全 文 ：第 32 卷第 4期 齐 齐 哈 尔 大 学 学 报（自然科学版） Vol.32,No.4
2016 年 7 月 Journal of Qiqihar University(Natural Science Edition) July,2016
中华苦荬菜中Ixerin D和chinensiolide B
的含量分析
王丹，张扩，赵明，李军，张树军
（齐齐哈尔大学 化学与化学工程学院，黑龙江 齐齐哈尔 161006）

摘要: 建立HPLC 法同时测定中华苦荬菜中 Ixerin D 和 chinensiolide B 含量，并对不同采收期、部位中的这两种成
分进行比较。在流动相为水-甲醇梯度洗脱（0→5 min, 90﹕10; 5→10 min，90﹕10→80﹕20，10→22 min，80﹕20；
22→45 min，80﹕20→75﹕25；45→50 min，75﹕25→73﹕27），流速 1.0 mL/min，检测波长 210 nm 条件下测定。
平均加样回收率分别为 101.5%，100.4%。采收的样品中，随着生长期延长，两者含量均呈现两个增长周期，都是
先升高再降低后又升高又降低的趋势，其中 6月末叶部的 Ixerin D 含量最高，chinensiolide B 的含量以 6月下旬在
叶部最高。
关键词：中华苦荬菜；ixerin D；chinensiolide B
中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：1007-984X(2016)04-0045-04

中华苦荬菜 Ixeris chinensis Nakai 系菊科苦荬菜属一至二年生草本植物，具有清热解毒，消炎止痛，
抗肿瘤等功效[1]，在我国东北、华东、西南等地区野生资源十分丰富。其中的倍半萜内酯类成分 chinensiolide
A～C 及 E等表现出极强的抗炎、抗肿瘤等活性[2-4]，但这些物质在中华苦荬菜中的含量甚微，难以满足高
层次生物活性测试的需要。对前期的研究中发现，ixerin D 在中华苦荬菜中的含量较高，并且其在结构上
与 chinensiolide A～C及 E都相近（如图 1），可作为合成 chinensiolide A～C及 E等的理想原料。为获得
较多的 ixerin D 用以合成其它倍半萜类化合物，以满足进一步研究中华苦荬菜中倍半萜内酯类成分的生物
活性需求，本文确立了利用高效液相色谱法对中华苦荬菜中 ixerin D 和 chinensiolide B 的含量进行分析的
方法，并对不同采收期中华苦荬菜的根和茎叶中两种成分的含量进行了分析，为适时采收并合理利用植物
资源提供科学依据。
O
HO
O
O
H
HO
HO
O
O
H
H O
HO
O
O
H
O
HO
O
O
H
H
O
OH
HO
HO
OH
O
HO
O
O
H
H
O
O
HO
HO O
O
HO
O
OH
chinensiolide A chinensiolide B chinensiolide C
chinensiolide E Ixerin D
图 1 chinensiolide A~C, E 及 Ixerin D 的结构

