全 文 ：　收稿日期：２０１３－０４－０２　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　通讯作者：李乐
　作者简介：张雅婷，女，石河子大学药学院２０１１级药学２班
　△ 基金项目：石河子大学第十一期大学生研究训练计划（ＳＲＰ２０１３０２４５）；石河子大学优秀青年科技人才培育计划立项项目
（２０１２ＺＲＫＸＹＱ２１
　　文章编号：１００４－４３３７（２０１３）０４－０４６０－０２　　　中图分类号：Ｒ９２７．２　　文献标识码：Ａ · 药学研究 ·
高效液相色谱法测定天山花楸中表儿茶素含量△
张雅婷　　顾晓娟　　马亚菠　　李　乐
（石河子大学药学院 　石河子８３２００２）
摘　要：　目的：建立高效液相色谱法测定天山花楸中表儿茶素的含量。方法：采用Ｃ１８色谱柱，检测波长２８０ｎｍ，流动相为乙腈：
水（２０：８０），流速为１ｍｌ·ｍｉｎ－１。结果：测得天山花楸中表儿茶素的含量为１．９６％。结论：该方法准确，重现性好，能为天山花楸的进
一步研究提供理论依据。
关键词：　高效液相色谱法；　表儿茶素
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－４３３７．２０１３．０４．０３４
　　天山花楸为蔷薇科（Ｒｏｓｅｃｅａｅ）花楸属（Ｓｏｒｂｕｓ）植物，主要
产新疆各地。该属植物具有重要的药用价值及经济价值，其
中一些植物由于有密集的花序也常作观赏用。《新疆中草药
手册》记载：“果实：味甘苦，性平，无毒。嫩枝和皮：味苦，性
寒，无毒。清肺止咳，补脾生津。治肺结核，哮喘咳嗽［１］”。课
题组在前期研究中，在天山花楸枝叶部分分离出表儿茶素单
体。而在一些研究报道中，表儿茶素对一些疾病具有抑制作
用，包括糖尿病等。本实验通过 ＨＰＬＣ法对天山花楸中的表
儿茶素含量进行测定，对天山花楸的抗糖尿病作用研究提供
一定的理论依据。
１　材料与方法
１．１　仪器与试药
美国ＨＰ１１００高效液相色谱仪；德国Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ　ＢＰ２１１Ｄ十
万分之一电子天平；表儿茶素对照品为中国药品生物制品检
定所提供；花楸枝叶采自玛纳斯林场，经药学院高级实验师陈
玉怀鉴定为天山花楸，采摘时间分别为２０１１０９０１，２０１１０８１５，
２０１００８０７，２０１００８０１；实验所用甲醇、乙腈为色谱级，其余均为
分析级。
１．２　方法
１．２．１　检测色谱条件　十八烷基硅烷键合硅胶填充柱；乙腈：
水（２０：８０）为流动相；检测波长为２８０ｎｍ，保留时间９分钟。
１．２．２　表儿茶素标准品溶液的配制　取在６０℃干燥２小时
的表儿茶素标准品约１５ｍｇ，精密称定，溶解并定量稀释制成
每ｌｍｌ中约含表儿茶素０．４ｍｇ的溶液，精密量取５ｍｌ，置５０ｍｌ
量瓶中，用流动相稀释至刻度，作为对照品溶液［２］。
１．２．３　花楸供试品溶液配制　取花楸枝叶５ｇ，粉碎，精密称
取适量，置２５ｍｌ具塞锥形瓶中，６０％乙醇定容，３７℃超声２０
分钟，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液５ｍｌ，置５０ｍｌ量瓶
中，用流动相稀释至刻度，作为供试品溶液。
２　结果
２．１　线性关系考察
精密吸取表儿茶素对照品溶液１，５，１０，１５，２０μｌ，按照，
“１．２．１”色谱条件进样，重复进样５次取均值，以进样量为横
坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，得标准曲线。线性回归
方程为：Ｙ＝－１．２７５＋２３５９．４２　Ｘ，相关系数ｒ＝０．９９９８，ｎ＝５，
线性范围为０．０４～０．８μｇ。
２．２　稳定性及精密度试验
精密吸取同一浓度供试品溶液１０μｌ，于０，６，１２，１８，２４ｈ
进行测定，结果表明样品稳定性良好，２４ｈ内峰面积基本不变，
ＲＳＤ为０．４％（ｎ＝５）。吸取表儿茶素同一浓度对照品溶液，
重复进样６次，峰面积ＲＳＤ为０．９％。
２．３　回收率
表儿茶素的平均回收率为９８．７％，ＲＳＤ为１．２５％。
２．４　样品测定
取４批天山花楸样品按照１．２．２项下方法制备供试品
溶液，取供试品溶液和对照品溶液各１０ｕｌ，按“１．１．２”色谱条
件记录色谱图。测量对照品和供试品待测成分的峰面积，按
外标峰面积法计算含量，计算后得含量为１．９６％，结果见表
１。重复进样，峰面积ＲＳＤ为０．３％，结果表明该方法重复性
良好。加样回收率为９９．５２％～９９．７９％。
表１　天山花楸中表儿茶素含量测定（ｎ＝３）
批号 表儿茶素／ｍｇ．ｇ－１ 百分含量％ ＲＳＤ
２０１１０９０１　 １８．９８　 １．８９　 ０．４
