全 文 ：书·研究论文·
［基金项目］江苏省中医药领军人才项目（２００６）；江苏省中医药研究院 国家中医药管理局中药口服制剂释药系统重点研究室开放基金课题
（编号：２０１１ＮＤＤＣＭ０２００２）　［作者简介］施亚琴，女，硕士研究生，研究方向：物质基础研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｈｉｙａｑｉｎ１９８８＠１２６．ｃｏｍ　［通讯作者］贾
晓斌，教授，研究员，博士研究生导师，研究方向：物质基础与现代中药制剂创新研究，电话：０２５－８５６３７８０９，Ｅ－ｍａｉｌ：ｊｘｉａｏｂｉｎ２００５＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ
超高效液相色谱法同时测定蒲公英中５种活性成分的含量
施亚琴１，２，朱粉霞２，丁淑敏２，宋捷２，郁丹红２，贾晓斌１，２　 （１．江苏大学药学院，江苏 镇江２１２０１３；２．江苏省中医药研
究院 国家中医药管理局中药释药系统重点研究室，江苏 南京２１００２８）
［摘要］　目的：建立ＵＰＬＣ同时测定蒲公英中绿原酸、咖啡酸、异绿原酸 Ａ、异绿原酸Ｃ和木犀草苷５种活性成分含量的方
法。方法：采用Ａｇｉｌｅｎｔ　Ｐｏｒｏｓｈｅｌ　１２０ＥＣ－Ｃ１８色谱柱（１００ｍｍ×３．０ｍｍ，２．７μｍ），以乙腈－０．１％醋酸水溶液为流动相，梯度洗
脱，流速０．４ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长为３２５ｎｍ和３５０ｎｍ，柱温３５℃。结果：绿原酸、咖啡酸、异绿原酸Ａ、异绿原酸Ｃ和木犀草
苷分别在３．４３～１７１．３８μｇ·ｍＬ
－１（ｒ２＝０．９９９　９），２．５４～１２６．７８μｇ·ｍＬ
－１（ｒ２＝１．０００　０），３．２７～１６３．２８μｇ·ｍＬ
－１（ｒ２＝
０．９９９　９），０．５１～２５．４８μｇ·ｍＬ
－１（ｒ２＝０．９９９　８）和１．６４～８２．１６μｇ·ｍＬ
－１（ｒ２＝０．９９９　７）内具有良好的线性关系；平均加样回
收率（ｎ＝６）分别为１０１．２６％，９８．１７％，９９．２４％，９７．０８％，９６．５３％。结论：该方法快速、准确、重复性好、分离度高，可有效控制
蒲公英的质量。
［关键词］　超高效液相色谱法；绿原酸；咖啡酸；异绿原酸Ａ；异绿原酸Ｃ；木犀草苷；含量测定
［中图分类号］Ｒ９２７．２　　［文献标识码］Ａ　　［文章编号］１００１－５２１３（２０１３）０９－０６７７－０４
Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｉｖｅ　ａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｉｎ　Ｈｅｒｂａ　Ｔａｒａｘａｃｉ　ｂｙ　ＵＰＬＣ
ＳＨＩ　Ｙａ－ｑｉｎ１，２，ＺＨＵ　Ｆｅｎ－ｘｉａ２，ＤＩＮＧ　Ｓｈｕ－ｍｉｎ２，ＳＯＮＧ　Ｊｉｅ２，ＹＵ　Ｄａｎ－ｈｏｎｇ２，ＪＩＡ　Ｘｉａｏ－ｂｉｎ１，２（１．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒ－
ｍａｃｙ，Ｊｉａｎｇｓｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉａｎｇｓｕ　Ｚｈｅｎｊｉａｎｇ　２１２０１３，Ｃｈｉｎａ；２．Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｎｅｗ　Ｄｒｕｇ　Ｄｅｌｉｖｅｒｙ　Ｓｙｓｔｅｍ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅ－
ｔｅｒｉａ　Ｍｅｄｉｃａ，Ｊｉａｎｇｓｕ　Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｉａｎｇｓｕ　Ｎａｎｊｉｎｇ　２１００２８，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａ　ｒａｐｉｄ　ＵＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ　ａｃｉｄ，ｃａｆｆｅｉｃ　ａｃｉｄ，
