全 文 ：第３４卷 第４期
２０１５年　７月
华　中　农　业　大　学　学　报
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｕａｚｈｏｎｇ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
Ｖｏｌ．３４　Ｎｏ．４
Ｊｕｌｙ　２０１５，３１～３６
菊薯中３种硫代磷酸酯类有机磷农药
残留量的快速测定
周梦春１　何　海１　舒耀皋２　王帆林１　舒少华１　王　沫１
１．华中农业大学植物科学技术学院，武汉４３００７０；２．上海化工研究院，上海２０００６２
摘要　应用超分子印迹微球与逆基质固相分散加速溶剂萃取，采用气相色谱质谱（ＧＣ－ＭＳ）检测方法测定菊
薯中３种硫代磷酸酯类有机磷农药（毒死蜱、喹硫磷和甲基立枯磷）残留量。以甲基立枯磷为模板分子制备对
３种农药有特异性识别的分子印迹微球聚合物，然后作为固相分散剂进行加速溶剂萃取，再以气相色谱质谱法
测定菊薯中３种农药的残留量，质谱条件为电子轰击离子源正离子选择离子监测模式。结果表明：３种农药的
线性范围均为０．０１～２．５０μｇ／ｍＬ，相关系数为０．９９８　７～０．９９９　６；３种农药的检出限范围为０．１７４～０．５２６
μｇ／ｋｇ，相对标准偏差为２．３％～９．９％，回收率为７９．８％～１０４．５％。
关键词　菊薯；有机磷农药；残留；测定
中图分类号　Ｓ　４８１＋．８　　文献标识码　Ａ　　文章编号　１０００－２４２１（２０１５）０４－００３１－０６
收稿日期：２０１４－０９－２４
基金项目：国家“十二五”科学支撑计划项目（２０１１ＢＡＩ０６Ｂ０３）
周梦春，博士研究生，工程师．研究方向：农药残留与毒理．Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｍｃ５０６３０８２３０＠１２６．ｃｏｍ
通信作者：舒少华，博士，讲师．研究方向：中药材栽培与质量管理．Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｈｕｓｈａｏｈｕａ＠ｍａｉｌ．ｈｚａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
　　菊薯（Ｓｍａｌｌａｎｔｈｕｓ　ｓｏｎｃｈｉｆｏｌｉｕｓ）是菊科类草本
植物，富含黄酮类、酚酸、酯类和多糖等化学成分，具
有多种保健和美容等功效［１］。在菊薯的栽培过程
中，需施用毒死蜱、喹硫磷、甲基立枯磷等有机磷农
药进行病虫害防治。毒死蜱（Ｃｈｌｏｒｐｙｒｉｆｏｓ）是一种
高效机磷杀虫剂，在农作物种植过程中使用广泛［２］。
喹硫磷（Ｑｕｉｎａｌｐｈｏｓ）是一种有机磷杀虫杀螨剂 ，对
害虫具有强烈的触杀和胃毒作用［３］。甲基立枯磷
（Ｔｏｌｃｌｏｆｏｓ－ｍｅｔｈｙｌ）是一个广谱、高效、低毒、对环境
安全的有机磷杀菌剂［４］。因菊薯的化学成分复杂，
施药后的农药残留直接影响菊薯的食用和药用功
效，故农药残留是食材和药材质量控制的一项重要
指标［５］。
有机磷农药残留检测方法主要有色谱检测法和
快速检测法。色谱检测法是目前农药残留主要的检
测方法，包括高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法、气相色谱
（ＧＣ）法、薄层色谱（ＴＬＣ）法等［６］。快速检测法是一
类快速检测农药残留的方法，包括免疫分析技术和
酶抑制法等［６］。基质固相分散法（ＭＳＰＤ）是一种样
品提取方法，具有简便快捷、样品和溶剂用量少等优
点［７］。近年来，分子印迹聚合材料在农药残留分析
中得到广泛应用［８－１２］。分子印迹聚合物（ＭＩＰｓ）是
一类有较强分子识别能力的新型高分子仿生材料，
具有预定性、识别性、实用性和稳定性，在较苛刻的
条件如使用有机溶剂或高温及一定压力情况下，也
不会破坏它的识别能力，可从复杂样品中分离富集
目标分子或与目标分子结构相似的化合物，清除基
质干扰，提高分析精度和准确性，很适合用于基质复
杂样品的净化、萃取等前处理过程。由于 ＭＩＰｓ在
识别目标物时具有很高的专一性和理化稳定性［１３］，
因此被广泛应用在样品分离富集、传感器和模拟酶
