全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2015，30(6)∶720 ～ 721
基金项目:国家自然科学基金资助项目(批准号:81160515)
作者简介:李晨阳(1984—) ，女，硕士，从事药物分析、天然药物化学的研究工作。
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:zhaojun21cn@ 163． com
HPLC测定不同产地新疆圆柏中的槲皮苷
李晨阳1，高 慧2，陈 燕1，谭 为1，赵 军1* ，徐 芳1
(1．新疆维吾尔自治区药物研究所 维吾尔药重点实验室，新疆 乌鲁木齐 830004;2．新疆伊犁州食品与药品检验所，新疆 伊宁
835000)
摘要:目的 采用 HPLC法测定不同产地新疆圆柏中的槲皮苷。方法 色谱柱为 Phenomenex ODS － A(250 mm × 4． 6 mm，5
μm) ，流动相为乙腈 － 0． 036 mol·L －1磷酸，梯度洗脱，流速 1． 0 mL·min －1，柱温 30 ℃，检测波长 266 nm。结果 槲皮苷2． 2 ～
88． 0 μg·mL －1与峰面积的线性关系良好(r = 0． 9999) ，加样回收率为 101． 38%，ＲSD = 1． 61%(n = 6) ;样品溶液在 32 h 内稳
定。结论 所用方法操作简便、重复性好，可用于新疆圆柏药材的质量控制。
关键词:新疆圆柏;槲皮苷;高效液相色谱法;含量测定;回收率;质量控制
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2015)06 － 0720 － 02
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2015． 06． 031
Determination of quercitrin in Juniperus sabina from the different habitats by HPLC
LI Chen － yang1，GAO Hui2，CHEN Yan1，TAN Wei1，ZHAO Jun1* ，XU Fang1
(1． Xinjiang Institute of Materia Medica，Key Laboratory of Uighur Medicine，Urumqi，Xinjiang，830004 P． Ｒ． China;2． Xinjiang Yili
Institute for Food and Drug Control，Yining，Xinjiang，835000 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To detect quercitrin in Juniperus sabina L． from the different habitats by HPLC．METHODS The HPLC
separation was performed on a Phenomenex ODS － A column(250 mm × 4． 6 mm，5 μm)in gradient elute mode with a mixture
consisting of acetonitrile and 0. 036 mol·L －1 phosphate acid solution at 30 ℃ ． The flow rate was 1． 0 mL·min －1，and the detection
wavelength was 266 nm． ＲESULTS The calibration curve of quercitrin was linear in the range of 2． 2 － 88． 0 μg·mL －1(r = 0. 9999) ，
and the average recovery of quercitrin was 101． 38% with the ＲSD of 1． 61%(n = 6)． The properties of sample solution kept steady
within 32 hours． CONCLUSION The method is simple and reproducible，and can be used for the quality control of J． sabina．
Key words:Juniperus sabina L．;Quercitrin;HPLC;Determination;Ｒecovery;Quality control
CLC number:Ｒ917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2015)06 － 0720 － 02
柏科圆柏属新疆圆柏 Juniperus sabina L．又名砂
地柏、叉子圆柏、臭柏，广泛分布于中国新疆、甘肃、
内蒙、陕北等省区的干旱荒山和沙地之中［1］。新疆
地处高原寒区，圆柏叶资源极其丰富，主要分布在新
疆乌鲁木齐南山、伊犁和阿勒泰地区。新疆圆柏含
有挥发油、萜类、木脂素类、黄酮类和香豆素类成分，
其枝叶和果实常用于治疗风湿性关节炎和类风湿性
关节炎［2 － 3］。新疆圆柏在新疆有较长的的种植历
史，为部颁标准品种，但尚无质量标准。现采用
HPLC法测定了新疆圆柏枝叶中槲皮苷的含量［4］，
可为药材质量标准的建立提供依据。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
LC －10ATvp高效液相色谱仪(日本岛津)。槲
皮苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号:
111538 － 200504) ;新疆圆柏药材于 2014 年 6 月在
新疆乌鲁木齐、伊犁、阿勒泰等地采集，由新疆维吾
尔自治区药物研究所何江副研究员鉴定为新疆圆柏
Juniperus sabina L． 的干燥枝叶;乙腈、甲醇为色谱
纯;水为纯净水;其余试剂为分析纯。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱为
Phenomenex ODS － A 色谱柱(250 mm × 4． 6 mm，5
μm) ，流动相为乙腈 － 0． 036 mol·L －1磷酸梯度洗脱
