全 文 ：黄疸的患者 , 其对肝细胞的保护作用 ,表现在谷丙转氨酶降低 ,肝
脏病理变化明显减轻 ,抑制巨噬细胞释放肿瘤坏死因子 [ 8] 。
本实验研究表明苦参碱可以抑制肥胖大鼠热量摄入和体重
增加 , 同时降低血糖 、血清游离脂肪酸 、谷丙转氨酶和丙二醛的含
量 , 增加总抗氧化能力 , 改善血脂紊乱 , 保护肝脏的功能 , 对于预
防高脂性肥胖的发展起到一定的作用 ,以上研究结果为开发研究
中药减肥药物奠定了基础。
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收稿日期:2007-12-07;　修订日期:2008-04-15
基金项目:国家 “十一五 ”科技支撑计划中医药领域项目 (No.
2006BAI06A14-05)
作者简介:潘　见(1955-),男(汉族),安徽金寨人 ,现任合肥工业大学教
授 ,博士学位 ,主要从事天然药物开发工作.
蒲公英提取物的质量标准研究
潘　见 ,梁　娟 ,谢慧明 ,张文成
(合肥工业大学 ,安徽 合肥　230009)
摘要:目的 以绿原酸和咖啡酸为定量指标 , 建立蒲公英提取物的质量标准。方法 采用薄层色谱法(TLC)为蒲公英提取
物制定定性鉴别方法;采用高效液相色谱(HPLC)法测定其中的绿原酸和咖啡酸含量。结果 绿原酸在 0.003 125 ～ 0.05
mg/ml与峰面积具有良好的线性关系 , R2 =0.999 5。咖啡酸在 0.003 125 ～ 0.05 mg/ml与峰面积具有良好的线性关系 ,
R2 =0.999 9。绿原酸和咖啡酸平均回收率分别为 98.89%和 99.65%, RSD分别为 1.05%和 1.34%。结论 建立的方法
简便 、准确 、可靠 , 可作为控制该药品的质量标准。
关键词:蒲公英提取物;　绿原酸;　咖啡酸;　质量标准;　高效液相色谱
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)09-2064-02
StudiesonQualityStandardofDandelionExtracts
PANJian, LIANGJuan, XIEHui-ming, ZHANGWen-cheng
(HefeiUniversityofTechnology, Hefei230009, China)
Abstract:ObjectiveToestablishthequalitystandardofDandelionextractswithchlorogenicacidandcafieicacidasquantita-
tivemarkers.MethodsWiththetechnologyoforthogonaltest, DandelionextractswereidentifiedbyTLC.Thechlorogenicacid
andcafeicacidcontentweredetectedbyhighperformanceliquidchromatogram(HPLC).ResultsThechlorogenicacidhadgood
linearrelationshipwithintheraugeof0.003 125 ～ 0.050 000mg/ml.R2 =0.999 5.Andthecaffeicacidhadgoodlinearrela-
tionshipwith0.003 125 ～ 0.05 mg/ml.R2 =0.999 9.Therecoveriesofchlorogenicacidandcafieicacidwere98.89% and
99.65%, RSDwere1.05% and1.34%, respectively.ConclusionThemethodissimple, accurate, credible, whichcanbe
usedasthequalitycontrolstandardofDandelionextracts.
