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朝鲜蓟叶提取物的抑菌作用研究



全 文 :FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
食 品 科 技
2009年 第 34卷 第 9期
朝鲜蓟叶提取物的抑菌作用研究
Study on antimicrobial effects of artichoke leaves extract
HUO Chao1,2 , SONG Shu-hui2*, XU Gui-hua1, YANG Ying1
(1.Department of Food Science and Engineering, Agriculture College, Ningxia University,
Yinchuan 750001; 2.National Engineering Research Center for Vegetables, Beijing 100097)
Abstract: The antimicrobial effects of artichoke leaf extract were investigated in this experiment. Bacterials
including Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, and fungus including Saccharomyces
cerevisiae, Candida tropicalis and Streptomyces griseus were used. The results showed that artichoke leaf
extract has the strongest antimicrobial effects on Streptomyces griseus and Bacillus subtilis, followed by
Escherichia coli and Staphylococcus aureus. The minimum inhibition concentrations(MIC) are 4.5%, 5.0%, 4.0%
and 4.0% respectively. There is no antimicrobial effect on Saccharomyces cerevisiae and Candida tropicalis.
Key words: artichoke; leaf extract; antimicrobial effect
霍 超 1,2, 宋曙辉 2*, 徐桂花 1, 杨 颖 1
(1.宁夏大学农学院食品科学与工程系,银川 750001;
2.国家蔬菜工程技术研究中心,北京 100097)
摘要: 对朝鲜蓟叶提取物进行抑菌实验。分别选取大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、
酿酒酵母、热带假丝酵母和灰色链霉菌进行抑菌研究。结果表明,朝鲜蓟叶提取物对供试菌灰
色链霉菌、枯草芽孢杆菌的抑制作用最强,其次是大肠杆菌、金黄色葡萄球菌。朝鲜蓟叶提取
物对上述供试菌的最低抑菌浓度分别为 4.5%、5.0%、4.0%和 4.0%。对于酿酒酵母、热带假丝酵
母两种酵母未体现出抑菌效果。
关键词: 朝鲜蓟;叶提取物;抑菌作用
中图分类号: R 284.2 文献标志码: A 文章编号: 1005-9989(2009)09-0217-03
收稿日期: 2008-11-14 *通讯作者
基金项目: 北京市科技新星计划(2006B41)。
作者简介: 霍超(1983—),男,河北邢台人,硕士研究生,主要从事食品营养与分析检测方面的研究工作。
食品由于微生物的污染(如大肠杆菌、金黄色
葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等)常常会腐败变质造成
直接的经济损失。向食品中加入防腐剂是一种简
单有效的方法。其中,添加高浓度食盐、食糖、
醋、乙醇或化学防腐剂是人们保存食品的传统方
法。但是这些防腐剂通常会掩盖或破坏食品的自
然风味,而且化学防腐剂的安全性也得不到保障。
随着社会生活水平的不断提高,消费者对健康的
日益关注及对目前食品卫生的不安心理,促使更
