全 文 ：中国药房 2015年第26卷第21期 China Pharmacy 2015 Vol. 26 No. 21
磷脂酰胆碱本身存在于咽鼓管的细胞膜外质膜上，无论
是患者还是健康人的咽鼓管灌洗液中均含有磷脂酰胆碱，其
含量因人而异，且一位患者每次咽鼓管灌洗液所能获取的量
很少。所以，本试验不同于测定药品中某一成分的含量，也不
同于测定血清中某药物的含量，在进行回收率试验时只能用
空白溶液作基础溶液计算回收率。
3.4 磷脂酰胆碱的稳定性
磷脂酰胆碱性质不稳定，其含有的不饱和脂肪酸结构使
其易发生氧化[5-6]。氮气是惰性气体，不会与磷脂酰胆碱产生
反应，也不会催化其反应，用氮气吹干磷脂酰胆碱能避免磷脂
酰胆碱在室温下长时间放置而发生分解和氧化。磷脂酰胆碱
贮备液需放置于冰箱内避光保存，且应定期重新配制，在样本
处理过程中应尽可能减少操作时间。
综上所述，本方法可操作性强、结果准确，可用于分泌性
中耳炎患者咽鼓管灌洗液中磷脂酰胆碱的含量测定。
参考文献
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究组.化学药物临床药代动力学研究技术指导原则
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（收稿日期：2014-12-19 修回日期：2015-06-22）
（编辑：周 箐）
Δ 基金项目：丽水市科学技术局项目（No.2012cxtd09-05；
No.2012cxtd11-03）
＊主管中药师，硕士研究生。研究方向：中成药、中药材（饮片）的
质量分析。电话：0571-86728851。E-mail：45585781@qq.com
GC法测定浙江蜡梅中桉油精的含量Δ
吕 兰 1＊，王伟影 2（1.浙江中医药大学附属广兴医院/杭州市中医院中药房，杭州 310007；2.丽水市食品药品检
验所，浙江丽水 323000）
中图分类号 R927.2 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2015）21-2991-03
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2015.21.40
摘 要 目的：建立测定浙江蜡梅中桉油精含量的方法。方法：采用气相色谱法。色谱柱为Zebron ZB-WAX毛细管柱，采用程序
升温；检测器为氢火焰离子化检测器，检测器温度为 250℃，进样口温度为 220℃，高纯氮气作载气。结果：桉油精质量浓度在
0.017 69～1.415 mg/ml范围内与其峰面积呈良好的线性关系（r＝0.999 1）；精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.87％；平均加样
回收率为99.72％，RSD为0.65％（n＝6）。相同月份不同地区采集的浙江蜡梅中的桉油精含量存在较大差异，最大可差1倍以上
（1.064％～0.450％），同一地区不同月份采集的也存在较大差异（0.633％～1.064％）。结论：本方法简便、准确、快速、重复性好，适
用于浙江蜡梅的质量控制。
关键词 浙江蜡梅；桉油精；气相色谱法；含量测定
Content Determination of the Eucalyptol in Chimonanthus Zhejiangensis by GC
LYU Lan1，WANG Wei-ying2（1.Dept. of Chinese Medicine，Guangxing Hospital Affiliated to Zhejiang Chinese
Medical University/Hangzhou Hospital of TCM，Hangzhou 310007，China；2.Lishui Institute for Food and Drug
Control，Zhejiang Lishui 323000，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish a method for content determination of eucalyptol in Chimonanthus Zhejiangensis. METH-
ODS：GC was conducted with Zebron ZB-WAX capillary column with temperature programmed；FID detector was used with the
temperature of 250 ℃；the volume temperature was 220 ℃ and the carrier gas was nitrogen with high purity. RESULTS：Eucalyp-
tol had a good linear relationship in the range of 0.017 69-1.415 mg/ml（r＝0.999 1）；the RSDs of precisions，stability and reproduc-
ibility tests were no more than 1.87％ and the average recovery was 99.72％（RSD＝0.65％，n＝6）.There were big differences in dif-
ferent areas of the same month and the maximum was more than one time（1.064％-0.450％）；there were also big differences in
the same area of different months（0.633％-1.064％）. CONCLUSIONS：The method is simple，accurate，fast and reproducible and
suitable for the quality control of Chimonanthus Zhejiangensis.
