全 文 ：·52· Chinese Journal of Information on TCM Feb.2009 Vol.16 No.2
高效液相色谱法测定复方蛇床酊中蛇床子素的含量
石继连 1,2,何 群 2,杨梓懿 2,刘平安 2
(1.北京中医药大学中药学院,北京 100102；2.湖南中医药大学药学院,湖南 长沙 410208)
摘要：目的 建立复方蛇床酊中蛇床子素含量的高效液相色谱测定方法。方法 采用 Hypersil ODS 色谱柱
(150 mm×4.6 mm,5 µm)；流动相为甲醇-水(70∶30),流速为 1.0 mL/min；测定波长为 322 nm；柱温为室温。结果 蛇
床子素在0.018～0.126 µg范围与峰面积呈良好的线性关系(r＝0.999 9),平均回收率为98.55%,RSD＝1.45%。结论 该
方法操作简便快速、准确可靠,可用于复方蛇床酊中蛇床子素含量的测定。
关键词：复方蛇床酊；蛇床子素；高效液相色谱法；含量测定
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2009)02-0052-02
Determination of Osthol in Compound Shechuang Tincture by HPLC SHI Ji-lian1,2, HE Qun2, YANG Zi-yi 2,
et al (1.College of Pharmaceutics, Beijing University of TCM, Beijing 100102, China；2.College of Pharmaceutics, Hunan
University of TCM, Changsha 410208, China)
Abstract：Objective To establish the determination method for osthol in Compound Shechuang Tincture.
Methods Hypersil ODS column was used and methanol-water (70∶30) was used as a mobile phase. The
flow rate was at 1.0 mL/min and the detection wave-length was at 322 nm. Results Osthol had a good
linear relationship between 0.018～0.126 µg (r＝0.999 9). The average recovery was 98.55% and RSD was
1.45%. Conclusion This method is simple, rapid and accurate. It can be applied to determining osthol in
Compound Shechuang Tincture.
Key words：Compound Shechuang Tincture；osthol；HPLC；content determination
复方蛇床酊为湖南中医药大学药学院研制的外用酊剂,由
蛇床子、土荆皮、黄柏等中药组成,具有清热解毒、燥湿止痒、
杀虫的功能,主治湿热带下及各种妇科炎症、皮肤瘙痒及湿疹
等。蛇床子素为方中君药蛇床子的主要有效成分,本试验采用
HPLC 法对其含量进行测定,现报道如下。
1 仪器与试药
Waters 1525/2487 高效液相色谱仪,Breeze 色谱工作站；
MICROLITER#702 微量进样器(HAMILTON 公司)。蛇床子素对照
品(中国药品生物制品检定所提供,批号 110822-200406)；复
方蛇床酊(自制)；实验中药材购于长沙市药材公司。甲醇为色

胶对照药材0.5 g,同法制成阴性对照溶液及对照药材溶液。照
薄层色谱法[《中华人民共和国药典》2005年版(一部)附录ⅥB][1]
试验,吸取供试品溶液、阴性对照溶液、对照药材溶液各 10 µL,
分别点于同一硅胶 G 薄层板上,以三氯甲烷-甲醇-丁酮-甲酸
(9.4∶0.3∶0.3∶0.3)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以 3%三
氯化铝乙醇溶液,置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,
在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。见
图 1。