功能等研究中［１４－１６］。然而，在制备过程中，分子印迹
大多采用的是以待测物为模板分子的本体聚合技
术，得到的聚合物模板分子包埋过深、容易渗漏、不
利于洗脱，且处理繁琐［１７］。
将分子印迹聚合物（ＭＩＰｓ）与加速溶剂固相基
质分散萃取技术（ＡＳＥ－ＭＳＰＤ）结合，用于菊薯中毒
死蜱残留样品前处理萃取净化后采用气相色谱质谱
法（ＧＣ－ＭＳ）进行检测，在国内外还未见相关报道。
本试验以待测物甲基立枯磷作为模板分子，采用沉
淀印迹法制备的印迹聚合微球，旨在解决传统的本
体聚合带来的模板分子包埋过深、印迹微粒形状不
规则、聚合物后处理繁琐等问题，建立一种新颖、简
便和高效的有机磷农药残留量快速测定方法。
DOI:10.13300/j.cnki.hnlkxb.2015.04.003
　　 华 中 农 业 大 学 学 报 第３４卷　
１　材料与方法
１．１　仪器与设备
ＥＹＥＬＡ　Ｎ－１１００／ＯＳＢ－２１００型旋转蒸发仪，北
京五洲东方科技发展有限公司产品；ＫＱ５２００ＤＥ型
超声波清洗仪，昆山市超声仪器有限公司产品；
ＶＡＲＩＡＮ　ＣＰ－３８００ＳＡＴＵＲＮ　２０００气相色谱质谱
联用仪（配有电子轰击ＥＩ源）及色谱工作站，美国
ＶＡＲＩＡＮ公司产品；Ｓ２３０００Ｎ扫描电镜，日本 Ｈｉ－
ｔａｃｈｉ公司产品；ＣＲ－２１Ｇ高速冷冻离心机，日本Ｈｉ－
ｔａｃｈｉ公司产品；ＶＥＲＴＥＸ７０型红外光谱仪，德国
Ｂｒｕｋｅｒ公司产品；ＤＩＯＮＥＸ　ＡＳＥ３００加速溶剂萃取
仪，德国Ｄｉｏｎｅｘ公司产品。
１．２　试剂与材料
乙酸，分析纯；丙酮、甲醇、乙酸乙酯、乙腈、无
水硫酸钠（６５０℃烘５ｈ），分析纯，国药集团产品；乙
二醇二甲基丙烯酸酯，分析纯，美国Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ
公司产品）；甲基丙烯酸，分析纯，国药集团产品；偶
氮二异丁腈，分析纯，国药集团产品；标品溶液，美
国阿拉丁试剂（上海）有限公司产品：１　０００μｇ／ｍＬ
毒死蜱标准溶液（甲醇中），１　０００μｇ／ｍＬ甲基立枯
磷标准溶液（甲醇中），１　０００μｇ／ｍＬ喹硫磷标准溶
液（丙酮中）。
对照空白菊薯，取自华中农业大学药用植物园。
对５００ｇ空白菊薯进行检测，确定无有机磷农药残
留后，将空白菊薯与样品同样处理萃取。
１．３　气相色谱－质谱仪ＧＣ－ＭＳ检测条件
色谱条件：ＶＦ－５ＭＳ毛细管柱 （３０ｍ ×０．２５
ｍｍ，０．２５μｍ）；载气为纯度大于９９．９９９％的氦气，
载气柱流速１ｍＬ／ｍｉｎ；进样口温度２００℃；柱升温
程序：初始温度８０℃，保持３ｍｉｎ，以１２℃／ｍｉｎ速
率升至２８０℃，保持５ｍｉｎ；不分流进样，进样量为
１μＬ。
质谱条件：电子轰击（ＥＩ）离子源，电子能量
７０ｅＶ，灯电流６０μＡ，检测器电压１．００ｋＶ，ＥＩ源
温度２００℃，接口温度２５０℃，溶剂延迟时间３．０
ｍｉｎ，传输线温度：２８０℃。选择离子监测（ｍ／ｚ）：
毒死蜱１９９，２５８，２８６，３１４；甲基立枯磷９３，１４５，
２０７，２８６；喹硫磷１１８，１２９，２６５。
１．４　标准曲线的配制
将毒死蜱、甲基立枯磷、喹硫磷标品溶液依次用
乙腈稀释成１００μｇ／ｍＬ单剂标准储备溶液和５０
μｇ／ｍＬ的混剂标准储备溶液，然后用乙腈依次逐
级稀释成２．５０、１．００、０．２５、０．０５、０．０１μｇ／ｍＬ的系
列混剂标准工作溶液，依次进样按照仪器 ＧＣ－ＭＳ
检测条件测定，绘制峰面积－质量浓度标准曲线。
１．５　高分子印迹聚合微球ＭＩＰｓ制备
将１．５ｍｍｏｌ模板子甲基立枯磷溶解于１２０
ｍＬ乙腈溶液中，依次加入６ｍｍｏｌ功能单体甲基
丙烯酸，室温下振荡９０ｍｉｎ，再置于冰箱中冷藏
１０ｈ，使甲基立枯磷与甲基丙烯酸充分作用，取出，
加入３０ｍｍｏｌ交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯和
３０ｍｇ引发剂偶氮二异丁腈，混匀后向混合溶液中
通入氮气２０ｍｉｎ，以除去溶解氧，密封后置于６０℃
水浴中反应聚合２４ｈ，取出冷却至室温，于４℃下
