全 文 ：吉林农业科技学院学报
Journal of Jilin Agricultural Science and Technology University
Vol.24,No.2
June,2015
第 24卷 第 2期
2015年 06月
鸡树条荚蒾组培初代培养技术初探
建德锋，高英凯
（吉林农业科技学院植物科学学院，吉林 132101）
Studies on the Technology of Primary Culture of Viburnum sargenti in Vitro
JIAN Defeng, GAO Yingkai
(Jilin Agricultural Science and Technology University School of Plant Science, Jilin 132101）
Abstract：In order to breed seedlings of Viburnum sargenti Koehne rapidly and largely, try to breed by
using propagation methods in vitro. In the test, taking shoot-tips as explants, the effects of different media
formulations on the callus induction and the bud induction were researched in the induction phase. The
results got that the training program of shoot-tips culture of Viburnum sargenti in vitro was that: the stems
with buds after disinfection, the buds were cut and seeded into the callus induction medium of MS+KT 0.6
mg/L, when produced callus, the callus were cut pieces and seeded into the bud induction medium of MS+KT
0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L or MS+KT 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L, when produced a large number of adventitious
buds, took these buds as middle propagates for further propagation and rooting, and become full seedlings.
Key words：Viburnum sargenti Koehne; media formulations; callus induction; bud induction
鸡树条荚蒾 （Viburnum sargenti Koehne），又
称天目琼花、鸡树条等，为忍冬科荚蒾属中的一种
落叶灌木。 该树木叶色亮绿，姿态清秀,可修剪成
不同造型；花开时伞形聚伞花序顶生，洁白如雪，
紧密多花，能孕花分布在中央，外围有不孕的辐射
花，花型非常独特；秋季果实成熟时节, 累累红果
缀满枝头，晶莹剔透，活泼生动，是非常优良的观
型、观花、观果树种，在园林中被大量应用[1-2]。目前
鸡树条荚蒾在园林苗木的生产中， 主要通过播种
和扦插方法培育苗木， 但由于鸡树条荚蒾的种子
休眠期长, 发芽率低，给播种繁殖造成困难 [3-4]；另
扦插繁殖需要大量的枝条， 规模化大量繁殖时材
料采集有困难， 因此本实验尝试采用离体培养的
方法进行苗木培育。 在植物的整个离体培养过程
中，初代培养过程中的诱导阶段最为重要，能否诱
导出大量的中间繁殖体是整个离体培养的关键。
所以该试验以鸡树条荚蒾的茎尖为外植体， 对其
进行初代离体培养技术研究， 以便为鸡树条荚蒾
的组培快繁提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验时间、地点
试验于 2013年 10月～ 2014年 6 月在吉林农
业科技学院组培实验室进行。
1.2 试验材料
1.2.1 外植体 2013 年 10 月份于吉林农业科技
学院苗圃中挑选生长良好、 无病虫害的鸡树条荚
