全 文 ：10批伸筋草药材中 α-玉柏碱含量在 0.083% ～
0.215%之间 ,中检所提供的伸筋草对照药材及 7#
样品药材中的 α-玉柏碱含量较高 , α-玉柏碱含量与
药材生长的海拔高度无明显关联 ,而在伸筋草的伪
品垂穗石松及舒筋草中均未检出 α-玉柏碱。本文
首次对伸筋草药材中 α-玉柏碱的含量测定方法进
行了试验研究 , 建立了伸筋草药材 α-玉柏碱的
HPLC含量测定方法 ,本方法的精密度 、重复性及回
收率试验结果均良好 ,可以作为伸筋草药材的质量
控制方法 。
参 考 文 献
[ 1] 国家药典委员会 .中华人民共和国药典 [ S] .一部 .北
京:化学工业出版社 , 2005:123-124.
HPLC法测定大叶田基黄中槲皮苷的含量
谢春英
(中山大学附属第六医院药剂科 ,广东 广州 510655)
　　摘要　目的:采用 HPLC法测定不同采收期大叶田基黄中槲皮苷的含量。方法:以 20%乙腈-0.05 mol/L磷酸
水溶液(pH3.0)为流动相 ,以 MerckLichrospherRp-18(250 mm×4.0mm, 5μm)为固定相 ,柱温为 25℃,流速为 1.0
mL/min, 检测波长为 350nm。结果:槲皮苷平均回收率为 97.93%, RSD为 3.05%。结论:该方法简单准确 , 灵敏度
高 , 可用于大叶田基黄中槲皮苷的含量测定 , 为选择其最佳采收期提供依据。
　　关键词　高效液相色谱法;大叶田基黄;槲皮苷
　　中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2010)06-0936-02
收稿日期:2010-03-29
　　大叶田基黄(又名珍珠菜)系报春花科植物星
宿菜 LysimachiafortuneiMaxim.的全草 ,分布于我国
华南 、西南地区 ,民间用于治疗急慢性肝炎〔1〕。笔
者采用高效液相色谱法测定不同采收期大叶田基黄
中槲皮苷的含量 ,为其最佳采收期的选择提供依据 。
1 　仪器与材料
　　Dionex高效液相色谱仪(P680四元梯度泵 、真
空脱气机 、自动进样器 、PAD检测器及工作站 ,美国
戴安公司), ELMAT660 /H超声波清洗器(美国 EL-
MA公司 ,功率 360 W,频率 35 kHz), Simplicity185
personal超纯水器 (美国 Milipore公司), 色谱柱
MerckLichrospherRp-18(250mm×4.0mm, 5μm)。
槲皮苷对照品(批号:20070611)由中国药品生物制
品检定所提供 ,甲醇 、乙腈为色谱纯 ,水为超纯水 ,其
他试剂均为分析纯。
　　大叶田基黄样品采于广州市帽峰山 ,每月采收
一次 ,晒干 ,连续采集 13个月 ,具体采收时间见表
1。经笔者鉴定为报春花科植物星宿菜 Lysimachia
fortuneiMaxim.的全草。
2 　方法与结果
2.1 　色谱条件　以 20%乙腈-0.05 mol/L磷酸盐
水溶液 (pH 3.0)为流动相 , 以 MerckLichrospher
Rp-18(250 mm×4.0 mm, 5 μm)为固定相 ,柱温为
25℃,流速为 1.0mL/min,检测波长为 365nm,理论
塔板数按槲皮苷计不少于 7 000。
　表 1　 样品采集时间
编号 样品 采集时间
1 大叶田基黄 2008.01.22
2 大叶田基黄 2008.02.22
3 大叶田基黄 2008.03.22
4 大叶田基黄 2008.04.22
5 大叶田基黄 2008.05.22
6 大叶田基黄 2008.06.22
7 大叶田基黄 2008.07.22
8 大叶田基黄 2008.08.22
9 大叶田基黄 2008.09.22
10 大叶田基黄 2008.10.22
11 大叶田基黄 2008.11.22
12 大叶田基黄 2008.12.22
13 大叶田基黄 2009.01.22
2.2　供试品溶液的制备　取大叶田基黄样品粉末
0.5 g,精密称定 ,置 100 mL具塞三角瓶中 ,加甲醇
超声处理(功率 360 W,频率 35 kHz)3次 ,每次 20
·936· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 33卷第 6期 2010年 6月DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2010.06.036
mL, 10 min, 滤过 , 合并滤液 , 减压回收溶剂至干 。
