. 3244 0. 2652 0. 5897 100. 38
0. 3220 0. 2526 0. 5694 97. 84
0. 3230 0. 3158 0. 6406 100. 80 100. 94 1. 86
0. 3220 0. 3158 0. 6325 98. 32
0. 3250 0. 3158 0. 6523 103. 70
0. 3229 0. 3915 0. 7182 100. 97 100. 32 0. 29
0. 3150 0. 3789 0. 6883 98. 52
0. 3229 0. 3915 0. 7202 101. 48
631 华 西 药 学 杂 志 第 25 卷
1. 3. 8 样品的测定 按“1. 3. 2”项下方法，每个样
品平行制备 2 份供试品溶液。在“1. 3. 1”项条件
下，分别精密吸取对照品和供试品溶液各 10 μL，注
入液相色谱仪，测定峰面积，按外标一点法计算含量
(表 2)。
表 2 贵州产菝葜类 8 个品种中薯蓣皂苷元的含量(n =4)
Table 2 The contents of diosgenin in 8 Smilax in Guizhou(n =4)
品种来源 产地 含量 /%
黑叶菝葜 S. nigrescens 贵州贵定 0. 1474
小叶菝葜 S. microphylla 贵州平坝 0. 0551
短梗菝葜 S. scobinincaulis 贵州贵阳 0. 0066
菝葜 S. china 贵州安龙 0. 0024
柔毛菝葜 S. chingii 贵阳水田 未检出
土茯苓 S. glabra 贵阳清镇 未检出
托柄菝葜 S. discotis 贵州大方 未检出
短柱肖菝葜 Heterosmilax. yunnanensis 贵州兴义 未检出
2 讨论
回流及超声方法提取薯蓣皂苷元含量相近，因
超声提取操作简便、快速，故选择超声法提取，并进
行了超声时间及次数的考察，以超声 30 min，超声 1
次为最佳提取。按 2005 年版《中国药典》中菝葜项
下方法制备和测定了 8 个品种［6］，短梗菝葜中薯蓣
皂苷元的峰未被分开。分别考察了甲醇 － 水、甲
醇 － 0. 05%磷酸水溶液、甲醇 － 0. 2%磷酸水溶液 3
个溶剂系统及不同的比例。结果表明:以甲醇 －
0. 2%磷酸水溶液(76∶24)为流动相，所得色谱峰
峰形较好，分离效果最佳。
分别考察了依利特 Hypersil ODS2 色谱柱、Age-
la Technologies Promosil C18色谱柱、迪马 Diamonsil
色谱柱、Agilent Zorba × NH2 色谱柱等。结果依利特
Hypersil ODS2 色谱柱对薯蓣皂苷元的分离较好。
按 2005 年版《中国药典》菝葜项下方法测定 8 个品
种，结果发现:除短梗菝葜外，其他 6 个品种药材的
杂质峰较多，且在 60 min 还有杂质峰出现，故对供
试品的制备方法进行了改进。经比较发现:两种方
法对薯蓣皂苷元的含量影响不大，故选用改进后的
方法作为供试品的制备方法。
在薄层鉴别的研究中，贵州菝葜类 8 个品种中
有短梗菝葜、黑叶菝葜及小叶菝葜含薯蓣皂苷元;
RP － HPLC检测到 4 个品种含薯蓣皂苷元，分别为
短梗菝葜、黑叶菝葜、小叶菝葜及菝葜。但菝葜中薯
蓣皂苷元的含量很低，仅 0. 0024%，未达到药典的
最低要求(不低于 0. 04%)。而黑叶菝葜中薯蓣皂
苷元的含量相对较高(0. 1474%)。所以，不同品种
间薯蓣皂苷元的含量有较大差异，其他品种能否代
替菝葜和土茯苓做药用，有待进一步深入研究。研
究中发现:短梗菝葜中薯蓣皂苷元主要分布于根茎，
根中的含量很低。检测发现:根茎中薯蓣皂苷元的
含量为 0. 0151%，而根茎及根混合用时，其含量为
0. 0081%，故此品种开发利用价值不大。在薄层鉴
别中，菝葜类 8 个品种各有不同的颜色斑点，故信息
量较大、专属性强、重复性好。由于此类品种应用混
乱并多样化，在药材鉴别上有一定的困难，故用此法
可作为不同品种鉴别的依据之一。
参考文献:
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收稿日期:2009 － 10 － 08
731第 2 期 曲国玉，等。贵州产菝葜类 8 种药用植物中薯蓣皂苷元的分析