全 文 ：第 31 卷 第 3 期
2015 年 3 月
贵州师范学院学报
Journal of Guizhou Normal College
Vol． 31． No． 3
Mar． 2015
艾纳香种苗快繁技术研究
＊
唐 松1，黄燕芬1，2* ，孔 丽1，罗查梅1，马俊飞1，文应劲1
(1．贵州师范学院化学与生命科学学院，贵州 贵阳 550018;
2．贵州省生物资源开发利用特色重点实验室，贵州 贵阳 550018)
摘要:以艾纳香幼茎段为外植体，研究激素对艾纳香诱导愈伤组织、继代增殖和生根的影响，建立了艾纳
香试管苗快繁体系，并优化获得其最佳增殖初代培养基为 MS + 6-BA 2． 0 mg /L;最佳增殖继代培养基为 MS
+ 6-BA 2. 5 mg /L + NAA 0. 3 mg /L;最佳的生根培养基为 1 /2 MS + NAA 0． 5mg /L;生根苗移栽于泥炭土与珍
珠岩比为 3∶ 1 的混合营养杯中，成活率可达 92． 16%。
关键词:艾纳香;组织培养;快速繁殖
中图分类号:S5043 文献标识码:A 文章编号:1674 － 7798(2015)03 － 0038 － 03
Study on rapid propagation technology of blumea balsamifera seedlings
TANG Song1，HUANG Yan-fen1，2* ，KONG Li1，LUO Cha-mei1，MA Jun-fei1，WEN Ying-jing1
(1． School of Chemistry and Life Science，Guizhou Normal College，Guiyang，Guizhou，550018;2． Guizhou Provincial Key
Laboratory of Biological Ｒesources Development and Utilization Characteristics，Guiyang，Guizhou，550018)
Abstract:In this experiment，with the tender stem segments of B． balsamifera (L．)DC． as explants，we study
the effect of plant hormone on the formation of B． balsamifera (L．)DC． callus，differentiation，and proliferation roo-
ting． Then，the rapid propagation system of tube seedling of B． balsamifera (L．)DC． is well established． The results
show that the optimal primary medium for primary culture is MS + 6 － BA 2． 0mg /L;the optimal medium for subcul-
ture is MS + 6 － BA2． 5 mg /L + NAA0． 3 mg /L;the optimal culture medium of rooting of rootless seedlings is 1 /2 MS
+ NAA0． 5mg /L;transplanting of rooting seedlings may use the nutrition earthen bowl transplants in greenhouse;the
suitable proportion of transplanting medium of with peat and perlite is 3:1，and the survival rate is 92． 16% ．
Key words:blumea balsamifera ;tissue culture;rapid propagation
艾纳香(Blumea balsamifera(L)DC)又称大风
艾、大艾、冰片艾等，属菊科艾纳香属多年生木质
草本植物，在我国主产于广西西南部和云南东南
部及贵州、广东等省。艾纳香适应性强，对土地要
求不高，是一种很好的水土保持先锋植被［1］。艾
纳香始载于《开宝本草》，药用为其叶、枝、根。艾
纳香的叶和嫩枝是提取天然冰片的重要原料，而
天然冰片是多种成药及民族药的组成成分，市场
需求量极大［2］。艾纳香主要以分株繁殖为主，植
株高大。一年生艾纳香母株在无株间竞争条件
下，当年发生分生株可达 48 株以上，也即无性繁
殖系数可达 50 左右［3］。但是，分生苗成活率低;
种子有性繁殖的育性、休眠性、发芽率以及种子采
收和种子对环境的抗适性也存在诸多问题，一般
不采用种子有性繁殖［4］。这些情况导致艾纳香
种苗短缺，严重制约艾纳香大规模生产。因而应
用组织培养手段快速繁殖种苗，是发展艾纳香种
植的关键。本实验以艾纳香嫩茎为外植体进行组