７　０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ得聚合物沉淀，以含体积
分数５％乙酸的甲醇为溶剂对聚合物沉淀进行索氏
提取２次，每次提取２４ｈ，用以去除模板分子甲基
立枯磷，再用甲醇洗去过量的乙酸至中性，于３５℃
下真空干燥至恒质量，然后取少量分子印迹微球
ＭＩＰ进行电镜扫描。
按上述方法不加入模板分子甲基立枯磷同时制
备非印迹聚合微球（ＮＩＰｓ），然后取少量印迹聚合微
球进行红外光谱分析。
１．６　分子印迹聚合微球ＭＩＰ的吸附特异性试验
在甲醇体系中进行 ＭＩＰ吸附性能试验，称取
１００．０ｍｇ洗脱掉模板分子后的印迹聚合微球 ＭＩＰ，
置于５ｍＬ试管中，加入３ｍＬ甲醇，加入３种系列
硫代磷酸酯类有机磷农药标准溶液１．０、５．０、１０．０、
２５．０、５０．０、１００．０μｇ／ｍＬ各２００μＬ，用甲醇定容
至５ｍＬ，振荡吸附１ｈ后于４℃下８　０００ｒ／ｍｉｎ转
速离心２５ｍｉｎ，取出沉淀物，用５ｍＬ甲醇（含５％乙
酸）解析 ＭＩＰ聚合沉淀物并过滤，将甲醇解析液于
４５℃下浓缩近干，加入１ｍＬ乙腈溶解残余物，经
０．２μｍ滤膜过滤后在仪器工作条件下进行分析，再
以不同含量的吸附量计算绘制等温吸附曲线。
１．７　添加回收率与检出限试验
在匀浆了的空白菊薯样品中，添加一定量的毒
死蜱、甲基立枯磷、喹硫磷标准溶液，添加水平分别
为０．１、０．５、２．０μｇ／ｇ，每组设５个重复，按照所建
立的样品前处理和 ＧＣ－ＭＳ检测条件进行测定，然
后分别计算出添加回收率。再取匀浆过的空白菊薯
１０ｇ，加入５０ｍＬ甲醇／水（１／４）振荡提取２０ｍｉｎ，
以０．４５μｍ滤膜真空抽滤后弃去滤液，将残渣加入
３ｇ无水硫酸钠并加入 ２５ ｍＬ 乙腈振荡提取
２０ｍｉｎ，过滤后取出乙腈滤液。将此基质提取液用
２３
　第４期 周梦春 等：菊薯中３种硫代磷酸酯类有机磷农药残留量的快速测定 　
于将含毒死蜱、甲基立枯磷、喹硫磷的５０μｇ／ｍＬ混
剂标准储备液稀释至０．１μｇ／ｍＬ，分别按 ＧＣ－ＭＳ
检测条件进样测定，用于计算检出限。
１．８　样品处理
空白菊薯样品取自华中农业大学药用植物园，
实际菊薯样品采购于湖北省武汉市洪山区果蔬批发
基地市场。将新鲜菊薯样品取回后经组织匀浆机匀
浆，称取１０ｇ匀浆样品，加入２００ｍｇ分子印迹聚
合物 ＭＩＰｓ，于２５ｍＬ具塞锥瓶中，加入甲醇／水
（１／３）２０ｍＬ，再加入０．１ｇ　ＭｇＣｌ２，充分搅拌混匀
于９０ｒ／ｍｉｎ匀速振荡６０ｍｉｎ后 转移至１００ｍＬ不
锈钢萃取池中，再置于加速溶剂萃取仪 ＡＳＥ　３００
中，先以甲醇／水（１／４）混合溶剂为杂质萃取剂，于
１５℃、２ＭＰａ压力下，静态萃取５ｍｉｎ，重复萃取
２次。每次冲洗体积为２０ｍＬ，氮气吹扫２０ｓ，然后
将此提取液弃去，换上含５％乙酸的甲醇作为萃取
剂，于２５℃、１０ＭＰａ压力下，静态萃取２５ｍｉｎ，重
复萃取３次。每次冲洗体积为６０ｍＬ，氮气吹扫
４０ｓ。将萃取液转移到旋转蒸发仪中，于４５℃旋转
蒸发至近干时，加入１ｍＬ乙腈溶解残余物，经
０．２μｍ滤膜过滤后再用乙腈定容至２ｍＬ，在仪器
工作条件下进行检测分析。
２　结果与分析
２．１　分子印迹聚合微球ＭＩＰ的表征与吸附特异性
经电镜扫描显示（图１），印迹微球的直径均小
于１μｍ，微球中有致密的孔隙和凹凸不平的表面，
能够有效识别吸附目标分子。印迹聚合物的红外光
谱图如图２所示。对于分子印迹聚合物，３　５０８
ｃｍ－１处为Ｏ－Ｈ 的伸缩振动吸收峰；２　９５６ｃｍ－１处
为Ｃ－Ｈ的伸缩振动吸收峰；１　７３１ｃｍ－１处为Ｃ＝Ｏ
伸缩振动吸收峰；１　４５５ｃｍ－１和１　３８９ｃｍ－１处为
Ｃ－Ｈ弯曲振动吸收峰；１　１６０ｃｍ－１处为Ｓｉ－Ｏ振动
吸收峰。这些震动吸收峰表明模板分子与功能单体
和交联剂发生了有效键合作用。
图１　甲基立枯磷分子印迹聚合微球ＭＩＰｓ的扫描电镜图
Ｆｉｇ．１　ＳＥＭ　ｍｉｃｒｏｇｒａｐｈｓ　ｏｆ　ｔｏｌｃｌｏｐｈｏｓ－ｍｅｔｈｙｌ　ＭＩＰｓ
图２　甲基立枯磷分子印迹聚合物的红外谱图
Ｆｉｇ．２　ＦＴＩＲ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆｔｏｌｃｌｏｐｈｏｓ－ｍｅｔｈｙｌ　ＭＩＰ
