全 文 :荔波、三都、雷山、剑河、榕江、黎平及梵净山等地,生于河谷
林下、石上或树干上。主治功效:清热利尿,止咳,除烦,解
毒消肿。用于小便癃闭,淋漓涩痛,热咳,心烦,疮疡肿毒,
跌打损伤[3]。
33 剑叶盾蕨
来源:水龙骨科植物剑叶盾蕨 Neolepisorus ensatus
(Thunb.)Ching的全草。贵州分布于遵义、贵定、榕江等
地,生于常绿阔叶林下。主治功效:清热利湿,凉血止血,活
血散瘀。用于劳伤吐血,尿血,跌打损伤,烧烫伤,疔毒痈
肿[3]。
34 宽底假瘤蕨
来源:水龙骨科植 物 宽 底 假 瘤 蕨 Phymatopteris
majoensis(C. Chr.)Pichi - Serm. 的全草。贵州分布于赫
章、贞丰、龙里、道真、雷公山和梵净山等地,生于山地林下、
石上及树干上。主治功效:清热解毒,凉血止血,利水通淋,
止咳祛痰。用于痈疡肿毒,目赤肿痛,肺热咳嗽,淋证[3]。
35 细柄假瘤蕨
来源:水龙骨科植物细柄假瘤蕨 Phymatopteris tenuipes
(Ching)Pichi - Serm. 的全草。贵州分布于赫章、毕节、安
顺、清镇、道真等地,生于石灰岩区的林下石上。主治功效:
清热凉血,利水通淋。用于肺热咳嗽,小便淋痛,肠风下
血[3]。
36 中华盾蕨
来源:水龙骨科植物中华盾蕨 Neolepisorus sinensis Ch-
ing的全草。贵州分布于金沙、石阡等地,生于常绿阔叶林
下。主治功效:清热利湿,活血散瘀。用于湿热肿满,劳伤
吐血,尿血,烧烫伤,跌打损伤,疔毒痈肿[3]。
37 爬岩姜
俗名:骨碎补。仡佬族药名:街郭港[1]。来源:槲蕨科
植物槲蕨 Drynaria roosii Nakaike的根茎。贵州各地均有分
布,生于树干上、石壁上或墙上。主治功效:补肾壮骨,活血
止痛。用于肾虚,足膝酸软,耳鸣耳聋,遗尿,跌打损伤[3]。
38 匙叶剑蕨
来源:剑蕨科植物匙叶剑蕨 Loxogramme grammitoides
(Bak.)C. Chr.的全草。贵州分布于道真、正安、绥阳、桐
梓、梵净山及雷公山,生于山坡林下、石上、石缝中及树干
上。主治功效:清热解毒,利尿止血。用于疮痈肿毒,水肿,
热淋,小便不利,血淋,外伤出血[3]。
参考文献
[1]赵俊华,潘炉台,张景梅. 仡佬族医药[M]. 贵阳:贵州
民族出版社,2002.
[2]贵州省地方志编纂委员会.贵州省志·民族志[M].贵
阳:贵州民族出版社,2002.
[3]潘炉台,赵俊华,孙庆文. 贵州药用蕨类植物[M]. 贵
阳:贵州科技出版社,2012.
[4]王培善,王筱英.贵州蕨类植物志[M].贵阳:贵州科技
出版社,2001.
