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HPLC法测定锦带花中绿原酸的含量



全 文 :第 27卷 第 3期
2 0 0 9年 3月
中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 27 No. 3
M ar. 2 0 0 9
中华中医药
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学刊
草正6: /当归, 其味甘而重,故专能补血, 其气轻而辛, 故又
能行血,补中有动, 行中有补, 诚血中之气药,亦血中之圣药
也0。人参甘补, 大补元气,善补脏腑之气。人参当归相须
相使配伍, 益气行血, 补气生血。李杲谓: /仲景以人参为
补血者,盖血不自生 ,须得生阳气之药乃生, 阳生则阴长,血
乃旺矣。若阴虚单补血, 血无由而生, 无阳故也0。 /故善
治血者, 不求之有形之血, 而求之无形之气0。方如人参
汤,出自5妇人大全良方6 (人参、当归等分 ) ,用治产后诸虚
不足、发热盗汗。
313 人参 鹿角 ) ) ) 益气生阳
鹿角味咸性温, 归肾肝经, 补肾助阳, 兼能活血散瘀消
肿。5本草经疏6云: /鹿角, 生角则味咸气温, 惟散热, 行血
消痈肿,辟恶气而已。咸能入血软坚, 温能通行散邪, 故主
恶疮痈肿,逐邪恶气 ,及留血在阴中, 少腹血结痛,损伤恶血
等证也。肝肾虚,则为腰脊痛, 咸温入肾补肝,故主腰脊痛。
气属阳,补阳故又能益气也0。人参甘,微苦, 微温, 大补元
气、生津益阴。5本草蒙笙6云: /人参, 定喘嗽, 通畅血脉,
泻阴火,滋补元阳。0甘温能补阳, 甘咸能滋养, 一补元气,
一壮元阳。人参鹿角相须相使配伍, 益气壮元阳, 益精血,
强筋骨。方如龟鹿二仙膏 (胶 ),配伍龟板、枸杞,出自5医
收稿日期: 2008 - 10 - 17
作者简介:高松 ( 1959 - ) , 男,辽宁大连人, 副教授,学士,研究方
向:中药质量控制。
方考6 (鹿角二斤、龟板五斤、枸杞子三十两、人参十五两 ) ,
出自5医方集解 6 (鹿角十斤、龟板五斤、枸杞二斤、人参一
斤 ),用治督任俱虚、精血不足, 瘦弱少气、梦遗泄精、目视
不明、精极之证。
人参甘温,入心肺脾经,大补元气,补脾益肺,生津止渴,安
神增智。人参大补元气,善补脏腑之气 ) ) ) 益气,配伍白术、
胡桃肉、茯神,健脾气,益肺气,补心气; 5本草经疏6云: /其主
治也,则补五脏。盖脏虽有五,以言乎生气流通则一也,益真
气,则五脏皆补矣0。气能化生血液、津液、阳气,配伍当归、天
花粉、鹿角,气能生质; 因其大补元气、气化生质,而能固脱元
阳,固护阴血, 维护阴阳,配伍附子、五味子、熟地,益气维固。
5本草经疏6云: /人参回阳气于垂绝,却虚邪于俄顷0。人参药
对实为补益方药中代表之药对。
中药药对中的药物药理渊源于中药药理的四气、五味、
升降浮沉、归经等经典理论, 药对的组成配伍亦宗于中药组
方的 /七情和合0精神, 其分类亦遵从于汗、吐、下、和、温、
清、消、补之八法。药对作为复方的最小配伍单位在复方方
剂中发挥着重要作用, 而人参药对在补益方药的复方配伍
中具有重要地位,人参作为一味补益方药在补益方剂中的
地位和作用也备受临床重视。如果在辨证施治过程中选药
得当,并加以研究和发掘、使之发扬光大药理,定会开扩视
野,拓展人参补益方剂复方配伍研究的深度和范围。
参考文献
[ 1 ] 吕景山.施今墨对药 [M ]. 3版.北京:人民军医出版社, 2006.