织培养和快繁研究，建立艾纳香试管苗快繁体系，
探索提高组培苗移栽成活率的方法，为艾纳香种
苗快繁技术提供参考。
—83—
* 收稿日期:2014 － 10 － 18
基金项目:教育部教改项目“生物资源科学专业综合改革试点”;贵州师范学院学生科研项目“艾纳香种苗快繁技术研究”。
作者简介:唐 松(1997 －) ，男，贵州师范学院生物资源科学专业 2011 级本科生。
* 通讯作者:黄燕芬，教授． E － mail:gyhyf@ 126． com
DOI:10.13391/j.cnki.issn.1674-7798.2015.03.011
1 实验材料与方法
1． 1 试验材料
1． 1． 1 供试材料 供试材料为艾纳香幼嫩枝
条，取自贵州省罗甸县，属大艾品种。
1． 1． 2 外植体 选取植株上的新生粗细均匀
健壮无病虫害损伤的幼茎段作为外植体。
1． 1． 3 芽增殖继代培养材料 初代或继代培
养所得无菌苗，带 2 ～ 3 个芽位的茎段。
1． 1． 4 生根培养材料 增殖继代培养获得的
丛芽中长约 2 ～ 3cm健壮的单芽。
1． 1． 5 培养基及培养条件
初代培养基为 MS +6-BA 1. 5 mg /L、MS +6-BA
1. 8 mg /L、MS + 6-BA 2. 0 mg /L、MS + 6-BA 2. 5
mg /L系列激素配比;继代培养基为 MS + 6-BA
1. 5 mg /L + NAA 0. 2 mg /L、MS + 6-BA 1. 5 mg /L
+ NAA 0. 3 mg /L、MS + 6-BA 2. 0 mg /L + NAA
0. 2 mg /L、MS + 6-BA 2. 5 mg /L + NAA 0. 3 mg /L
系列激素配比;生根培养基为 MS + NAA 0. 1 mg /L、
MS + NAA 0. 5 mg /L、MS + NAA 0. 7 mg /L、MS +
NAA 1. 0 mg /L、MS + NAA 1. 2 mg /L 系列激素配
比。所有培养基均附加 3%白砂糖，0. 6%琼脂。
pH值 5. 8 ～ 6. 0，培养室温度 25℃ ± 3℃，光照时
间 10 ～ 12 h /d，光照强度 1500 ～ 1800Lx。
1． 2 试验方法
1． 2． 1 初代培养
从植株上取具 4 ～ 5 片叶，长约 6cm 的新生
幼嫩枝条，用自来水清洗干净，然后在超净工作台
中，先用 75%酒精浸泡 30s，无菌水冲洗 2 次，再
用 0. 1%的升汞溶液灭菌 8min，无菌水浸洗 5 次
后将枝条剪成带有腋芽约 1. 0cm 长的小段，接种
于不同激素配比的初代培养基中。培养得到大量
丛生芽后，再切成 1. 5cm 左右并带腋芽的小芽，
接种于不同处理的初代培养基中。30d 后统计各
项数据，筛选最佳初代培养基配方。
1． 2． 2 芽的增殖继代培养
将初代培养得到的艾纳香无菌芽苗切成带有
2 ～ 3 个腋芽(长约 2. 0cm)的茎段，接种至 MS 添
加不同激素组合处理的增殖培养基中继代培养，
每处理接种 5 瓶，每瓶接种 3 个茎段。30d 后统
计增殖情况，探索最适增殖继代培养基配方及继
代周期、增殖系数。
1． 2． 3 生根培养
选择继代培养得到的 2 ～ 3cm 高的健壮单
芽，接入不同生根培养基中进行培养。20d 后统
计根的生长情况，筛选最佳生根培养基配方。
1． 2． 4 炼苗移栽
生根的瓶苗移到培养室外的荫棚下，较强散射
光中炼苗 3 ～5d后打开瓶盖继续炼苗 2 ～3d后，小
心取出小苗并洗净基部附着的培养基，植入经过
0． 1%高锰酸钾溶液消毒的泥炭土与珍珠岩比为
3∶ 1的混合营养杯中。移栽苗置于遮阳棚下培养，
期间注意补充水分与防虫害，20d后统计成活率。
2 结果与分析
2． 1 诱导培养
艾纳香的初代培养即对丛生芽诱导的培养，接
种后 1 ～2周腋芽开始萌动，同时茎基部切口处开
始膨大形成愈伤组织，但愈伤组织不直接产生小
芽。其培养基组合及 30d后的生长情况见表 1。
表 1 6-BA对丛生芽诱导的影响
6-BA
(mg /L)
接种芽
数(个)
长出丛生
芽数(个)
芽增殖
系数
诱导率
(%)
1． 5 20 105 5． 25 100
1． 8 20 108 5． 40 100
2． 0 20 143 7． 15 100
2． 5 20 111 5． 55 100
注:基本培养基为 MS。芽增殖系数 =长出丛生芽数
(个)/接种芽数(个)。
从表 1 可以看出，6-BA在 1． 5 ～ 2． 0 mg /L的
范围内，芽增殖系数随 6-BA 浓度提高而增加。
当 6-BA浓度超过 2． 0 mg /L 时，芽增殖系数降低
且茎段切口处产生的愈伤组织增多。MS + 6-BA
2． 0 mg /L为较适宜诱导产生丛生芽的培养基，诱
导率可达 100%，芽增殖系数为 7. 15。
2． 2 丛生芽的增殖继代培养
接种 1 ～ 2 周后，接种芽开始旺盛分化新芽，
经过 4 ～ 5 周培养，可分化多个小芽苗。继代增殖
苗的长势观察测定最适增殖周期为 30d左右。天
