全 文 ：薄层扫描法测定八棱麻中 β -谷甾醇的含量
Determ ination on the Content of β— sitosterolin in F los Sambuc i Javanicae by TLC
杨德泉 1 ,瞿显友 2
(1.湘西自治州药品检验所 ,湖南 吉首 416000;2. 重庆市中药研究院 ,重庆 400065)
[摘要 ] 目的:建立薄层扫描法测定八棱麻中 β —谷甾醇含量的方法。方法:以 0. 5%CMC -N a硅胶 G为薄层板 , 以甲
苯—氯仿—丙酮—甲醇(8：5：1：1)为展开剂 ,以 20%硫酸乙醇液为显色剂 ,检测波长 λ=530nm。结果:R
f
为 0. 65, 回归方
程 Y=177. 52X+33. 42, r=0. 9912,表明 β —谷甾醇在 0. 9960 ～ 4. 970μg范围内有良好的线性关系。结论:该方法简单 、方便 、
可靠 , 可作为八棱麻中 β —谷甾醇含量测定的方法。
[关键词 ] 薄层扫描法;八棱麻;β—谷甾醇
[ Abstract] Ob jec tive:To estab lish them e thod o f de te rm ina tion on the con tent o f β — sitostero lin in F los xambuc i javanicae by
TLC. M e thod:To use 0. 5% CMC -Na silica gel G a s lame lla board;To luene - chloroform - dim ethy lke tone -m e thano l(8：5：1：
1) as evo lu tion drug s;20% heparan m ethanol as co lo ra tion drugs;de tec tive wave leng th:λ=177. 52+33. 42, r=0. 9912;the β - si-
toste ro l had a good linearity in the range of 0. 996 ～ 04. 970μg. Conc lusion:Them e thod was simp le, facility, re liable, so itw as fit fo r
dete rm ina ting the conten t o f β - sitostero l in F los x ambuci pavanica.l
[ Key w ords] TLC;F los xambuci javanicae;β - sitostero l
[中图分类号 ] R927. 2 [文献标识码 ] A [文章编号 ] 1672 - 951(2005)03 - 062 - 02
八棱麻为忍冬科接骨木属植物陆英 Sambucus
chine sis L ind.l地上部分 。别名蒴藋 、臭草 、走马风 、
走马箭;土家族药名八棱麻 、水边麻 、七里麻。具有
祛风 、利湿 、舒筋 、活血的功效。主治风湿病痛 、腰腿
痛 、水肿 、黄疸 、跌打损伤 、产后恶露不行 、风疹瘙痒 、
丹毒 、疮肿。土家族民间用于治疗漆疮 、风土疮
等 [ 1, 2] 。目前 , 尚未见到八棱麻含量测定相关报
道 [ 3] 。为评价药材的质量提供可控的指标 ,笔者用
薄层扫描法测定八棱麻不同采收期药材中 -谷甾醇
的含量 。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 CS - 9301型双波长薄层扫描仪 (日本
岛津);定量毛细管 (美国 O runond Scientig ic Co. );
939薄层制板器 (重庆南岸贝尔德仪器技术厂制
作 )。
1. 2 试药 β -谷甾醇对照品(中国药品生物制品
检定所 ,批号:0851— 9601)。硅胶 G(青岛市市九区
海化干燥剂厂);其它试剂均为分析纯 。
八棱麻由笔者采自湘西州吉首市郊 ,在同一地
点分不同时期采收。 1号样采于 3月下旬 , 2号样采
于 4月中旬 , 3号样采于 5月中旬 , 4号样采于 6月
中旬(开花间 ), 5号样采于 7月下旬 (已结实 )。经
杨德泉副主任药师鉴定为陆英 Sambucus chinesis
L ind.l 。
2 实验方法
2. 1 测定条件 薄层板:0. 5%CMC -Na硅胶 G自
动制板 200mm ×200mm ,厚度 500μm ,展开剂:甲苯
-氯仿 -丙酮 -甲醇(8：5：1：1)。展开方式:展
开缸用展开剂饱和 15m in后展开 ,展距约 10cm;显
色:喷 20%硫酸乙醇液 , 105℃加热至斑点显色清
晰 。薄层扫描条件:λ=530nm ,灵敏度中 ,反射式线
性扫描 ,狭缝 1. 6×1. 6mm , sx =3,在此条件下样品
中各组分分离良好。
2. 2 线性关系考察 精密称取一定量的对照品 ,用
