全 文 ： 2009, Vol. 30, No. 12 食品科学 ※分析检测154
高效液相色谱法测定天山花楸中
金丝桃苷的含量
杨玲玲，常军民*，姚 军
(新疆医科大学药学院，新疆 乌鲁木齐 830011)
摘 要：目的：建立天山花楸枝叶中金丝桃苷的含量测定方法。方法：采用HPLC Shim-pack VP-ODS柱(150mm
×4.6mm，5μm)，流动相为乙腈-水(25:75，V/V)，流速为1.0ml/min，柱温为25℃，检测波长为360nm。结
果：金丝桃苷在0.04～0.32mg/ml之间线性关系良好，r＝0.9992，平均回收率99.7%，RSD为2.6%；结论：本
法快速、灵敏、准确、可靠、重复性好，可用于天山花楸药材的质量控制。
关键词：天山花楸；金丝桃苷；高效液相色谱法
HPLC Determination of Hyperoside in Stems and Leaves of Sorbus tianschanica Rupr
YANG Ling-ling，CHANG Jun-min*，YAO Jun
(College of Pharmacy, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, China)
Abatract ：Hyperoside was extracted from stems and leaves of Sorbus tianschanica Rupr with methaol and then subjected to
HPLC analysis. The determination (at 360 nm) was performed on a Shim-pack VP-ODS (150 mm × 4.6 mm, 5 μ ) column (25 ℃)
using aceyonitrile - water (25:75, V/V) as a mobile phase at the flow rate of 1.0 ml/min. A good linearity was obtained within the
range of 0.04 － 0.32 mg and the correlation coefficient was 0.9992. The average recovery for hyperoside was 99.7% and the RSD
was 2.6%. The method is simple, rapid, sensitive, precise, reliable and repeatable and can be applied to the quality control of
stems and leaves of Sorbus tianschanica Rupr as a kind of Chinese medicinal material.
Key words：Sorbus tianschanica Rupr；hyperoside；HPLC
中图分类号： R284.1　 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2009)12-0154-03
收稿日期：2008-09-08
基金项目：新疆维吾尔自治区高校科研计划项目(XJEDU2005I19)
作者简介：杨玲玲(1982-)，女，硕士研究生，研究方向为药物分析。E-mail：muyiling@sina.com
*通讯作者：常军民(1965-)，男，副教授，研究方向为药物分析。E-mail：cjmcjn2471@yahoo.com.cn
天山花楸(Sorbus tianschanica Rupr.)，系蔷薇科
(Rosacea)花楸属(Sorbus)植物(Sorbus tianschanica
Ruper.)[1]。天山花楸嫩枝叶，茎皮和果实常作为维吾尔
医用药，维吾尔名称为Tianxan Qitini，为“花楸”正
品之一。《新疆药品标准》(1980年版)将其收载并规定
为蔷薇科植物Sorbus tianschanica的干燥果实 ，其有
清热利肺、补脾生津、止咳的功效[2]。现代研究表明，
天山花楸主要药效成分为黄酮类和氰苷类化合物[3]。金
丝桃苷具有很好的治疗慢性气管炎、哮喘的作用[4]，是
天山花楸中主要的活性成分、含量高，用于天山花楸
的质量控制专属性强。因此本实验拟建立高效液相色谱
法测定其含量的方法，为评价天山花楸药材质量提供参
考依据。
1 材料与方法
1.1材料与试剂
天山花楸的枝叶样品采自新疆维吾尔自治区昌吉州
米泉市铁仓沟林场，经新疆医科大学生药学教研室帕丽
达教授鉴定为Sorbus tianschanica Ruper.。
金丝桃苷标准品(批号：111521-200303) 中国药品
生物制品检定所。甲醇(色谱纯)；超纯水；其他试剂
均为分析纯。
1.2仪器与设备
LC-20A高效液相色谱仪 日本岛津公司； SPD-
M20A检测器；SIL-20A自动进样器；KQ-200KDE型高
功率数控超声波清洗器(超声功率200W，工作频率60Hz)
昆山市超声仪器有限公司；2-16K sartorius离心机 Sigma
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公司。
1.3方法
1.3.1色谱条件
Shim-pack VP-ODS色谱柱(150mm×4.6mm，5μm)；
流动相为乙腈-水(25:75，V/V)；柱温为25℃；流速为
1.0ml/min；检测波长：360nm。
按上述色谱条件进行实验，金丝桃苷的n=1794.96；
R1=1.74、R2=1.52、T=0.89，符合《中国药典》(2005
版)Ⅰ部附录中理论塔板数、分离度、拖尾因子的规
定。标准品与样品的色谱图见图1。
A.对照品；B.供试品。
图1 金丝桃苷对照品与样品色谱图
Fig.1 HPLC chromatograms of hyperoside standard (A) and