蒾植株， 采其当年生的完全木质化的带芽枝条若
干，带回组培实验室备用。
收稿日期：2015-02-18
作者简介：建德锋（1976-），男，河南省灵宝市人，副教授，从事园林植物教学与研究。
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吉林农业科技学院学报
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第 24卷 第 2期
2015年 06月
Vol.24,No.2
June,2015
1.2.2 试验用具 高压灭菌锅、超净工作台、干燥
箱、电磁炉与钢锅、电子天平、搅拌仪、封口膜、线
绳、三角瓶、量筒、移液管、大烧杯、玻璃棒、pH 试
纸、试管刷、容量瓶等，均由该组培实验室提供。
1.2.3 试验药品 84 消毒液、次氯酸钠、戊二醛、
酒精、新洁尔灭消毒液，MS 培养基所需各种药品，
KT、IBA植物激素，蒸馏水、燃料乙醇等药品，均由
该组培实验室提供。
1.3 试验方法
1.3.1 培养基配方 愈伤组织诱导培养基采用 5
个配比，基本培养基采用 MS，添加不同配比 KT，
KT添加量呈阶梯式的均匀分布，由小到大，记作：
J1：MS+KT 0.2 mg/L；J2：MS+KT 0.4 mg/L；J3：MS+
KT 0.6 mg/L；J4：MS+KT 0.8 mg/L；J5：MS+KT 1.0
mg/L。芽诱导培养基采用 4个配比，基本培养基同
样采用 MS， 添加不同配比的 KT 和 NAA， 记作：
Y1：MS +KT 0.5 mg/L +IBA 0.1 mg/L；Y2：MS +KT
0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L；Y3：MS+KT 1.0 mg/L+IBA
0.1 mg/L；Y4：MS+KT 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L。 以
上培养基均采用固体培养基， 添加琼脂量为 6 g/
L，蔗糖 30 g/L，培养基 pH调整为 6.0。
1.3.2 材料处理 将采集回来的带芽枝条切成小
段，每段带芽，先放入广口瓶中，在自来水底下流
水冲洗 20 min， 然后用 0.5%的 84消毒液浸泡 15
min ，蒸馏水冲洗 3～4 次后，再放入 0.05%次氯酸
钠溶液（有效氯含量）中浸泡 8 min，最后再次蒸馏
水冲洗 3～4次，放入接种室的超净工作台备用[5-7]。
1.3.3 培养过程 在超净工作台内用刀片将芽从
枝条段上切下， 用蘸有 75%酒精的纱布对芽擦拭
消毒，用蒸馏水冲洗 3～4 次后，再用消毒过的滤纸
拭去芽上的水珠，然后进行接种。接种时将芽边的
较大叶片去掉，保持芽大小为 0.5 cm 左右，另接
种插入时注意保持芽的极性。 首次接种为了减少
污染率，每个瓶中接 1 块原材料，每个配方接 30
瓶。接种后将瓶放入培养室中进行培养，定期观察
茎尖的分化情况， 记录每个配方瓶中愈伤组织出
现的时间， 到接种后第 25d 计算各配方的愈伤组
织诱导率。
诱导出愈伤组织后， 在超净台内将愈伤组织
切割成块，分别接种到 4 个芽诱导培养基上，每种
配方接种 20 瓶，每瓶接 3 块愈伤组织。 然后放入
培养室中进行芽诱导培养，定期观察芽诱导情况，
诱导 30d 后计算不同分化培养基的芽分化系数，
针对分化芽的情况记录形成芽的时间， 统计平均
形成芽的数量。
1.3.4 培养条件 整个诱导过程均在培养室进
行， 愈伤组织诱导阶段培养室温度保持在 18～
22℃，漫射光下培养；芽分化阶段培养室温度控制
在 23～25℃左右，光照度 2 000～3 000Lx。每天光照
时间 8～12h，培养室湿度保持在 85%。
2 结果与分析
2.1 愈伤组织诱导情况
茎尖接种到 5 种愈伤组织诱导培养基上之
后，会发现均有不同程度的分化，记录每个配方出
现愈伤组织的最早时间，在接种后第 25d，愈伤组
织诱导基本完成，形成的愈伤组织开始由绿变黄，
这时统计愈伤组织诱导率，结果见表 1。
表 1 愈伤组织诱导情况
注：愈伤组织诱导率（%）=出现愈伤组织的瓶数/（接种总瓶
数-污染瓶数）×100%
由表 1 可知，5 种培养基均可诱导出愈伤组
织，但诱导情况各有不同。从第 25d统计的诱导率
来看，5 个配方随着 KT 添加量的增加， 刚开始诱
导率增加，J3 诱导率达到最大，随后 J4、J5 又开始
出现下降， 说明 KT 的添加量有利于出现愈伤组
织，但并不是添加量越大越好，添加量过多反而导
