全 文 ：鸡树条荚蒾生长期不同部位绿原酸含量变化分析
冀树伸，朱伯强，符林春＊
（广州中医药大学 热带医学研究所，广东广州５１０４０５）
摘　要：目的：采用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）测定鸡树条荚蒾生长期不同部位绿原酸含量，为其资源合
理利用提供科学依据。方法：采用ＶＰ－ＯＤＳ　Ｃ１８（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ）色谱柱，以乙腈∶０．４％磷酸（１７
∶８３）为流动相，流速为１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长为３２７ｎｍ。果实和叶片的绿原酸提取液经０．２２μｍ滤
膜过滤后直接进样，进样量为２０μＬ。结果：绿原酸浓度在０．０１～５４．０μｇ／ｍＬ范围内与峰面积呈良好的
线性关系（ｒ＝０．９９９　７）。８月果实中绿原酸含量最高，为４９．３５μｇ／ｍＬ。结论：鸡树条荚蒾生长期果实中
绿原酸含量变化显著，且８月份积累最多。
关键词：鸡树条荚蒾；绿原酸；高效液相色谱法；含量测定
中图分类号：Ｒ２８４．２　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１６７３－２１９７（２０１５）１１－００３４－０３
ＤＯＩ：１０．１１９５４／ｙｔｃｔｙｙ．２０１５１１０１４
收稿日期：２０１５－０１－１５
作者简介：冀树伸（１９８８－），男，广州中医药大学硕士研究生，研究方向为中医药防治病毒性疾病。
通讯作者：符林春（１９５７－），男，广州中医药大学教授，博士生导师，研究方向为中医药防治病毒性疾病。
　　鸡树条荚蒾（Ｖｉｂｕｒｎｕｍ　ｓａｒｇｅｎｔｉｉ　Ｋｏｅｈｎｅ）系忍冬科荚
蒾属植物，又名天目琼花，民间作“鸡树条”药用［１］。为落叶
灌木，分布于辽宁、吉林、黑龙江、内蒙古、山东、河北、四川、
浙江等地，朝鲜、日本、前苏联也有分布，其天然资源极为丰
富［２－３］。鸡树条荚蒾所含的有效成分绿原酸具有广谱抗病
毒、抗菌、抗炎等药理作用［４］，对消化系统、血液系统和生殖
系统均有疗效，同时又是很多中药现代制剂如双黄连注射
液、双花注射液的原料［５］。
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本实验利用高效液相色谱法
Ｒｅ（０．７４５１％）、Ｒｂ１（０．８５９６％），是由于其皮部所占比例较
大［４］；而人参芦头亦含有较高的人参皂苷Ｒｇ１（０．４１５８％）。
人参皂苷Ｒｇ１、Ｒｅ和Ｒｂ１均具有益智、抗衰老和抗疲劳功
效，人参皂苷Ｒｇ１、Ｒｅ还具有防治心脑血管疾病的作用。如
果能针对性地提取人参参须、芦头中的人参皂苷Ｒｇ１、Ｒｅ和
Ｒｂ１单体，应能提高单体化合物的提取效率，更好地服务于
老年病创新药物的开发［５－６］。
在传统中医治疗中，人参作为大补元气、安神益智药，可
调节人体免疫力和中枢神经系统；现代临床应用也很广泛，
在改善心肌缺血、缺氧和抗疲劳方面均具有确切的医疗价
值［７－９］。现代研究也表明，补气药的药效成分与皂苷类和多糖
类物质相关［１０］。此外，近期也有研究报道，人参皂苷具有预
防和抗肿瘤的功效，可见，人参皂苷开发前期广阔，本研究为
进一步开发人参各部位的临床应用提供了科学依据。
参考文献：
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ｏｓｉｄｅ　Ｒｇ３ｏｎ　ｂｌｏｏｄ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ　ｉｎ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ　ｗｉｔｈ　ｈｉｇｈ　ｎｏｒｍａｌ
ｂｌｏｏｄ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ　ｏｒ　ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ［Ｊ］．Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｙ－
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（责任编辑：宋勇刚）
—４３—
（ＨＰＬＣ）测定鸡树条荚蒾生长期不同部位绿原酸含量，并分
析了不同时期不同部位绿原酸含量的变化，以期为合理利
用药用植物资源提供依据。
１　材料及方法
１．１　材料
本试验选择长势一致的鸡树条荚蒾植株，在其展叶期
以及果实转色期，采摘大小一致、方向相同、长势相近的叶
片与果实，放阴凉处阴干至恒重，用粉碎机粉碎，备用，采样
时间为７月５日、７月１５日、７月２５日、８月５日、８月１５
日。
１．２　仪器与试剂
高效液相色谱仪（岛津ＬＣ－２０ＡＴ），电子分析天平（梅特
勒），ＫＱ３２００ＤＢ型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有
限公司），中药粉碎机（温州ＬＧ－０８Ａ），水浴锅（金坛市医疗
仪器厂 ＨＨ－Ｓ４），ＳＨＢ１１１循环水式多用真空泵，高速冷冻
离心机，旋转蒸发仪（步琪）。
绿原酸对照品 （中国食品药品检定研究院，批号
