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高效液相色谱法对天山花楸不同提取部位槲皮素含量的测定



全 文 :471※分析检验 食品科学 2006, Vol. 27, No. 11
收稿日期:2006-08-01 *通讯作者
基金项目:国家自然基金资助项目(30550001)
作者简介:赵永昕(1980-),女,硕士研究生,主要从事植物有效成分分析。
高效液相色谱法对天山花楸不同提取部位
槲皮素含量的测定
赵永昕,帕提古丽·马合木提,买合布白·阿不都热依木,胡开峰,阿不都拉·阿巴斯*
(新疆大学生命科学与技术学院,新疆 乌鲁木齐 830046)
摘 要:利用高效液相色谱法对天山花楸枝、叶、果实等不同提取部位进行槲皮素含量的测定,色谱柱为Kromasil-
C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸(60:40),检测波长为368nm,流速为0.7ml/min,结果表
明该方法可提供简便准确的含量测定方法。
关键词 :天山花楸;槲皮素;高效液相色谱;含量测定
Determination of Quercetin in the Different Part of the Sorbus tianschanicaL.by HPLC
ZHAO Yong-xin,PATIGUL Mahmut, AHBUBA Abdureyim,HU Ka -feng,ABDULLA Abbas*
(College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi 830046, China)
Abstract :HPLC was used to determine the content of quercetin in the different part of the Sorbus tianschan ca L. A Komasil-
C18(4.6mm×250mm, 5μ )was used mobile phase, flow rate being 0.7ml/min, detecting wavelength being 368nm, and the method
is quick and simple with good repetition can be used for quality control.
Key words:Sorbus tianschanica L.;quercetin;HPLC;content determination
中图分类号:Q949.751.8 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2006)11-0471-03
天山花楸(Sorbus tianschanica L.)是蔷薇科花楸属植
物,高约3~8m的落叶灌木或小乔木[1]。维吾尔民族和
哈萨克民族民间常以天山花楸的嫩枝、叶和果实入药,
用于治疗肺结核、哮喘、咳嗽、胃炎、胃痛等疾病。
天山花楸其功能主治为清热利肺、补脾生津、止咳、
治疗肺结核、哮喘、和VA、VC缺乏症[ 2 ]。临床上
也报道,天山花楸对呼吸系统疾病的咳痰哮喘等症有
一定的疗效[3],用于治疗慢性气管炎、肺结核、水肿
等症[4]。经研究发现天山花楸的不同提取部位枝、叶、
果实中均含有较高的黄酮类化合物。因高效液相色谱仪
对于单一组分的含量测定具有速度快,灵敏度高,重
复性好等明显优势,在新药开发中,有效部位的含量
测定方法选择的科学性对含量准确性至关重要的。因此
本研究利用高效液相色谱法对样品中槲皮素含量进行测
定[5],以槲皮素做标准品,配制成不同浓度的溶液,
利用HPLC以色谱峰面积对浓度作回归曲线,得标准
曲线,通过与对照品比较计算,拟合紫外图谱进行识
别[6],得到天山花楸不同提取部位槲皮素的含量。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1植物材料
天山花楸采自新疆乌鲁木齐南山东白杨沟,经新疆
大学生命科学与技术学院阿不都拉·阿巴斯教授鉴定为
蔷薇科花楸属天山花楸(Sorbus tianschanica L.)。
1.1.2主要仪器及试剂
高效液相色谱仪:美国安捷伦HP1100,DAD二极
管阵列检测器。
1.1.3主要试剂
槲皮素对照品 中国药品生物制品检定所;所用试
剂均为分析纯。
1.2方法
1.2.1色谱条件 色谱柱为Kromasil C18(4.6mm×
250mm)色谱柱,柱温为室温,流动相为甲醇-0.4%磷
酸(60:40),流速为0.7ml/min,检测波长为368nm。
2006, Vol. 27, No. 11 食品科学 ※分析检验472
1.2.2标准曲线的制备精密称取对照品槲皮素5mg,
定容在10ml的容量瓶中,配置成每1ml含0.5mg的槲皮
素标准溶液。准确吸取对照品溶液0.025、0.05、0.075、
0.125、0.175μg[7],按上述的色谱条件测定,以进样量
C为横坐标,峰面积A为纵坐标,绘制标准曲线[8],回
归方程为A=9405.76C-2. 21,r=0.9999。槲皮素在
0.025~0.175μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。
1.2.3供试品溶液的制备 精确称取天山花楸的枝、叶、
果实各1.0g,首先加入100ml石油醚进行索氏提取[9],以