KEYWORDS Chimonanthus Zhejiangensis；Eucalyptol；GC；Content determination
􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪􀤪
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China Pharmacy 2015 Vol. 26 No. 21 中国药房 2015年第26卷第21期
浙江蜡梅（Chimonanthus Zhejiangensis）为蜡梅科植物，产
于浙江南部、福建北部，其叶入药，为一种历史悠久的畲药
——食凉茶的原料。畲民主要用其治疗伤食所致的痞证和慢
性胃炎、胃及十二指肠溃疡引起的胃胀、胃痛、泛酸等，及防治
感冒和流行性感冒[1]。2005年版《浙江省中药炮制规范》[2]以畲
药名“食凉茶”收载此品种，是 11味被收载的畲药中唯一被收
载在常用中药中的。在该标准中以传统的水蒸气蒸馏的方
法测定挥发油含量，对其进行质量控制。关于浙江蜡梅的研
究报道极少 [3-4]，而关于畲药“食凉茶”的另一来源柳叶蜡梅
（Chimonanthus salicifolius）研究较多。相关研究显示，桉油精是
浙江蜡梅的挥发油中稳定存在的主要成分，且占据较大比
例[4-5]。本试验选取桉油精为指标性成分，采用气相色谱（GC）
法，对浙江蜡梅中该成分的含量进行测定，探索以该成分的含
量作为其质控标准的可行性。
1 材料
1.1 仪器
6890型 GC仪，包括自动进样器（美国 Agilent公司）；
XS105DU型电子天平（瑞士Mettler-Toledo公司）；DL-360D型
智能超声波清洗器（上海之信仪器有限公司，功率：360 W，频
率：40 kHz）。
1.2 试剂
桉油精对照品购自中国食品药品检定研究院（批号：
110788- 201004，纯度：99.6％）；乙醇为色谱纯。
1.3 药材
浙江蜡梅（Chimonanthus Zhejiangensis）的干燥叶，自行采
集，经由丽水市食品药品检验所李水福主任中药师鉴定，详见
表1（注：水分采用甲苯法测得）。
表1 浙江蜡梅药材一览
Tab 1 List of Chimonanthus Zhejiangensis
编号
1
2
3
4
5
6
7
来源
浙江省庆元县
浙江省云和县
浙江省云和县
浙江省青田县
浙江省丽水市莲都区
浙江省庆元县
浙江省龙泉市
采收年月
2014.5
2014.5
2014.6
2014.6
2014.7
2014.7
2014.8
水分，％
10.2
9.8
10.5
10.5
8.9
8.2
8.0
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性试验
色谱柱：Zebron ZB-WAX 毛细管柱（60 m×0.32 mm，0.5
μm）；程序升温：60 ℃保持 1 min，以 10 ℃/min的速率升温至
90℃，保持 5 min，以 50℃/min的速率升温至 200℃，保持 15
min；进样口温度：220 ℃；检测器：氢火焰离子化检测器；检
测器温度：250 ℃；载气：99.999％的高纯氮气；流速：1.0 ml/
min；对照品进样量：1 μl，样品进样量：0.5 μl，不分流。在此
色谱条件下，桉油精与其他成分可达到基线分离，分离度大
于 1.5，理论板数在 300 000以上，具有良好的分离效果，详
见图 1。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取桉油精对照品适量，加乙醇制成质量浓度为
2.358 4 mg/ml的溶液作为对照品贮备液。精密吸取对照品贮
备液，加乙醇制成0.176 9 mg/ml的溶液作为对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备
本品过二号筛粉末，取约 1.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶
中，精密加入乙醇25 ml，密塞，称定质量，冷浸24 h后超声处理
30 min，放冷至室温，再称定质量，用乙醇补足减失的质量，摇
匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2.4 线性关系考察
精密吸取“2.2”项下对照品贮备液适量，制成质量浓度为
0.017 69、0.035 38、0.070 75、0.176 9、0.353 8、0.707 5、1.415
mg/ml的系列对照品溶液，各进样 1 μl，按“2.1”项下色谱条件
进行测定。以桉油精质量浓度（x，mg/ml）为横坐标、峰面积
（y）为纵坐标进行线性回归，得回归方程为 y＝10 108.6x－
36.241 2（r＝0.999 1）。结果表明，桉油精质量浓度在0.017 69～
1.415 mg/ml范围内与其峰面积呈良好的线性关系。
2.5 精密度试验
精密吸取“2.2”项下对照品溶液 1 μl，按“2.1”项下色谱条
件连续进样5次，记录峰面积。结果，桉油精峰面积的RSD为
0.62％（n＝5），表明仪器精密度良好。
2.6 稳定性试验
取同一供试品（编号：1）溶液适量，分别于放置0、4、8、12、
18、24 h时，精密吸取 0.5 μl，按“2.1”项下色谱条件进样测定，
