全 文 ：China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 35 中国药房 2010年第21卷第35期
菝葜为百合科植物菝葜Smilan china L.的干燥根茎，具有
消肿止痛、活血化瘀、祛风利湿等作用[1]，临床常用于治疗各种
妇科炎症，疗效显著。菝葜中主要含有皂苷、黄酮、鞣质等化
学成分[2]。药理研究表明，菝葜中的总黄酮为抗炎活性成分之
一[3]。本试验采用大孔吸附树脂纯化工艺提取分离菝葜总黄
酮提取物，并采用高效液相色谱（HPLC）法测定了提取物中槲
皮素的含量。
1 材料
1.1 仪器
1100型HPLC仪（美国Agilent公司）；BP-211D型十万分
之一分析天平（德国Sartorius公司）；AL204型万分之一分析天
平（瑞士Metter Toledo公司）；KQ3200DE型超声波清洗仪（昆
山市超声仪器有限公司）。
1.2 试药
槲皮素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：
100081-200406）；菝葜药材由湖北福人药业有限公司提供，经
湖北中医学院生药学教研室吴和珍副教授鉴定为百合科植物
菝葜S. china L.的干燥根茎；甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其
它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 菝葜提取物的制备
取菝葜药材饮片，加适量水煎煮3次，合并提取液，过D101
大孔吸附树脂柱，用水洗至近无色，再用 70％乙醇洗脱，收集
洗脱液，回收乙醇并浓缩至适量，喷雾干燥，即得。共制得3批
菝葜提取物（总黄酮含量达 27.5％以上，批号分别为 090320、
090522、090525）。
·中药分析与鉴定·
HPLC法测定菝葜提取物中槲皮素的含量Δ
尹 玲 1＊，冯 芸 1，吴 姗 1，陈树和 2，刘焱文 1 #，巴 赛 3（1.湖北中医学院中药资源与中药复方省部共建教育部
重点实验室，武汉市 430061；2.湖北省中医院，武汉市 430061；3.广东药学院，广州市 510006）
中图分类号 R284.1；R927.2 文献标识码 A 文章编号 1001-0408（2010）35-3312-02
摘 要 目的：建立以高效液相色谱法测定菝葜提取物中槲皮素含量的方法。方法：色谱柱为Kromasil 100-5C18（250 mm×4.6
mm，5 μm），检测波长为370 nm，流动相为甲醇-0.4％磷酸（49 ∶ 51），柱温为35℃，流速为1.0 mL·min-1。结果：槲皮素检测浓度
在0.041～0.410 μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系（r＝0.999 7）；平均回收率为97.81％，RSD＝1.04％（n＝6）。结论：本
方法简便、准确，可作为菝葜提取物中槲皮素的含量测定方法。
关键词 菝葜提取物；高效液相色谱法；槲皮素；含量测定
Content Determination of Quercetin in Extracts from Smilax china by HPLC
YIN Ling，FENG Yun，WU Shan，LIU Yan-wen（Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Resource and
Compound Prescription，Ministry of Education，Hubei College of TCM，Wuhan 430061，China）
CHEN Shu-he（Hubei Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine，Wuhan 430061，China）
BA Sai（Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish HPLC method for the content determination of quercetin in extracts from of Smilax chi-
na. METHODS：Kromasil 100-5 C18（250 mm ×4.6 mm，5 μm）column was used as chromatographic column and the detection
wavelength was set at 370 nm. The mobile phase consisted of methanol-0.4％phosphatic acid（49 ∶ 51）with flow rate of 1.0 mL·
min-1 and column temperature at 35 ℃.RESULTS：The linear range of quercetin was 0.041 μg～0.410 μg（r＝0.999 7）with an aver-
age recovery of 97.81％（RSD＝1.04％，n＝6）. CONCLUSION：The method is simple and accurate for the content determination of
quercetin in extracts from S. china.