　　为进一步表征分子印迹聚合物 ＭＩＰ，对３种农
药进行吸附特异性试验。图３表明，３种农药在
ＭＩＰ上的吸附量要明显高于在ＮＩＰ上的吸附量，两
者对农药的吸附量差值在２倍以上，并且在２．０
μｇ／ｍＬ时，ＭＩＰ和ＮＩＰ对３种农药的吸附量趋于饱
和。其中，ＭＩＰ对甲基立枯磷 Ａ的吸附量最高，对
毒死蜱Ｂ的吸附量最低，这是因为该分子聚合物是
以甲基立枯磷为模板分子进行印迹聚合的，故对甲
基立枯磷有很强的特异吸附性。又因３种农药中毒
死蜱的分子质量最大，分子体积较大，故 ＭＩＰ对其
吸附量明显偏低些，且 ＭＩＰ对喹硫磷和甲基立枯磷
的吸附量要明显略高于毒死蜱。ＮＩＰ对３种农药的
吸附差异性明显没有 ＭＩＰ显著，说明 ＭＩＰ对３种
农药具有明显的吸附差异性和选择性，这是由其分
子结构差异造成的。ＮＩＰ对不同农药的吸附差异性
不明显，具有较弱的选择性与吸附量。
　　Ａ，Ｂ，Ｃ：ＭＩＰ对甲基立枯磷Ａ，毒死蜱Ｂ，喹硫磷Ｃ的吸
附曲线；Ｄ，Ｅ，Ｆ：ＮＩＰ对甲基立枯磷Ｄ，毒死蜱Ｅ，喹硫磷Ｆ的
吸附曲线。Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆ：Ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｃｕｒｖｅｓ　ｏｆ　Ｃｈｌｏｒｐｙｒｉｆｏｓ
（Ｂ，Ｅ），Ｔｏｌｃｌｏｆｏｓ－ｍｅｔｈｙｌ（Ａ，Ｄ），Ｑｕｉｎａｌｐｈｏｓ（Ｃ，Ｆ）ｏｎ　ＭＩＰ
（Ａ，Ｂ，Ｃ）ａｎｄ　ＮＩＰ（Ｄ，Ｅ，Ｆ）．
图３　ＭＩＰ和ＮＩＰ对３种农药的等温吸附曲线
Ｆｉｇ．３　Ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｃｕｒｖｅｓ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ｏｎ　ＭＩＰ　ａｎｄ　ＮＩＰ
２．２　仪器的精密度
在气相质谱仪器条件下，待仪器基线稳定后连
续对同一质量浓度的毒死蜱样品（０．５μｇ／ｍＬ）进
行７次平行测定，进样量为１μＬ。结果表明：峰面
３３
　　 华 中 农 业 大 学 学 报 第３４卷　
积和保留时间的平均值分别为１．４２３×１０３（ＲＳＤ
２．１８％）和１５．３６ｍｉｎ（ＲＳＤ　０．１２％），说明该方法重
现性好，仪器的精密度高。
２．３　方法的线性关系、检出限和定量限
经检出限测定，计算得到仪器响应信噪比
（Ｓ／Ｎ）分别为１２．９、１３．５和１１．２，以Ｓ／Ｎ≥３为检
出限（ＬＯＤ），折算得基质匹配标准溶液中的ＬＯＤ
值分别为０．２８３μｇ／ｋｇ（毒死蜱）、０．１７４μｇ／ｋｇ（甲
基立枯磷）、０．５２６μｇ／ｋｇ（喹硫磷）；以Ｓ／Ｎ≥１０为
定量限（ＬＯＱ），折算得基质匹配标准溶液中的
ＬＯＱ值分别为０．９１４μｇ／ｋｇ（毒死蜱）、０．６２５μｇ／ｋｇ
（甲基立枯磷）、１．４５２μｇ／ｋｇ（喹硫磷）。３种有机磷
农药的线性范围均在０．０１～２．５μｇ／ｍＬ，线性相关
系数ｒ值均在０．９９以上（表１）。
由图４可知，３种农药均得到充分分离，且与相
关文献对比后发现，３种农药在菊薯中检出限均明
显低于相关文献中检出限的ＬＯＤ值［１８－１９］。
表１　３种农药的线性范围、相关系数与标准曲线
Ｔａｂｌｅ　１　Ｌｉｎｅａｒ　ｒａｎｇｅ，ｌｉｎｅａｒ　ｅｑｕａｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ
ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ
农药
Ａｇｒｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ
线性方程
Ｌｉｎｅａｒ　ｅｑｕａｔｉｏｎｓ
相关系数（ｒ）
Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ
毒死蜱
Ｃｈｌｏｒｐｙｒｉｆｏｓ ｙ
＝３１３２４．７ｘ－２５２８．５　 ０．９９８　７
甲基立枯磷
Ｔｏｌｃｌｏｆｏｓ－ｍｅｔｈｙｌ ｙ
＝４３４６７．２ｘ－２７３６．７　 ０．９９９　６
喹硫磷
Ｑｕｉｎａｌｐｈｏｓ ｙ