多的科学工作者将注意力转向了天然防腐剂的开
发研究。因此,从植物中寻找有抑菌防腐作用且
安全性高的活性物质,有着广阔的前景。
朝鲜蓟(Cynara scolymus L.),别名菊蓟、菜蓟、
法国百合、荷花百合,多年生草本植物,原产地
提取物与应用
·217·
DOI:10.13684/j.cnki.spkj.2009.09.038
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
食 品 科 技
2009年 第 34卷 第 9期
中海沿岸[1]。在西班牙、法国、意大利及美国的加
利福尼亚栽培较多。国内,朝鲜蓟主要在上海、
北京、浙江、湖南、云南等地栽培。朝鲜蓟叶片
中含有丰富的多酚类化合物绿原酸、洋蓟酸等,
它们具有保护肝脏、抗氧化、抑菌等多种生理功
效[2-5]。随着国际市场需求量不断增大,我国朝鲜
蓟的种植面积也在进一步扩大,因而对其进行充
分开发利用具有重要的意义。本文通过对朝鲜蓟
叶片提取物进行抑菌实验,验证了它的抑菌功能,
为朝鲜蓟的开发提供了理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
朝鲜蓟叶片于 2007 年 8 月 15 日采收于国家
蔬菜工程技术研究中心延庆实验农场。
1.2 试剂与仪器
营养肉汤:北京市海淀区微生物培养基制品
厂;葡萄糖:北京化学试剂工厂;酵母浸粉:北
京双旋微生物培养基制品厂;氯化钠:北京北化
精细化学品有限责任公司;琼脂粉:北京欣惠泽
奥科技有限公司;胰化蛋白胨:OXOID LTD,
BASINGSTOKE, HAMPSHIRE, ENGLAND。
电子天平:Sartorius BS210S;密闭微波消解
仪:CEM corporation;离心机:飞鸽牌 TDL-40B;
全自动立式电热压力蒸气灭菌器:YXQ-LS-50A,
上海博迅实业有限公司医疗设备厂;超净工作
台:北京昌平长城空气净化工程公司;恒温培
养箱:BSP-150,上海博迅实业有限公司医疗设
备厂;真空干燥箱:DZF-6050,上海一恒科学仪
器有限公司。
1.3 供试菌种
大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌
(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌 (Bacillus
subtilis)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、热带
假丝酵母(Candida tropicalis)、灰色链霉菌(Strepto-
myces griseus):北京科技大学微生物实验室。
1.4 朝鲜蓟叶提取物的制备
朝鲜蓟鲜叶片→切碎→冷冻干燥→粉碎→过
60 目筛→70%乙醇浸泡→微波提取→3500 r/min,
10 min 离心→上清液→旋转蒸发浓缩→真空冷冻
干燥→朝鲜蓟叶提取物→蒸馏水配制成一定浓度
的溶液备用。
1.5 朝鲜蓟叶片提取物抑菌实验
1.5.1 培养基的制备 大肠杆菌:营养肉汤培养
基/100 mL(1.3 g营养肉汤、1.8 g琼脂);金黄色葡
萄球菌:营养肉汤培养基/100 mL(1.3 g营养肉汤、
1.8 g 琼脂 );枯草芽孢杆菌:LB 培养基/100 mL
(1.0 g 胰化蛋白胨、0.5 g 酵母提取物、1 g NaCl、
1 g葡萄糖、1.8 g琼脂);酿酒酵母:豆芽汁葡萄
糖培养基/100 mL(50 g黄豆芽加水煮沸 1 h,过滤
后用蒸馏水定容至 100 mL、5.0 g葡萄糖、1.8 g琼
脂);热带假丝酵母:豆芽汁葡萄糖培养基/100 mL
(50 g黄豆芽加水煮沸 1 h,过滤后用蒸馏水定容至
100 mL、5.0 g葡萄糖、1.8 g琼脂);灰色链霉菌:
马铃薯葡萄糖培养基/100 mL(20 g马铃薯加水煮沸
1 h,过滤后用蒸馏水定容至 100 mL、2.0 g 葡萄
糖、1.8 g琼脂)。
1.5.2 菌/孢子悬液的制备 将大肠杆菌、金黄色
葡萄球菌斜面菌种接种 2~3环于营养肉汤培养基
上,在 36 ℃下培养 24 h;将枯草芽孢杆菌斜面菌
种接种 2~3环于 LB培养基上,在 28 ℃下培养 24
h;将酿酒酵母、热带假丝酵母斜面菌种接种 2~3
环于豆芽汁葡萄糖培养基上,在 28 ℃下培养 24