2015 年 1 月 19 日收稿
△基金项目:国家“重大新药创制”科技重大专项(2009ZX09308 -
001 - 4)
维吾尔药材驱虫斑鸠菊质量标准研究△
阿不都瓦尔·阿布拉克1 沙拉麦提·艾力2 王亚丽2
(1.新疆维吾尔自治区维吾尔医医院,新疆 乌鲁木齐 830049;
2.新疆维吾尔自治区食品药品检验所,新疆 乌鲁木齐 830004)
摘 要:目的:建立维医常用药材驱虫斑鸠菊的质量标准。方法:采用 TLC法对绿原酸进行定性鉴别。采用 HPLC 法,Agi-
lent ZORBAX SB - C18(4. 6mm × 150mm ,5μm),以乙腈为流动相 A,以 0. 2%磷酸为流动相 B,进行梯度洗脱;流速:1. 0mL·
min -1,检测波长为 327nm,柱温:30℃,测定驱虫斑鸠菊中绿原酸的含量。结果:TLC鉴别专属性强,分离效果好。绿原酸在
1. 218 ~ 91. 350μg·L -1范围内,有良好的线性关系(r2 = 0. 9999),平均回收率为 102. 5%(n = 9),RSD%为 1. 25%。结论:
该方法简便、准确、重现性好,可作为驱虫斑鸠菊药材的质量控制方法。
关键词:驱虫斑鸠菊;绿原酸;薄层色谱法;高效液相色谱法
中图分类号:R291. 5 文献标识码:A 文章编号:1006 - 6810(2015)04 - 0044 - 03
驱虫斑鸠菊为维吾尔医常用药材,维吾尔语名为“Kali
zire ”,译音即“卡力 孜然”。其植物基源均为菊科植物驱
虫斑鸠菊 Vernonia anthelmintica Willd. 的成熟果实[1 - 3]。
我国分布于云南西部。国外分布于印度、巴基斯坦、斯里兰
卡、尼泊尔、阿富汗、缅甸、老挝、马来西亚等。生于宅旁荒
地或路旁,新疆和田县、阿克苏地区有栽培。性质为三级末
干热,具有清除过盛黏液质,促进色素沉着,恢复皮肤颜色,
祛湿消肿,散寒止痛,驱虫等功效。临床用于白癜风,湿寒
性炎肿,湿痹疼痛,肠道寄生虫等症。目前以其为主药研制
的单味和复方制剂有注射剂、软膏、擦剂、丸剂、片剂
等[4 - 6]。卫生部药典会编《中华人民共和国卫生部药品标
准 -维吾尔药分册》(1998 年)收载了驱虫斑鸠菊,只有性
状和显微鉴别项。本标准修订了基源、性状项,增加了薄层
色谱鉴别、水分、总灰分、酸不溶性灰分、含量测定等项,使
44 中国民族医药杂志 2015 年 4 月第 4 期
DOI:10.16041/j.cnki.cn15-1175.2015.04.033
质量标准得到了全面提高。
1 仪器与试药
1. 1 仪器:岛津 LC - 20AT 高效液相色谱仪,SPD -
M10AVP二极管阵列检测器,Lab solution色谱工作站(日本
岛津);CPA 225D 型电子分析天平(德国 sartorius 公司)中
草药粉碎机(德国 IKA),定量毛细管(美国 Drummond Sci-
entific Company),OLYMPUS BX - 51 生物显微照相系统
(日本),CAMAG REPROSTAR3 薄层色谱成像系统(瑞士
卡玛柯公司);KLZ - UP超纯水仪(台湾艾柯成都康宁实验
专用纯水设备厂)。KUDOS SK7210LHC型超声仪(上海科
导超声仪器有限公司)
1. 2 试药:乙腈为色谱纯,水为超纯水,其他试剂均为分析
纯。对照品:绿原酸对照品(中国食品药品检定研究院,批
号:110753 - 200413,供含量测定用)。样品:驱虫斑鸠菊样
品 11 批,经自治区食品药品检验所苏来曼·哈力克主任药
师鉴定均为菊科植物驱虫斑鸠菊 Vernonia nthelmintica
Willd.的成熟果实。
2 方法与结果
2. 1 性状:本品呈倒圆锥形,长 4 ~ 6mm,直径 1 ~ 2mm,表
面棕色至墨绿色,顶端平截,下端稍细。具 10 条纵向突起
棱肋,用放大镜观察,棱肋处被短柔毛。气特异,味极苦。
2. 2 显微鉴别:横切面:外果皮细胞 l 列,方形,在棱脊处
可见棕色单细胞和叉状非腺毛,在肋间凹陷处有棕黄色卵
形或乳头状单细胞腺毛。中果皮细胞多层,棱脊处中央有
维管束,木质部内侧有石细胞群和纤维群散在,最内侧有石
细胞带,从棱脊一直延伸与另一棱脊石细胞带相连,在每个