＝３６１５２．４ｘ－３８４９．８　 ０．９９９　２
　　１．喹硫磷 Ｑｕｉｎａｌｐｈｏｓ；２．甲基立枯磷 Ｔｏｌｃｌｏｆｏｓ－ｍｅｔｈｙｌ；
３．毒死蜱Ｃｈｌｏｒｐｙｒｉｆｏｓ．
图４　对照空白样品、添加样品（０．１μｇ／ｇ）
和实际样品的总离子流（ＴＩＣ）色谱图
Ｆｉｇ．４　Ｔｏｔａｌ　ｉｏｎ　ｃｕｒｒｅｎｔ（ＴＩＣ）ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ
ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｔａｎｄａｒｄｓ　ｏｆ　ｂｌａｎｋ　ｓａｍｐｌｅ，ｓｐｉｋｅｄ
ｓａｍｐｌｅ（０．１μｇ／ｇ）ａｎｄ　ａｃｔｕａｌ　ｓａｍｐｌｅ
２．４　方法的准确度和精密度
添加回收试验结果表明：回收率显然受添加浓
度的影响，浓度越高时回收率越高，相对标准偏差越
低（表２）。
表２　空白菊薯样品中毒死蜱、喹硫磷和甲基立枯磷的添加回收率与精密度（ｎ＝５）
Ｔａｂｌｅ　２　Ｓｔａｎｄａｒｄ　ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ　ａｎｄ　ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｌｏｒｐｙｒｉｆｏｓ，ｑｕｉｎａｌｐｈｏｓ　ａｎｄ　ｔｏｌｃｌｏｆｏｓ－ｍｅｔｈｙｌ　ｉｎ　ｂｌａｎｋ　ｙａｃｏｎ　ｓａｍｐｌｅｓ（ｎ＝５）
检测物
Ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ
实际样品检测值／（ｍｇ／ｋｇ）
Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｖａｌｕｅ
ｏｆ　ａｃｔｕａｌ　ｓａｍｐｌｅ
添加水平／（ｍｇ／ｋｇ）
Ａｄｄｅｄ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
检测平均值／（ｍｇ／ｋｇ）
Ｍｅａｎ　ｏｆ
ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｖａｌｕｅ
平均回收率／％
Ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ
变异系数／％
ＲＳＤ
０．１０　 ０．０８１±０．００８　 ８１．２　 ９．９
毒死蜱Ｃｈｌｏｒｐｙｒｉｆｏｓ　 ０．０６９±０．００５　 ０．５０　 ０．４６１±０．０１７　 ９２．２　 ３．７
２．００　 ２．０９０±０．０５８　 １０４．５　 ２．８
０．１０　 ０．０８０±０．００５　 ８０．４　 ５．８
喹硫磷 Ｑｕｉｎａｌｐｈｏｓ － ０．５０　 ０．４７４±０．０１３　 ９４．９　 ２．８
２．００　 １．９９０±０．０４７　 ９９．６　 ２．３
０．１０　 ０．０８０±０．００４　 ７９．８　 ５．４
甲基立枯磷Ｔｏｌｃｌｏｆｏｓ－ｍｅｔｈｙｌ － ０．５０　 ０．４７３±０．０１５　 ９４．７　 ３．１
２．００　 ２．０７０±０．０９３　 １０３．６　 ４．５
　　在不同的加标回收率中，毒死蜱的回收率为
８１．２％～１０４．５％，甲基立枯磷的回收率为７９．８％～
１０３．６％，喹硫磷的回收率为８０．４％～９９．６％，其相
对标准偏差ＲＳＤ均低于１０％。这说明３种有机磷
农药的回收率和相对标准偏差结果都比较理想，能
够满足菊薯中农药残留分析的要求。
２．５　仪器条件的选择
因农药残留量检测属痕量分析，样品中含量往
往很低，故进样方式采用 “不分流”的方式。为增
加检测的灵敏度，进样量设为１μＬ。根据３种有机
磷农药的气化温度，采用程序升温，初始温度设为
８０℃，略高于溶剂温度而低于样品沸点，充分利用
热聚集效应改善峰形，同时可避免溶剂效应所致的
４３
　第４期 周梦春 等：菊薯中３种硫代磷酸酯类有机磷农药残留量的快速测定 　
空间谱带展宽。将溶剂延迟时间设为３ｍｉｎ，可避
免高浓度溶剂对离子源灯丝的不利影响。
分析菊薯中有机磷农药，提取液中杂质干扰比
较大，用全扫描则灵敏度低。本试验采用全扫描结
