全 文 ：第 39卷　第 3期 陕西师范大学学报(自然科学版) Vol.39　N o.3　2010年 5月 Journal of Shaanxi No rmal U niversi ty (Natural Science Edit ion) May.2011　
文章编号:1672-4291(2011)03-0045-03
收稿日期:2011-01-18
基金项目:陕西省自然科学基金资助项目(2009JM2011);陕西师范大学研究生创新基金资助项目(2008CXB009).
作者简介:陈战国 , 男 ,副教授 , 主要从事有机合成及药物分析方面的研究.E-mail:chzhg@snnu.edu.cn.
太白泡沙参中薯蓣皂苷元含量的测定
陈战国 , 　王英杰 , 　李鹏程 , 　闻　化 , 　周继梅 , 　李文丽
(陕西师范大学 化学与材料科学学院 , 陕西省大分子科学重点实验室 , 陕西西安 710062)
摘　要:以高氯酸-香荚兰醛为显色剂 , 以冰醋酸为溶剂 ,建立了光度法定量测定太白泡沙参中薯
蓣皂苷元含量的新方法.结果表明 ,回归方程为Y =3.011 7X -0.003 4 , 相关系数 r=0.999 8 ,线
性范围 0.050 ～ 0.298 mg/mL.利用该方法对太白泡沙参中薯蓣皂苷元含量进行了定量测定 ,薯蓣
皂苷元含量高达 8%左右 ,7次回收率平均值为 100.2%, RSD=1.03%.
关键词:薯蓣皂苷元;太白泡沙参;含量测定
中图分类号:O657.3　文献标志码:A
The determination of diosgenin in the root of the
A .potaninii Korsh from Taibai Mountain in China
CHEN Zhan-guo , WANG Ying-jie , LI Peng-cheng , WEN Hua , ZHOU Ji-mei , LI Wen-li
(College o f Chemist ry and M ate rials Science , Shaanxi No rmal Universi ty;
Key Labotato ry fo r M acromolecular Science o f Shaanxi Province ,
Shaanx i No rmal Universi ty , Xi′an 710062 , Shaanxi , China)
Abstract:Pho tometric me thod for the de termination of diosg enin in the root of the A.potaninii
Korsh f rom Taibai M ountain in China has been developed using perchloric acid-vanillin as colour-
developing agent and g lacial acetic acid as solvent.T he experiment results indicated that the
reg ression equat ion of the method is Y =3.011 7X -0.003 4(r=0.999 8), and the linear range is
found to be 0.050 ～ 0.298 mg/mL.The content of diosg enin in the roo t of the A.potaninii
Korsh f rom Taibai M ountain in China has been accurately determined by using this method.The
content of dio sgenin is up to 8 %.The even recovery (n=7)is 100.2%and the relativ e standard
deviation is less than 1.03%.
Key words:dio sgenin;A.potanini i Korsh f rom Taibai M ountain in China;determination of
content
　　薯蓣皂苷元以糖苷的形式广泛分布于薯蓣科 、
蔷薇科 、石竹科等植物的根茎中 ,仅薯蓣属植物就有
138 种 , 但薯蓣皂苷元在 1%以上的种数只占
26.5%,有工业利用价值的只占 9%～ 11%.由于植
物资源分布的原因 ,薯蓣皂苷元的主要生产国为中
国和墨西哥 ,约占世界总产量的 90%.我国集中了
多种具有工业开发价值的薯蓣属植物 ,如:黄姜的薯
蓣皂苷元的质量分数可达 1.1%～ 16.15%;穿龙薯
蓣 ,质量分数平均约 1.8%;葫芦巴的种子 ,经提胶
后质量分数约 1%[ 1] .薯蓣皂苷元不仅是重要的医
药化工原料 ,其本身还具有生物活性 ,引起了多个领
域研究者的广泛关注 ,因此寻找新的薯蓣皂苷元的
天然资源就显得尤为重要.近年来 ,本课题组对太白
泡沙参的化学成分研究进行了相关报道 [ 2-4] ,并且
发现太白泡沙参除了含有较高多糖成分以外 ,还含
有具有生物活性的薯蓣皂苷元成分.为了确证太白
泡沙参是否具有提取薯蓣皂苷元的工业价值 ,我们
开展了太白泡沙参中薯蓣皂苷元的定量分析研究.