棱脊处断开,呈 V字形。薄壁细胞中含众多草酸钙方晶和
柱晶。内果皮细胞黄棕色。种皮细胞 2 层,黄棕色。胚乳
不发达,为 2 ~ 3 层薄壁细胞,中央有子叶 2 枚,子叶为长圆
形,外侧有 1 层方形细胞,内有长方形细胞,其间有维管束。
(见图 1)
粉末:粉末棕黄色,石细胞为类圆形、椭圆形或纺锤形,
成群或单个散在,棕黄色,细胞壁厚,直径 20 ~ 35μm,长
120μm,孔沟明显。腺毛为单细胞卵形,长 23 ~ 25μm。非
腺毛单一或呈叉状,长达 160μm。螺纹导管直径 15 ~
25μm。果皮细胞含有方晶和柱晶。种皮细胞黄棕色,细胞
壁形状特异,呈网纹状。胚乳细胞多角形,内含众多油滴。
图 1
2. 3 薄层色谱鉴别 取本品粉末 2g,加甲醇 20mL,超声提
取 20min,滤液蒸干,残渣加甲醇 1mL 使溶解,作为供试品
溶液。另取绿原酸对照品适量,加甲醇制成每 1mL 含 1mg
的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典 2010
年版一部》附录Ⅵ B)试验,吸取上述供试品溶液 20μL,对
照品溶液 5μL,分别点于同一硅胶 G 薄层板上,以乙酸丁
酯 -甲酸 -水(7:2. 5:2. 5)的上层溶液为展开剂,展开,取
出,晾干,置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与
对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,见图 2。
图 2
2. 4 杂质:按(《中国药典 2010 年版一部》附录ⅨA)规定
测定样品,杂质量为 0. 5% ~ 12. 3%,平均值为 4. 6%(n =
11)。
2. 5 水分:按(《中国药典 2010 年版一部》附录Ⅸ H)第
一法规定测定,结果水分含量为 5. 5% ~ 6. 7%,平均值为
6. 3% (n = 11)。
2. 6 总灰分:按(《中国药典 2010 年版一部》附录Ⅸ K)规
定测定,结果总灰分为 5. 2% ~ 11. 4%,平均值为 7. 7% (n
= 11)。
2. 7 酸不溶性灰分:按(《中国药典 2010 年版一部》附录
Ⅸ K)规定,结果酸不溶性灰分为 0. 2% ~ 6. 1%,平均值为
2. 5% (n = 11)。
2. 8 重金属及有害元素:按(《中国药典 2010 年版一部》
附录Ⅸ B)(原子吸收分光光度法)规定测定样品。重金属
及有害元素均未超出药典规定限度。
2. 9 含量测定
2. 9. 1 色谱条件:色谱柱为 Agilent TC - C18 (4. 6mm ×
150mm ,5μm);流动相以乙腈为 A,以 0. 2%磷酸溶液为 B
按表 1 梯度洗脱;检测波长:280nm;流速:1. 0mL /min ,柱
温:30℃。
表 1 梯度洗脱流动相比例
时间(min) 流动相 A乙腈(%) 流动相 B(%)
0 ~ 10 11→20 89→80
10 ~ 25 20→30 80→70
25 ~ 35 30→11 70→89
35 ~ 40 11 89
2. 9. 2 对照品溶液的制备:精密称取绿原酸对照品适量,
加 75%甲醇制成每 1mL含 30μg的溶液,作为对照品溶液。
2. 9. 3 供试品溶液制备 取本品粉末(过三号筛)约 2g,精
密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入 75%甲醇 50mL,称定
重量,超声处理(功率 350W,频率 59kHz)60min,放冷,再称
542015 年 4 月第 4 期 中国民族医药杂志
定重量,用 75%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤
液。
2. 9. 4 标准曲线制作:精密称取绿原酸对照品适量,加
75%甲醇适量溶解,摇匀,制成每 mL含绿原酸 1. 218μg、5.
22μg、15. 225μg、30. 45μg、60. 9μg、91. 35μg 的系列浓度对
照品溶液,分别进样 10μL,以浓度为横坐标,峰面积为纵坐
标进行回归,绿原酸标准曲线方程为:Y = 30454X - 5743.