合选择离子（毒死蜱１９９，２５８，２８６，３１４；甲基立枯
磷９３，１４５，２０７，２８６；喹硫磷１１８，１２９，２６５）监测
方式，大大提高了检测的灵敏度，保留时间结合
ＮＩＳＴ　２．０质谱谱库检索，使定性结果更为可靠；
以分子离子峰（毒死蜱ｍ／ｚ　３１４，甲基立枯磷ｍ／ｚ
２８６，喹硫磷ｍ／ｚ２６５）的峰面积积分值定量，结果
更为准确。３种农药的保留时间以及 ＧＣ－ＭＳ监测
的特征离子和丰度比详见表３与图５。
表３　３种农药的保留时间、特征离子和丰度比
Ｔａｂｌｅ　３　Ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ　ｔｉｍｅｓ，ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ　ｉｏｎｓ
ａｎｄ　ａｂｕｎｄａｎｃｅ　ｒａｔｉｏｓ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ
农药
Ａｇｒｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ
保留时间／ｍｉｎ
Ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ
ｔｉｍｅ
特征离子（ｍ／ｚ）
Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ
ｉｏｎ
丰度比
Ａｂｕｎｄａｎｃｅ
ｒａｔｉｏ
毒死蜱
Ｃｈｌｏｒｐｙｒｉｆｏｓ
１５．３８　 ３１４　２８６　１９９　 １００∶４５∶８３
甲基立枯磷
Ｔｏｌｃｌｏｆｏｓ－
ｍｅｔｈｙｌ
１５．０４　 １４５　２８６　２０７　９３　１００∶７８∶４２∶８５
喹硫磷
Ｑｕｉｎａｌｐｈｏｓ
１４．７２　 ２６５　１２９　１１８　 １００∶３５∶８２
图５　毒死蜱（Ａ）、喹硫磷（Ｂ）和甲基立枯磷（Ｃ）
标准物质选择离子扫描质谱图
Ｆｉｇ．５　Ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｉｏｎ　ｓｃａｎ　ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ｃｈｌｏｒｐｙｒｉｆｏｓ（Ａ），
ｑｕｉｎａｌｐｈｏｓ（Ｂ）ａｎｄ　ｔｏｌｃｌｏｆｏｓ－ｍｅｔｈｙｌ（Ｃ）ｓｔａｎｄａｒｄ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ
２．６　实际样品测定分析
测定结果表明，在实际样品中只检出毒死蜱，平
均含量为０．０６９±０．００５ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝５），而喹硫磷
和甲基立枯磷均未检出。这说明在实际菊薯栽培中
毒死蜱已被广泛应用于防治该作物的病虫害，但样
品中毒死蜱的检测值未超出第５版欧洲药典的最大
残留限量（ＭＲＬ）值０．２ｍｇ／ｋｇ和２００６年韩国中药
材农药残留限量标准的 ＭＲＬ值０．５ｍｇ／ｋｇ［２０］。中
国目前还没有毒死蜱、喹硫磷、甲基立枯磷在中药材
中的残留限量标准，但若将菊薯作为保健类果蔬食
品进行食品安全评价研究可参考国家《食品安全国
家标准 食品中农药最大残留限量》（ＧＢ２７６３－
２０１４）中根茎类蔬菜中毒死蜱，喹硫磷和甲基立枯磷
的 ＭＲＬ值。
３　讨　论
本试验建立了菊薯中３种硫代磷酸酯类有机磷
农药的高分子印迹基质固相分散－加速溶剂萃取－气
相色谱质谱测定方法，将分子印迹微球作为固相分
散萃取剂应用在加速溶剂萃取中，在０．１～２．０
μｇ／ｇ的添加水平内，采用甲醇／水（１／４）先萃取除去
杂质后，再用含５％乙酸的甲醇萃取解析出分子印
迹聚合物所吸附的有机磷农药，３种硫代磷酸酯类
有机磷农药（毒死蜱、甲基立枯磷、喹硫磷）的平均回
收率为７９．８％～１０４．５％，ＲＳＤ为２．３％～９．９％。
本试验以甲基立枯磷为模板分子，以甲基丙烯酸为
功能单体，以乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂的沉
淀印迹聚合方法，既具有基质固相分散技术简便快