1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5
A B C
注：1、2、3.供试品；4.对照药材；5.阴性对照；
A.桑叶；B.人参；C.蜂胶
图 1 糖复平胶囊 TLC 图谱
3 讨论
糖复平胶囊为中药复方制剂,成分复杂,各成分之间多
有相互干扰,通过多次试验,逐步摸索出合理的提取方法和层
析系统。对方中主要药物进行质量控制,经 3 批样品验证,该
方法简便易行、专属性强,斑点清晰,色谱重现性好,可以作为
该制剂质量控制的方法。其中桑叶、蜂胶为糖复平胶囊中调
节血糖的主要药味,并且关于桑叶、蜂胶及其制剂的薄层色谱
鉴别文献报道较少,因此,建立其薄层色谱鉴别方法具有重要
意义。
在人参的薄层鉴别中主要针对人参皂苷这一类成分进行
鉴别。因复方中含有黄芪,对薄层鉴别有一定的干扰。在建立
本方法过程中,一方面过中性氧化铝柱,另一方面调整展开剂,
减少黄芪的干扰,斑点分离度好且清晰。
参考文献：
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出
版社,2005.209,7,249.
[2] 江 丰,冯丽华,曾丽萍.伤风止咳糖浆的薄层色谱鉴别[J].实用临床医
学,2005,10(6)：10－11.
(收稿日期：2008-04-30,编辑：陈静)
2009 年 2 月第 16 卷第 2 期 中国中医药信息杂志 ·53·
谱纯；乙醇为分析纯；水为重蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Hypersil ODS 色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 µm,大连依利特分
析仪器有限公司)；流动相：甲醇-水(70∶30)；流速：1.0 mL/min；
测定波长：322 nm；柱温：室温；进样量为 5 µL。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取蛇床子素对照品适量,加乙醇制成 9.0 µg/mL 的
溶液,即得。
2.3 供试品溶液的制备
精密吸取复方蛇床酊 0.2 mL,置 10 mL 量瓶中,加无水乙
醇至刻度,摇匀,用 0.45 µm 微孔滤膜滤过,取续滤液作为供试
品溶液。
2.4 阴性对照溶液的制备
以去掉蛇床子的复方蛇床酊处方,按复方蛇床酊的生产工
艺制备阴性药液,再按“2.3”项下方法制备阴性对照溶液。
2.5 干扰试验
照上述色谱条件,取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照
溶液各 5 µL,分别注入色谱仪。供试品色谱图中,在与对照品
色谱图相应的位置上,有一相同的色谱峰,而阴性对照溶液色
谱图在此处无干扰(见图 1)。






A





B



C t/min
注：A.供试品；B.对照品；C.阴性对照
图 1 复方蛇床酊 HPLC 图谱
2.6 线性关系考察
分别精密吸取对照品溶液 2、4、6、8、12、14 µL 进样,以
峰面积对进样量(µg)进行线性回归,得回归方程：Y＝4.392×
106X－6 036.38,r＝0.999 9。表明蛇床子素在0.018～0.126 µg
与峰面积呈良好的线性关系。
2.7 精密度试验
用同一供试品溶液重复进样测定5次,以峰面积计算,RSD＝
1.06%。
2.8 重复性试验
取同一批次的复方蛇床酊,按“2.3”项下方法分别制备 5
份供试品溶液,按上述色谱条件进行测定,结果平均含量为
0.020 3 mg/mL,RSD＝0.94%。
2.9 稳定性试验
取同一供试品溶液,分别在制备后 0、2、4、6、12、16、
24 h 进样,测定峰面积,计算,RSD＝1.21%(n＝7)。表明供试品
溶液在 24 h 内稳定。
2.10 加样回收率试验
精密吸取已知蛇床子素含量(21.74 µg/mL)的复方蛇床酊
0.2 mL 共 6 份,按“2.3”项下方法制备,分别置 6个 10 mL 的
量瓶中,精密加入对照品溶液适量,用无水乙醇定容至刻度,摇
匀,按上述色谱条件进行测定,计算回收率,结果见表 1。
表 1 加样回收率试验结果
样品含量
(µg)
加入量
(µg)
测得量
(µg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
4.348 3.6 7.931 99.6
4.348 3.6 7.791 96.4
4.348 4.5 8.765 98.1
4.348 4.5 8.870 100.5
98.55 1.45
4.348 5.4 9.657 97.9
4.348 5.4 9.696 98.8
2.11 样品测定
精密吸取各供试品溶液(4 批各 3 份)5 µL,按上述色谱条
件进行测定,结果见表 2。
表 2 复方蛇床酊中蛇床子素的含量测定结果(n =3)
批号 含量(mg/mL) RSD(%)
1 0.021 7 1.06
2 0.021 1 1.27
3 0.020 8 1.03
4 0.022 4 1.49
3 讨论
用紫外分光光度计对文中试验条件下蛇床子素对照品溶
液作了波长扫描,发现其最大吸收波长在 321.5 nm,在参考文
献[1-2]后,选用 322 nm 作为检测波长。
笔者曾试验了几种不同的流动相系统,在本试验所确定的
色谱条件下,用甲醇作流动相较 2005 版《中华人民共和国药
典》(一部)[3]规定的乙腈简单且经济,测定时间比较短(约7.5 min
出峰),蛇床子素与其他成分能达到基线分离,理论板数按蛇床
子素计大于 3 000。
参考文献：
[1] 刘灿群,黄香连.HPLC法测定青柏洁身洗液中蛇床子素的含量[J].中药
材,2004,27(5)：380.
[2] 黄美兰,王 希,黄荣林.高效液相色谱法测定癣湿药水中蛇床子素的含
量[J].广东药学,2003,13(3)：4.
[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出
版社,2005.219.
(收稿日期：2008-04-08,编辑：陈静)