7,r2 = 0. 9999。绿原酸在 1. 218μg ~ 91. 35μg范围内,有良
好的线性关系。
2. 9. 5 精密度试验:精密吸取供试品溶液,重复进样 6 次
测定绿原酸的峰面积值,计算相对标准偏差,结果绿原酸的
RSD = 0. 0709%,显示精密度良好。
2. 9. 6 稳定性试验:取同一供试品溶液,室温下放置,每隔
2h,连续测定绿原酸的峰面积值,计算 RSD为 0. 15%,表明
供试品溶液室温下 36h内稳定。
2. 9. 7 重复性试验:取同一样品 6 份,照前述方法测定,结
果绿原酸的峰面积的 RSD为 0. 41%,表明重复性良好。
2. 9. 8 回收率试验:取已测定量 1. 0g,共 9 份,精密绿原酸
对照品溶液(0. 0816mg·mL -1)4mL、5mL、6mL,按上述色
谱条件下测定,计算回收率。绿原酸平均回收率为 102.
5%,RSD为 1. 25%。
2. 9. 9 样品的测定 分别精密称取 11 批不同产地、不同采
集期驱虫斑鸠菊药材粉末各 1g,按正文方法测定,记录
HPLC图谱,外标法计算含量,结果绿原酸含量为 0. 074%
~0. 184%,平均 0. 110%(n = 11)。
3 讨论
3. 1 杂质、水分、总灰分和酸不溶性灰分是平价药材质量
的主要参数。相应的限度是水分必要的。根据试验结果,
规定其杂质不得过 6%,水分不得过 8. 0%,总灰分不得过
10. 0%,酸不溶性灰分不得过 3. 0%。重金属及有害元素
均未超过百万分之十,暂不在质量标准中设置此项目。
3. 2 本试验中多次探索流动相,最终选择梯度洗脱以确保
峰形较好、基线平稳、保留时间稳定,杂质峰较少。
3. 3 上述研究项目内容全面,方法简便快速,能有效控制
维药材驱虫斑鸠菊的质量。
参考文献
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维吾尔药分册[S]. 乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社,
1998,47.
[2]国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草 -维吾
尔药卷[M].上海:上海科技出版社,2005:164 - 165.
[3]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M].
第 74 卷.北京,科学出版社,1979:08.
[4]中国药品生物制品检定所等.中国民族药志[M].第 1
卷.人民卫生出版社,1990;249 - 252.
[5]新疆植物志编委会. 新疆植物志[M]. 第 5 卷. 新疆科
技卫生出版社,1999:473.
[6]刘勇民,沙吾提. 衣克木. 维吾尔药药志[M]. 乌鲁木
齐:新疆科技卫生出版社,1993;207.
2015 年 1 月 8 日收稿
Studies on Quality Control of Uyghur Crude Drug Coriander
Seeds of Vernonia anthelmintica Willd
Abduwar Abdulhak Salamet Ely Wang Ya - li
(Hospital of Xinjiang Traditional Uyghur Medicine,Urumqi830049)
(Xinjiang Institute for Food and Drug Control,Urumqi830004
[Abstract]Aim::To study and estabilish Uyghur Crude Drugs standard for seeds of Vernonia anthelmintica
Willd. Methods::The TLC method was used for the research of identification marks of the seeds. Carry out tests of
foreign matter,loss and drying,total ash,acid and insolution ash. Chlorrgenic acid in the drugs was determined by
HPLC,the analytical column was Agilent ZORBAX SB - C18(4. 6mm ×150mm 5μm) ,the mobile phase consis-
ted of A(acetonitrile)and B(0. 2% phosphoric acid). The gradient condition was 0min→10min→25 min→35
min→40 min,A:89%→80%→70%→89%→89%;The flow rate was maintained at 1. 0 mL·min - 1,and the
detective wavelength was set at 327nm. The injection volume was 10μl,and the colume temperature was main-
tained at 30℃ . Results:The calibration curve was linear in the ranges of 1. 218 - 91. 350μg·L - 1 for chloreo-
genic acid(r2 = 0. 9999) ,The average recoveries(n = 9)of sample was 102. 5%,and the RSD was 1. 25% .
Conclusion This method is simple,accurate,eproducible,and can be used for quantitative control of this prepa-
ration.
[Key words]:Vernonia anthelmintica Willd. Chlorrgenic acid TLC HPLC
64 中国民族医药杂志 2015 年 4 月第 4 期