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构树组培快繁技术



全 文 :2010年 9月
第 23卷第 5期
黑龙江生态工程职业学院学报
JournalofHeilongjiangVocationalInstituteofEcologicalEngineering
Sep.2010
Vol.23 No.5
构树组培快繁技术
陶文丞 韦景枫 程友忠 蒙先举 张声涛 覃凤好
(安顺市林科所 ,贵州 安顺 561000)
  摘 要:以构树优良母株的幼茎为外植体 ,通过调整激素配比 ,使其不经过愈伤组织而直接萌发出芽 ,进而增殖
获得大量的丛生芽。结果表明:适宜腋芽诱导的培养基为 MS+6 -BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L, 芽增殖培养基为
MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L, 生根培养基为 1/2MS+NAA0.1mg/L,生根率达到 94.6%。
关键词:构树;组织培养;快繁技术
中图分类号:S794   文献标志码:A   文章编号:1674-6341(2010)05-0027-02
  构树(BroussonetiapapyriferaL)属桑科 , 系多年生阔叶乔
木。主要分布于我国黄河 、长江及珠江流域 , 在贵州安顺有
分布 , 多为野生 , 有少量栽培 ,属当地乡土树种。具有速生 、
适应性强 、分布广 、热量高 、轮伐期短的特点。其树皮 、木材 、
枝桠 、叶 、花 、果实 、种子 、根 、乳汁等皆可综合利用 ,经济效益
潜力很大 , 为了扩大优良母本的繁殖系数 , 探索规模化繁殖
途径 , 我们对其进行了组织培养研究。 以优良乡土构树为母
种 , 采用无性繁殖方法进行繁殖有利于保存母本的优良性
状。通过构树的组培快繁研究 , 实现构树种苗的快繁和壮苗
生产。
  收稿日期:2010-08-23
作者简介:陶文丞(1972-),男 , 贵州安顺人 , 助理工程
师 , 从事植物组织培养研究。
1 材料和方法
1.1 试验材料
从野外采取优良母树上芽比较饱满的枝条为试验材料。
1.2 试验方法
1.2.1 外植体消毒
把采来的枝条用洗洁精泡洗干净 ,用自来水冲洗 30min,
在无菌条件下用 75%的酒精浸泡消毒 30 ~ 40s, 无菌水冲洗
2 ~ 3次 , 再用 0.1%的升汞溶液消毒 5 ~ 6min后 , 取出用无
菌水冲洗 5 ~ 6次。滤纸吸干后 , 切取 1.5 ~ 2.0cm的茎段 ,
接种于培养基上。
1.2.2 初代培养
以 MS为基本培养基 , 附加不同浓度的 6 -BA(0.5、 1.0
mg/L)、IBA(0.1、0.2mg/L)、NAA(0.1、 0.2mg/L), 计 8个
处理。
  从表 8可知 , 5年间林分蓄积生长量为:
Mctn-Mt=198.346-157.066,即 41.2751m3
连年生长量为 Z=Z5/5=8.2550。
林分蓄积生长率 p% =41.2751/(57.066 +198.346)×
200/5=4.6453%。
每公顷生长量 =公顷蓄积量 ×生长率 =255.993 ×
0.004 645 3=1.189m3
4 结论
分析上述资料表明 ,五营林业局云冷杉林分以中幼林为
主 , 分布广 ,比重大 , 为不正常复层异龄林 , 经计算知 , 大 、中 、
小径的蓄积量比为 1.6∶3∶1。为合理经营云冷杉林 , 给国民
经济建设提供优质木材 ,特提出以下几点经营措施供生产单
位参考。
4.1 适时进行抚育
调查资料表明 , 云冷杉林郁闭度在 0.6以上 , 公顷株数
在 1 200株 , 且中 、幼林比重大 , 更新情况良好 ,为加速林木生
长 , 有必要进行生长抚育。抚育伐必须贯彻 “以抚育为主 ,抚
育利用相给合”的原则 ,反对单纯取材的做法。
4.2 采伐方式的选择
国外经验认为 , 经营水平最好的异龄林 , 大 、中 、小径木
蓄积应该保持 2.5∶1.5∶1的比例 , 而五营局为 1.1∶3∶1, 所以
选择采伐方式时 , 不能 “拔大毛” , 可采用低强度 、短周期择
伐 , 按择伐强度 25%林分蓄积生长率p=4.6453%计算 ,则择
伐周期为 6年。
A=-log(1-s)/log1.0p=-log(1 -0.25)/log1.46453
=6.3(年)
只有选择低强度 、短周期择伐 , 才能改变现在的不合理
比例 , 使之趋于合理。
五营林业局现有云冷杉蓄积为 2 658 599m3 , 按成过熟
20%计算 , 可利用的有 24 458.911m3 , 对此可利用渐伐方式。
4.3 加强森林资源管理
为切实做到青山长在 , 永续利用 , 要依法治林 , 真正搞好
防病 、防火 、防人为破坏 ,严格执行森林法。
参考文献:
[ 1]五营局资料科.资源档案 [ Z] .2008.
[ 2]北京林学院.森林经理学 [ Z] .2006.
[ 3]白云庆 , 郝文康 ,蒋伊中 ,郎全建.测树学 [ M] .哈尔滨:东
北林业大学出版社 , 1987.
