全 文 ：鸡树条荚蒾叶的最佳采收期研究
杨连荣，杨珺，胥莉莉，齐乐辉，王旭飞，王晓江，李洪阳，李彦冰
(黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040)
摘 要:目的:确定鸡树条荚蒾叶的最佳采收期。方法:采用 HPLC 法测定不同时间段采收到的鸡树条
荚蒾树叶中的绿原酸的含量，确定其最佳采收期。结果:数据显示，绿原酸含量最高的鸡树条荚蒾树叶
采自 9 月份。结论:九月份鸡树条荚蒾树叶繁茂，且绿原酸的含量较高，为最佳采收期。
关键词:鸡树条荚蒾;绿原酸;含量测定;最佳采收期
中图分类号:R28 文献标识码:A 文章编号:1002 － 2406(2012)04 － 0035 － 03
基金项目:黑龙江省中医药管理局项目(ZH04Z11)
作者简介:杨连荣(1979 －) ，女，讲师，主要从事中药新药研究工作。
通讯作者:李彦冰(1955 －) ，男，教授，硕士研究生导师，主要从事中药
新药研究工作。
收稿日期:2012 － 03 － 04
修回日期:2012 － 03 － 21
鸡树条荚蒾(Vibumum sargentii Koehne)为忍冬科
(Caprifoliaceae)荚蒾属(Viburnum)植物，又名天目琼
花［1］、鸡树条，为落叶灌木，主要分布于我国北方多个
省份［2］。鸡树条荚蒾的叶、嫩枝、果实均可入药。叶
外用主治疮疖、疥癣、皮肤瘙痒［3］;嫩枝主治风湿性关
节炎、腰酸腿痛、跌打损伤;果实有止咳的功用，主治
急、慢性气管炎、咳嗽［4］。鸡树条荚蒾味甘、苦、平，入
肺、肝、脾、肾四经，具有通经活络、祛风除湿、健脾消
食、消肿、驱虫、镇咳祛痰等作用［5］，其天然资源极为
丰富，且蕴含量大［6］。目前，鸡树条荚蒾常作园林用
途，在民间作“鸡树条”药用。有关资料报道，鸡树条
的枝叶具有收缩子宫，增强子宫的紧张度，治疗子宫出
血的作用［7］。为了开发利用鸡树条荚蒾这一潜在的
民间药用植物资源，本文研究了鸡树条荚蒾叶的最佳
采收期，为鸡树条荚蒾叶的资源开发提供科学依据。
1 实验
1． 1 实验材料
药材:鸡树条荚蒾叶(于 2010 年采自黑龙江省尚
志市帽儿山镇，经黑龙江中医药大学药学院李彦冰教
授鉴定为鸡树条荚蒾(Vibumum sargentii Koehne)的叶
子;绿原酸(753 － 8701，中国药品生物制品检定所) ;
用于分析的试剂均为分析纯，水为蒸馏水，用于 HPLC
法测定的试剂均为色谱纯，水为超纯水;SK250LH 超
声波清洗器 (上海树立仪器仪表有限公司) ;
E2120813 色谱柱 (大连依利特) ;AL204 电子天平
(梅特勒 －托利多仪器(上海)有限公司)。
1． 2 绿原酸含量测定
1． 2． 1 色谱条件 Hypersil C18色谱柱(填料粒径为
5um) ;流动相为甲醇 －水 0． 4%磷酸缓冲液，体积比为
22 ∶ 78;流速为 0． 8ml /min;柱温 30℃;检测波长为
327nm;进样量为 10μl。
1． 2． 2 绿原酸对照品溶液的制备 精确称取绿原酸
标准品 20mg，加入 50ml的容量瓶中，用 50%的甲醇溶
液超声溶解并定容至刻度，摇匀得 40ug /ml 的标准品
溶液。其 HPLC色谱图见图 1。
图 1 绿原酸标准品 HPLC谱图
1． 2． 3 绿原酸标准曲线的绘制 设置进样量分别为
2，10，15，20，25，35，50μl，记录色谱图及峰面积值。以
峰面积 －进样浓度做回归分析，得标准曲线，见图 2。
图 2 绿原酸标准曲线
1． 2． 4 精密度试验 取同一份供试品溶液，重复进样
5 次，测得绿原酸峰面积为 5． 541 9，5． 504 5，5． 577 2，
5. 574 6，5． 724 5，计算 RSD为 0． 50%(n = 5) ，表明系
·53·
2012 年第 29 卷第 4 期
Vol. 29，No. 4，2012
中 医 药 信 息
Information on Traditional Chinese Medicine

统精确性良好。
1． 2． 5 重复性试验 准确称取 5． 0g鸡树条荚蒾树叶
5 份，分别加入 10 倍量的 50%乙醇溶液，加热回流 2
次，每次 1h，提取液定容至 250ml，用微孔滤膜过滤，高
效液相色谱法进行绿原酸含量测定，得到峰面积分别
为:36． 439 3，36． 012 4，36． 244 2，35． 923 4，35. 879 6，
计算 RSD为 0． 62%。表明检测样品重复性好。
1． 2． 6 稳定性试验 取同一份供试品溶液分别在制