数过短，增殖数量达不到最大效益;过长，增殖系
数虽高但生长空间及营养不足，无效苗较多，直接
影响增殖效益。增殖培养基组合及 30d后的生长
情况见表 2。
表 2 6-BA和 NAA对丛生苗增殖的影响
6-BA
(mg /L)
NAA
(mg /L) 增殖系数 苗长势
平均株高
(cm)
1． 5 0． 2 4． 00 较弱 2． 24
1． 5 0． 3 4． 63 中等粗壮 2． 32
2． 0 0． 2 4． 50 弱 2． 20
2． 5 0． 3 3． 55 粗壮 2． 83
注:基本培养基为 MS。
在丛芽增殖过程中观察到，不同比例的 6-BA
与 NAA组合对丛生苗增殖的影响差异较大，其中
—93—
MS + 6-BA 1． 5 mg /L + NAA 0． 3mg /L 的培养基
组合对丛生苗增殖较好，增殖系数达 4. 63，苗长
势较健壮，但平均株高仅为 2. 32cm。综合各项指
标来说 MS +6-BA 2． 5 mg /L + NAA 0. 3mg /L的培
养基组合最佳，增殖系数为 3. 55，苗长势健壮，平
均株高为 2. 83cm。
2． 3 生根培养
将继代培养得到的无菌苗切成 2 ～ 3cm 高的
单芽，接种到不同培养基中进行培养。约一周后
芽苗的基部切口可分化出根。其培养基组合及
20 d后根的生长情况见表 3。
表 3 NAA对幼苗生根的影响
NAA
(mg /L)
接种苗数
(株)
生根率
(%)
平均根数
(条)
平均长
(cm)
0． 1 15 100 6 10． 20
0． 5 15 100 12 8． 93
0． 7 15 100 8 5． 53
1． 0 15 100 10 7． 07
1． 2 15 100 13 4． 73
注:基本培养基为 1 /2MS。
实验结果表明，1 /2 MS基本培养基对艾纳香
的生根诱导效果很好，出根时间快，根系十分发
达，为须根系。但是根显得过长过密，对出瓶移栽
清洗培养基时带来不便，容易断根。在 1 /2 MS培
养基上增加 NAA，对诱导艾纳香生根有很好的促
进作用。其中 MS + NAA 0. 5mg /L 的培养基组合
对小苗诱导生根的效果最佳，生根率达 100%，每
苗平均生根达 12 条，平均根长 8. 93cm。需要注
意的是生根培养时间过长时，茎上着生的气生根
增多，根系容易徒长，对移栽不利。
2． 4 炼苗移栽
试管苗的根吸收功能相对较差，叶片上角质
层很薄，气孔开口过大，极易散失水分，光合作用
能力较弱。因此，试管苗必须要有一个逐步锻炼
和适应过程［5］。移栽前先将瓶苗移到培养室外
的荫棚下，较强散射光中炼苗 5d，再打开瓶盖继
续炼苗 2 ～ 3 d后，小心取出小苗并洗净基部培养
基。艾纳香组培苗的根细长而脆嫩，冲洗过程中
尽量保全完整的根系。然后将小苗植入经过 0．
1%高锰酸钾溶液消毒的不同处理的基质中，移栽
苗置于遮阳棚下培养，期间注意补充水分与防虫
害。覆膜保湿、保温，防虫害。其不同处理及 20d
后的成活率见表 4。
表 4 不同处理对移栽成活率的影响
处理 移栽天数(d) 成活率(%)
腐殖土 20 76． 92
泥炭土∶珍珠岩(3∶ 1) 20 92． 16
实验表明:经过炼苗的植株成活率比直接移
栽的成活率要高;移栽于泥炭土与珍珠岩比为3∶ 1
的混合营养杯中比移栽于腐殖土中的成活率高，
平均成活率为 92. 16%。
3 结果与讨论
3． 1 对于艾纳香外植体选择，较幼嫩的外植
体比相对老熟的外植体更容易诱导腋芽萌发。因
此，在生产中应该优先选择幼嫩粗壮的外植体。
3． 2 在植物组织培养中，植物激素对器官分
化的调节起着重要的作用，尤其细胞分裂素与生
长素的比值，对愈伤组织的发育方向起决定作
用［6］。本次实验，6-BA对丛生芽诱导的最佳诱导
培养基为 MS + 6-BA 2． 0 mg /L;6-BA 和 NAA 结
合对丛生芽最佳增殖继代培养基为 MS + 6-BA
2. 5 mg /L + NAA 0. 3 mg /L;适量的生长素的参与
能诱导维管束的形成促进根原基分化，使之具有
分生能力最终分化形成根［7］，NAA 对幼苗生根的
最佳生根培养基为 1 /2 MS + NAA 0. 5mg /L。
3． 3 本实验研究结果表明移栽于泥炭土与
珍珠岩比为 3∶ 1 的混合营养杯中比移栽于腐殖土
中的成活率高，成活率为 92. 16%。但本实验所
设计的处理组合较少，要达到更好的处理效果还
有待更深入系统地研究。
3． 4 本实验研究结果表明艾纳香试管植株
的培养具有诱导周期短、激素用量相对较少、操作
比较方便的优点且在长势上呈现出很大的优势，
分化迅速，植株长势旺盛，适合大规模生产且易于
推广，但纳香规模化生产的技术有待进一步深入
研究。
参考文献:
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［责任编辑:袁向芬］
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