收稿日期：2016-03-14
作者简介：王丹（1991-），女，辽宁朝阳人，硕士研究生，主要从事天然产物研究，wd15214405606@163.com。

·46· 齐 齐 哈 尔 大 学 学 报（自然科学版） 2016 年
1 实验部分
1.1 仪器和材料
Agilent 1260 型安捷伦高效液相色谱仪 (美国安捷伦科技公司)：1260 二元泵，1260MWD 检测器，自
动进样器；CN61M / SP-752 紫外分光光度计（北京中西远大科技股份有限公司）；Sarturius BT 124S / BT 25S
电子天平；KQ3200DE 型数控超声波清洗器 (昆山超声仪器有限公司)，84-1 磁力搅拌控温电热套 (山东鄄
城华鲁电热仪器有限公司)。
1.2 试药
中华苦荬菜: 2015 年 4～10 月间于齐齐哈尔大学校园内同一地点采集，共 10 份样品，阴干后再于 60℃
真空干燥 4 h 备用)；对照品 ixerin D 和 chinensiolide B 从中华苦荬菜全草中分离得到，经 1H NMR，13C NMR
等理化性质进行结构鉴定，并利用 HPLC 归一化法进行纯度分析确定：ixerin D 对照品的纯度为 98.7%，
chinensiolide B 对照品的纯度为 99.5％；HPLC 用甲醇为色谱醇，水为娃哈哈纯净水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6×150 mm，5 m)；流动相为水-甲醇梯度洗脱（0→5 min, 90﹕10；
5→10 min,90﹕10→80﹕20,10→22 min, 80﹕20; 22→45 min,80﹕20→75﹕25; 45→50 min, 75﹕25→73﹕27）；
流速 1.0 mL/min；进样量 5 L；柱温 25 oC；检测波长 210 nm。
2.2 标准品溶液的制备
精密称定干燥至恒重的对照品 ixerin D 6.80 mg 和 chinensiolide B 0.30 mg，分别用甲醇定容到 10 mL，
摇匀，得 ixerin D 680 μg / mL，chinensiolide B 30 μg / mL 的对照品溶液，冰箱密闭保存待用。
2.3 样品溶液的制备
精密称取干燥至恒重的中华苦荬菜叶、根各 3.0 g，置于 500 mL 圆底烧瓶中，精密加入甲醇 150 mL，
加热回流 1 h，放冷，过滤后，药渣按相同方式重复提取 2 次，合并滤液，浓缩至恒重。取一定质量的提
取物至 5 mL 容量瓶中，定容至刻度，摇匀，过 0.45μm 微孔滤膜，取滤液即得供试品。
2.4 线性关系的考察
分别精密吸取 ixerin D 和 chinensiolide B 的对照品溶液 2, 4, 6, 8, 10μL，分别注入液相色谱仪中，测
定峰面积，以质量浓度为横坐标、峰面积为纵坐标进行线性回归，所得回归方程分别为 Y= 1385.2x + 5.7847，
R2=1.0000；Y = 1753x + 3.2401，R2 = 0.9997。结果表明，Ixerin D 进样量在 1.36～6.8 μg 范围内、chinensiolide
B 进样量在 0.06～0.30 μg 范围内与峰面积有良好的线性关系。
2.5 精密度实验
在上述色谱条件下，精密吸取标准品溶液 5 μL注入高效液相色谱仪，重复进样 5次，分别测定峰面积，
结果 ixerin D 的峰面积 RSD为 1.7%，chinensiolide B 的峰面积的 RSD为 0.51%，表明仪器精密度良好。
2.6 稳定性实验
精密吸取同一供试品溶液 5 μL，按照上述色谱条件，分别于 0, 2, 4, 6, 8, 10 h 测定峰面积，结果 ixerin D
的峰面积 RSD为 1.34%，chinensiolide B 的峰面积的 RSD为 0.38%，表明供试品溶液室温放置 10 h 内稳定。
2.7 重现性实验
取同一批次中华苦荬菜根部5份，按照2.3项下的方法制备，测定峰面积，计算ixerin D的RSD为 1.39%，
chinensiolide B 的 RSD为 2.67%，表明重现性良好。
2.8 回收率实验
取已知含量的同一批次的中华苦荬菜根部9份，分别按照ixerin D和chinensiolide B含量的120%，100%，
80%，3个目标浓度，精密加入对照品，每个浓度平行 3份，按照上述色谱条件进样分析，计算得 ixerin D 和
chinensiolide B 的平均回收率分别为 101.5%, 100.4%；RSD为 2.83%, 1.95%。


第 4期 中华苦荬菜中 Ixerin D 和 chinensiolide B 的含量分析 ·47·

2.9 样品含量测定
精密称取不同采收期中华苦荬菜根和叶粉末 3.0 g，按 2.3 项方法制成供试品溶液，按 2.1 项下色谱条
件下分析，测定峰面积，计算不同采收期中华苦荬菜中 ixerin D 和 chinensiolide B 含量。
3 讨论
3.1 色谱流动相的考察
由于中华苦荬菜中含有大量的黄酮及其糖苷类成分[5]，给 ixerin D 的 HPLC 分析带来较大的影响，因此
为了获得较好的分析效果，分别选择：甲醇—0.1%磷酸二氢钾水溶液，甲醇—水和乙腈—0.1%磷酸二氢钾
水溶液 3种体系的流动相，流速为 1.0 mL/min，在柱温为 25 oC，检测波长为 210 nm 的条件下，对 ixerin D
和 chinensiolide B 两种对照品的色谱分析效果进行了考察，结果甲醇-水体系为流动相，流动相的梯度比例
为：0→5 min，90﹕10；5→10 min，90﹕10→80﹕20，10→22 min，80﹕20；22→45 min，80﹕20→75﹕25；
45→50 min，75﹕25→73﹕27 时，出峰完全，保留时间合适，分离效果理想，因此选择该条件作为样品分
析的色谱条件，该色谱条件下，供试品溶液色谱图见图 2。