１１０７５３－２００２１２）、９５％乙醇（分析纯）、乙腈（色谱纯）、甲醇
（色谱纯）、磷酸（分析纯）、氢氧化钠（分析纯）、石油醚（分析
纯）。
１．３　绿原酸的提取
将干燥的鸡树条荚蒾果实用研钵研碎，称取４．０ｇ，用石
油醚脱脂，之后加乙酸乙酯４０ｍＬ，超声提取３０ｍｉｎ，提取２
次，控制温度在３５℃左右。过滤，合并滤液，定容于８０ｍＬ。
用旋转蒸发仪蒸馏，用色谱甲醇定容于５ｍＬ。将提取溶液
用０．２２μｍ滤膜过滤，取２０μＬ上样。将干燥的鸡树条荚蒾
叶用研钵研碎，称取１０．０ｇ，用石油醚脱脂，之后加乙酸乙酯
１００ｍＬ，超声波提取３０ｍｉｎ，提取２次，控制温度在３５℃左
右。过滤，合并滤液，定容于２００ｍＬ。用旋转蒸发仪蒸馏，
用色谱甲醇定容于５ｍＬ。将提取溶液用０．２２μｍ 滤膜过
滤，取２０μＬ上样
［６－１３］。
１．４　色谱条件
色谱柱：ＶＰ－ＯＤＳ　Ｃ１８柱（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ）；流动相：乙
腈∶０．４％磷酸（１７∶８３）；流速：１ｍＬ·ｍｉｎ－１；０．４５μｍ滤膜
抽滤，等梯度洗脱，进样量：２０μＬ；柱温：室温；检测波长：
３２７ｎｍ；灵敏度０．５ＡＵＦＳ［６］。
１．５　精密度试验
在上述色谱条件下，精密吸取１．００ｍｇ·Ｌ－１对照品溶液
２０μＬ，重复进样６次，求得对应的绿原酸含量，得ＲＳＤ为１．
９０％，说明绿原酸较为稳定。
１．６　重复性试验
取同一时期果实中绿原酸提取液共５份，进样测定。
求得对应的绿原酸含量，计算其含量的ＲＳＤ值为１．１６％，
说明绿原酸在样品中较为稳定。
１．７　标准曲线绘制
将绿原酸标准品４．６ｍｇ溶于甲醇中，定容至５０ｍＬ容
量瓶中，配制成０．０９２ｍｇ·ｍＬ－１的标准储备液。从标准储
备液中吸取３、５、７、９、１１ｍＬ用甲醇稀释至２５ｍＬ容量瓶中，
用０．２２μｍ滤膜过滤，取１０μＬ上样。以绿原酸浓度为横坐
标，峰面积为纵坐标进行线性回归分析，绘制标准品的标准
曲线［６－１３］。
图２　绿原酸标准曲线
１．８　数据处理方法
采用ＳＰＳＳ１７．０软件进行统计学分析，组间数据比较采
用ｔ检验。Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。
２　结果与分析
２．１　标准品高效液相色谱
用高效液相色谱法，在规定的色谱条件下进行测量，用
标准品溶液确定绿原酸色谱峰的保留时间，标准品的高效
液相色谱见图１，绿原酸标品的保留时间为４．１９０ｍｉｎ。
图１　绿原酸标准品的ＨＰＬＣ色谱
２．２　绿原酸标准曲线绘制
浓度为５４．０００μｇ／ｍＬ、２７．０００μｇ／ｍＬ、１３．５００μｇ／ｍＬ的
标准品溶液用高效液相色谱法绘制标准曲线。以绿原酸浓
度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归分析，绘制标准
品的标准曲线，得到回归方程Ｙ＝４１６　７４．０６Ｘ－０．０１２，相
关系数ｒ＝０．９９９　７０１　０，说明绿原酸浓度在０．０１～５４．０００
μｇ／ｍＬ范围内与峰面积呈良好的线性关系。标准曲线见图
２。
２．３　样品中绿原酸含量的测定
测得７月５日、７月１５日、７月２５日、８月５日、８月１５
—５３—
日鸡树条荚蒾果实和叶片中绿原酸的峰面积与其相对应的
质量浓度见表１。由ｔ检验得知，ｔ＝５．００４＞ｔ０．０１（４），则Ｐ＜
０．０１，即果实与叶片的绿原酸含量有极显著差异，鸡树条荚
蒾果实中绿原酸的含量明显高于叶片中绿原酸的含量。
表１　鸡树条荚蒾生长期的果实和叶片中绿原酸含量变化
果实
峰面积 含量（μｇ／ｍＬ）
叶片
峰面积 含量（μｇ／ｍＬ）
５３１４２０　 １２．７５５３３　 ７７５２　 ０．１８６００
２００５６４１　 ４８．１２２８８　 １４７５４　 ０．３５４３０
１５８３８４０　 ３８．００８３０　 ３５４２　 ０．０８５００
２０５６９０８　 ４９．３５２７５　 ３１２６　 ０．０７５６９
１０８３６８０　 ２６．０３０８３　 ５６６８　 ０．１３６７９
２．４　生长期绿原酸含量变化分析
测得７月５日、７月１５日、７月２５日、８月５日、８月１５
日鸡树条荚蒾果实和叶片中绿原酸质量浓度后，分析比较鸡
树条荚蒾不同时期果实和叶片中绿原酸含量变化，见图３。
图３　生长期鸡树条荚蒾中绿原酸含量变化
３　讨论
从图３可以看出，生长期鸡树条荚蒾果实中绿原酸含
量呈现先增长后下降再增长再下降的趋势。从７月５日至
７月１５日较快增长，含量接近最高，为４８．１２２μｇ／ｍＬ；７月
１５日至７月２５日缓慢下降；７月２５日至８月５日又缓慢增
长，含量达到最高，为４９．３５２μｇ／ｍＬ；８月５日至８月１５日
又较快下降。生长期鸡树条荚蒾叶中片绿原酸含量都较
低，变化趋势不明显。
从生长期鸡树条荚蒾中绿原酸含量变化来看，果实中
绿原酸含量在７月１５日较高，为４８．１２２８８μｇ／ｍＬ，在８月５
日达到最高，为４９．３５２７５μｇ／ｍＬ。叶片中绿原酸含量在７
月１５日达到最高，为０．３５４３μｇ／ｍＬ。果实中绿原酸含量与
叶片中有极显著差异，果实＞叶片，而且生长期果实中绿原
酸含量变化比较显著。因此８月为最佳采收时期，能充分
利用鸡树条荚蒾果实中积累的绿原酸。
参考文献：
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（责任编辑：宋勇刚）