备 0，1，2，4，6，8h 后测定峰面积，分别为:23． 535 3，
23． 016 4，23． 297 0，22． 840 8，23． 396 5，23． 104 8，计
算 RSD为 1． 43%。表明溶液在 8h内相对稳定。
1． 2． 7 回收率试验 取已知含量的供试品溶液，精确
量取 1mL，共 5 份，分别置 10mL 量瓶中，各分别取绿
原酸对照品 3mL，精密称定加入，加甲醇至刻度，摇匀，
过滤后测定绿原酸含量，计算加样回收率(%)为
99. 31，98． 79，98． 68，98． 73，98． 13，RSD 为 0． 71%，符
合要求。
1． 3 鸡树条荚蒾树叶中绿原酸的提取
采摘鸡树条荚蒾树叶，晾干，粉碎(20 目) ，备用。
1． 3． 1 提取方法的确定
准确称取鸡树条荚蒾树叶 5． 0g，分别使用水超
声，水回流，50%乙醇超声，50%乙醇回流的方法，加入
10 倍量的溶剂，提取 2 次，每次 1h。将提取液定容至
250ml，使用微孔滤膜过滤后使用高效液相色谱方法测
其中绿原酸的含量。其结果见表 1。
表 1 四种提取方式得到绿原酸的峰面积
提取方法 水超声 水回流 乙醇超声 乙醇回流
峰面积 3． 518 9 8． 557 2 10． 562 2 36． 439 3
1． 3． 2 提取用乙醇的确定
准确称取 5． 0g 鸡树条荚蒾树叶，分别使用 30%、
40%、50%、60%、70%乙醇 10 倍量回流提取 2 次，每
次 1h。将提取液定容至 250ml，用微孔滤膜过滤，使用
高效液相色谱仪进行绿原酸含量测定，得结果见表 2。
表 2 不同浓度的乙醇回流得到绿原酸的峰面积
乙醇浓度(%) 30 40 50 60 70
峰面积 25． 582 2 33． 309 9 36． 439 3 26． 846 1 28． 505 7
1． 4 绿原酸提取工艺优化
采用正交试验优化绿原酸提取工艺。准确称取鸡
树条荚蒾树叶 5． 0g，置于 500ml 圆底烧瓶中，分别按
L9(3
4)正交试验设计(表 3)进行回流提取。合并提取
液，定容至 250ml 容量瓶，摇匀，采用高效液相色谱法
测定绿原酸含量。
1． 5 不同采收期鸡树条荚蒾叶中绿原酸含量测定
采用最佳工艺提取不同采收时间树叶中的绿原
酸，结果见表 4。
表 3 试验因素水平表
水平
乙醇浓度
A(%)
加溶剂量
B(倍)
回流时间
C(小时)
回流次数
D(次)
1 45 8 0． 5 2
2 50 10 1 2
3 55 12 1． 5 2
表 4 不同采收期鸡树条荚蒾叶中绿原酸的峰面积
采收时间
(月．日)
7． 19 8． 03 8． 17 9． 02 9． 17 10． 02 10． 17
峰面积 13． 551 7 21． 637 1 29． 885 7 40． 865 9 36． 439 3 40． 322 5 24． 311 1
2 结果与分析
2． 1 提取方法
鸡树条荚蒾树叶中绿原酸以水超声法提取时绿原
酸含量为 0． 593 2mg，提取率为 0. 012%;以水回流法
提取时绿原酸含量为 5． 068 5mg，提取率为 0. 101%;
以醇超声法提取时绿原酸含量为6． 849 4mg，提取率为
0． 137%;以醇回流提取时绿原酸含量为 29． 835 0mg，
提取率为 0． 597%。由此可见，乙醇回流为佳。
2． 2 鸡树条荚蒾叶中绿原酸提取正交试验结果
见表 5 ～ 7。由表 7 分析可知，A、B、C 三因素均对
实验结果有显著性影响，即加醇量、乙醇浓度、提取时
间均能明显的影响荚蒾叶中绿原酸的提取。从表 6 直
观分析，各因素水平的优劣顺序分别是:A2 ＞ A3 ＞ A1，
B2 ＞ B1 ＞ B3，C2 ＞ C3 ＞ C1。从而得出最佳提取工艺为
A2B2C2，即提取次数 2 次、加 50%乙醇、加醇量为 10
倍、提取时间为 1h。
表 5 正交试验表及结果
试验号 A B C D 绿原酸含量(mg) 提取率(%)
1 1 1 1 1 15． 864 7 0． 317
2 1 2 2 2 20． 584 2 0． 412
3 1 3 3 3 15． 776 5 0． 316
4 2 1 2 3 25． 468 4 0． 509
5 2 2 3 1 29． 835 0． 597
6 2 3 1 2 22． 803 6 0． 456
7 3 1 3 2 25． 219 2 0． 504
8 3 2 1 1 16． 266 6 0． 325
9 3 3 2 3 18． 372 9 0． 367
·63·
中 医 药 信 息