KEY WORDS Extracts from Smilax china；HPLC；Quercetin；Content determination
Δ国家自然科学基金资助项目（30870256）
＊硕士研究生。研究方向：中药及其制剂的有效成分。E-mail：
ccdxw120021@126.com
#通讯作者：教授，博士研究生导师。研究方向：中药及其制剂的
有效成分。电话：027-88920834。E-mail：ywliu@public.wh.hb.cn
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（收稿日期：2009-10-12 修回日期：2009-12-06）
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中国药房 2010年第21卷第35期 China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 35
2.2 色谱条件[4～6]
色谱柱：Kromasil 100-5 C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；柱
温：35 ℃；流动相：甲醇-0.4％磷酸（49 ∶ 51）；流速：1.0 mL·
min-1；检测波长：370 nm。在此条件下，菝葜提取物样品中槲
皮素色谱峰与其它色谱峰可达基线分离。色谱见图1。
2.3 对照品溶液的制备
精密称取槲皮素对照品8.1 mg，置100 mL量瓶中，加甲醇
溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1 mL含槲皮素0.081 mg）。
2.4 供试品溶液的制备
取菝葜提取物0.8 g，精密称定，置100 mL具塞锥形瓶中，
精密加入甲醇100 mL，加塞，精密称定，超声提取30 min，放置
至室温，再精密称定，用甲醇补足失重，摇匀，滤过，精密吸取
续滤液50 mL，水浴蒸干，残渣用甲醇定容至10 mL量瓶中，即
得。
2.5 线性关系考察
分别精密吸取槲皮素对照品溶液 0.5、1、2、3、4、5 mL，置
于10 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。精密吸取上述溶
液各 10 μL，注入液相色谱仪，测定。以进样量（X，μg）为横坐
标，峰面积积分值（Y）为纵坐标，制备标准曲线，得回归方程为
Y＝4 327.7X+46.531（r＝0.999 7，n＝6）。结果表明，槲皮素进
样量在0.041～0.410 μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关
系。
2.6 精密度试验
精密吸取槲皮素对照品溶液10 μL，重复进样6次，测定峰
面积。结果，RSD＝1.64％，表明仪器精密度良好。
2.7 稳定性试验
精密吸取同一供试品溶液，分别于 0、1、2、4、8、24 h各进
样 10 μL，测定槲皮素峰面积。结果，RSD＝1.02％，表明供试
品溶液在制备后24 h内稳定。
2.8 重复性试验
取同一批菝葜提取物（批号：090320）6份，每份0.8 g，精密
称定，按“2.4”项下方法制成供试品溶液，精密吸取10 μL进样，
测定。结果，槲皮素平均含量为 0.500 mg·g-1，RSD＝1.64％，
表明方法重复性良好。
2.9 加样回收率试验
取同一批已知槲皮素含量（0.500 mg·g-1）的菝葜提取物
（批号：090320）6份，每份 0.4 g，精密称定，分别加入一定量的
槲皮素对照品，按“2.4”项下方法制成供试品溶液，按上述方
法测定槲皮素含量，计算加样回收率，结果见表1。
2.10 样品含量测定
取 3批菝葜提取物，每批 2份，每份 0.8 g，精密称定，按
“2.4”项下方法制成供试品溶液。精密吸取对照品溶液、供试
品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以外
标法计算槲皮素的含量。结果，3批样品（批号：090320、
090522、090525）中槲皮素含量分别为 0.500、0.516、0.479 mg·
g-1。
3 讨论
文献报道[7～9]槲皮素的检测波长有360、368、254 nm，笔者
利用紫外-可见分光光度计对槲皮素对照品进行全波长扫描，
结果发现其最大吸收峰为370 nm，故选择370 nm为检测波长。
关于槲皮素的HPLC含量测定，流动相多采用甲醇-磷
酸-水系统，笔者考察了不同比例的甲醇-0.4％磷酸作为流动
相，最后确定流动相为甲醇-0.4％磷酸（49 ∶ 51），在柱温35℃、
流速 1.0 mL·min-1条件下槲皮素峰可达基线分离，且峰形对
称、分离度好。
综上，本方法简便、准确，可作为菝葜提取物中槲皮素的
含量测定方法，并可为菝葜总黄酮提取物的质量控制提供参
考。
参考文献
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（收稿日期：2009-10-05 修回日期：2010-03-25）
表1 加样回收率试验结果（n＝6）
Tab 1 Result of recovery experiment（n＝6）
试验号
1
2
3
4
5
6
取样量/g
0.405 2
0.406 1
0.404 2
0.403 3
0.400 7
0.403 6
样品含量/mg
0.202 6
0.203 1
0.202 1
0.201 7
0.200 4
0.201 8
加入量/mg
0.205
0.205
0.205
0.205
0.205
0.205
测得量/mg
0.406 0
0.401 5
0.402 9
0.400 1
0.399 9
0.404 2
回收率/％
99.23
96.80
97.94
96.79
97.35
98.74
x/％
97.81
RSD/％
1.04
2 4 6 8 10 12 14 16 18 min
A
2 4 6 8 10 12 14 16 18 min
B
1
1
图1 高效液相色谱图
A.槲皮素对照品；B.菝葜提取物；1.槲皮素
Fig 1 HPLC chromatograms
A. quercetin control；B. extracts of S. china；1. quercetin
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