全 文 ：第 32 卷第 6 期 通 化 师 范 学 院 学 报 Vol． 32 №6
2011 年 6 月 JOURNAL OF TONGHUA NORMAL UNIVERSITY Jun． 2011
紫外分光光度法测定毛茛中总皂苷的含量
秦汝兰，孟庆双
(通化师范学院 制药与食品科学系，吉林 通化 134002)
摘 要:以齐墩果酸为对照品，采用紫外分光光度法于 205nm 处测定毛茛中总皂苷含量． 结果表明，齐墩果酸在 0． 0024 ～
0． 0480g·ml －1范围内呈良好的线性关系(r = 0． 9997) ，平均加样回收率为 99． 10%，(n = 6，RSD = 0． 98%) ，测得毛茛中总皂苷
含量为 4%;该方法简便、准确、重现性好，可用于毛茛中总皂苷的含量测定．
关键词:紫外分光光度法;毛茛;总皂苷
中图分类号:R284 文献标志码:A 文章编号:1008 － 7974(2011)06 － 0040 － 02
收稿日期:2011 － 04 － 25
作者简介:秦汝兰(1980 －) ，女，吉林通化市人，硕士，通化师范学院制药与食品科学系教师．
毛茛(Ranunculus japonicus Thunb． )是毛茛科
(Ranunculaceae)毛茛属(Ranunculus)多年生草本
植物，在长白山地区广泛分布，具有消炎、镇痛、抗菌
等多种活性．在民间广泛用于治疗黄疸、结核、肝炎
等病［1］．近年来，对毛茛化学成分的研究显示，其全
草含有内酯类、黄酮类、皂苷类及生物碱类等化合
物［2］．目前已从毛茛属植物中得到的皂苷其苷元均
为齐墩果酸型三萜皂苷，有研究显示，毛茛总皂苷具
有显著的抗心肌肥大作用［3］． 但有关毛茛总皂苷含
量测定方面的研究未见报道，因此本试验以齐墩果
酸为对照品，通过紫外分光光度法测定毛茛总皂苷
的含量，以期为合理开发利用长白山区药用植物毛
茛提供参考性依据．
1 材料与方法
1． 1 试验材料、仪器与试剂
毛茛采于通化师范学院后山，经通化师范学院
于俊林教授鉴定;齐墩果酸对照品(中国药品生物制
品检定所批号:110709 － 200505) ;UV － 1700 紫外分
光光度计(苏州市莱顿科学仪器有限公司) ;AB256
－ S /10 万电子天平(赛多利斯丹佛 TP 系列分析天
平) ;正丁醇、甲醇等试剂均为国产分析纯．
1． 2 试验方法
1． 2． 1 对照品溶液的制备
准确称取 105℃干燥至恒重的齐墩果酸标准品
0． 0060g，置于 25ml容量瓶中，甲醇定容，摇匀，配制
成 0． 00024g·ml －1的对照品溶液．
1． 2． 2 供试品溶液制备［4］
准确称取毛茛粉末约 3g，置 125ml圆底烧瓶中，
加入 95%乙醇 20ml，连续回流提取 3h，过滤，滤液浓
缩，用 95%乙醇定容至 50ml容量瓶中，摇匀．精密量
取 20ml置蒸发皿中挥散溶剂，残渣加 10ml 蒸馏水
溶解，用水饱和的正丁醇振摇萃取三次，每次 10ml，
合并正丁醇液，蒸干．残渣加少量甲醇溶解并转移至
50ml容量瓶中定容，摇匀． 再精密吸取 1ml 溶液至
100ml容量瓶中，甲醇定容，摇匀，作为供试品溶液．
1． 2． 3 检测波长的选择
将对照品溶液在 200 ～ 600nm 进行扫描，在
205nm处有最大吸收波长，故选择 205nm 为检测波
长．
1． 2． 4 标准曲线的绘制
精密吸取对照品溶液 0． 05、0． 2、0． 4、0． 6、0． 8、
1． 0ml分别置于 5ml 容量瓶中，甲醇定容，配置成不
同浓度的标准品溶液，从中各吸取 4ml 置于比色皿
中，在 205nm波长处测定吸光度值．
2 结果与分析
2． 1 标准曲线的线性范围
根据标准曲线，计算得到回归方程 Y = 78． 673X
－ 0． 0458，r = 0． 9997，表明齐墩果酸对照品在
0． 0024 － 0． 0480g·ml －1范围内呈良好的线性关系．
2． 2 精密度试验
精密吸取对照品溶液 4ml 于比色皿中，测定吸
光度值，连续 5 次，结果 RSD 为 0． 077%，表明仪器
精密度良好．
2． 3 稳定性试验
称取毛茛粉末约 3g，按“1． 2． 1”项下方法制备
毛茛总皂苷提取液，分别在 0，1，3，5，7h 测定吸光
度，结果 RSD 为 0． 103%，表明供试品溶液在 7h 内
有良好的稳定性．
·04·
DOI:10.13877/j.cnki.cn22-1284.2011.06.014
2． 4 重复性试验