Keywords:Dandelionextracts;　Chlorogenicacid;　Cafeicacid;　Qualitystandards;　HPLC
　　中药提取物是一类新兴的天然药物产品 ,被广泛用于医疗保
健。在我国以中药材为原料的中药提取物已形成了一定的生产
规模。中药提取物的质量规范对中药产业的发展至关重要 ,但是
目前绝大多数的中药提取物没有国家标准或行业标准 [ 1] 。蒲公
英提取物作为市场畅销的中药提取物之一 ,制定其质量标准对其
在中药产业的发展有非常重要的意义。
蒲公英提取物富集了蒲公英药材中的有效成分 ,含有多种活
性物质 , 如倍半萜烯内酯 、三萜类 、植物甾醇 、酚酸类化合物 、黄酮
类物质 、类固醇等 , 而其中酚酸类化合物含量丰富。尤其是咖啡
酸和绿原酸含量较高 ,是蒲公英提取物的主要有效成分 [ 2, 3] 。绿
原酸具有抗氧化作用 ,特别是绿原酸的生物活性 , 能促进人体的
新陈代谢 、调节人体各部功能的平衡等功效。因此绿原酸成分的
研究和利用越来越受到人们的重视 [ 4] 。咖啡酸具有广谱抗菌 、
消炎利胆 、利尿通淋等作用。 《中国药典 》 2005年版(Ⅰ部)仅制
定了蒲公英药材中咖啡酸检测方法 [ 5, 6] 。 本实验同时以蒲公英
提取物中的绿原酸和咖啡酸为指标建立蒲公英提取物质量标准 ,
用高效液相色谱法同时检测蒲公英提取物中咖啡酸和绿原酸
含量。
1 　仪器与试药
1.1 　仪器 Waters高效液相色谱仪(Waters515高压泵 , microli-
terTM#702型手动进样针 , Waters2487紫外检测器 , Empower数据
处理系统), SIGMA3K15型离心机 , MettlerToledoAG135型电子
·2064·
时珍国医国药 2008年第 19卷第 9期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.9　
天平。
1.2 　试药 蒲公英药材由亳州济人药业有限公司提供 , 咖啡酸
和绿原酸对照品购于中国药品生物制品检定所。硅胶 G(青岛海
洋化工厂),甲醇为色谱级 , 磷酸和磷酸二氢钠为分析纯 , 水为超
纯水。其他试剂均为分析纯。
2 　方法与结果
2.1　 定性鉴别
2.1.1　供试品溶液的制备 取蒲公英提取物 1g,加甲醇 20 ml,
加热回流 30min,滤过 , 滤液蒸干 ,残渣加水 10 ml使溶解 , 滤过 ,
滤液用醋酸乙酯振摇提取 2次 , 10 ml/次 , 合并醋酸乙酯液 , 蒸
干 , 残渣加甲醇 1 ml使溶解 ,作为供试品溶液。
2.1.2　对照品溶液的制备 取咖啡酸对照品 , 加甲醇制成每毫
升含 0.5mg的溶液。另取绿原酸对照品 , 加甲醇制成每毫升含
0.5 mg的溶液 , 作为对照品溶液。
2.1.3　薄层层析 吸取上述 3种溶液各 6 μl, 分别点于同一硅
胶 G薄层板上 ,以醋酸丁酯 -甲酸 -水(7∶2.5∶2.5)的上层溶
液为展开剂 , 展开 ,取出 , 晾干 , 置紫外光灯(365 nm)下检测。供
试品色谱中 , 在与对照品相应的位置上 , 显相同颜色的荧光斑点。
2.2 　含量测定
2.2.1 　色谱条件 色谱柱为 AgilentHypersilODS柱 , (5 μm,
4.6 mm×250 mm);流动相为甲醇 -磷酸盐缓冲液(pH 4.0):
(23∶77), 检测波长 323 nm,柱温 25℃, 流速为 1.0 ml/min。灵
敏度:1.0AUFS;理论塔板数按咖啡酸峰计算应不低于 3 000, 咖
啡酸峰与其他峰能达到基线分离 ,且出峰时间适宜 , 峰形较好。
2.2.2　对照品溶液的制备 分别精密称取在 110℃干燥至恒重
的绿原酸和咖啡酸对照品各 2.5 mg,置 50 ml容量瓶中 , 加甲醇
至刻度 , 摇匀 ,精密量取 5 ml,置 10ml量瓶中 , 加甲醇至刻度 ,摇
匀 , 即得 0.025 mg/ml的对照品溶液。
2.2.3　供试品溶液的制备 取蒲公英提取物干粉 0.5 g,精密称
定 , 置 100 ml具塞锥形瓶中 , 精密加含 5%甲酸的甲醇溶液 50
ml, 密塞 ,摇匀 , 称定重量 ,超声处理(功率 250W, 频率 40kHz)30
min,取出 , 放冷 ,再称定重量 , 用含 5%甲酸的甲醇溶液补足减失