４，５－ｄｉｃａｆｆｅｏｙｌｑｕｉｎｉｃ　ａｃｉｄ，３，５－ｄｉｃａｆｆｅｏｙｌｑｕｉｎｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｌｕｔｅｏｌｉｎ－７－Ｏ－ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ　ｉｎ　Ｈｅｒｂａ　Ｔａｒａｘａｃｉ．ＭＥＴＨＯＤＳ　Ｔｈｅ　Ａｇｉｌｅｎｔ　Ｐｏ－
ｒｏｓｈｅｌ　１２０ＥＣ－Ｃ１８（１００ｍｍ×３．０ｍｍ，２．７μｍ）ｃｏｌｕｍｎ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｗｉｔｈ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｏｆ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ　ａｎｄ　ｗａｔｅｒ　ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　０．１％
ａｑｕｅｏｕｓ　ａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｗａｓ　ｍｏｎｉｔｏｒｅｄ　ａｔ　ｄｕａｌ－ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｓ　３２５ｎｍ　ａｎｄ　３５０ｎｍ．Ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　０．４ｍＬ·ｍｉｎ－１
ａｎｄ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　３５℃．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｔｈｅ　ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｒａｎｇｅｓ　ｏｆ　ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ　ａｃｉｄ，ｃａｆｆｅｉｃ　ａｃｉｄ，４，５－ｄｉｃａｆｆｅｏｙｌｑｕｉｎｉｃ
ａｃｉｄ，３，５－ｄｉｃａｆｆｅｏｙｌｑｕｉｎｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｌｕｔｅｏｌｉｎ－７－Ｏ－ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ　ｗｅｒｅ　３．４３－１７１．３８μｇ·ｍＬ
－１（ｒ２＝０．９９９　９），２．５４－１２６．７８μｇ·
ｍＬ－１（ｒ２＝１．０００　０），３．２７－１６３．２８μｇ·ｍＬ
－１（ｒ２＝０．９９９　９），０．５１－２５．４８μｇ·ｍＬ
－１（ｒ２＝０．９９９　８），ａｎｄ　１．６４－８２．１６μｇ·
ｍＬ－１（ｒ２＝０．９９９　７），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ（ｎ＝６）ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ　１０１．２６％，９８．１７％，９９．２４％，
９７．０８％ａｎｄ　９６．５３％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ｒｅａｌｉｚａｂｌｅ，ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ　ａｎｄ　ｕｌｔｒａ　ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ，ａｎｄ
ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｏｆ　Ｈｅｒｂａ　Ｔａｒａｘａｃｉ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：ＵＰＬＣ；ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ　ａｃｉｄ；ｃａｆｆｅｉｃ　ａｃｉｄ；４，５－ｄｉｃａｆｆｅｏｙｌｑｕｉｎｉｃ　ａｃｉｄ；３，５－ｄｉｃａｆｆｅｏｙｌｑｕｉｎｉｃ　ａｃｉｄ；ｌｕｔｅｏｌｉｎ－７－Ｏ－ｇｌｕｃｏ－
ｓｉｄｅ；ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ
　　蒲公英系菊科多年生草本植物蒲公英Ｔａｒａｘａ－
ｃｕｍ　ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍ Ｈａｎｄ．Ｍａｚｚ．、碱地蒲公英Ｔａｒａｘ－
ａｃｕｍ　ｂｏｒｅａｌｉｓｉｎｅｎｓｅ　Ｋｉｔａｍ．全国各地均有分布，又
称蒲公草、婆婆丁、地丁、黄花地丁等，具有清热解
毒，消肿散结，利尿通淋的功效。用于疔疮肿毒、乳
痈、瘰疬、目赤、咽痛、肺痈、肠痈、湿热黄疸、热淋涩
痛［１］。现代药理研究表明，蒲公英具有广谱抑菌，利
胆保肝，抗内毒素，健胃和免疫促进等作用［２］。蒲公
英的主要活性成分是酚酸类、黄酮类［３］，其中酚酸类
物质具有抗血栓形成、溶纤和抗脂质过氧化的作用，
是治疗心肌缺血、心绞痛、心肌梗死等心血管疾病的
有效成分［４］，而黄酮以木犀草素及其糖苷含量较高，
具有较强的抗氧化活性，此外酚酸类和黄酮在体内
均有抗菌、抗炎、抗病毒的作用［５－８］。目前，关于测定
蒲公英药材及其制剂中的咖啡酸、绿原酸、阿魏酸的
含量已有报道［９－１２］，但是，尚未见对蒲公英中咖啡
·７７６·中国医院药学杂志２０１３年第３３卷第９期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１３Ｍａｙ，Ｖｏｌ　３３，Ｎｏ．０９
DOI:10.13286/j.cnki.chinhosppharmacyj.2013.09.001
酸、绿原酸、异绿原酸Ａ、异绿原酸Ｃ和木犀草苷的
同时测定报道。本研究采用超高效液相色谱法
（ＵＰＬＣ）同时测定蒲公英中５种活性成分的含量，
相对于 ＨＰＬＣ，更加灵敏、高效、准确，从而建立一种
更好地控制蒲公英药材质量的方法。
１　材料
ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ（美国 Ｗａｔｅｒｓ公司，包括四
元高压梯度泵、真空脱气机、自动进样器、柱温箱、二
极管阵列检测器、Ｅｍｐｏｗｅｒ２色谱工作站）；梅特勒
百万分之一电子天平 （ＭＥｔｔＬＥＲ　ＴｏｌＥｄｏ，型号
ＭＴ５）；数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公
司，ＫＱ５２００ＤＥ型）；离心机（上海安亭科技仪器厂，
ＴＧＬ－１６Ｇ）。
对照品：绿原酸（批号１１０７５３，含量：９８．７％）、
咖啡酸（批号１１０８８５，含量：９９．１％）中国食品药品
检定研究院；异绿原酸 Ａ 和 Ｃ（批号分别为：
Ｄ１００６２４，Ｄ１００６２３；含量分别为：９８．２％，９９．２％）购
自成都普瑞法科技开发有限公司；木犀草苷（中国食
品药品检定研究院，批号２０１１０５１２，供含量测定
用）；乙腈为色谱纯（美国 Ｍｅｒｃｋ公司），甲醇、醋酸
和甲酸均为色谱纯（均为美国 Ｔｅｄｉａ　Ｃｏｍｐａｎｙ公
司），水为注射用水，其他试剂均为分析纯。蒲公英
产于安徽、江苏、河南、山西、湖北等地，其中，江苏
（１１０７０１）一批于２０１１年７月采集于苏州卫生职业
技术学院植物园；江苏（１２０５２１）一批于２０１２年５月
采集于中国药科大学植物园；其余９批药材均购于
安徽省亳州市万珍中药饮片厂，经南京中医药大学
吴德康教授鉴定为菊科植物Ｔａｒａｘａｃｕｍ　ｍｏｎｇｏｌｉ－
ｃｕｍ　Ｈａｎｄ．Ｍａｚｚ．的全草。
２　方法与结果
２．１　色谱条件　色谱柱：Ａｇｉｌｅｎｔ　Ｐｏｒｏｓｈｅｌ　１２０
ＥＣ－Ｃ１８（１００ｍｍ×３．０ｍｍ，２．７μｍ）；流动相：Ａ为
乙腈，Ｂ为０．１％醋酸水溶液，梯度洗脱条件：０～８
ｍｉｎ，Ａ：８％～１０％；８～１２ｍｉｎ，Ａ：１０％～１６％；１２
～１４ｍｉｎ，Ａ：１６％～１６％；１４～２０ｍｉｎ，Ａ：１６％～