DOI :10.15983/j.cnki.jsnu.2011.03.006
46　 陕西师范大学学报(自然科学版) 第 39卷
薯蓣皂苷元的定量测定方法有多种.皂素厂家
由于受仪器条件限制 ,多用重量法粗略测定薯蓣皂
苷元的质量分数.有条件的厂家和实验室多用分光
光度法[ 5-6] ,该法利用甾体化合物的共同结构环戊烷
多氢菲可以发生 Liebermann-Barcharad 反应产生
颜色 ,根据吸光度同薯蓣皂苷元浓度线性相关进行
测定.除此之外 ,还可以利用标准品作对照 ,用薄层
扫描法[ 7-8] 、旋光法[ 9] 、液相色谱法[ 10] 、气相色谱
法[ 11]准确测定薯蓣皂苷元的质量分数.本文以太白
泡沙参为研究对象 ,参照文献[ 6]建立了太白泡沙参
中薯蓣皂苷元的分光光度定量测定方法.以高氯酸-
香荚兰醛为显色剂 , 以冰醋酸为溶剂 ,在 530 nm 处
对薯蓣皂苷元含量进行分光光度法测定.实验结果
表明 , 本法操作比较简单 , 皂苷元从植物中提取后
不需要分离精制可直接测定 , 在一定程度上具有专
属性 ,灵敏度高 , 重现性好 ,皂苷元在0.050 ～ 0.298
mg/mL 范围内呈良好的线性关系.
1　实验
1.1　仪器与试剂
U —1901 UV-VIS Spect ropho tome ter (北京谱
析通用仪器有限责任公司);石油醚(60 ～ 90℃),分
析纯;香荚兰素分析纯;冰醋酸 ,分析纯;浓硫酸 ,分
析纯;标准薯蓣皂苷元 ,由陕西省安康地区制药厂质
量检验科提供.
1.2　对照品溶液配制
精确称量 60℃干燥过的薯蓣皂苷元50.00 mg ,
用少量石油醚溶解然后用石油醚定溶于 100 mL 容
量瓶中 ,即得对照品溶液(0.5 mg/mL).放入冰箱
备用.
1.3　最大吸收波长的确定
分别取不同体积标准皂苷元溶液 3份 ,显色后
定溶于 10 mL 的比色管中 ,用紫外分光光度计在
400 ～ 700 nm 波长范围内扫描 ,确定最大吸收波长
为 530 nm ,实验结果见图 1.
1.4　储备液的制备
准确称取经 60℃下干燥后粒度为 60目的太白
泡沙参根粉5.000 0 g ,先用去离子水37℃浸泡24 h
后 ,再加浓硫酸至酸的质量分数为 3%,90℃水解 4
h ,用去离子水洗至中性 , 60℃减压干燥.把干燥过
的残渣放入索氏提取器中 ,加入 150 mL 石油醚(60
～ 90℃)及适量活性炭 ,水浴加热回流.按文献[ 12]
检验 ,回流 12 h.滤出活性炭 ,用石油醚洗涤 3次 ,以
确保活性炭中吸附的皂苷元完全洗脱下来 ,检验方
图 1　皂苷元溶液的紫外光谱图
Fig.1　The UV absorption spectra of the diosgenin
solution in differenc concentration
法同上.合并滤液及洗液 ,定溶于 250 mL 容量瓶中
备用.
2　结果与讨论
2.1　显色条件考察
2.1.1　温度对吸光度值的影响　取 3.0 mL(0.5
mg/mL)标准皂苷元溶液 ,在不同温度下按实验方
法分别测定显色的吸光度值.由表 1可知 ,本法显色
的最佳温度为 70℃.
表 1　温度对吸光度的影响
Tab.1　The effect of reaction temperatures
on the absorption value
t/ ℃ 50 60 70 80 90 100
A 0.264 0.432 0.451 0.457 0.461 0.463
2.1.2　显色时间对吸光度值的影响　显色时间包
括薯蓣皂苷元与香荚兰醛-高氯酸加热到 70℃后的
保温时间和冷却到室温的放置时间.取 3.0 mL(0.5
mg/mL)标准皂苷元溶液 ,加入香荚兰醛-高氯酸后
70±0.5℃条件下显色 ,在不同的显色时间下测定吸
光值 ,结果如表 2.从表 2中可以得知 ,本方法测定
的最佳显色时间为 20 min.
表 2　显色时间对吸光度的影响
Tab.2　The effect of coloration
times on the absorption value
时间/min 10 15 20 25 30
A 0.392 0.437 0.451 0.451 0.451
2.2　标准工作曲线绘制
分别移取对照品溶液 0.5 、1.0 、2.0 、3.0 、4.0 、
5.0 、6.0 mL 于 7个比色管中 ,水浴挥发掉溶剂.分
别加入新配制的 5%香荚兰醛冰醋酸溶液 0.20
mL ,高氯酸 0.80 mL ,在 70℃水浴中显色 20 min ,
冰水浴冷却 ,加冰醋酸定溶于 10.00 mL.冷却至室
　　第 3期 陈战国 等:太白泡沙参中薯蓣皂苷元含量的测定 47　
温后 ,用紫外分光光度计在波长为 530 nm 处测定 其吸光度值 ,试剂作参比液 ,实验结果见表 3.