称取毛茛粉末约 3g，6 份，按“1． 2． 1”项下方法
制备毛茛总皂苷提取液，分别取 4ml于比色皿中，测
定吸光度值结果 RSD为 1． 31%，表明本方法重现性
良好．
表 1 回收率试验(n = 6 )
称样量
/ g
样品含量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均
/%
RSD
/%
0． 5008 20． 03 5． 05 25． 01 98． 61
0． 5021 20． 08 5． 05 25． 14 100． 20
0． 5014 20． 06 10． 08 29． 97 98． 31 99． 10 0． 98
0． 5016 20． 06 10． 08 29． 95 98． 12
0． 5001 20． 00 20． 13 40． 19 100． 30
0． 5009 20． 04 20． 13 40． 11 99． 70
2． 5 加样回收率试验
精密称取已知含量的毛茛粉末 0． 5g，6 份，分别
准确加入一定量的齐墩果酸对照品，得出平均回收
率为 99． 10%，RSD为 0． 98%，表明测定方法稳定可
靠，结果见表 1．
2． 6 样品含量测定
准确量取“1． 2． 2”项下供试品溶液 4ml 置比色
皿中，平行三次，测定其吸光度值，根据回归方程，计
算得到毛茛总皂苷含量为 4% ．
3 讨论
本试验曾选用了超声提取法、回流提取法、浸渍
法等提取手段提取毛茛总皂苷，但得率均较低，分析
原因可能是药材在溶剂中时间较短，不足以使总皂
苷完全溶出，因此本试验提取方法最终定为连续回
流提取法，得到的毛茛总皂苷含量较高为 4%，本方
法结果准确、重现性好、得率高，可作为毛茛总皂苷
含量的测定方法．
长白山区野生毛茛资源极为丰富，因此，本试验
为今后毛茛药材抗癌等新的药理作用的开发以及资
源的充分利用提供了有利依据．
参考文献:
［1］江苏新医学院．最新中药大辞典(一册) ［M］．北京:中国中医药出版社，2005:437 － 438．
［2］郑威，周长新，张水利，等．毛茛化学成分的研究［J］．中国中药杂志，2006，31(11) :892 － 894．
［3］王榕乐．毛茛化学成分及毛茛总苷的药理学研究［D］．广州:广东药学院，2007．
［4］万德光，裴瑾，唐远．分光光度法测定威灵仙中总皂苷的含量［J］．成都中医药大学学报，2007，30(3) :52 － 53．
(责任编辑:王前)
Content Determination of Total Saponins in Ranunculus japonicus Thunb． by UV － Spectrophotometry
QIN Ru － lan ，MENG Qing － shuang
(Department of Pharmaceutics and Food Science，Tonghua Normal University，Tonghua，Jilin 134002，China)
Abstract:The content of total saponins in Ranunculus japonicus Thunb． was determined by UV － Spectrophotome-
try，using Oleanolic acid as control sample． The results showed that the linear range of Oleanolic acid
were 0． 0024 － 0． 0480g·ml －1(r = 0． 999 7)． The average recoveries were 99． 10%，with RSD of 0．
98%，the content of total saponins were 4 %;the method was proved to be simple，precise and reprodu-
ciable． It can be used for the quantitative determination of total saponins in Ranunculus japonicus
Thunb． ．
Key words:UV － Spectrophotometry;Ranunculus japonicus Thunb． ;total saponins
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