Information on Traditional Chinese Medicine
2012 年第 29 卷第 4 期
Vol. 29，No. 4，2012

表 6 正交试验结果分析
Mean Std． Error 95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
A乙醇浓度
1 17． 605 ． 219 17． 173 18． 038
2 25． 990 ． 181 25． 633 26． 346
3 20． 471 ． 208 20． 060 20． 881
B加入溶剂量
1 22． 404 ． 197 22． 015 22． 793
2 22． 426 ． 199 22． 034 22． 818
3 19． 236 ． 212 18． 818 19． 654
C回流时间
1 18． 563 ． 216 18． 137 18． 990
2 24． 129 ． 192 23． 750 24． 507
3 21． 374 ． 200 20． 980 21． 768
表 7 主体间效应的检验
源 Ⅲ型平方和 df 均方 F Sig
校正模型 4 083． 053a 6 680． 509 269． 641 ． 000
截距 83 667． 685 1 83 667． 685 33 151． 995 ． 000
A 2 396． 731 2 1 198． 366 474． 833 ． 000
B 391． 673 2 195． 837 77． 597 ． 000
C 935． 033 2 467． 517 185． 246 ． 000
误差 464． 372 184 2． 524
总计 99 429． 366 191
校正的总计 4 547． 425 190
2． 3 不同采收时间鸡树条荚蒾树叶中绿原酸的含量。
树叶中绿原酸的含量随着采收时间的不同也发生
变化。其中，9． 02、9． 17、10． 02 三个采收时间的树叶
中绿原酸的含量接近且明显高于其他时间。因此确定
鸡树条荚蒾树叶的最佳采收时间为每年的 9 月份，结
果见图 3。
图 3 不同采收时间鸡树条荚蒾树叶中绿原酸的含量
2． 4 回归方程
HPLC检测方法由线性关系考察得回归方程:Y =
28． 145X + 2． 581 1，R2 = 0． 999 6。绿原酸在0． 08 ～
2． 00μg范围内线性关系良好，精密度、重现性、稳定
性、加样回收率试验 RSD 值分别为 0． 50%、0． 62%、
1. 43%、0． 71%。所以 HPLC 检测方法适用于绿原酸
的含量测定，且具有精确、高效、专一等特点。绿原酸
标准品和鸡树条荚蒾叶样品中绿原酸 HPLC 图谱见图
l、图 4。
图 4 鸡树条荚蒾叶中绿原酸 HPLC图谱
3 讨论
3． 1 由实验结果表 1 可知，水超声法提取到的绿原酸
含量非常少，水回流法与乙醇超声法提取到的绿原酸
含量接近，乙醇回流法提取到的绿原酸最多。这可能
是由于绿原酸结构中含有多个羟基基团连接在苯环
上，在乙醇溶液中溶解度较大，所以用乙醇作为提取溶
剂更好。
3． 2 由图 3 结果可知，鸡树条荚蒾树叶中绿原酸的含
量最初随采收时间增加而增加，采收时间 9． 02 开始到
10． 02 的采摘的树叶中绿原酸含量接近且明显高于其
他时间，说明，在整个 9 月份采摘得到的树叶绿原酸含
量高。精确的采收日期有待于进一步研究与考察。
3． 3 目前有关鸡树条荚蒾叶采收期的研究资料鲜见
报道，本实验为鸡树条荚蒾的开发利用提供了科学
依据。
参考文献:
［1］ 冉先德．中华药海下卷［M］．哈尔滨:哈尔滨出版社，1998:946．
［2］ 祝之友．荚莲属植物资源调查及开发利用［J］．基层杂志，1999，13
(1) :24．
［3］ 《全国中草药汇编》编写组． 全国中草药汇编［M］． 北京:人民卫
生出版社，1994:428 － 429．
［4］ 中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志［M］．北京:科学
技术出版社，1988．
［5］ 江苏新医学院． 中药大辞典［M］． 上海:上海科学技术出版社，
1977．
［6］ 祝之友．荚莲的临床应用与本草学研究［J］．时珍国药研究，1997，
8(1) :4．
［7］ 朱有昌．东北药用植物［M］． 哈尔滨:黑龙江科技出版社，1989:
1064．
·73·
2012 年第 29 卷第 4 期
Vol. 29，No. 4，2012
中 医 药 信 息
Information on Traditional Chinese Medicine