的重量 , 摇匀 ,离心 , 取上清液 ,用微孔滤膜(0.22 μm)滤过 ,滤液
置棕色量瓶中 , 即得。
2.2.4　线性关系考察 分别精密称取在 110℃干燥至恒重的绿
原酸和咖啡酸对照品各 2.5 mg, 置 50 ml容量瓶中 ,加甲醇至刻
度 , 摇匀 ,再用甲醇逐级稀释得 0.05, 0.025, 0.012 5, 0.006 25,
0.003 125mg/ml5个不同浓度的对照品溶液 , 分别进样 10 μl,
测定其峰面积 , 然后分别以绿原酸和咖啡酸的浓度为横坐标 , 5
次测定峰面积的均值为纵坐标 , 绘制标准曲线 , 计算回归方程为
绿原酸:Y=3×107X-24 923, R2 =0.999 5;咖啡酸:Y=5×107X
+8 862.3, R2 =0.999 9。实验结果表明绿原酸和咖啡酸的浓度
在 0.003 125 ～ 0.05mg/ml范围内均与所测得的相应峰面积呈良
好的线性关系。
2.2.5　精密度实验 精密吸取对照品溶液 10 μl进样 , 重复进
样 6次。按上述色谱条件测定绿原酸的峰面积分别为 735 557,
723 229, 730 246, 735 043, 720 147, 724 230, RSD=0.89%。咖啡
酸的峰面积分别为 1 255 324, 1 275 697, 1 267 064, 1 270 335,
1 292 704, 1 243 824, RSD=1.33%。结果表明本方法的精密度
良好。
2.2.6　稳定性实验 精密吸取供试品溶液 , 按上述色谱条件 ,每
隔 1h进样 1次 , 共进样 6次。绿原酸峰面积分别为 505 928,
506 310, 510 911, 515 970, 518 800, 510 034, RSD=1.01%。咖啡
酸的峰面积为 798 944, 797 559, 803 781, 811 651, 820 222,
816 674, RSD=1.17%。结果表明 , 绿原酸和咖啡酸的峰面积在
5 h内无明显变化 ,供试品溶液稳定性好。对照品及供试品色谱
图见图 1 ～ 2。
2.2.7　重复性实验 取同一批样品 , 平行实验 6次 , 测得绿原酸
含量为 1.775, 1.734, 1.808, 1.750, 1.788, 1.75, RSD=1.52%。
咖啡酸含量为 1.606, 1.583, 1.628, 1.567, 1.613, 1.60 1, RSD=
1.36%。结果表明 , 在同一条件下 , 6次测得样品绿原酸含量及
咖啡酸含量一致 ,本方法重复性好。
图 1　对照品色谱图　　　　　图 2　供试品色谱图
2.2.8　回收率实验 采用加样回收法 , 精密称取已知含量的样
品 6份 , 每份 0.5g, 分别精密添加绿原酸对照品 1.8 mg和咖啡
酸对照品 1.6 mg, 按 “ 2.2.3”的方法制成供试品溶液 , 各取 10 μl
进样 , 测定绿原酸和咖啡酸的含量。计算平均回收率分别为
98.89%和 99.65%, RSD分别为 1.05%和 1.34%。实验结果表
明 , 本方法回收率好。
2.2.9　 样品含量测定 按 “ 2.2.3”项的方法制备样品 , 用上述
方法对以下不同批次样品进行含量测定。结果见表 1。
表 1　蒲公英提取物中绿原酸和咖啡酸含量测定结果
mg· g-1
批号 绿原酸含量 咖啡酸含量
070522 1.769 1.599
070613 1.785 1.605
070710 1.755 1.580
3　讨论
有人以单独的咖啡酸或绿原酸为指标 ,对蒲公英药材或制剂
进行质量评价 [ 4, 7] 。蒲公英提取物与蒲公英药材的化学成分及
含量有所不同。为了更好地评价蒲公英提取物 ,本实验在前人研
究的基础上同时以绿原酸和咖啡酸为指标 ,对蒲公英提取物进行
质量标定。
本法参考了 《中国药典》 2005年版Ⅰ部蒲公英中咖啡酸的测
定方法 , 并新加入了绿原酸作为检测指标 , 考虑同时以咖啡酸和
绿原酸作为检测指标 , 本实验在原有的检测条件下做了若干改
进 , 获得较好的效果 , 能有效控制蒲公英提取物质量。
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.9 时珍国医国药 2008年第 19卷第 9期