１８％；２０～２１ｍｉｎ，Ａ：１８％～２０％；流速：０．４ｍＬ·
ｍｉｎ－１；柱温：３５℃；进样量：３μＬ；检测波长：其中绿
原酸、咖啡酸、异绿原酸 Ａ、异绿原酸Ｃ　４个化合物
采用３２５ｎｍ，木犀草苷采用３５０ｎｍ。色谱图见图
１。
２．２　溶液的制备
２．２．１　对照品溶液　分别精密称取绿原酸、咖啡
酸、异绿原酸Ａ、异绿原酸Ｃ和木犀草苷对照品适
量置于５ｍＬ棕色量瓶中，加甲醇溶解后稀释到刻
度，制得质量浓度分别为８５６．４１，８４５．２３，８０５．６４，
８４９．２６，８２１．６５μｇ·ｍＬ
－１的各对照品储备液。
图１　对照品（Ａ－１，Ａ－２）和蒲公英样品（安徽野生，Ｂ－１，Ｂ－２）超高效
液相色谱图
Ａ－１，Ｂ－１为３２５ｎｍ 下，Ａ－２，Ｂ－２为３５０ｎｍ下；１－绿原酸；２－咖啡酸；
３－木犀草苷；４－异绿原酸Ａ；５－异绿原酸Ｃ
Ｆｉｇ　１　ＵＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ　ｏｆ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ（Ａ－１，Ａ－２）ａｎｄ
Ｈｅｒｂａ　Ｔａｒａｘａｃｉ　ｓａｍｐｌｅ（Ｂ－１，Ｂ－２）ｉｎ　３２５ｎｍ （Ａ－１，Ｂ－１）ａｎｄ　３５０
ｎｍ（Ａ－２，Ｂ－２）
１－ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ　ａｃｉｄ；２－ｃａｆｆｅｉｃ　ａｃｉｄ；３－ｌｕｔｅｏｌｉｎ－７－Ｏ－ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ；４－４，５－
ｄｉｃａｆｆｅｏｙｌｑｕｉｎｉｃ　ａｃｉｄ；５－３，５－ｄｉｃａｆｆｅｏｙｌｑｕｉｎｉｃ　ａｃｉｄ
２．２．２　供试品溶液　精密称取蒲公英粉末（过３号
筛）０．５ｇ，置于５０ｍＬ具塞锥形瓶中，精密加入１０
ｍＬ　５％甲酸的５０％甲醇溶液，密塞，称重，超声（功
率２５０Ｗ，频率１００ｋＨｚ）３０ｍｉｎ，放冷，用５０％甲醇
补足失重，摇匀，过滤，取续滤液离心即得。
２．３　线性关系考察　取“２．２．１”项下各对照品储备
液适量置于１０ｍＬ棕色量瓶中，５０％甲醇定容，制
得含绿原酸１７１．２８μｇ·ｍＬ
－１、咖啡酸１２６．７８μｇ·
ｍＬ－１、异绿原酸 Ａ　１６３．２８μｇ·ｍＬ
－１、异绿原酸 Ｃ
２５．４８μｇ·ｍＬ
－１、木犀草苷８２．１６μｇ·ｍＬ
－１的混合
对照品储备液，将混合对照品溶液分别稀释０，２，
１０，２０，４０，５０倍，得到一系列浓度的混合对照品溶
液，离心后按“２．１”项下色谱条件，进样３μＬ。以峰
面积积分（Ｙ）对浓度（Ｘ）进行线性回归，得到各成分
的回归方程、相关系数、线性范围、检测限和定量限，
如表１所示。
２．４　精密度试验　取中浓度质控混合标准品溶液
进行精密度考察。按上述色谱条件连续进样６次；
计算绿原酸、咖啡酸、异绿原酸Ａ、异绿原酸Ｃ、木犀
草苷 峰 面 积 的 ＲＳＤ，分 别 为０．２８％，０．５２％，
０．４３％，０．７４％，０．６９％，表明仪器精密度良好。
·８７６· 中国医院药学杂志２０１３年第３３卷第９期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１３Ｍａｙ，Ｖｏｌ　３３，Ｎｏ．０９
表１　各成分线性回归数据、检测限和定量限
Ｔａｂ　１　Ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｄａｔａ，ＬＯＤ（Ｓ／Ｎ≥３－４）ａｎｄ　ＬＯＱ（Ｓ／Ｎ≥１０－１２）ｏｆ　ｔｈｅ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ
成分 回归方程 Ｒ２ 线性范围／μｇ·ｍＬ－１ 定量限／ｎｇ 检测限／ｎｇ
绿原酸 Ｙ＝２４　３９９　Ｘ－２６　６３９　 ０．９９９　９　 ３．４３～１７１．２８　 ０．１０　 ０．０３
咖啡酸 Ｙ＝３６　４４０　Ｘ－１９　２００　 １．０００　０　 ２．５４～１２６．７８　 ０．０９　 ０．０３