HPLC法测定锦带花中绿原酸的含量
高 松,江 丹,王 朋,李 阳,任丕晨,林芷茹
(大连大学医学院,辽宁 大连 116622)
摘 要:锦带花为忍冬科植物锦带 Weigela florida ( Bunge ) A. DC. 的干燥花雷。民间用于治疗瘟病初起、头
痛咽干、喉痹、痈肿疔疮、丹毒等症。目前在活性成分、药理药效等方面未见报道, 因此按照5中华人民共和国药
典6 2005版金银花项下绿原酸的含量测定方法对锦带花中的绿原酸进行含量分析,测定结果为 1%。
关键词:锦带花;绿原酸; 高效液相色谱法
中图分类号: R285. 5 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2009) 03 -0651 - 02
Determ ination of the Content o f Chlorogenic Ac id in the
F lower ofW e ige la flo rida ( Bunge) A . DC . by HPLC
GAO Song, JIANG Dan, WANG Peng, LI Yang, REN P i-chen, L IN Zhi-ru
(M ed icalC ollege of DalinUn iversi ty, Dalian 116622, L iaon ing, Ch ina)
Abstrac t: The flowe r o fWeigela flor ida( Bunge) A. DC. ( Cap rifo liaceae) w as used to trea t p lagues o f ear ly stage,
headache, drought of pharynx, para ly sis o f throa ,t sw e lling, sore and e rysipe las, e tc. Ac tive constituents and pha rm aco-
log ical studies on th is fo lk d rug have neve r been repo rted. The conten t o f ch lo rogenic ac id in the flowe r ofWeigela flor ida
( Bunge) A. DC. wa s de term ined by the m ethod in the China Pha rmacopoe ia and the re su lt wa s 1% .
Keyw ords: flowe r o fWeige la flo rida( Bunge) A. DC; Cho lrogenic acid; Hp lc
锦带花为忍冬科植物 W eigela flo rida ( Bunge ) A. DC.
的干燥花雷或初开放的花。主产于辽宁、吉林、河北、山东
等省。通常被作为观赏品种而广泛栽培。而民间用于治疗
瘟病初起、头痛咽干、喉痹、痈肿疔疮、丹毒等症。经查新未
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DOI:10.13193/j.archtcm.2009.03.204.gaos.051
第 27卷 第 3期
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见报道,为此笔者对其活性成分、药效学、药理学等进行系
统地研究,现将笔者研究的一部分,用 HPLC法对锦带花中
绿原酸的含量测定报道如下。
1 实验仪器与试药
1. 1 药材来源
锦带花采于庄河市冰峪沟, 经大连大学高明教授鉴定
为忍冬科植物锦带 Weigela florida ( Bunge) A. DC. 的花蕾
或初开放的花。
1. 2 仪器
高效液相色谱仪 ( H ITACH I L 2000), 日本日立。输液
泵 ( H ITACH I L - 2130)。检测器 ( H ITACH I UV - de tector 2
- 2400)。工作站 N - 2000色谱数据工作站, 浙江大学智
达信息工程研究所。微量进样器。电子天平 M ETTLER
AE 240, 上海梅特勒托仪器有限公司。数控超声波清洗器。
DHG - 9076A型电热恒温鼓风干燥箱。
1. 3 试剂
对照品:绿原酸购自中国药品生物制品检定所提供,批
号为: 120766 -200717,纯度为 99. 7%。