责任编辑:王洪军
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1.2.3 增殖培养
将诱导出的芽接种在增殖培养基上 , 附加不同浓度的
6-BA(0.1、0.5、1.0、2.0mg/L)、NAA0.1mg/L, 计 4个处理。
1.2.4 生根培养
在 1/2MS培养基上分别加入不同浓度的 NAA, 计 4个
处理。
1.2.5 培养条件
初代培养基和增殖培养基加入 3%的蔗糖和 0.7%的琼
脂 , 生根培养基加入 2%的蔗糖和 0.7%的琼脂。 pH值均为
5.8, 光照强度 3000lx, 培养温度(25±2)℃,光照时间 12h/d。
2 结果与分析
2.1 芽的诱导
2.1.1 不同接种方式对芽萌发及生长的影响
外植体接种于培养基中时 , 竖插与横放于培养基上 , 芽
萌发及生长不同。表 1表明竖插于培养基中 , 芽萌发较多 ,
且叶片下常展开;而外殖体横放于培养基表面时 , 芽萌发数
明显减少 , 且叶片多呈畸形 , 严重皱折卷曲 , 叶尖枯黄 , 且萌
芽生长缓慢。因此 , 构树外植体的接种方式以竖插为宜。
 表 1 不同接种方式对芽萌发及生长的影响
接种方式 样本数(个)
芽萌发数
(个)
出芽率
(%)
叶片畸形的外
殖体数(个)
竖插 45 41 91 2
横放 42 29 69 5
2.1.2 不同激素配比对芽诱导的影响
从表 2分析 , 4种培养基均有较高的出芽率 (80% ~
88%)。其中 A6培养基明显高于其他培养基 ,且新芽生长健
壮 、叶色绿 , 芽诱导以 MS+6-BA1.0mg/L+AA0.1mg/L培
养基为宜。
 表 2 不同激素组合对芽诱导的影响
代号 BA(mg/L)
IBA
(mg/L)
NAA
(mg/L)
样本数
(个) 出芽指数
出芽率
(%)
A1 0.5 0.1 22 2.1 85
A2 1.0 0.1 30 2.6 80
A3 0.5 0.2 26 2.0 81
A4 1.0 0.2 28 2.3 83
A5 0.5 0.1 25 2.8 85
A6 1.0 0.1 20 3.4 88
A7 0.5 0.2 24 3.0 84
A8 1.0 0.2 25 3.1 82
2.2 芽的增殖
把诱导出的芽转接到增殖培养基上 , 2周后观察不同培
养基中芽的增殖情况。从表 3可以看出 ,激素浓度与芽的增
殖有明显相关 , BA浓度越高 ,增殖芽的数量越多 ,但 B4的新
芽生长细弱 , 不如 B3粗壮 、叶色绿。试验得出最适增殖的培
养基为 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。
 表 3 不同激素组合对芽增殖的影响
代号 BA(mg/L)
NAA
(mg/L)
样本数
(个) 出芽指数
出芽率
(%)
B1 0.1 0.1 36 2.9 83
B2 0.5 0.1 32 3.1 85
B3 1.0 0.1 35 3.3 96
B4 2.0 0.1 34 3.5 96
2.3 生根培养
当苗长到 2 ~ 4cm时 , 将丛生苗切成单株 ,接种到生根培
养基上。 15d时开始生根 , 25d后进行观察。 从表 4可以看
出 , 4种不同浓度的生根培养基对诱导均有明显的效果 ,其中
C2培养基生根率最高 , 生长最好。 因此 , 生根培养基以
1/2MS+NAA0.1mg/L为最好。
 表 4 1 /2MS培养基与NAA对生根的影响
代 号 NAA(mg/L)
样本数
(个)
生根数
(条 /株)
生根率
(%) 生 长 情 况
C1 0 50 2.3 14.0 叶色下常 ,根细弱
C2 0.1 56 3.6 94.6 叶色绿 ,生长好 ,根粗壮
C3 0.2 52 3.2 92.3 部分叶片发黄 , 根部有愈伤组织
C4 0.5 55 3.3 89.1 部分叶片发黄 , 根部愈伤组织多
2.4 组培苗移栽
当瓶苗长到 4 ~ 6片叶 、植株高约 4cm时可出瓶移栽。
将瓶苗取出 , 置于清水中漂洗 , 洗去根部的培养基后 , 栽植于
珍珠岩的基质中。小苗移栽后要经常给叶片喷水 , 为保证植
物恢复生长所需养分 ,可在小苗移栽后用无机营养液或培养
基的母液进行叶面施肥 , 每隔 3d一次。若遇高温 、光照强 ,
还应搭盖遮阴网或罩薄膜。
3 结语
(1)构树外植体采用 1.5 ~ 2.0cm茎段竖插于培养基上 ,
可获得较高的腋芽萌发率。
(2)适宜的诱导培养基为 MS+6-BA1.0mg/L+AA0.1
mg/L;增殖培养基为 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L;生
根培养基为 1/2MS+NAA0.1mg/L。
(3)通过芽器官培养而获得的组培苗 ,遗传性质稳定 ,能
保持母本的优良性状。 利用构树茎段建立相应的快速增殖
体系 , 对构树优良单株的繁殖与推广具有实用价值。
参考文献:
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发 , 2005, 19(2):45 ~ 46.
[ 2]谭文澄.观赏植物组织培养技术 [ M] .北京:中国林业出
版社 , 2001.
[ 3]石大兴 , 等.巨桉芽器官离体培养与快繁体系建立的研究
[ J] .林业科学 , 2003, 39(1):69 ~ 74.
[ 4]邱运亮.翅荚木试管苗快速繁殖技术的研究 [ J] .林业科
技开发 , 2002, 16(6):14 ~ 16.
责任编辑:王洪军
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