捷的特点，又具有分子印迹聚合物选择性高的优势，
再结合采用ＮＰＤ检测器的气相色谱质谱（ＧＣ－ＭＳ）
检测方法，使得３种农药的检出限明显降低，且低
于相关文献的检出限。应用该方法能够灵敏地测定
菊薯中３种硫代磷酸酯类农药的残留量，最低检测
限达到了０．１７４μｇ／ｋｇ，显著提高毒死蜱的检测灵
敏度，能够适用于菊薯样品中硫代磷酸酯类有机磷
农药的残留测定和食品药品安全评价研究。
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１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｌａｎｔ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｈｕａｚｈｏｎｇ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｈａｎ　４３００７０，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｉｎｄｕｓｔｒｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２０００６２，Ｃｈｉｎａ
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ａ　ｍｅｔｈｏｄ　ｔｏ　ａｓｓｅｓｓ　ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏａｔｅ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ
（ｃｈｌｏｒｐｙｒｉｆｏｓ，ｔｏｌｃｌｏｆｏｓ－ｍｅｔｈｙｌ，ｑｕｉｎａｌｐｈｏｓ）ｉｎ　ｙａｃｏｎ　ｔｈａｔ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｕｓｉｎｇ　ａ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ　ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ　ｒｅ－
ｖｅｒｓｅｄ　ｍａｔｒｉｘ　ｓｏｌｉｄ－ｐｈａｓｅ　ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ（ＭＩ－ＭＳＰＤ）ａｎｄ　ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ　ｓｏｌｖｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ（ＡＳＥ）ｃｏｍｂｉｎｅｄ
ｗｉｔｈ　ＧＣ－ＭＳ．Ｔｈｅ　ＭＩＰｓ　ａｒｅ　ｃｒｏｓｓ－ｌｉｎｋｅｄ　ｐｏｌｙｍｅｒｓ　ｗｉｔｈ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｓｉｔｅｓ　ｆｏｒ　ａ　ｐａｒｔｉｃｕｌａｒ　ａｎａｌｙｔｅ，
ｗｈｉｃｈ　ｒｅｃｏｇｎｉｚｅ　ｔａｒｇｅｔ　ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　ｂｙ　ｉｍｐｒｉｎｔｉｎｇ　ａ　ｍｏｌｅｃｕｌｅ　ｄｕｒｉｎｇ　ｐｏｌｙｍｅｒ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｃｏｖａｌｅｎｔ　ｏｒ
ｎｏｎ－ｃｏｖａｌｅｎｔ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ．Ｔｈｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ＭＩＰｓ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｅｘｔｒａｃｔ　ａｎｄ　ｐｒｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ　ｔｈｒｅｅ　ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔ－