氯仿制成每 1m l含 0. 9960mg对照品溶液。精密吸
取 1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0μl的 β -谷甾醇对照品液 ,
点于同一硅胶 G薄层板上 ,依法展开 ,显色 ,结果 β
-谷甾醇 Rf值为 0. 65。分别进行扫描测定各斑点
的面积 。以对照品点样量为横坐标 ,斑点面积积分
值为纵坐标分别作图 , 回归方程 Y =177. 52X +
33. 42,相关系数 r=0. 9912, β -谷甾醇在 0. 9960 ～
4. 970μg范围内具有良好的线性关系。
2. 3 稳定性试验 将 β -谷甾醇对照品溶液 2μl
点于薄层板上 ,展开 、显色后 ,每隔 20m in分别扫描
测定其吸收峰面积值 ,结果表明 ,在 2h内显色斑点
峰面积积分值基本稳定 , RSD分别为 1. 90%。
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DOI牶牨牥牣牨牫牳牰牪牤j牣cnki牣cn牬牫牠牨牬牬牰牤r牣牪牥牥牭牣牥牫牣牥牪牴
2. 4 精密度试验 按上述条件对 β -谷甾醇对照
品同一斑点连续扫描 5次 ,测得峰面积的 RSD为
1. 72%,表明仪器重现性良好;同一样品点于同一薄
层板不同位置 ,测定并计算含量 (n =5), RSD为
2. 57%;同一样品点于不同的薄层板上 ,测定并计算
含量(n=5), RSD为2. 82%。
2. 5 重现性试验 对 2号样品平行测定 5份 , β -
谷甾醇的含量为 0. 181%, RSD为 2. 56%。
2. 6 加样回收率试验 精密称取 β -谷甾醇对照
品 2. 01mg,置 25m l量瓶中 ,加氯仿溶解并稀释至刻
度 ,配制成浓度为 0. 0805mg /m l的对照品溶液 。取
已知含量的八棱麻样品(1号样品 )5份 ,分别加入上
述对照品溶液 2m l(0. 0805mg /m l×2m l=0. 16mg),
按样品供试液制备成供试品液 ,并依法测定含量。
(见附表 )
附表 加样回收率试验结果
样品量
(g)
含量
(mg)
加入量
(m g)
测得量
(m g)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
1. 0082 0. 1617 0. 16 0. 3163 96. 62
1. 0109 0. 1630 0. 16 0. 3132 93. 88
1. 0117 0. 1622 0. 16 0. 3193 98. 19 96. 33 1. 78
0. 9984 0. 1612 0. 16 0. 3172 97. 50
1. 0113 0. 1639 0. 16 0. 3166 95. 44
2. 7 样品测定 取八棱麻地上部分粗粉 2g,精密称
定 ,置索氏提取器中 ,加氯仿溶氯仿适量 ,水溶中加
热回流至提取液近无色 ,提取液回收氯仿并浓缩至
近干 ,溶解并移至 5m l量瓶内 ,加氯仿稀释至刻度 ,
作为 β—谷甾醇含量测定供试液。准确吸取供试品
溶液 2μl, β -谷甾醇对照品溶液 2μl、4μl ,交叉点于
同一含 0. 5%CMC -N a的硅胶 G板上 ,依法展开 ,
显色 , 扫描 。据其峰面积积分值 ,用外标两点法计
算含量 。 (见表 2、图 1、图 2)
3 小 结
采用薄层扫描法测定八棱麻中 β -谷甾醇的含
量 ,能有效地排除其它成分的干扰 , 并且稳定时间
长 ,精密度良好 ,回收率高且稳定 ,操作简便易行 ,可
以作为八棱麻药材的质控指标 。
土家族民间用八棱麻茎叶煎水治疗漆疮 、土风
疮等接触性皮炎 ,经临床验证有较好的疗效。八棱
麻的茎叶含有 β -谷甾醇成分 ,具有局部抗炎作用 ,
与民间所用治疗漆疮 、止痒有一定相关性。为此笔
者以 β -谷甾醇为指标 ,对药材质量进行评价。
本法测定结果表明 ,不同采收期 β -谷甾醇含
量不同 , 3月后 β -谷甾醇的含量不断升高 ,在开花
期间达到最高 ,提示药材应在开花期间采收为佳。
表 2 八棱麻中 β —谷甾醇的含量(n=3)
样品 β—谷甾醇(%)
1 0. 161
2 0. 193
3 0. 218
4 0. 278
5 0. 173
(下转第 69页)
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间的配伍机理 , 是我们今后研究中医复方的一种重要的手段
和趋势。
我们进行经方现代研究的目的就在于论证经方配伍的
科学性 , 为扩大经方的应用范围及其衍化发展 , 创立和发明
新方提供现代科学依据。因此 , 制作符合临床实际的病证结
合模型并进一步深入研究半夏泻心汤的作用将是我们今后
研究工作的主要方向 。
参考文献:
[ 1]麻春杰 , 米子良 , 云彩麟. 半夏泻心汤对实验性大白鼠胃