图 2 供试品的 HPLC 色谱图
3.2 ixerin D 和 chinensiolide B 的含量
本实验测定齐齐哈尔地区中华苦荬菜的根部和叶部4月到10月ixerin D和chinensiolide B的含量。10 个
采收期中华苦荬菜根和叶中 ixerin D 和 chinensiolide B 含量结果见表 1。
表 1 不同采收期根和叶中测定结果 μg/g (n = 3)
采收期
月-日
ixerin D chinensiolide B
叶 根 叶 根
04-17 286.3 526.7 77.3 56.9
04-27 884.0 1246.0 132.6 62.1
05-07 877.4 839.3 213.6 104.4
05-17 129.4 1304.4 26.3 45.5
06-17 511.3 1310.5 353.8 44.7
06-30 1516.5 1458.6 90.6 48.4
07-17 1504.1 1223.7 729.9 44.3
08-30 1320.9 1102.8 46.1 39.5
09-17 703.3 1083.3 20.4 30.4
10-17 392.7 622.7 12.5 9.1
Ixerin D
Chinensiolide B

·48· 齐 齐 哈 尔 大 学 学 报（自然科学版） 2016 年
实验结果表明，在该植物的生长发育不同的阶段，两者存在明显差异，其含有量存在两个由低到高的
趋势。从不同采收期来看，6 月末中华苦荬菜根当中的 ixerin D 含量最高，6 月下旬中华苦荬菜叶中
chinensiolide 含量最高；从不同部位来看，中华苦荬菜的根中 ixerin D 的含量相对较高，中华苦荬菜叶中
的 chinensiolide B 的相对含量较高。
参考文献：
[1] 江苏新医学院.中药大辞典.上册[M].上海: 上海科学技术出版社, 1986: 186
[2] Zhang S, Wang J, Xue H, et al.Three New Guaianolides from Siyekucai (Ixeris chinenseis) [J].J. Nat. Prod., 2002, 65 (12): 1927-1929
[3] Zhang S, Zhao M, Bai L, et al. Bioactivi Guaianolides from Siyekucai (Ixeris chinensis) [J]. J. Nat. Prod., 2006, 69 (10): 1425-1428
[4] 张树军, 王丹, 许策, 等.中华苦荬菜根部化学成分研究[J].中国中药杂志. 2014, 39 (16): 3089-3093
[5] 王晓飞, 王晓静.中华苦荬菜化学成分研究[J].中草药. 2007, 38 (8): 1151-1152
Analysis of the contents of ixerin D and chinensiolide B in ixeris chinensis
WANG Dan，ZHANG Kuo，ZHAO Ming，LI Jun，ZHANG Shu-jun
（Institute of Chemistry and Chemical Engineering, Qiqihar University, Heilongjiang Qiqihar 161006, China）

Abstract：To develop a HPLC method for simultaneous determination of the content of Ixerin D and chinensiolide B
of the Ixeris chinensis, different collection period, parts of these two components were compared. The mobile phase
was water - methanol gradient (0 →5 min, 90﹕10; 5 → 10 min, 90﹕10 → 80﹕20,10 → 22 min, 80﹕20; 22 → 45
min, 80﹕20 → 75﹕25; 45 → 50 min, 75﹕25 → 73﹕27), mobile phase flow rate 1.0 mL/min, detection
wavelength 210 nm. the average recoveries were 101.5%, 100.4%. With the growth period prolonged, the Ixerin D
and chinensiolide B content of the collecting samples present two growth cycle, namely increased at first and then
decreased and again. In late June the content of Ixerin D in the root reached the highest, while chinensiolide B in the
leaves.
Key words: Ixeris chinensis Nakai；ixerin D；chinensiolide B


（上接第 24 页）
Design of multi joint manipulator adaptive fuzzy control system based on MIMO system
XIE Bin，DING Zheng-jie，JIANG Wei
（Bozhou Vocational and Technical College Electronics and Electrical Engineering，Anhui Bozhou 26800，China）

Abstract: For manipulator operation process there are uncertain factors of interference and design from the adaptive
fuzzy control system, the control algorithm of the system is the use of MIMO (multiple input multiple output) fuzzy
systems to approximate the error. The robust adaptive control law is used to eliminate the influence caused by the
approximation error, which can effectively guarantee the stability of the system operation and reduce the number of
fuzzy control rules. Experimental verification and computer simulation show that the algorithm is effective.
Key words: Multi joint manipulator; adaptive control; robust control; nonlinear function