ｈｉｏａｔｅ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ａｓ　ａｄｓｏｒｂｅｎｔ　ｏｆ　ｍａｔｒｉｘ　ｓｏｌｉｄ　ｐｈａｓｅ　ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ　ｆｒｏｍ　ｙａｃｏｎ　ｓａｍｐｌｅ　ｉｎ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｐｏｔ　ａｎｄ
ｃｅｌ　ｏｆ　ＡＳＥ，ｔｈｅｎ　ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｇａｓ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｇｒａｐｈ（ＧＣ－ＭＳ），ａｎｄ
ｔｈｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｉｏｎ　ｍｏｄｅ　ｏｆ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｉｏｎ　ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ（ＳＩＭ）ｗｉｔｈ　ｅｌｅｃｔｒｏｎ　ｉｍｐａｃｔ　ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ　ｓｏｕｒｃｅ　ｗａｓ　ａｄｏｐｔ－
ｅｄ　ｉｎ　ＭＳ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　３ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏａｔｅ　ａｇｒｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｉｎ　ｙａｃｏｎ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｉｎ　Ｗｕ－
ｈａｎ　ａｒｅａ　ｗｅｒｅ　ｓａｔｉｓｆａｃｔｏｒｙ．Ｔｈｅ　ｌｉｎｅａｒ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｗａｓ　０．９９８　７－０．９９９　６ｂｅｔｗｅｅｎ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ
０．０１－２．５μｇ／ｍＬ；ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｌｉｍｉｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　０．１７４－０．５２６μｇ／ｋｇ　ｉｎ　ｙａｃｏｎ　ｓａｍｐｌｅｓ，ｔｈｅ　ｒｅｌａ－
ｔｉｖｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｄｅｖｉａｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　２．３％－９．９％ｉｎ　ｙａｃｏｎ　ｓａｍｐｌｅｓ，ｔｈｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎ　ｔｈｅ
ｒａｎｇｅ　ｏｆ　７９．８％－１０４．５％ｉｎ　ｙａｃｏｎ　ｓａｍｐｌｅｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　Ｓｍａｌｌａｎｔｈｕｓ　ｓｏｎｃｈｉｆｏｌｉｕｓ；ｏｒｇａｎｉｃ　ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ；ｒｅｓｉｄｕｅ；ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
（责任编辑：陈红叶）
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