运动的影响 [ J] .实用中医药杂志 , 1996, 12(4):31
[ 2]付东 , 陈国志.半夏泻心汤对照射引起小肠运动紊乱的调
节作用 [ J] .中国实验方剂学杂志 , 1996, 2 ( 3 ):21
[ 3]陈国志 , 任华.半夏泻心汤对顺铂引起小肠功能紊乱的调
节作用 [ J] .中药药理与临床 , 1997, 13(4):5
[ 4]魏辉 , 司兆学 , 单罢安 , 等. 加味半夏泻心汤对大鼠胃粘
膜损伤的影响 [ J] .中国中医药科技 , 1998, 5(5):282
[ 5]吴发义 , 顾武军. 半夏泻心口服液对实验性慢性胃炎大
鼠血清 MDA和 SOD的影响 [ J] .中药药理与临床 , 1997,
13(6):14
[ 6]李惠林. 半夏泻心汤对大鼠实验性胃溃疡防治作用的研
究 [ J] .陕西中医学院学报 , 1987, 10(3):11 ～ 17
[ 7]第一军医大学第一附属医院溃疡病科研协作组. 溃疡病
的中医分型及其病理基础探讨 [ J] . 中医杂志 , 1980,
(2):17
[ 8]郑玉兰. 半夏泻心汤治疗胃脘痛 30例 [ J] . 山东中医杂
志 , 1990, (1):25
[ 9]李久成. 半夏泻心汤治疗胃肠疾病. 陕西中医杂志 , 1990,
11 (2):550
[ 10]龙丽敏 , 王广生. 半夏泻心汤加减治疗胃窦胃炎 62例
[ J] .湖南中医杂志 , 1997, 13(1):30
[ 11]冯涛 ,高丽芝 , 刘成德 ,等. 复方半夏泻心汤对慢性萎缩
性胃炎治疗作用的病理形态学研究 [ J] . 中医药学报 ,
1995, (1):31 ～ 32
[ 12]麦燕芳. 半夏泻心汤加味治疗慢性萎缩性胃炎 42例
[ J] .山西中医 , 1997, 13(6):13
[ 13]苏根.半夏泻心汤加减治疗胃炎 、溃疡病疗效观察 [ J] .
实用中医内科杂志 , 1999, 13(2):13
[ 14]应乔麟. 半夏泻心汤保留灌肠治疗慢性结肠炎 29例
[ J] .四川中医 , 1997, 15(4):29
[ 15]潘建华 ,冯冬梅 , 蒋兰矩.半夏泻心汤治疗胃肠节律紊乱
120例 [ J] . 国医论坛 , 1997, 12(6):64
[ 16]陈新开.半夏泻心汤加减治疗肠易激综合征 52例 [ J] .
山东中医杂志 , 1996, 15(3):15
[ 17]姚保泰 ,迟莉丽 , 孙秀荣.辛开苦降法治疗慢性萎缩性胃
炎癌前病变 80例 [ J] . 山东中医学院学报 , 1995, 19
(4):248
[ 18]杨瑞合.半夏泻心汤调治消化道肿瘤三则 [ J] . 陕西中
医 , 1988, (4):171
[ 19]李宇航 ,李澎涛 , 王庆国 , 等.半夏泻心汤及其拆方对慢
性胃溃疡大鼠溃疡灶形态变化的影响 [ J] . 中国中医基
础医学杂志 , 2003, 9( 1) :16 ～ 20
[ 20]李宇航 ,王庆国 , 牛欣 ,等. 半夏泻心汤及其拆方对慢性
胃溃疡大鼠胃粘膜细胞增殖活性的影响 [ J] .北京中医
药大学学报 , 2001, 24(3):30～ 32
[ 21]王庆国 ,李宇航 , 牛欣 ,等. 半夏泻心汤及其拆方对慢性
胃溃疡大鼠表皮生长因子的影响 [ J] .中国中西医结合
急救杂志 , 2001, 8(3):137～ 139
(收稿日期:2005 - 02 - 21 编辑:朱民)
(上接第 63页 )
参考文献:
[ 1] X iao Y B, et a.l C lin ica lObservation on T rea ting 50 C ases of
Lacquer So re W ith Shuodiao o f the Tu jia Nationality D rugs
[ J] . Jovrna l ofM ed icine＆Pharm acy o f ChineseM ino rities,
2001, 7(1):44
[ 2] X iao Y B, e t a.l C linica l Obse rva tion on T rea ting Sore
Caused byG eogenW ith Q ilima[ J] . Chinese Journa l of E th-
nom edicine and E thnopha rmacy, 2002, (8):203
[ 3] Zhao S X, et a.l Colle ctionW ords o f Ch ineseM ate riaM edica
[ M ] . V o lⅢ . Beijing:ChinaM edicinal S cience and Techno l-
ogy Pub lishing H ouse, 1997. 1093
(收稿日期:2004 - 12 - 27 编辑:张金慧)
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