h;将灰色链霉菌斜面菌种接种 2~3环于马铃薯葡
萄糖培养基上,在 28 ℃下培养 24 h,然后以上培
养后的菌种分别用无菌水洗脱配制成含菌数为
107~108 cfu/mL的菌悬液备用。
1.5.3 朝鲜蓟叶提取物的抑菌实验[6] 取直径为 6
mm的滤纸片放入 10%朝鲜蓟叶提取物溶液中充分
浸润,取出后置于真空干燥箱中干燥(加热温度低
于 60 ℃),之后于紫外灯下灭菌。将各种供试菌悬
液取 0.1 mL 分别注入无菌培养皿内,再倒入 15
mL对应的培养基,混匀后冷却成含菌平板,然后
用无菌镊子夹取已灭菌的滤纸片贴在含菌板上,
每皿贴 6片,每个菌种 2个平行,大肠杆菌、金
黄色葡萄球菌置培养箱中 36 ℃下培养 24 h,酿酒
酵母、热带假丝酵母、灰色链霉菌、枯草芽孢杆
菌置培养箱中 28 ℃下培养 24 h。测量滤纸片周围
抑菌圈直径大小,比较抑菌效果。
1.5.4 朝鲜蓟叶提取物最低抑菌浓度(MIC)测定
配制供试菌种培养基,在各平皿内分别加入
质量分数为 7.0%、6.5%、6.0%、5.5%、5.0%、
4.5%、4.0%、3.5%、3.0%、2.5%、2.0%、1.5%、
1.0%、0.5%和 0.25%的朝鲜蓟叶提取物溶液,然
后每皿倒入培养基 15 mL,然后混匀,冷却凝固
后,每平皿加入 0.1 mL菌悬液,涂匀,每一浓度
重复 3次,大肠杆菌、金黄色葡萄球菌置培养箱
中 36 ℃培养 48 h,枯草芽孢杆菌、灰色链霉菌置
提取物与应用
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培养箱中 28 ℃培养 72 h,观察各种供试菌的生长
状况。
2 结果与分析
2.1 朝鲜蓟叶提取物的抑菌效果
朝鲜蓟叶提取物的抑菌作用见表 1。
从表 1可以看出,朝鲜蓟叶提取物对供试的
灰色链霉菌、枯草芽孢杆菌的抑制作用最强,其
次是大肠杆菌、金黄色葡萄球菌。对酿酒酵母、
热带假丝酵母两种酵母均未体现出抑菌效果。
2.2 朝鲜蓟叶提取物最小抑制浓度(MIC)
朝鲜蓟叶提取物对供试菌种的最低抑菌浓度
实验结果见表 2。
对 4种有抑菌作用的供试菌进行最低抑菌浓
度实验,取3 个重复中的平均值作为最小抑制浓
度。结果由表 2可以看出,朝鲜蓟叶提取物对枯
草芽孢杆菌和灰色链霉菌的最小抑制浓度为
4.0%,而大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的最小抑制
浓度分别为 4.5%、5.0%。这一结果与前述的抑菌
结果一致。
3 结论
本文的实验结果表明,朝鲜蓟叶片提取物具
有一定的抗微生物作用。对不同的微生物,抑制
程度存在一定的差异。本文中的 6种供试菌的抑
制效果从大到小依次为灰色链霉菌>枯草芽孢杆
菌>大肠杆菌>金黄色葡萄球菌。而对酵母属的酿
酒酵母和热带假丝酵母两种酵母未体现出抑菌效
果。朝鲜蓟叶提取物对枯草芽孢杆菌、灰色链霉
菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的最小抑制浓度
分别为 4.0% 、4.0%、4.5%和 5.0%。
参考文献:
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[6] 蒋盛岩,赵良忠,陈立德,等.树头发提取物抑菌作用研究.
食品科学,2007,28(7)
注:结果为两次的平均值。
表 1 朝鲜蓟叶提取物的抑菌作用 mm
菌名称 抑菌圈直径 菌名称 抑菌圈直径
大肠杆菌 15.5 酿酒酵母 0
金黄色葡萄球菌 11.8 热带假丝酵母 0
枯草芽孢杆菌 20.8 灰色链霉菌 21.6
注:“- ”表示无菌落出现;“+”表示有菌落出现。
溶液质量
分数/% 大肠杆菌
金黄色
葡萄球菌
枯草芽孢
杆菌
灰色链霉

0.25 + + + +
0.5 + + + +
1.0 + + + +
1.5 + + + +
2.0 + + + +
2.5 + + + +
3.0 + + + +
3.5 + + + +
4.0 + + - -
4.5 - + - -
5.0 - - - -
5.5 - - - -
6.0 - - - -
6.5 - - - -
7.0 - - - -
表 2 朝鲜蓟叶提取物对供试菌的最低抑制浓度(MIC)
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