sample (B)
500
400
300
200
100
0
A
m
AU
时间(min)
0 1 2 3 4 5 6 7
金
丝
桃
苷
800
600
400
200
0
B
m
AU
时间(min)
0 2 4 6 8 10
金
丝
桃
苷
1.3.2标准品溶液的制备
精密称取10mg金丝桃苷标准品，加甲醇溶解并定
容于25ml容量瓶中，浓度为40μg/ml，待用。
1.3.3供试品溶液的制备
样品研磨均匀，精密称取5g，置100ml具塞三角
瓶中，加甲醇50ml，60℃超声提取30min，相同条件
提取三次，合并提取液，4000r/min离心15min，取上
清液将甲醇挥尽，后用水溶解，再用乙醚萃取，最终
将水溶液浓缩后用甲醇定容至10ml，摇匀，再精密量取
1ml稀释定容至10ml，摇匀，即的供试品溶液，备用。
2 结果与分析
2.1线性关系考察
精密吸取金丝桃苷标准贮备液1、2、4、6、8ml，
分别置于10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。
按1.3.1节色谱方法，取10μl注入液相色谱仪分别测定，
以峰面积为横坐标、浓度为纵坐标、进行线性回归，
回归方程为y=－2.575+5.748×10-2x，r=0.9992，实验表
明，金丝桃苷在0.04～0.32mg/ml范围内呈良好的线性关
系。最低检测浓度为42ng/ml(S/N=3)。
2.2精密度实验
精密吸取金丝桃苷标准溶液，按1.3.1节色谱条件
测定，取10μl注入液相色谱仪，重复5次，测定峰
面积，其RSD为1.2%(n＝5)，表明精密度良好(表1)。
2.4重复性实验
取同一批天山花楸5份，每份5.0g，按1.3.3节方
法提取样品，含量按1.3.1节的方法重复测定，以外标
法计算其RSD为2.6%(n=5)，结果见表3。
序号 峰面积 峰面积平均值 RSD(%)
1 6352.12
2 6412.39
3 6321.29 6335.75 1.2
4 6377.52
5 6215.44
表1 金丝桃苷精密度实验
Table 1 RSD of precision
序号 峰面积 峰面积平均值 RSD(%)
1 2729.25
2 2826.84
3 2792.11 2755.43 1.8
4 2709.84
5 2719.09
表2 金丝桃苷稳定性实验
Table 2 RSD of stability
表3 金丝桃苷重复性实验
Table 3 RSD of repeatability
样品(g) 金丝桃苷含量(mg) 含量平均值(mg) RSD(%)
5.0103 1.579
4.9923 1.533
5.0038 1.569 1.547 2.6
5.0096 1.573
5.0079 1.482
2.3稳定性实验
取同一供试品溶液，分别于2、4、8、10h进样，
按1.3.1节色谱条件测定，所测峰面积的RSD为1.8%，
表明供试品溶液在10h内稳定性良好(表2)。
2.5回收率实验
精密称取样品粉末5g，共6份，分别加入标准品
溶液，按供试品溶液的制备方法制备测试溶液，经一
次稀释定容至10ml并测定，计算回收率，结果见表4。
计算得金丝桃苷的平均回收率为99.7%，RSD = 2.5%。
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2.6样品测定
样品 金丝桃苷含量 加入量 测得量 回收率 平均回收率 RSD
(g) (mg) (mg)(mg) (%) (%) (%)
5.00691.411 0.4121.824100.2
5.01031.579 0.4121.98999.5
5.00381.569 0.8242.395100.299.7 2.5
5.00961.573 0.8242.38898.9
4.98821.528 1.6483.17499.9
4.99231.533 1.6483.17699.7
表4 金丝桃苷回收率实验
Table 4 Average recovery for hyperoside in sample spiked and
the RSD
实验号 1 2 3 4 5
样品(g) 5.00695.01035.00964.98825.0038
金丝桃苷含量(mg/g)2.983.153.143.093.13
RSD(%) 2.3
表5 样品金丝桃苷含量测定结果(n＝ 5)
Table 5 Parallel determination results of hyperoside in 5 g of sample
为3.10mg/g。
3 结 论
本实验采用HPLC定量分析方法测定天山花楸枝叶
中金丝桃苷的含量，测定条件为流动相乙腈-水(25:75，
V/V)、流速1.0ml/min、柱温25℃、检测波长360nm，
此色谱条件下金丝桃苷在0.04～0.32mg/ml之间线性关系
良好(r＝0.9992)，平均回收率99.7%，RSD=2.6%，分
离效果较好。金丝桃苷含量高达3.10mg/g，充分说明
天山花楸枝叶中黄酮含量较高，且本法快速、灵敏、
准确、可靠、重复性好，可用于天山花楸枝叶药材的
质量控制。
参考文献：
[1]中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志: 第三十六卷[M].
北京: 科学技术出版社, 1974:284
[2]新疆植物志编辑委员会. 新疆植物志: 第二卷(第二分册)[M]. 乌鲁
木齐: 新疆人民出版社, 1973: 62
[3]赵永昕, 帕提古丽·马合木提. 新疆天山花楸不同药用部位总黄酮
的提取及其定量测定[J]. 食品科学, 2005, 26(9): 414-415.
[4]陶遵威. 金丝桃甙药理作用研究进展[J]. 天津药学, 2002,14(2): 14-
16.
精密称取样品粉末5g(精度0.0001g)，按1.3.3节方
法提取，并按1.3.1节色谱方法进行测定，以外标法
计算金丝桃苷的含量，结果见表5，得样品平均含量