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ｓａｒｇｅｎｔｉ　Ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　Ｇｒｏｗｉｎｇ　Ｔｉｍｅ
Ｊｉ　Ｓｈｕｓｈｅｎ，Ｚｈｕ　Ｂｏｑｉａｎｇ，Ｆｕ　ｌｉｎｃｈｕｎ＊
（Ｔｒｏｐｉｃａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ　５１０４０５，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐａｒｔ　ｏｆ　Ｖｉｂｕｒｎｕｍ　ｓａｒｇｅｎｔｉｉ　ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
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ｈｅｒｂ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ａｌ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ＶＰ－ＯＤＳ　Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎ（１５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）ａｔ　ＵＶ　３２７ｎｍ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ，ｕｓｉｎｇ
ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ－０．４％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ　ａｃｉｄ　ａｓ　ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ａｔ　ａ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｏｆ　１．０ｍＬ／ｍｉｎ．Ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｆｒｏｍ
ｔｈｅ　ｆｒｕｉｔ　ａｎｄ　ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｅｒｂ　ｗａｓ　ｃａｒｒｉｅｄ　ｏｕｔ　ｂｙ　ｄｉｒｅｃｔ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ａｆｔｅｒ　０．２２μｍ　ｍｉｃｒｏｐｏｒｅ　ｆｉｌｔｅｒ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｓａｍｐｌｅ　ｓｉｚｅ　ｗａｓ
２０μＬ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ　ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ　ｃｕｒｖｅ　ｗａｓ　ｌｉｎｅａｒ　ｗｉｔｈｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　０．０１～５４．０μｇ／ｍＬ（ｒ＝０．９９９　７）。Ｉｎ　Ａｕｇｕｓｔ，ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ
ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ　ａｃｉｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｆｒｕｉｔ　ｏｆ　Ｖｉｂｕｒｎｕｍ　ｓａｒｇｅｎｔｉ　ｗａｓ　４９．３５ｕｇ／ｍＬ　ａｎｄ　ｒｅａｃｈｅｄ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ
ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ　ａｃｉｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｆｒｕｉｔ　ｏｆ　Ｖｉｂｕｒｎｕｍ　ｓａｒｇｅｎｔｉｉ　ｖａｒｉｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｔｉｍｅ　ａｎｄ　ｒｅａｃｈｅｄ　ｔｈｅ
ｈｉｇｈｅｓｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　Ａｕｇｕｓｔ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｖｉｂｕｒｎｕｍ　ｓａｒｇｅｎｔｉｉ　Ｋｏｅｈｎｅ；Ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ　Ａｃｉｄ；ＨＰＬＣ；Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｏｎｔｅｎｔ
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