２０１１０８１５　 １９．２７　 １．９３　 １．２
２０１００８０７　 ２０．０３　 ２．００　 １．３
２０１００８０１　 ２０．１２　 ２．０１　 １．４
·０６４·
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍａｔｈｅｍａｔｉｃａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　 Ｖｏｌ．２６　　 Ｎｏ．４　　２０１３
　收稿日期：２０１３－０３－３１
　作者简介：程颖（１９７８－），女，湖北武汉人，研究生在读，儿科主治医生，主要研究方向：医院感染学
檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
。
３　讨论
本实验采用高效液相色谱法测定天山花楸中的表儿茶素
含量，以２８０ｎｍ为测定波长，灵敏度高，准确度和精密度好，操
作简单，色谱峰分离度良好，回收率较高。在流动相选择过程
中，曾尝试甲醇，水，乙腈等不同溶剂不同配比，在综合考虑保
留时间、拖尾因子、理论塔板数、峰形等因素后，最终以乙腈：
水（２０：８０）分离效果较好，故选择该组流动相为最佳流动相。
本方法测得天山花楸中表儿茶素含量１．９６％，本方法采用外
标法测定，改变流动相配比和测定波长，结果准确，可靠，可以
为天山花楸的进一步研究提供理论依据。
参　考　文　献
１　新疆植物志编辑委员会．新疆植物志．第２卷．乌鲁木齐：新疆人民
出版社，１９７３．
２　王淑敏，李惠琳，刘志强，等 ．儿茶药材中儿茶素和表儿茶素的高
效液相色谱法分析研究．时珍国医国药，２００６，１７（４）：４９０．
　　文章编号：１００４－４３３７（２０１３）０４－０４６１－０２　　　中图分类号：Ｒ９６９．３　　文献标识码：Ａ · 药学研究 ·
２００９～２０１１年儿科常见真菌及耐药性分析
程　颖
（湖北省妇幼保健院 院感办 　武汉４３００７０）
摘　要：　目的：掌握２００９年１月～２０１１年１２月儿科住院患儿真菌病原学分布及药物敏感情况，为儿科医师的治疗及疾病预防
提供依据。方法：常规分离、培养并鉴定细菌，采用纸片扩散法对细菌进行药敏试验。结果：共分离真菌１０３２株，其中白假丝酵母菌
７６７株，占７４．３２％；热带假丝酵母菌６３株，占６．１０％，清酒假丝酵母菌３０株，占２．９１％。白色假丝酵母菌和热带假丝酵母菌对两性
霉素Ｂ均敏感，而对其他抗真菌药物均有不同程度耐药。结论：１０９３株真菌中白色念珠菌的比例最高，其次为热带念珠菌。药敏检
测结果显示两性霉素Ｂ的敏感率最高，氟康唑和伏立康唑较好。
关键词：　真菌；　儿科；　耐药性
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－４３３７．２０１３．０４．０３５
　　由于广谱抗菌药物在儿科临床的广泛使用，真菌感染的
现象日益严重，因此，对真菌耐药监测资料及时准确地汇总分
析，能为临床医生提供合理应用抗真菌药物的参考。笔者对
本院２００９年１月１日～２０１１年１２月３１日住院儿科患者真
菌感染种类及耐药情况进行监测分析，现报告如下。
１　资料与方法
１．１　菌株来源
本院２００９年１月１日～２０１１年１２月３１日儿科住院患
者各类标本分离的真菌菌株。同一患儿连续分离出相同菌
株，取首次分离菌株。非无菌部位标本（如痰液）只收集致病
菌株，按统一方案进行抗菌药物敏感性试验。
１．２　细菌鉴定及药敏试验
细菌鉴定采用法国生物梅里埃的 ＶＩＴＥＫ２－Ｃｏｍｐａｃｔ全自
动细菌鉴定仪进行细菌的培养鉴定，药敏试验采用纸片扩散
法，药敏结果按照美国临床实验室标准化研究所（ＣＬＳＩ）最新
版本规定的折点进行操作和判断。
１．３　统计方法
数据分析采用 ＷＨＯＮＥＴ５．４软件进行数据处理分析。
２　结果
２．１　病原菌分布
共分离真菌１０３２株，３年间依次分离真菌３０４株、３２７株
和４０１株。真菌构成如表１所示。
表１　２００９年１月～２０１１年１２月常见真菌的构成比（％）
真菌
２００９
株数 构成比
２０１０
株数 构成比
２０１１
株数 构成比
合计
株数 构成比
白假丝酵母菌 ２３３　 ７６．６４　 ２６０　 ７９．５１　 ２７４　 ６８．３３　 ７６７　 ７４．３２
热带假丝酵母菌 １４　 ４．６１　 １７　 ５．２０　 ３２　 ７．９８　 ６３　 ６．１０
清酒假丝酵母菌 ９　 ２．９６　 ６　 １．８３　 １５　 ３．７４　 ３０　 ２．９１
其他 ４８　 １５．７８　 ４４　 １３．４６　 ８０　 １９．９５　 １７２　 １６．６７
合计 ３０４　 １００．０　 ３２７　 １００．０　 ４０１　 １００．０　 １０３２　 １００．０
·１６４·
数理医药学杂志 ２０１３年第２６卷第４期