(0 ～ 15 ～ 20 min，21% ～ 25% ～ 21% 乙腈) ，流速
1. 0 mL·min －1，柱温 30 ℃，检测波长 266 nm，进样
量 10 μL。在上述色谱条件下，槲皮苷与相邻色谱
峰的分离度 ＞ 1． 5，理论板数按槲皮苷计≥1． 6 × 104
(图 1)。
1． 2． 2 溶液的制备 精密称取槲皮苷对照品适量，
加甲醇制成0 ． 22 mg·mL －1对照品贮备液。取新疆
图 1 槲皮苷对照品(A)与供试品(B)溶液的色谱图
Figure 1 Chromatograms of quercitrin control solution(A)and
sample solution(B)
圆柏药材粉碎，过 40 目筛，脱脂，晒干后精密称定
0． 1 g，置 25 mL量瓶中，加入 60%甲醇 20 mL，超声
提取 30 min，放至室温，加入 60%甲醇定容，用 0． 45
μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。
1． 2． 3 线性关系的考察 精密量取槲皮苷对照品
贮备液 0． 1、0． 2、0． 5、1． 0、2． 0、4． 0 mL，分别置
10 mL量瓶中，用甲醇定容。精密吸取上述溶液各
10 μL，进样测定，记录峰面积。以峰面积为纵坐标、
浓度为横坐标进行线性回归，得回归方程:Y =
2． 4347 × 107X － 9． 3538 × 103(r = 0． 9999) ，槲皮苷
2． 2 ～ 88． 0 μmg·mL －1与峰面积的线性关系良好。
1． 2． 4 精密度、重复性与稳定性试验 取同一份供
试品溶液，连续进样 6 次，计算得槲皮苷峰面积的
ＲSD = 0． 29%;取样品粉末，按“1． 2． 2”项方法制备
供试品溶液并进样，连续 6 d，计算得槲皮苷峰面积
的 ＲSD = 2． 30%;表明方法的精密度良好。准确称
取同一份样品粉末，制备 6 份供试品溶液，分别进
样，计算得槲皮苷峰面积的 ＲSD = 1. 15%，表明方法
的重复性良好。取同一份供试品溶液，分别在 0、1、
3、7、24、32 h时进样，计算得槲皮苷峰面积的 ＲSD =
0． 15%，表明供试品溶液在 32 h内稳定。
1． 2． 5 加样回收率试验 精密称取已知含量的样
品粉末 6 份，每份约 0． 05 g，分别加入 0． 088 mg·
mL －1槲皮苷对照品溶液 1． 1 mL，再加入 60%甲醇
20 mL，按“1． 2． 2”项方法制备供试品溶液，分别进
样测定。槲皮苷的平均加样回收率 = 101． 38%，
ＲSD = 1． 61%(n = 6) (表 1)。
表 1 加样回收率试验的结果(μg，n =6)
Table 1 Ｒesults of the recovery tests(μg，n =6)
No． Original Added Detected Ｒecovery /% 珔X /% ＲSD /%
1 100． 80 96． 80 196． 80 99． 16 101． 38 1． 61
2 101． 80 96． 80 201． 90 103． 43
3 100． 20 96． 80 198． 20 101． 22
4 103． 80 96． 80 203． 40 102． 93
5 101． 60 96． 80 198． 40 100． 05
6 101． 40 96． 80 199． 60 101． 48
1． 2． 6 样品的测定 分别取 13 批新疆圆柏样品粉
末，按“1． 2． 2”项方法制备供试品溶液，分别进样，
记录峰面积，计算样品中槲皮素的含量(表 2)。
表 2 样品中槲皮素含量的测定结果(n =3)
Table 2 Ｒesults of quercitrin content in the samples(n =3)
No． 产地 Quercitrin /mg·g － 1 ＲSD /%
1 新疆阿克塔斯 －唐布拉 2． 42 0． 62
2 新疆乔尔玛(315 省道) 2． 87 0． 70
3 新疆 217 国道 699 公里处 3． 78 0． 57
4 新疆 217 国道 72 公里处 3． 12 0． 45
5 新疆巴州和静县巩乃斯 2． 72 0． 60
6 新疆昭苏 74 团 3 连 2． 78 0． 38
7 新疆昭苏煤矿 2． 21 0． 62
8 新疆察布查尔努拉洪 5． 39 0． 77
9 新疆赛里木湖东 2． 14 0． 64
10 新疆果子沟 2． 65 0． 88
11 新疆乌鲁木齐后峡跃钢 1． 71 0． 87
12 新疆乌鲁木齐后峡萨尔乔克达 2． 02 0． 55
13 新疆阿勒泰地区 3． 49 0． 60
2 讨论
曾考察了甲醇 －磷酸水溶液和乙腈 －磷酸水溶
液两种流动相系统，结果后者作流动相时，峰形和分
离度更好，因此，选择乙腈 －磷酸水溶液系统。分别
考察了加热回流法(不同溶剂、提取次数、提取时间
和料液比)和超声提取法(不同溶剂、提取时间和料
液比)提取药材中的槲皮苷，确定了加热回流法的
最佳提取条件为:取药材 0． 1 g，加入 30 mL 60%甲
醇，加热回流 1 h;超声提取法的最佳提取条件为:取
药材 0． 1 g，加入 20 mL 60%甲醇，超声提取 0． 5 h。
两种方法下测得样品中槲皮苷的含量分别为 1． 6、
2． 0 mg·g －1，综合实际情况，确定采用超声法提取药
材中的槲皮苷。文中测定了 13 批不同产地的新疆
圆柏枝叶中槲皮苷的含量，结果表明:各产地药材中
槲皮苷的含量差异大，说明其化学成分的含量有差
异，这可能与气候、环境、土壤和海拔等因素有关。
文中结果可为新疆圆柏药材质量标准的制定提供
依据。
参考文献:
［1］ 中华人民共和国卫生部药典委员会．卫生部药品标准·维吾
尔药分册［S］．乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社，1999:111．
［2］ 刘勇民．维吾尔药志［M］． 上册． 乌鲁木齐:新疆科技卫生出
版社，1999:550 － 553．
［3］ 赵军，闫明，黄毅，等． 新疆圆柏黄酮类成分的研究［J］．林产
化学与工业，2008，43(19) :33 － 37．
［4］ 郑一敏，胥秀英，杨艳红，等． HPLC测定菟丝子中金丝桃苷与
槲皮苷的含量［J］．华西药学杂志，2005，20(3) :261 － 262．
收稿日期:2014 － 09 － 09
127第 6 期 李晨阳，等。HPLC测定不同产地新疆圆柏中的槲皮苷