致最终的诱导率开始下降。 在实际的定期观察中
也会发现，J5形成愈伤组织最早后，紧接着很多瓶
不再反应， 反而 J3 配方的瓶中形成愈伤组织较
多，且形成的愈伤组织质量较好。 综合比较，5 个
配方中， 鸡树条荚蒾茎尖愈伤组织诱导的最佳配
方应该为 MS+KT 0.6 mg/L。
2.2 不定芽诱导情况
2.2.1 不同分化培养基上分化系数 愈伤组织切
块转接到 4 种不同的芽诱导培养基上，定期观察，
都有不定芽分化， 到转瓶后第 30d 统计每个配方
的分化率，见图 1。
由图 1 可知，4 个配方中的不定芽诱导分化
率均大于 50%， 说明 4个配方均能进行不定芽的
诱导，但诱导情况有一定的差异，其中 Y2 配方的
分化率最高， 达到 80%， 其次为 Y4， 达到 78%，
培养基
配方
KT 添加
量/ mg/L
愈伤组织最早出
现时间/d
愈伤组织诱导率/
%
J1
J2
J3
J4
J5
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
18
17
12
11
10
9
45
62
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分化培
养基
转瓶瓶
数/个
成活瓶
数/个
分化不
定芽瓶
数/个
最早形
成不定
芽时间/d
平均芽
数//个/瓶
Y1
Y2
Y3
Y4
20
20
20
20
20
20
19
20
12
16
13
15
26
20
25
21
3.2
4.5
3.6
4.2
Y1、Y3 相对较低，均在 70%以下，可见KT 和 IBA
两种植物激素的配比对分化率有一定的影响，说
明 IBA 0.2 mg/L 对不定芽诱导有促进作用，较 0.1
mg/L 诱导效果好 ，KT 的量为 0.5 mg/L 或者 1.0
mg/L 对不定芽诱导的影响不大，二者之间没有较
大的差异。
图 1 不同芽诱导分化培养基的分化情况
注：分化率=诱导出不定芽的瓶数/(转瓶总瓶数-污染瓶数)
2.2.2 已分化培养基上分化情况 愈伤组织分化
不定芽的数量及分化速度对后期的扩繁有较大影
响，观察记录已分化培养基上不定芽的分化情况，
结果见表 3。
表 3 已分化培养基上分化情况
由表 3可知，Y2、Y4形成不定芽的时间较早，
从平均芽数比较，Y2 最多，为 4.5 个，其次为 Y4，
为 4.2 个，与 Y1、Y3 比较，Y2、Y4 配方较好，愈伤
组织分化不定芽个数较多。 结合图 1， 可以得出
Y2、Y4配方分化率大于其他 2 个配方， 另形成不
定芽的时间较早、分化不定芽的个数最多。得出在
4个配方中 Y2、Y4配方均适合鸡树条荚蒾愈伤组
织块进行不定芽的诱导。
3 结论与讨论
通过不同愈伤组织诱导培养基及不定芽诱导
培养基的诱导情况比较， 得出 KT 对愈伤组织诱
导有主导作用， 添加量以 0.6 mg/L 最为合适，KT
和 IBA 对愈伤组织分化不定芽都能起主导作用，
但所用配比不同， 导致分化情况不同， 在添加
0.5mg/L KT 或添加 1.0 mg/L KT 的情况下，IBA 的
量均添加到 0.2 mg/L为好。综合本实验结果，可得
出鸡树条荚蒾茎尖离体培养的培养方案： 选用带
芽茎段经过消毒后， 切割芽转入 J3：MS+KT 0.6
mg/L 愈伤组织诱导培养基上， 产生愈伤组织后，
将愈伤组织切块转入 Y2：MS+KT 0.5 mg/L+NAA
0.2 mg/L 或 Y4：MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L
的芽诱导培养基上，待产生大量的不定芽时，以这
些不定芽作为中间繁殖体，再进一步扩繁、生根，
进而形成再生植株。 由于本试验仅针对鸡树条荚
蒾的初代诱导阶段进行研究， 得出的仅为诱导愈
伤组织及不定芽的方案， 关于扩繁过程中的具体
培养基配方配比及生根阶段的配方影响等， 还有
待于进一步的研究。
参考文献：
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[7] 刘青林 ,马 袆 ,郑玉梅 .花卉组织培养 [M].中国农业出版社 ,
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责任编辑：吴艳玲
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配方
分
化
率
%
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