异绿原酸Ａ　 Ｙ＝２７　４６９　Ｘ－１８　７５９　 ０．９９９　９　 ３．２７～１６３．２８　 ０．１０　 ０．０３
异绿原酸Ｃ　 Ｙ＝２４　３０４　Ｘ－３　１１７．９　 ０．９９９　８　 ０．５１～２５．４８　 ０．４１　 ０．１３
木犀草苷 Ｙ＝１８　９７１　Ｘ－１１　７８３　 ０．９９９　７　 １．６４～８２．１６　 ０．２４　 ０．０６
２．５　日间精密度　取安徽野生蒲公英样品（批号
１２０５０４）进行日间精密度的考察。于第一个工作日
取样品３份，按“２．２．２”项下平行操作，在上述色谱
条件下进样分析；连续３ｄ同法测定，计算５种成分
含量 的 ＲＳＤ，分 别 为２．１４％，１．３９％，２．６２％，
３．９２％和３．２８％，结果显示该方法日间精密度良好。
２．６　重复性　精密称定同一批样品（１２０５０４），按
“２．２．２”项下操作，平行制备６份供试品溶液，按
“２．１”项下色谱条件进样３μＬ，测定峰面积，计算绿
原酸、咖啡酸、异绿原酸Ａ、异绿原酸Ｃ、木犀草苷含
量的 ＲＳＤ，分别为１．７６％，２．１１％，１．４３％，２．０１％
和２．５９％，表明此方法重复性良好。
２．７　稳定性　取同一批供试品溶液，室温放置，在
上述色谱条件下分别在０，２，４，８，１２，２４ｈ时进样分
析，测定峰面积，计算５种成分含量的ＲＳＤ，分别为
１．６６％，１．６８％，１．９７％，２．０１％，１．７３％和１．１５％，
表明供试品溶液在２４ｈ内各成分稳定性较好。
２．８　加样回收率　取同一批（１２０５０４）已知含量的
供试品６份，每份０．２５ｇ，精密称定。分别精密加入
等同于药材样品含量的５种对照品，按“２．２．２”项下
方法制备，以“２．１”项下色谱条件进样３μＬ检测，计
算绿原酸、咖啡酸、异绿原酸Ａ、异绿原酸Ｃ、木犀草
苷的平均加样回收率，结果见表２。
表２　加样回收率测定结果（ｎ＝６）
Ｔａｂ　２　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｔｅｓｔｓ（ｎ＝６）
成分 含样量／μｇ 加入量／μｇ 测得量／μｇ 回收率／％ ＲＳＤ／％
绿原酸 ６０．６４　 ５９．９２　 １２１．３２　 １０１．２６　 １．７６
咖啡酸 ３５．６５　 ３３．６０　 ６８．９９　 ９８．１７　 ０．９９
异绿原酸Ａ　 ６２．５８　 ６０．１９　 １１４．６５　 ９９．２４　 ０．７８
异绿原酸Ｃ　 ７．４９　 ８．４８　 １５．７２　 ９７．０８　 ３．７９
木犀草苷 ２１．１１　 ２０．５０　 ４１．４１　 ９６．５３　 ４．７７
２．９　样品测定　取所收集的蒲公英样品粉末约
０．５ｇ，精密称定，按“２．２．２”项下方法制备供试品溶
液，按“２．１”项下色谱条件进行分析，计算绿原酸、咖
啡酸、异绿原酸Ａ、异绿原酸Ｃ、木犀草苷含量，结果
见表３。
３　讨论
本实验用ＵＰＬＣ在２１ｍｉｎ内同时测定蒲公英
药材中的绿原酸、咖啡酸、异绿原酸Ａ、异绿原酸Ｃ
和木犀草苷，该方法分析效率高，溶剂消耗少，且灵
敏、准确、快速，具有进一步推广和应用的价值。
表３　蒲公英中５种活性成分含量测定结果（μｇ·ｇ
－１，ｎ＝３）
Ｔａｂ　３　Ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｉｎ　Ｈｅｒｂａ　Ｔａｒａｘａｃｉ（μｇ·ｇ
－１，ｎ
＝３）
　　产地 绿原酸 咖啡酸 异绿原酸Ａ 异绿原酸Ｃ 木犀草苷
江苏（１２０５２１） ４１１．１１　 ６１．２８　 ２１２．３２　 １５．６３　 １３８．７１
湖北（１１０９０３） ９９．９２　１０９．８１　 ９７．７８　 １１．７５　 ８３．４２
山西（１１０７０１） １５７．８８　４２０．６４　 １５１．７６　 ３９．４３　 ３６．８９
河南（１１０６２５） ３４７．４３　３３０．３６　 ３３３．７４　 ５４．６０　 ６８．７３
河南（１２０４２３） １５８．３８　２０７．８１　 ９７．４７　 １５．２２　 ７４．８５
安徽亳州（１２０２０９） ３３３．６１　３２６．９９　 ３６３．６６　 ４４．７７　 ８２．９２
安徽（１２０５１０） ２９０．３３　２２３．８２　 ２６０．３０　 ２５．３６　 ６２．１２