精密加入甲醇 10 mL使溶解 ,用微孔滤膜 (0.45
μm)滤过 ,取续滤液 ,即得。
2.3 　对照品溶液的制备　精密称取干燥至恒重的
槲皮苷对照品 1 mg,加甲醇制成每 1 mL含槲皮苷
100μg的溶液 ,即得。
2.4 　线性关系考察　取槲皮苷对照品溶液 ,分别
进样 2.5、5、10、15、20、30 μL。按 “2.1”项下色谱条
件操作 ,以峰面积积分值 A为纵坐标 ,对照品进样
量 C(μg)为横坐标 ,进行回归分析 ,得回归方程:A
=26.8426C-0.30975, r=0.9999。结果表明:槲皮
苷量在 0.252 ～ 3.030 μg范围内线性关系良好。
2.5　精密度试验　取槲皮苷对照品溶液 10μL,按
“ 2.1”项下色谱条件重复进样 5次 ,计算槲皮苷对
照品峰面积的相对标准偏差 ,结果 RSD为 1.24%,
表明仪器精密度良好 。
2.6 　稳定性试验　取槲皮苷对照品溶液 、供试品
溶液 10μL,分别在 0、1、3、6、12、24、48 h进样 ,测定
峰面积 ,计算槲皮苷峰面积的相对标准偏差。结果
对照品 RSD为 2.43%,供试品 RSD为 0.88%,表明
对照品与供试品溶液在 48 h内稳定性较好 。
2.7　重复性试验 　精密称取同一批号的 6份样
品 ,按 “2.2”项下方法制备供试液 ,按 “2.1”项下色
谱条件进样测定 ,计算槲皮苷的含量及相对标准偏
差。结果 RSD为 1.86%,表明方法重复性较好 。
2.8　加样回收率试验　根据线性范围设计槲皮苷
含量高中低三种水平 ,精密称取已测知槲皮苷含量
的样品适量 ,再分别精密加入一定量的对照品 ,按样
“2.2”项下操作 ,依法测定 ,计算回收率 。结果平均
回收率为 97.93%, RSD为 3.05%。
2.9　样品测定　对 13批大叶田基黄样品进行检
测 ,照 “2.1”项下色谱条件操作 。精密吸取供试品
溶液各 10 μL,依法测定 ,峰面积按外标法计算样品
中槲皮苷的含量。结果见表 2。表明大叶田基黄全
年均可检测到槲皮苷 , 6月至 9月槲皮苷含量高于
其他月份 。
　　表 2　 含量测定的结果
编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
槲皮苷含量 /% 0.118 0.147 0.184 0.263 0.420 0.521 0.523 0.604 0.564 0.376 0.253 0.219 0.121
3 　讨论
3.1 　提取方法的选择　分别用 60%乙醇超声提
取 、甲醇超声提取 、热回流提取 、乙酸乙酯萃取等方
法 ,对药材中的黄酮类成分进行提取。结果表明甲
醇超声提取方法简便 ,提取黄酮类成分效果好 ,且能
避免大量色素的提出 ,故选用甲醇超声提取。
3.2 　流动相的选择　曾选用乙腈 -水(20∶80),乙
腈 -磷酸盐缓冲液(20∶80、16∶84、18∶82)等系统 ,结
果表明:乙腈-磷酸盐缓冲液 〔称取磷酸二氢钾
(KH2PO4)6.8g,溶解至水 1 000 mL中 , 加磷酸调
pH3.0,即得〕(20∶80),分离效果最好 。
3.3　检测波长的选择　槲皮苷紫外最大吸收峰在
204、256和 350 nm处。笔者选 210、256、350、 355
nm四个波长同时检测 ,结果发现在 210、256和 355
nm处 ,杂质峰的吸收也较高 ,而且分离度不如 350
nm好 。故最终确定检测波长为 350 nm。
参 考 文 献
[ 1] 江苏新医学院 .中药大辞典 [ M] .上海:上海科学技术
出版社 , 1986:1656-1657.
售 《中药材 》杂志合订本
现有 1990年(50元), 1991年(50元), 1992年(50元), 1995年(70元), 1996年(70元), 1997年(75
元), 1998年(精装 100元), 1999年(精装 100元), 2000年(精装 150元), 2001年 、2002年 、2003年 、2004年
(精装上 、下册每年 180元), 2005年 、2006年(精装上 、下册每年 200元), 2007年(精装上 、下册 220元),
2008年 、2009年(精装上 、中 、下册每年 400元)《中药材》杂志合订本。需者请汇款至《中药材》编辑部购买 。
·937·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 33卷第 6期 2010年 6月