甲醇:分析纯试剂; 乙腈:色谱纯试剂;水:重蒸水;其他
试剂均为分析纯试剂。
2 方法与结果
2. 1 分析方法的建立
按照 20055中华人民共和国药典 6中关于金银花中绿
原酸的含量测定方法 [1 ]。色谱条件与系统适用性试验:以
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂; 以乙腈 -0. 4%磷酸溶液
( 13 B87 )为流动相; 流速: 0. 8m L# m in- 1; 检测波长:
327nm ;进样量: 5LL; 柱温:室温。
2. 2 对照品溶液的配制
精密称定绿原酸对照品 4. 00mg,置 100mL棕色量瓶中,加
50%甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液。
2. 3 供试品溶液的制备 [ 2- 3 ]
精密称定本品粉末 (过 4号筛 ) 0. 5292g , 置具塞锥形
瓶中,精密加入 50%甲醇 50m L,称定重量, 超声处理 (功率
250W,频率 35kH z) 30m in, 放冷, 再称定重量, 用 50% 甲醇
补足减失的重量 , 摇匀, 滤过, 精密量取续滤液 5mL, 置
25m L棕色量瓶中, 加 50% 甲醇至刻度, 摇匀, 即得。测定
法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 5LL,注入液
相色谱仪,测定, 即得。
2. 4 线性关系的考察
精密吸取上述对照品溶液进样, 按上述色谱条件测定峰
面积,以峰面积各分值为纵坐标, 绿原酸进样量 (LL ) 为横坐
标,绘制标准曲线,得出回归方程为 y= ax; a= 3. 88E -007, b=
0. 00E+ 000,相关系数: R= 0. 9994。试验结果表明: 进样量范
围内,绿原酸的峰面积与进样量有良好的线性关系。
2. 5 稳定性试验
精密吸取样品供试品溶液 20LL,在 0、2、4、6、8、10h分
别进样 5LL, 记录峰面积积分值,测得 RSD为 0. 14% ,说明
10h内仪器稳定性好。
2. 6 重复性试验
取样品,按供试品溶液制备方法操作,平行制备 5份溶
液,按上述色谱条件进行测定 ,测得 RSD为 1. 13% ,表明本
法重复性较好。
2. 7 精密度试验
取样品,按供试品溶液制备方法操作, 按上述色谱条
件,连续进样 5 次, 记录峰面积积分值, 测得的 RSD为
0. 60% , 说明仪器较精密。
2. 8 样品测定
分别精密吸取对照品溶液 5LL与供试品溶液 5LL, 注
入液相色谱仪,测定 5批样品中绿原酸的含量。绿原酸对
照品的 HPLC色谱图见图 1, 供试品的 H PLC色谱图见图 2,
供试品绿原酸的含量见表 1。
表 1 供试品绿原酸的含量
编号 峰面积 浓度 (Lg /mL) 百分含量 (% )
1 271697. 656 105. 4 0. 9960
2 269849. 658 104. 7 0. 9892
3 272685. 365 105. 8 0. 9996
4 271068. 236 105. 2 0. 9937
5 271868. 565 105. 5 0. 9966
平均值 105. 3 0. 9950
3 讨 论
绿原酸广泛分布于忍冬科植物中,具有清热解毒, 保肝
利胆,抑制病毒的复制, 降低胆固醇,消除自由基的作用, 是
多种感冒药物的药物原料, 也是呼吸系统感染的重要药物
原料,为非常重要的活性物质。本文按照 5中华人民共和
国药典6 ( 2005版 )的方法, 用 HPLC法测定锦带花中绿原
酸含量, 测定结果为 1. 0%。通过测定证明锦带花中不仅含
绿原酸, 而且也为锦带花的药效找到依据, 为我们继续研究
打下基础 ,同时为绿原酸原料的来源探索出了新药源, 也为
锦带花在临床中的应用提供了依据。
参考文献
[ 1 ] 国家药典委员会.中华人民共和国药典 [S ].北京:化学工业
出版社, 2005.
[ 2 ] 毕跃峰, 田野. 金银花化学成分分析 [ J ]. 郑州大学学报,
2007, 39( 2 ) : 185 - 186.
[ 3 ] 石俊英,张会敏.金银花不同品种、产地与采收期样品中緑缘
酸与木犀草苷的含量测定 [ J ].山东中医药大学报, 2007, 31
( 3) : 247 - 249.
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