表 3　质量浓度与吸光度的关系
Tab.3　The relation between concentration and absorption value
c/(mg·m L-1) 0.025 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
A 0.072 0.147 0.297 0.448 0.603 0.755 0.907
　　以质量浓度对吸光度进行线性回归 ,得回归方
程:Y =3.011 7X -0.003 4相关系数 r=0.999 8 ,
线性范围 0.050 ～ 0.298 mg/mL .
2.3　精密度试验
取 3.0mL(0.5 mg/mL)标准皂苷元溶液 7份 ,
按 2.2项下操作分别测定吸光度值 ,结果为:0.447 ,
0.456 ,0.450 , 0.453 , 0.449 , 0.453 , 0.450 ,平均值
0.451 , RSD=0.67%.
2.4　太白泡沙参中皂苷元含量测定
吸取储备液各 1 mL 分别放入 7支比色管中 ,
挥发掉溶剂 ,按绘制标准工作曲线项下操作测定其
吸光度值 ,再利用回归方程 ,得试液中皂苷元的浓
度 ,按下式折算成原植物中的皂苷元的含量:太白泡
沙参根中的皂苷元的含量=c×10×V 1/(V2 ×W ×
10
3)×100%,其中 c为显色测定液中皂苷元的浓度
(mg/mL),V 1 为提取液定容后的体积(mL), V2 为
测定时所取的储备液体积(mL),W 为原药材的重
量.实验测定结果见表 5 , 7 次测定后的 RSD =
0.46%.
表 4　太白泡沙参皂苷元含量的测定
Tab.4　Results of diosgenin in samples
determined by the proposed method
实验号 A
测试液中
皂苷元浓度/
(mg·mL -1)
原植物中
皂苷元含
量/ %
X
1 0.485 0.162 8.1
2 0.489 0.163 8.2
3 0.492 0.164 8.2
4 0.490 0.164 8.2 8.2%
5 0.487 0.163 8.2
6 0.486 0.162 8.1
7 0.489 0.163 8.2
　　　　　n=7.
2.5　重复性试验
取 5.000 0 g 同一批太白泡沙参药材 5份 ,按
2.4项下操作 ,重复 5次测得太白泡沙参根中的皂
苷元的含 量结果如下:8.3%、 8.1%、 8.2%、
8.2%、 8.3%,平均值为 8.2 %, RSD=1.06%.
2.6　回收率
为了考证方法的准确性 ,分别精密称取同批太
白泡沙参根粉 1.000 0 g , 2.000 0 g , 3.000 0 g ,
4.000 0 g , 5.000 0 g , 6.000 0 g , 7.000 0 g 共 7
组.向上述 7组样品中分别加入标准皂苷元各 80.0
mg ,按 2.4 项下操作测定各组中皂苷元的总量 ,计
算回收率 ,结果见表 4.由表 4可知 ,回收率平均值
为 100.2%(n=7),RSD=1.03%.
表 5　回收率实验结果
Tab.5　Results of recovery test
组别
各组样品
皂苷元的
量/(mg)
加入皂苷
元量/
(mg)
测得量/
(mg)
回收率/
%
1 82.0 80.0 160.2 98.9
2 164 80.0 240.3 98.5
3 246 80.0 329.6 101.1
4 340 80.0 426.3 101.5
5 410 80.0 487.6 99.5
6 492 80.0 575.4 100.6
7 574 80.0 661.9 101.2
　　　　n=7.
2.7　讨论
薯蓣皂苷元在 C-3位有羟基 , ■5(6)有双键 ,在
与高氯酸-香荚兰醛反应时 C-3位有羟基脱水 ,形成
共轭体系 ,因此特征吸收位置红移到 530 nm.而其
他甾体和萜类化合物无此结构 ,特征吸收远小于
530 nm.因此 ,本方法选择性好 ,测定薯蓣皂苷元时
无需分离.
3　结论
以高氯酸-香荚兰醛为显色剂 , 以冰醋酸为溶
剂 ,在 530 nm 处对太白泡沙参中薯蓣皂苷元含量
进行了测定 ,建立了太白泡沙参中薯蓣皂苷元的分
光光度定量测定方法.实验结果表明 , 本法操作简
单 , 皂苷元从植物中提取后不需要分离精制可直接
测定 , 在一定程度上具有专属性 ,灵敏度高 , 重现
性好.经测定 ,太白泡沙参中薯蓣皂苷元的含量高达
8%左右.这一结果不仅为太白泡沙参具有很好的保
健作用提供了理论依据 ,结合我们前期的工作 ,可以
预见太白泡沙参可能成为身价倍增的经济作物.
(下转第 61页)
　　第 3期　纪砚耘 等:丹参铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基因的克隆与生物信息学分析 61　
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　　(上接第 47页)
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