除去脂溶性色素的干扰,放冷,然后加入7 0 %甲醇
100ml,水浴提取3h,趁热过滤,所得的提取液用甲
醇定容至100ml,快速冷却,从中取出50ml加入盐酸
10ml,加热30min,放冷,定容至100ml,过0.45μm
微孔滤膜,即得供试品溶液[10]。
1.2.4样品含量的测定分别精密称取供试品溶液,按
照标准品的色谱条件进行测定,结果如表1~3。
进样量(μl) 峰面积 含量(mg/ml)平均值(mg/ml)
20 150.36 0.001626
20 154.44 0.001670 0.001652
20 154.40 0.001660
表1 天山花楸枝中槲皮素含量的测定结果
Table 1 Quercetin content of branch of Sorbus tianschanica
进样量(μl) 峰面积 含量(mg/ml)平均值(mg/ml)
5 1109.25 0.02364
5 1112.64 0.02371 0.02368
5 1111.85 0.02370
表2 天山花楸叶中槲皮素含量的测定结果
Table 2 Quercetin content of leaf of Sorbus tianschanica
进样量(μl) 峰面积 含量(mg/ml)平均值(mg/ml)
20 924.2 0.004927
20 925.42 0.004933 0.004943
20 932.5 0.004970
表3 天山花楸果实中槲皮素含量的测定结果
Table 3 Quercetin content of fruit of Sorbus tianschanica
473※分析检验 食品科学 2006, Vol. 27, No. 11
2 结果与分析
2.1结果
按照标准曲线,计算得到天山花楸枝中槲皮素含量
为0.033%,叶中槲皮素含量为0.47%,果实中槲皮素含
量为0.099%。
2.2讨论
用高效液相的方法测天山花楸枝叶、果实中槲皮素
的含量,结果表明枝中槲皮素含量最少,而叶中含量
最高。且含量相差较大,推测可能是因为天山花楸枝
叶、果实中黄酮类化合物存在形式不同的结果。
参考文献:
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1998, 13(2): 10.
[5] 孙斌, 翟伟青, 张晓玲. 高效液相色谱法测定沙棘籽渣中黄酮苷元
含量. 中国药学杂志[J].
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[7] 仲英, 杨尚军, 王菊, 等. 高效液相色谱法测定山渣叶总黄酮中牡荆
素含量[J]. 时珍国医国药, 2000, 11(10): 871-872.
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[J]. 色谱, 1994, 12(5): 384.
采用反相C18-HPLC分离天然红心鸭蛋中
红色类胡萝卜素的异构体
刘良忠1,2,张声华2,石嘉怿3,魏泽义4
(1.武汉工业学院食品学院,湖北 武汉 430023; 2.华中农业大学食品科技学院,湖北 武汉 430070;
3.长江大学生命科学学院,湖北 荆州 434103;4.武汉市疾病预防控制中心,湖北 武汉 430000)
摘 要:采用5μm,25cm×4.6mm ODS RP-C18柱,0.5ml/min流速,5μl进样量,流动相为甲醇-水(99.5:0.5V/V),
检测波长480nm的条件下,18℃柱温,天然红心蛋中的红色类胡萝卜素可以被分离出五个分离峰,经MS检测,
五个分离峰具有相同的分子量。结果表明:采用上述条件,可以有效地分离天然红心蛋中的红色类胡萝卜素的同
分异构体。
关键词:C18-HPLC;MS 分离;类胡萝卜素;天然红心鸭蛋
Separation of the Isomers of Red Carotenoid in Nature Red Yolk with Reverse-phase C18-HPLC
LIU Liang-zhong1,2,ZHANG Sheng-hua2,SHI Jia-yi3,WEI Ze-yi4
(1.College of Food Science and Technology, Wuhan Polytechnology University, Wuhan 430023, China;
2.College of Food Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China;
3.College of Life Science, Yangtze University, Jingzhou 434103, China;
4.Wuhan Disease Prevent and Control Center, Wuhan 430020, China)
Abstract:The red carotenoid was separated into 5 peaks by HPLC with 5μm,25cm×4.6mm ODS RP-C18 column, flow
phase: methanol-water(99.5:0.5 V/V), flow velocity: 0.5ml/min, sample size: 5μl, determina ing wavelength 480nm, column
收稿日期:2006-03-31
作者简介:刘良忠(1963-),男,教授,博士,研究方向为功能食品与食品生物技术。