安徽（１１０９１６） ２３０．３７　１８４．６７　 １５３．５４　 １９．６３　 １４３．３９
安徽野生（１２０５０４） ２４２．４８　１４２．５４　 ２５０．２３　 ２９．９４　 ８４．４１
安徽（１２０３０１） ２４７．０６　３６６．１８　 １６８．７５　 ２６．１３　 ５７．８２
江苏（１１０７０１） １９６．７６　３７５．１９　 １２７．６１　 ２９．１５　 １２０．１２
　　实验比较了５％甲酸的３０％甲醇、５％甲酸的
５０％甲醇、５％甲酸的７０％甲醇等不同的提取溶剂，
发现５％甲酸的５０％甲醇提取效果最好。此外又比
较了回流、超声提取方法，结果显示提取率无显著性
差异，超声简单、方便，故选择超声提取。并考察超
声提取条件，比较了２０，３０，４０ｍｉｎ　３个提取时间，
最终选定超声提取（功率２５０Ｗ，频率１００ｋＨｚ）３０
ｍｉｎ，该方法简便快捷，提取率高。
中国药典２０１０年版一部中蒲公英的质量标准
只规定了咖啡酸的含量限度，在湖北、山西等５批药
材中，咖啡酸的含量占所测绿原酸、咖啡酸、异绿原
酸Ａ、异绿原酸Ｃ总量的４０％以上，而含量测定中
发现１１个批次的蒲公英样品中绿原酸和异绿原酸
Ａ含量高于咖啡酸的分别有６批和５批，故也应该
列入含量测定项下，从而更全面地控制原料药材蒲
公英的质量。
本研究应用建立的 ＵＰＬＣ定量检测方法测定
了１１批不同产地和集散地蒲公英药材中绿原酸、咖
啡酸、异绿原酸Ａ、异绿原酸Ｃ和木犀草苷的含量，
测定结果显示，药材中这５种成分的含量偏差较大。
其中绿原酸以购自江苏的一批（１２０５２１）含量最高
（４１１．１１μｇ·ｇ
－１），而从湖北（１１０９０３）收集的含量较
低；咖啡酸以购自山西（１１０７０１）的含量最高（４２０．６４
μｇ·ｇ
－１），江苏一批（１２０５２１）和湖北（１１０９０３）的含
量较低；异绿原酸Ａ以购自安徽亳州（１２０２０９）的含
量最高（３６３．６６μｇ·ｇ
－１），湖北（１１０９０３）和河南
（１２０４２３）的含量较低；异绿原酸Ｃ以购自河南的一
批（１１０６２５）含量最高（５４．６０μｇ·ｇ
－１），而湖北
·９７６·中国医院药学杂志２０１３年第３３卷第９期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１３Ｍａｙ，Ｖｏｌ　３３，Ｎｏ．０９
（１１０９０３）、河南（１２０４２３）和江苏的一批（１２０５２１）含
量均较低。木犀草苷以购自安徽的一批（１１０９１６）含
量较高（１４３．３９μｇ·ｇ
－１），而山西（１１０７０１）的含量最
低。测定数据显示，不同药材中５种成分含量总体
偏差较大，说明各地蒲公英药材质量均衡性较差，这
可能与产地和采摘季节有一定的相关性，如江苏的
两批药材采摘于不同的季节，其咖啡酸、绿原酸、异
绿原酸Ａ的含量差别较大。这一现状提示制定蒲
公英药材新的质量标准紧迫而且必要，不仅可以确
保蒲公英药材及其相关产品的内在质量，更可促进
提升蒲公英质量控制的现有水平。
参考文献：
［１］　中国药典．一部［Ｓ］．２０１０：３３１．
［２］　林云，江林，蒋健，等．蒲公英的药理作用研究进展［Ｊ］．中国
现代中药，２０１１，１３（８）：４２－４７．
［３］　许丹，侯凤飞，吴立军，等．蒲公英的化学研究［Ｊ］．中国中药
杂志，２００４，２９（３）：２７８．
［４］　曹炜，陈卫军，宋纪蓉．不同种类蜂蜜总酚酸含量测定和抗氧
化作用的研究［Ｊ］．食品科学，２００５，２６（１）：４８－５１．
［５］　Ｃｈｏｉ　ＵＫ，Ｌｅｅ　ＯＨ，Ｙｉｍ　ＪＨ，ｅｔ　ａｌ．Ｈｙｐｏｌｉｐｉｄｅｍｉｃ　ａｎｄ　Ａｎ－
ｔｉｏｘｉｄａｎｔ　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｄａｎｄｅｌｉｏｎ（Ｔａｒａｘａｃｕｍ　ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ）Ｒｏｏｔ　ａｎｄ
Ｌｅａｆ　ｏｎ　Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ－Ｆｅｄ　Ｒａｂｂｉｔｓ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒ　Ｊ　Ｍｏｌｅ　Ｓｃｉ，２０１０，