记录峰面积。结果，桉油精峰面积的RSD为1.63％（n＝6），表
明供试品溶液在24 h内稳定性良好。
2.7 重复性试验
取同一批浙江蜡梅干燥药材（编号：1）1.5 g，平行取样 6
份，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条
件进样测定并计算含量。结果，按干燥品计，桉油精的质量分数
为0.518％，RSD为1.87％（n＝6），表明本方法重复性较好。
2.8 加样回收率试验
800
600
400
200
0
5 10 15 20
时间，min
A
电流
，pA
1 1800
600
400
200
0
5 10 15 20 25
时间，min
B
图1 气相色谱图
A.对照品；B.供试品；1.桉油精
Fig 1 GC chromatograms
A.reference；B.test sample；1.eucalyptol
电流
，pA
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取已知含量的浙江蜡梅药材（编号：1）共6份，各约0.75 g，
精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入“2.2”项下对照品贮备
液（2.358 4 mg/ml）1.5 ml，再分别精密加入乙醇 23.5 ml，按
“2.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样
测定，记录峰面积，计算加样回收率，结果详见表2。
表2 加样回收率试验结果（n＝6）
Tab 2 Results of recovery test（n＝6）
称样量，
g
0.750 3
0.751 2
0.746 9
0.749 1
0.752 0
0.748 7
样品含量，
mg
3.505 7
3.509 9
3.489 8
3.500 1
3.513 6
3.498 2
加入量，
mg
3.537 6
3.537 6
3.537 6
3.537 6
3.537 6
3.537 6
测得量，
mg
7.043 6
7.073 8
7.002 5
7.033 1
7.010 3
7.019 9
加样回收
率，％
100.01
100.74
99.30
99.87
98.84
99.55
平均加样回
收率，％
99.72
RSD，
％
0.65
2.9 样品含量测定
分别取不同编号的样品约 1.5 g，各 3份，精密称定，按
“2.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样
测定，记录峰面积，以干燥品计算样品含量，结果详见表3。
表3 样品含量测定结果（n＝3）
Tab 3 Results of content determination of samples（n＝3）
编号
2
3
4
5
6
7
桉油精质量分数，％
0.633
1.064
0.450
0.596
0.933
1.088
3 讨论
3.1 提取方法的选择
2005年版《浙江省中药炮制规范》中采用传统的水蒸气蒸
馏方法测定食凉茶挥发油，样品取样量至少25 g，提取时间约
为5.5 h；2010年版《中国药典》（一部）豆蔻[6]挥发油项下采取的
提取方法为传统的水蒸气蒸馏，以正己烷为接收溶剂的提取
方法，样品取样量为 5 g，提取时间约为 2.5 h。此两种方法提
取过程均相当烦琐。本试验根据桉油精易溶于乙醇的性质，
以乙醇为溶剂考察提取方法。由于桉油精是挥发性物质，故
选择超声的方式，并考察了超声时间、乙醇用量。大量预试验
后发现，冷浸24 h后超声30 min的提取效果最佳，与以正己烷
为接收溶剂的水蒸气蒸馏几乎无差别。因此，选择简便的冷
浸加超声法作为样品的提取方法。
3.2 程序升温方法的选择
桉油精的沸点为 176～178 ℃，本试验结合相关文献报
道 [7-10]，尝试了多种程序升温方法，最终发现以“60 ℃保持 1
min，以10℃/min的速率升温至90℃，保持5 min，以50℃/min
的速率升温至200℃，保持15 min”为最佳方法。按此方法，其
他组分对桉油精完全无干扰，理论板数在 300 000以上，具有
良好的分离效果。
3.3 产地与采收时间对桉油精含量的影响
表3结果显示，相同月份不同地区采集的浙江蜡梅中的桉
油精含量存在较大差异，最大可差 1倍以上（1.064％与
0.450％）。同一地区不同月份采集的也存在较大差异
（0.633％与 1.064％）。桉油精质量分数最低的为 0.518％，最
高的为1.088％，产地、采收期均对含量有一定影响。当然，浙
江蜡梅中桉油精含量变化趋势的确定还需科学地收集更多批
次的浙江蜡梅进行测定。
畲药食凉茶作为畲族民间用药具有悠久的历史，且功效
明确，而浙江蜡梅作为其重要来源之一，在浙江省分布较广，
具有一定的开发意义。目前，关于浙江蜡梅的研究甚少，且尚
无相关质量控制方法，故本试验首次建立了该药材中桉油精
含量的GC测定法。研究结果表明，本方法简便、准确、快速、
重复性好，适用于浙江蜡梅的质量控制。
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（收稿日期：2014-12-02 修回日期：2015-02-09）
（编辑：余庆华）
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