１１（１）：６７－８７．
［６］　Ｗａｎｇ　ＧＦ，Ｓｈｉ　ＬＰ，Ｒｅｎ　ＹＤ，ｅｔ　ａｌ．Ａｎｔｉ－ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　ｖｉｒｕｓ　ａｃ－
ｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ　ａｃｉｄ，ｑｕｉｎｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｃａｆｆｅｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｖｉｖｏ
ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ［Ｊ］．Ａｎｔｉｖｉｒａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００９，８３（２）：１８６－１９０．
［７］　Ｈｅ　Ｗ，Ｈａｎ　Ｈ，Ｗａｎｇ　Ｗ，ｅｔ　ａｌ．Ａｎｔｉ－ｉｎｆｌｕｅｎｚａ　ｖｉｒｕｓ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ
ａｑｕｅｏｕｓ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　ｄａｎｄｅｌｉｏｎ［Ｊ］．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ　Ｊｏｕｒｎａｌ，２０１１，
８（１）：５３８．
［８］　施树云，张宇平，周宏灏，等．管花蒲公英中抗肿瘤活性化合
物的快速筛选研究［Ｊ］．药物分析杂志，２０１１，３１（３）：４７１－
４７５．
［９］　刘凤仙，李罡，薛占英，等．不同季节采撷蒲公英中绿原酸含
量的研究［Ｊ］．中国医院药学杂志，２０１０，３０（１）：９１．
［１０］许海棠，徐远金．ＨＰＬＣ／ＭＳ测定蒲公英颗粒中绿原酸、咖啡
酸和阿魏酸的含量［Ｊ］．化学通报，２００８，７１（６）：４１５－４１９．
［１１］李喜凤，师绘敏，陈随清，等．ＨＰＬＣ同时测定蒲公英中咖啡
酸和绿原酸的含量［Ｊ］．中成药，２００８，３０（１０）：１５５３－１５５５．
［１２］李喜凤，孟璐，陈随清．蒲公英药材高效液相色谱特征图谱研
究［Ｊ］．中国医院药学杂志，２０１０，（８）：６４３－６４５．
［收稿日期］２０１２－０７－３１
［基金项目］贵州省中药现代化科技产业专项基金项目（黔科合中药字［２０１２］５０２３号）；贵阳市科技计划项目（筑科合同［２０１２２０４］２号）　［作
者简介］张洁，女，硕士研究生，研究方向：制剂新剂型新技术，电话：０８５１－６９０８４６８，Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｊｉｎｇｂｏ１９８９＠ｙｅａｈ．ｎｅｔ　［通讯作者］黄勇，男，
副教授，研究方向：制剂新剂型新技术及新药开发，电话：０８５１－６９０８４６８，Ｅ－ｍａｉｌ：ｍａｉｌｏｆｈｙ＠１２６．ｃｏｍ
右旋酮洛芬氨丁三醇速释缓释双层片的研制及其体外释放特性
张洁１，石凌云２，郑林１，２，牟景丽１，黄勇１，２　 （１．贵阳医学院药学院，民族药与中药开发应用教育部工程研究中心，贵州
贵阳５５０００４；２．贵州省药物制剂重点实验室，贵州 贵阳５５０００４）
［摘要］　目的：研制右旋酮洛芬氨丁三醇速释缓释双层片并考察其体外释药特性。方法：分别制备２种不同处方的速释层和
缓释层，压制速释缓释双层片，测定右旋酮洛芬氨丁三醇的体外释放度。结果：右旋酮洛芬氨丁三醇的累积释放度为：０．５ｈ释
放度为３０％～４０％，６ｈ释放度为７５％～８５％，１２ｈ释放度大于９０％，其释放行为可用一级方程拟合。结论：研制的右旋酮洛
芬氨丁三醇双层缓释片制备工艺简单，具有明显的速释和缓释特性。
［关键词］　右旋酮洛芬氨丁三醇；速释；缓释；双层片
［中图分类号］Ｒ９４４　　［文献标识码］Ａ　　［文章编号］１００１－５２１３（２０１３）０９－０６８０－０５
Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｅｘｋｅｔｏｐｒｏｆｅｎ　ｔｒｏｍｅｔａｍｏｌ　ｉｍｍｅｄｉａｔｅ－ｒｅｌｅａｓｅ　ａｎｄ　ｓｕｓ－
ｔａｉｎｅｄ－ｒｅｌｅａｓｅ　ｔａｂｌｅｔｓ
ＺＨＡＮＧ　Ｊｉｅ１，ＳＨＩ　Ｌｉｎｇ－ｙｕｎ２，ＺＨＥＮＧ　Ｌｉｎ１，２，ＭＵ　Ｊｉｎｇ－ｌｉ　１，ＨＵＡＮＧ　Ｙｏｎｇ１，２（１．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｇｕｉｙａｎｇ
Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ，Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｔｈｎｉｃ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ　ａｎｄ　ＴＣＭ ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ
Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ｇｕｉｙａｎｇ　５５０００４，Ｃｈｉｎａ；２．Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ　Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ　ｉｎ　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ｇｕｉ
ｙａｎｇ　５５０００４，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｐｒｅｐａｒｅ　ｄｅｘｋｅｔｏｐｒｏｆｅｎ　ｔｒｏｍｅｔａｍｏｌ　ｉｍｍｅｄｉａｔｅ－ｒｅｌｅａｓｅ　ａｎｄ　ｓｕｓｔａｉｎｅｄ－ｒｅｌｅａｓｅ　ｂｉｌａｙｅｒ　ｔａｂｌｅｔｓ　ａｎｄ
ｓｔｕｄｙ　ｉｔｓ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ．ＭＥＴＨＯＤＳ　Ｔｗｏ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｉｍｍｅｄｉａｔｅ－ｒｅｌｅａｓｅ　ｌａｙｅｒ　ａｎｄ　ｓｕｓｔａｉｎｅｄ－ｒｅｌｅａｓｅ　ｌａｙｅｒ　ｗｅｒｅ　ｐｒｅ－
ｐａｒｅｄ　ｓｅｐａｒａｔｅｌｙ；ｔｈｅ　ｉｍｍｅｄｉａｔｅ－ｒｅｌｅａｓｅ　ａｎｄ　ｓｕｓｔａｉｎｅｄ－ｒｅｌｅａｓｅ　ｂｉｌａｙｅｒ　ｔａｂｌｅｔｓ　ｗｅｒｅ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｄ；ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｒｅｌｅａｓｅｓ　ｏｆ　ｄｅｘｋｅｔｏｐｒｏｆｅｎ
ａｎｄ　ｔｒｏｍｅｔｈａｍｉｎｅ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｔｈｅ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｅｄ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ｄｅｘｋｅｔｏｐｒｏｆｅｎ　ｔｒｏｍｅｔａｍｏｌ　ｔａｂｌｅｔｓ　ｗｅｒｅ　３０％
－４０％，７５％－８５％ａｔ　０．５ｈ，６ｈｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄ　ｉｔ　ｗａｓ　ｍｏｒｅ　ｔｈａｎ　９０％ａｔ　１２ｈ．Ｔｈｅｉｒ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｐａｔｔｅｒｎ　ｗａｓ　ａｃｃｏｒｄｅｄ　ｗｉｔｈ
·０８６· 中国医院药学杂志２０１３年第３３卷第９期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１３Ｍａｙ，Ｖｏｌ　３３，Ｎｏ．０９